Name: 고상 수지 기반의 방법론을 통해 비대칭 페로센 유래 바이오 복합체 시스템 용 합성 방법론 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 7 s
Description: 배우세요 고상 수지 기반 합성법으로 비대칭 페로센-비오틴 바이오접합체를 제조하고 금 표면에 고정하는 방법을 익히세요. 이 기술은 정제가 간단하고 수율이 우수하여 바이오센싱 연구에 활용됩니다.

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KG는 RA 웰치 재단 보조금 P-1760에 의해 지원되었다, 수학 및 (KG에) 과학 교육의 TCU 앤드류 연구소, TCU 연구 및 창조 활동 그랜트 (KG에)와 (JHS에) TCU SERC을 부여합니다.

비오틴-FC 시스테인의 합성 1. (1) <ol><li> 고체상 방법은 1 수지 바인딩 생성한다. <ol><li> 융해 된 주사기에 비오틴로드 수지 (250 ㎎, 0.145 밀리몰)을 놓고 디메틸 포름 아미드 (5 ml)에 그리기와 20 분 동안 실험실 통에 주사기를 흔들어 수지를 팽창. 솔루션을 추방하고 한 번 더 붓기 디메틸 포름 아미드를 반복합니다. </li><li> 10-15 분간 진탕 하였다 주사기에 디메틸 포름 아미드 20 % 피 페리 딘 4-6를 가하여의 Fmoc- 보호기를 제거한다. 피 페리 딘 다른 4-6 ml의 탈 보호 과정을 반복한다. ~, 디클로로 메탄 (3X)를 5 ㎖ 각 메탄올 (1 : 1), 3X : 메탄올 : 디클로로 메탄 (1) 디메틸 포름 아미드 3 배의 순서, 3X 디메틸 포름 아미드 수지를 세척 하였다. 가열시 블루의 존재에 의해 성공적으로 탈 보호를 확인하기 위해 구슬의 작은 샘플링 (~ 10)에 닌히 드린 시험 (+)를 수행합니다. </li><li> 1&#39;-의 Fmoc- 아미노 페로센 -1- 카르 복실 산을 함유하는 용액을 섞어(203.3 ㎎, 0.4350 밀리몰), 1- 히드 록시 벤조 트리아 졸 수화물 (58.8 ㎎, 0.413 밀리몰), 디 이소 프로필 카르 보디이 미드 (0.0673 ㎖, 0.435 밀리몰), 디 이소 프로필 에틸 아민 (0.0757 ㎖, 0.435 mmol) 및 4 : 1 혼합물을 디클로로 메탄 및 디메틸 포름 아미드. 융해 된 주사기에이를 그리고 6 시간 동안 실험실 진탕 기에서 흔들어 부드럽게. 시린지로부터 용액을 배출하고 전술 한 바와 같이 세척 하였다. </li><li> 커플 링을 확인 상술 한 바와 같이 (-) 닌히 드린 시험을 수행합니다. 닌히 드린 테스트는 여전히 잔기를 함유하는 철의 부착으로부터 유도 비드의 오렌지 색상을 확인에도 불구하고 커플 링에 유용 할 수있다. </li><li> 이어서, 디메틸 포름 아미드 중 20 % 피 페리 딘의 첨가에 의해 및 Fmoc기를 제거하고 전술 한 바와 같이 세척 하였다. 닌히 드린 시험 (+)를 Fmoc 등의 제거를 확인하는 데 사용되어야한다. </li><li> (0.0673 mL로의 Fmoc-의 Cys (Trt가)로 이루어지는 용액 -OH (254.8 ㎎, 0.4350 밀리몰), 1- 히드 록시 벤조 트리아 졸 수화물 (58.8 ㎎, 0.4125 밀리몰), 디 이소 프로필 카르 보디이 미드를 준비 0.4350밀리몰), 디 이소 프로필 에틸 아민 (0.0757 ㎖, 0.4350 밀리몰)을 4 : 디클로로 메탄 및 디메틸 포름 아미드 1 혼합물. 이 시스테인 결합 칵테일을 융해 된 주사기를 추가하고 부드럽게 6 시간 동안 흔들어. 전술 한 프로토콜을 사용하여 세척 하였다. </li><li> 20 % 피 페리 딘으로 세정 성분 및 Fmoc 제거하여, (-) 닌히 드린 시험을 이용하여 결합하는 것을 확인. 닌히 드린 시험 (+)를 사용하여 아민 무료 터미널을 확인합니다. </li></ol></li><li> 수지 1 개열. <ol><li> , TFA의 용액 (9.45 ㎖), 물 (0.25 ㎖), 1,2- 에탄 디티 올 (0.25 ㎖) 및 트리 이소 프로필 실란 (0.1 ml)에 확인 주사기에 추가 4 시간 동안 가볍게 흔들어. </li><li> 에펜 도르프 튜브에서 얻어진 적갈색 용액 모아서 서서히 공기 스트림을 사용하여 TFA를 증발시켰다. </li><li> 찬 디 에틸 에테르를 추가 (~ 15 mL)을 에펜 도르프 튜브는 교반과 형성되는, 하나를 석출한다. 원심 분리를 통해 제품 (1g, 5 분)를 분리합니다. 티디 에틸 에테르 세척 (~ 60 ml의 합계)과 원심 분리기의 암탉 반복주기는 빨강 / 갈색 고체로 일을 얻었다. </li></ol></li></ol> 2. 특성과 1의 분석 <ol><li> 신원은 1 H (16 스캔)과 중 메탄올 (300 μL) 및 ESI-MS 분석 (13) C NMR (512 스캔)를 사용하여 그림 2의 연결 및 구성과 일치하는지 확인합니다. 다음과 같은 결과를 기대합니다 : 1 H NMR 스펙트럼 (CD 3 OD) δ / PPM : 1.407-1.684 (m, 6H), 2.245 (t, 2H), 2.665-3.150 (m, 12H), 4.015 (t, 1H), 4.104 (D, 2H ), 4.274 (Q, 1H), 4.426 (D, 2H), 4.479 (Q, 1H), 4.595 (t, 1H) 13 C NMR 스펙트럼 (CD 3 OD) δ / PPM : 24.644 (CH 2), 25.472 (CH 2), 28.051 (CH 2), 28.300 (CH 2), 35.474 (CH 2), 38.698 (CH 2), 39.241 (CH 2), 39.717 (CH 2), 55.340 / 55.538 (CP 링), 60.286 (CH), 61.964 (CH), 62.521 / 62.821 (CP 링), 66.038 / 66.170 (CP 링), 69.153 / 69.328 (CP 링), 71.468 / 71.593 (CP 링), 76.466 (CH), 171.770 (C = O), 175.361 (C = O). ESI-MS (m / Z)는 : 찾았 639.00 [1 + 나] +, 이론 : 639.1 [1 + 나 +와 HR-MS (m / z) : 찾았 617.2049 [1 + H] +, 이론 : 617.1622 [1 + H] +. </li><li> HPLC에게, 절연 1의 구성을 확인하는 원소 분석을 수행합니다. C8을 사용하여 수행 HPLC 크로마토 그램은 0.5 ㎖ / 분의 유속으로 100 % MeOH로 위상 반전 컬럼. 참고 : HPLC 유지 시간은 같다 : 3.198-4.674 분. </li></ol> 골드 표면에 1 항에 고정화 <ol><li> 컷 폴리머는 2 ~ 0.25 제곱에 금 슬라이드를 백업. </li><li> 1 (~ 1 ㎜)의 DI 워터 솔루션 (50) 비이커를 입력합니다. </li><li> 비커에 금 슬라이드를 추가하고 시계 유리 커버. 모든아야 유리 슬라이드을 교반없이 실온에서 O / N을 배양한다. </li><li> 용액으로부터 금 슬라이드를 제거하고 공기가 건조 할 수 있습니다. </li><li> 고정화되는 감시 한 주사 전자 현미경 (또는 등가)를 사용하여 전자 현미경 이미지를 스캔 구합니다. </li></ol>

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비대칭 페로센 유도체의 합성은 용액에 도전하고있다. 예를 들어, 용액은 목적하는 생성물 (20 % 이하)의 낮은 수율로 한 결과를 생성하기 위해 시도한다. 마찬가지로, 1&#39;- 아미노 페로센 카복실산 (산세 Fmoc 등) 및 결합 된 수지를 이용하는 비오틴 반응 Baristic 등에 의해보고 된 중합 생성물과 일치 불용성 생성물 결과. 최소한의 제품. (47)이 더 페로 복잡 및 그 유도체는 빛 민감하고 아미노산 이성체 솔루션에 이량하는 경향이 있다는 것입니다. 이러한 문제는 다양한 반응과 순찰 도전합니다. 그러나이 반응 제는 펩티드 합성에 의해 개발 된 메리 필드 고상 방법을 사용하여 회피 될 수있다. 페로 펩타이드 시스템의 합성은 여러 그룹으로 관심을 얻고있다 비대칭 펩타이드 페로 시스템의 라이브러리하게되었다. 46,48-52 작업비오틴 - 페로센 시스테인을 함유하는 제 비대칭 페로센 바이오 접합체의 합성은 본원에 기...

바이오 센서는 선택적 분석 플랫폼으로 생체 분자 인식 기술을 채용하고 특이성, 속도 및 저가에 이용되는 소형 장치이다. 생체 분자의 검출을위한 전기 화학 바이오 센서는 그들의 단순성, 비용 효율성, 그리고 고감도로이 필드의 선두에있다. 이러한 센서의 1,3- 일반적인 해부학 관심 생물학적 마커에 특이적인 인식 분자 구비 전극 인 . 분자 인식하여 바이오 마커의 결합 단순한 측정에 의해 검출 될 수 전위 또는 전류의 로컬 변경을 초래한다. 효소에서 4-8 항체, 9-12 전체 세포, 13-16 수용체, 17 ~ 20 펩타이드 21-23과 DNA (24) 크게 더 큰 생물 분자에 초점을 맞추고있다 범위 수있는 인식 부분을 날짜합니다. 25 ~ 28 연구를 이 분야에서의 노력은 면역 센서 갔지에 주로 집중하고면역 글로불린은 산화 환원 활성 코어 고정화 (예 페로센 등) 및 관심있는 항체를 검출하는 데 사용되는 재. 이러한 연구는 항원 / 항체의 사용에서 발생하는 합병증에 따른 불량으로 인한 정밀도와 시간 소비 임상 적용에서 제외되었습니다. 1,3 성장주의는 생명의 작은 분자의 검출 (이하 1kg / 몰)에 초점을 맞추고있다 음식과 국가 안보 외에 환경 관심사. 바이오 센서 장치 (29)의 가장 잘 알려진 예는 포켓 사이즈 m에 연결된 전류계 스크린 인쇄 된 효소 전극이 셀프 테스트 포도당 모니터링이다. 이러한 시스템은 일반적으로 포도당 산화 반응에 의해 생성 된 전하의 총량은 시간의 기간에 걸쳐 측정되는 전기량 방법을 이용한다. 유가 장치, 휴대용 강력하고 있어야 큰에서 인구에 대한 손쉬운 사용하기 위해 핸드 헬드. 이러한 페로센 (ferrocene) 등의 산화 환원 태그 necessa 있습니다대부분의 바이오 마커는 본질적으로 전기 화학적 활성 아니기 때문에 공예는 용액에서 바이오 마커 또는 작은 분자의 전기 화학적 검출을 제공합니다. (30-38) 페로센은 전기 화학적 바이오 센서로의 통합을위한 훌륭한 선택이 전기 화학을위한 황금 표준 인 유기 금속 분자이다. 페로센 기반의 산화 환원 활성 종은 이미 그들의 작은 크기, 좋은 안정성, 편리 합성 액세스, 쉽게 화학적 변형, 상대적으로 친 유성 및 산화 환원 조정의 용이성에 상당한 관심을 얻고있다. 3,30-42 작은 분자가 페로센 코어를 기반으로 금속 이온과 작은 분자의 검출기로 광범위하게 사용되었다. 이러한 생체 분자 등의 큰 종을 대상으로 32-38,43 시스템은 전기 화학적 표면에 내장 된 페로센 유도체에 큰 항체 또는 면역 글로불린의 첨부 파일을 이용했다. 1,3,39 , 각각의 경우에 (44), 잠재력과 현재 intensi철 III / II의 Fe의 산화 환원 커플의 TY 따라서 분석 물 분자의 존재를 나타내는 새로운 분광 핸들을 생성 분자 결합에 변경되었다. 이러한 변화는 시클로 펜타 디에 닐 고리의 파이 - 시스템과 철 D 오비탈 사이에서 발생 광범위한 오버랩으로부터 발생한다. 파이 시스템이 변경되는 경우, 즉, 유도하거나, 다음 궤도 상호 작용이 것, 차례로, 변화를 반응. 이 철 코어에 영향을 미칠 것입니다 및 철 III / 철 II 커플의 잠재력의 변화로 관찰 할 수있다. 40,45,46 이러한 특성은 전기 화학적 면역 또는 바이오 센서의 정량 에이전트로 사용하기에 이러한 시스템이 매력. 바이오 센서 용량에 특이 페로센 함유 시스템을 생산하기 위해, 그것은 표적 분자에 특이적인 바이오 리셉터와 하나의 Cp 환을 수정하고 전기 판독 또는 ELEC에 분자 테더로서 다른 CP 링을 이용하는 것이 최적trode (그림 1). 이러한 비대칭 페로센 유도체의 합성 부반응 및 분자간 가교 상에 형성된 다이머 및 폴리머 종의 형성에 의해 도전. 47 그러나, 아미드 결합을 생성하는 커플 링 화학이 생물학적 성분 등을 포함 페로센의 간단한 유도체를 제공하기위한 가장 직접적인 경로이고 펩타이드 및 그 대사 산물로. 따라서, 제 펩티드 합성에 메리 필드 (Merrifield)에 의해 1950 년대에 개발 된 고상 기법 페로센을 함유하는 유기 금속 화합물에 적용될 수있다. 갖는다 직교 치환 1&#39;-의 Fmoc- 아미노 페로센 -1- 카르 복실 산 분자 수용체 부위 (비오틴), 전기 리드 (페로센) 및 고정화 링커 성분 (시스테인)를 포함 할 수 페로센 시스템의 사용을 통해 건설하고 여기에 자세히 설명되어. 이 바이오 접합체의 합성 금 표면에 고정화 증거로도 설명된다. 이 작업 represen비오틴, 페로센 및 금 표면에 고정화 아미노산으로 이루어지는 시스템의 제 프레젠테이션 TS.

<table><tbody><tr><td>비오틴 Novatag 수지</td><td>NovaBiochem</td><td>8550510001</td><td></td></tr><tr><td>TORVIQ 10ml Luer Lock Fritted Syringe</td><td>Fisher</td><td>NC9299151</td><td></td></tr><tr><td>piperidine</td><td>Acros</td><td>P/3520/PB05</td><td></td></tr><tr><td>닌히드린 테스트</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>60017-1ea</td><td></td></tr><tr><td>1'-Fmoc-amino-ferrocene-1-carboxylic acid</td><td>Omm Scientific</td><td>특별 주문</td><td></td></tr><tr><td>N,N&prime; -Diisopropylcarbodiimide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D125407-5G</td><td></td></tr><tr><td>Fmoc-Cys(Trt)-OH</td><td>Novabiochem</td><td>8520080025</td><td></td></tr><tr><td>trifluoroacetic acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T5408</td><td></td></tr><tr><td>1,2-ethanedithiol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>2930</td><td></td></tr><tr><td>triisopropyl silane</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>233781</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf tubes (20 ml)</td><td>모든 소스</td><td></td><td></td></tr><tr><td>메탄올</td> 사용 전 분자체로 건조 <td>된 모든 소스</td><td></td> 디클로로 메탄 쉬운 <td>사용을 위해 100 ml 미디어 병에 보관 및 사용</td></tr><tr><td></td> 전에 분자체로 건조 된 <td>모든 소스</td><td></td> 쉬운 <td>사용을 위해 100 ml 미디어 병에 보관</td></tr> 디<tr><td>메틸 포름 아미드</td><td>모든 소스</td><td></td><td>사용하기 전에 분자체로 말리십시오 & 100ml 미디어 병에 보관하여 모든</td></tr><tr><td>소스를</td><td></td><td></td> <td>원심</td></tr>분리기 쉽게 사용할 수 있습니다.</tbody></table>

고상 수지 기반의 방법론을 통해 비대칭 페로센 유래 바이오 복합체 시스템 용 합성 방법론

Synthetic Methodology for Asymmetric Ferrocene Derived Bio-conjugate Systems via Solid Phase Resin-based Methodology

조기 발견이 가장 질환의 성공적인 치료의 핵심이며, 많은 종류의 암의 진단 및 치료에 특히 필수적이다. 사용되는 가장 일반적인 기술은 자기 공명 영상 (MRI), 양전자 방출 지형도 (PET), 및 계산 된 지형 (CT)과 같은 양상을 이미징 및 질병의 물리적 구조를 이해하는데 최적이지만 회만 매 4로 할 수 있습니다 조영제 및 전체 비용의 사용으로 인해 육주. 마음, 치료 프로토콜을 혁명 것, 질병 및 / 또는 임상의 사무실에서 치료 효능의 무대를 평가하고 적절한시기에 이렇게 바이오 센서 등의 기술, &quot;관리의 포인트&quot;의 개발. 1과에두고 생물학적으로 중요한 분자 (2)의 검출에 페로센 기반 바이오 센서를 탐색하는 수단은, 본원에 기재된 방법은 페로센 비오틴 바이오 컨쥬 게이트를 제조하기 위해 개발되었다. 이 보고서는 금 표면에 고정화 될 수 비오틴 - 페로센 시스테인 시스템에 초점을 맞출 것이다.

(1)의 수지 결합 된 형태는도 2에 도시되어있다. 페로센 성분의 공유 결합은 철분 흡수 반대로 연속 세정하고 영구적 인 착체를 함유하는 고정화 된 철 나타내는 수지 비드에 오렌지 색조를 일으킨다 수지 입자의 PEG 성분. 하나의 수지 - 유리 형태는 수지 비드에 색상이 동일하다. 수지 구슬에서 화합물의 제거 후, ​​방법에 의한 순도와 수율 (68 %)는 일반적인 해결 방법보다 훨씬 우수하다. C (26) 이론치 (발견) H (36) 펜 6 O 4 S 2 4TFA : 제품의 원소 분석 (1) TFA 염으로서 분리 된 것으로 나타났다 C, 38.07 (38.90)를; H, 3.76 (4.20); N, 7.83 (7.70). 전형적인 반응으로부터 얻어진 수율 (105.1 ㎎, 68 %)의 원소 분석 결과를 기반으...

페로센의 비대칭 종의 합성은 용액 기술을 사용하여 어렵습니다. 이 보고서는 고체상 합성을 통해 수행된 용이하고 깨끗한 반응을 사용하여 페로센-비오틴 생체접합체를 생성하기 위해 수행된 방법에 중점을 둡니다. 티올레이트 부분의 혼입은 금 표면에 고정화(immobilization)를 위한 능력을 부여하기 위해 보여진다.

Early detection is a key to successful treatment of most diseases, and is particularly imperative for the diagnosis and treatment of many types of cancer. ...

다음 실험의 전반적인 목적은 금 표면에 고정할 수 있는 비대칭 ferne-biotin 바이오 접합체를 제조하는 것입니다. 이는 고체상 수지에서 ferne-biotin 바이오 접합체를 합성함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계에서는 바이오 접합체를 수지에서 제거하여 화합물을 분리하고 특성을 분석합니다.다음으로, 티올레이트가 금과 접착될 수 있도록 바이오 접합물을 금 표면과 함께 인큐베이션합니다. 결과에 따르면, 페린 바이오 접합물을 높은 수율과 순도로 제조하여 금 표면에 고정시킬 수 있음을 알 수 있습니다. 용액 기반 방식과 같은 기존 방법보다 이 기술을 사용했을 때의 주요 장점은 정제 과정이 간단하고 용이하다는 점입니다.용액 기반 방법으로 인해 발생하는 부산물을 방지하는 것 외에도, 저희는 당뇨병 환자 모니터링에 사용되는 포도당 센서의 효율성과 실용성에 대해 고민하던 중 이 방법의 아이디어를 처음 얻게 되었습니다. 이 절차의 시연은 저희 연구실의 대학원생인 Sean Rodich와 학부생인 Paulina Gonzalez가 맡아 진행하겠습니다. 먼저, 250 mg의 biotin 로딩 레진을 프릿 시린지(fritted syringe)에 넣습니다.5 mL의 dimethylformamide를 흡입하고 실험실 쉐이커에서 20분 동안 흔들어 레진을 팽윤시킵니다. 완료되면 용액을 배출하고 dimethylformamide 팽윤 과정을 반복합니다. 그 다음, 주사기에 20% papine in dimethylformamide를 4~6 mL 첨가하고 10~15분 동안 흔들어 FOC 보호기를 제거합니다. 탈보호 과정을 반복한 후, dimethylformamide, dimethylformamide와 methanol(1:1), methanol과 di chloro methane(1:1), 그리고 di chloro methane 순으로 레진을 세 번씩 세척합니다.용액을 배출한 후, 비드의 소량을 샘플링하여 가열 시 청색이 나타나는지 확인함으로써 딥 프로텍션(deep protection)이 성공적으로 이루어졌는지 확인하는 hyn 테스트를 수행합니다. 다음으로, 하나의 prime FM amino farin, 하나의 carboxylic acid, HOBT hydrate, DIC di, isopropyl ethyl amine, 그리고 di chloro methane와 dimethylformamide의 4:1 혼합액이 포함된 용액을 혼합합니다. 이 용액을 프릿 시린지(fritted syringe)에 흡입하고 랩 셰이커(lab shaker)에서 6시간 동안 부드럽게 흔들어 섞어줍니다.수지를 세척한 후, 앞서 설명한 대로 hyran 테스트를 수행하여 커플링이 일어났는지 확인합니다. 그 다음, 시린지에 담긴 수지에 dimethylformamide 내 20%ine을 첨가하여 FM o 그룹을 제거한 후, 이전과 동일한 방식으로 흔들어 세척합니다. fmm cyst trit till O-H-O-B-T hydrate, DIC di, isopropyl eth lamine, 그리고 di chloro methane과 dimethylformamide를 4:1 비율로 혼합한 용액을 준비합니다.이 시스틴 커플링 칵테일을 프릿 시린지에 넣고 6시간 동안 부드럽게 흔들어 줍니다. HYN 테스트를 통해 커플링을 확인한 후, 20%ine으로 F MOC 성분을 제거합니다. 세척이 완료되면 하이드란트 테스트를 사용하여 유리 말단 아민을 확인합니다.이 단계에서 trichloroacetic acid 수용액, 1, 2-ethanediol, 그리고 isopropyl cy 용액을 제조하십시오. 그다음 이 용액을 시린지에 넣습니다. 4시간 동안 흔들어 섞은 후, 생성된 적갈색 용액을 eppendorf tube에 수집하고 공기 흐름을 이용하여 trichloroacetic acid를 천천히 증발시킵니다.이어서 약 15 milliliters의 차가운 diethyl ether를 eppendorf tube에 넣어 생성물을 침전시키며, 이때 가볍게 흔들어 섞어줍니다. 원심분리를 통해 생성물을 분리합니다. 그 후 diethyl ether 세척과 원심분리 과정을 반복합니다.적갈색 고체 형태의 ferne biotin 바이오 접합체를 얻습니다. proton 및 carbon NMR 분광법과 E-S-I-M-S 분석을 사용하여 ferne biotin 바이오 접합체의 동일성을 확인합니다. HPLC 및 원소 분석을 수행하여 분리된 화합물의 조성을 확인합니다.제품의 특성 분석이 완전히 완료되면, 폴리머 지지 금 슬라이스를 약 0.25 square inches 크기의 정사각형으로 자릅니다. 그런 다음 50 milliliter 비커에 ferne biotin 바이오 컨쥬게이트의 1 millimolar 탈이온수 용액을 채웁니다. 금 슬라이드 하나를 비커에 넣고 시계접시로 덮습니다.슬라이드를 상온에서 교반 없이 하룻밤 동안 배양합니다. 배양이 끝나면 금 슬라이드를 용액에서 꺼내 탈이온수로 세척합니다. 슬라이드가 마르면, 주사전자현미경을 사용하여 주사전자현미경 이미지를 획득함으로써 고정된 ferne biotin 바이오 컨쥬게이트를 관찰합니다.수지 결합 형태의 ferne biotin 바이오 컨쥬게이트 1이 여기에 제시되어 있습니다. ferne 성분이 공유 결합되면 수지 비드가 오렌지색을 띠게 되는데, 이는 수지 비드의 PEG 성분에 의한 철 흡착이 아니라 철 함유 복합체가 고정되었음을 나타냅니다. 수지 비드에서 화합물을 제거한 후 얻어지는 순도와 수율은 일반적인 용액법보다 훨씬 뛰어납니다.이 기술을 숙달하면 적절히 수행했을 때 3일 안에 완료할 수 있습니다. 클로로아세트산과 F 및 다이어트(diet)를 사용하는 작업은 매우 위험할 수 있으므로, 본 절차를 수행할 때는 항상 개인 보호 장구를 착용하고 흄 후드 내부에서 작업을 진행하는 등의 예방 조치를 취해야 함을 잊지 마십시오.

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Research

연구

JoVE Journal

Chemistry

화학

HMBA 수지에서 절단 절차를 "안전 잡는 '활용하는 작용 비스 - 펩티드 trimer의 효율적인 고체 상 펩타이드 합성이 설명되어 있습니다.

기능화 비스 - 펩타이드의 고상 합성은 방법론 &quot;을 안전 잡아라&quot;사용

이 프로토콜은 시약 정제 반응 조건 bioconjugate 정화 및 bioconjugate 특성화를 포함하여 말레이 미드로 단백질을 함유하는 시스테인의 바이오 콘쥬 게이션에 필요한 중요한 단계를 자세히.

단백질 Bioconjugates의 합성<em&gt;를 통해</em&gt; 시스테인 - 말레이 미드 화학

미리 결정된 금속 중심 서열을 포함하는 수용성 다금속 펩티드 어레이의 합성을 위한 잠재적인 일반적인 방법이 제시됩니다.

수용성 유기 금속 복합 어레이의 합성

선물이 thioether/비닐의 건설에 대 한 프로토콜 황화 닿는 헬리컬 펩 티 드 사진 유도 thiol-ene/thiol-yne hydrothiolation를 사용 하 여.

헬리컬 펩 티 드를 통해 사진 유도 Thiol-ene 또는 yne Hydrothiolation Thioether/비닐 황 화물-곁에 건설

여기 선물이 spirocyclic heterocycles의 합성을 위한 효율적인 방법 설명 하는 프로토콜. 5 단계 프로세스 활용 고체 상 합성 및 마이클 링커 전략을 다시 생성 합니다. 일반적으로 합성 하기 어려운, 우리 다른 현대 접근에 그렇지 않으면 액세스할 수 spirocyclic 분자의 합성에 대 한 사용자 정의 방법 제시.

[4.4] Spirocyclic Oximes의 고체 상 합성

이 프로토콜에서 포드는 phenyoxadiazolyl 메 틸 sulfone 기반 시 약 쓰이므로, 특히 항 체의 thiols 화물의 사이트 선택 첨부 파일에 대 한 종합을 설명 합니다. 또한, 합성 및 포드 베어링 bifunctional chelator 및 모델 항 체에의 활용의 설명 합니다.

합성 및 Bioconjugation의 Thiol 반응 시 약 사이트에 선택적으로의 창조에 대 한 수정 Immunoconjugates

정보 부호화 된 펩토이드 올리고머의 합성과 동적 공유 반응체 쌍 및 루이스 산성 희토류로 아민과 알데히드를 사용하여 분자 사다리로 이러한 펩토이드의 시퀀스 지시자가 조립하기 위한 프로토콜이 제시됩니다. 다중 역할 시약으로 금속 triflates.

정보 베어링 펩토이드의 합성과 시퀀스 지향 동적 공유자 자체 조립

이 프로토콜은 시스테인과 메티오닌 사이의 비스알킬화와 프로파길 설포늄 중심에 의해 유발되는 용이한 티올-인 반응을 통한 고리형 펩타이드의 합성을 제시합니다.

온테더 설포늄 중심을 사용한 순환 펩타이드 구성

이 프로토콜은 방향족 가교를 갖는 고리형 세포 침투 펩타이드의 합성과 생물학적 장벽을 통한 투과성 평가를 설명합니다.

생물학적 장벽의 침투 강화를 위한 순환 세포 침투 펩타이드의 구성

고압 사파이어 전지 장치는 광범위한 범위의 압력 하에서 샘플링 위상 동작없이 공부 유일한 도구이다. cathetometer를 사용하여, 매우 정확한 부피 측정은 액체 팽창 및 위상 성분을 측정하기 위해 기록 할 수있다. 따라서,이 합성 방법은 다 성분 혼합물 (1) 상 평형의 연구 및 압력의 함수로서 촉매 또는 모델 화합물 (2) 파티션 동작을 가능하게한다.

CO의 상 평형 측정을위한 고압 사파이어 셀<sub&gt; 2</sub&gt; / 유기농 / 물 시스템

배우세요 고상 수지 기반 합성법으로 비대칭 페로센-비오틴 바이오접합체를 제조하고 금 표면에 고정하는 방법을 익히세요. 이 기술은 정제가 간단하고 수율이 우수하여 바이오센싱 연구에 활용됩니다.

고상 수지 기반의 방법론을 통해 비대칭 페로센 유래 바이오 복합체 시스템 용 합성 방법론

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