쥐에서 초음파 기술을 사용하여 약물 유발 신장 혈역학 적 부전의 조기 발견

이 절차의 전반적인 목표는 약물 유발 신독성 쥐 모델을 사용하여 신장 기능 장애를 감지하기 위한 단계별 초음파 검사 방법론을 제공하는 것입니다. 이것은 먼저 레일 시스템을 사용하여 초음파 프로브를 배치하고 대동맥을 분리함으로써 수행됩니다. 다음으로, 프로브 각도를 조정하여 화면 중앙에서 완전한 신장 시야를 확보하고 가능한 가장 높은 프레임 속도를 사용하여 B 모드 이미지를 저장합니다.

그런 다음 컬러 도플러 음향 창을 열어 신장 동맥과 신장 정맥을 분리합니다. 마지막으로, 펄스파 또는 PW 노란색 표시선은 오른쪽 신장 동맥의 흐름을 평가하는 데 사용되며 시니스토어는 가능한 가장 높은 프레임 속도로 데이터를 수집하는 데 사용됩니다. 궁극적으로, 고해상도 초음파 영상은 시스플라틴에 의한 급성 신장 손상 후 신장의 혈역학적 변화를 보여주는 데 사용됩니다.

이 방법은 신장 손상으로 인한 혈역학적 변화와 같은 신장 기능 모니터링 분야의 주요 질문에 답할 수 있습니다. 이 방법은 신장 혈류역학에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만 마우스 모델과 같은 다른 시스템에도 적용할 수 있습니다. 0일차에는 텍스트 프로토콜에 따라 동물을 마취하고 안연고를 바른 후 No.40 면도날과 제모 크림을 사용하여 가슴의 털을 제거합니다.

동물의 활력 징후를 모니터링하는 동안 활성 포트에 연결된 중심 주파수가 21MHz인 고해상도 MS250 초음파 시스템을 설정하고 신장에 애플리케이션을 미리 설정합니다. 마취된 동물을 플랫폼에 누운 자세로 놓고 레일 시스템을 사용하여 대동맥을 분리하는 왼쪽 흉골 주위선에 대해 90도 각도로 동물의 초음파 프로브 정중선을 배치합니다. 이 위치에서 프로브가 왼쪽 또는 오른쪽 신장 동맥과 수평이 되도록 동물과 함께 플랫폼을 밉니다.

미세 조작기를 사용하여 신장 동맥을 봅니다. 그런 다음 프로브의 Y축을 따라 약간 기울여 프로브 각도를 조정하여 화면 중앙에서 전체 신장 보기를 얻습니다. 신장 골반과 신장 동맥이 이미지화되면 사용된 프로브와 함께 허용되는 가장 높은 프레임 속도를 사용하여 이미지를 저장합니다.

그런 다음 키보드의 컬러 도플러 키를 눌러 컬러 도플러 음향 창을 켭니다. 초점 깊이가 신장의 중앙에 있다는 것을 확인하십시오. sinistore를 사용하여 가능한 가장 높은 프레임 속도로 데이터를 기록합니다.

펄스파나 PW에서 이미지를 캡처하려면 view, PW 키를 클릭하여 화면에 노란색 표시선을 표시합니다. PW 각도 키를 사용하여 혈관을 통한 흐름의 방향성과 평행한 각도로 신장 동맥의 노란색 선을 배치하고 도플러 각도가 60도 미만이 되도록 합니다. 이 모드에서는 음향 창이 위쪽과 아래쪽 섹션으로 나뉩니다.

sinistore를 사용하여 최대 수축기 및 이완기에서 동맥 흐름의 속도를 나타내는 파형의 이미지를 캡처합니다. 이미징 후, 흉골 누워있는 깨끗한 회복 부위의 가열 램프 아래에 동물을 놓습니다. 동물을 수용 시설로 돌려보내기 전에 마취에서 완전히 회복될 때까지 동물의 활력 징후를 지속적으로 모니터링하십시오.

기준선 이미징을 수행한 후 24시간 후에 치료 동물에게 1회 용량으로 시스플라틴 1kg당 10mg의 복강 간 주사를 투여합니다. 대조 동물에게 생리식염수를 투여합니다. 여기에 표시된 일정에 따라 동물의 활력 징후를 모니터링하면서 비디오의 앞부분에서 설명한 대로 초음파 영상을 수행합니다.

텍스트 프로토콜의 지침에 따라 데이터 분석을 수행합니다. 이 연구에서 제시된 이미지는 한 명의 작업자가 촬영했으며 이미징 데이터는 한 명의 조사자가 분석했습니다. 그 결과, 시스플라틴을 투여한 동물은 6일째에 혈청 크레아티닌이 0.5에서 2.1 사이인 것으로 나타났다.

크레아티닌의 정상 수치는 1.1 미만입니다. 초음파 이미지는 다음 연구에서 나타난 조직학적 데이터에 비해 높은 감도를 제공합니다. 6일째에 조직학은 정상 식염수 처리 동물과 비교하여 시스플라틴 처리 신장에서 급성 세뇨관 간질 손상의 일관된 패턴을 보여주었습니다.

고해상도 초음파 영상을 사용하여 신장의 혈역학적 변화를 측정한 결과, 시스플라틴 처리를 하지 않은 동물에서는 0일과 6일 사이에 형태학적 변화가 없었으며, 시스플라틴 처리를 한 동물에서는 6일째에 맥박 파부스 형태가 감지되었습니다. RI는 Resistive Index, PI는 Pulsatile Index의 약자입니다. 쥐에서 정상 RI와 PI의 상한은 각각 0.7과 1.15입니다.

신장의 혈역학적 변화를 평가하기 위해 이러한 지표를 측정한 결과, 6일째에 시스플라틴 투여된 두 동물 모두에서 유의한 증가가 입증되었습니다. 이 절차를 시도하는 동안 동물이 마취 상태에서 정상적인 활력 징후를 가지고 있는지 확인하는 것이 중요합니다. 개발 후, 이 기술은 급성 신장 손상 후 신장 초음파 혈류역학적 변화 분야의 연구자들에게 길을 열었습니다.

이 동영상을 시청한 후에는 급성 신장 손상의 작은 동물 모델을 사용하여 신장을 이미지화하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.