Name: 고주파 초음파를 사용하여 마우스 태아에 대비 이미징 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 39 s
Description: 배우세요 고주파 초음파를 이용한 마우스 태아 혈관 대비 이미징 기법입니다. 미세기포를 태반 혈관망에 주입하여 혈관 관류 매개변수와 표적 결합을 평가하는 방법을 익혀보세요.

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이 연구는 캐나다 국립 암 연구소의 테리 폭스 프로그램의 지원을 받았습니다.

<ol><li>Voigt, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+molecular+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Ultrasound molecular imaging.</a> Methods. 48 (2), 92-97 (2009).</li>
<li>Klibanov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+targeted+microbubbles%3A+Ultrasound+contrast+agents+for+molecular+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Biological+Engineering+Computing%22%5BJournal%5D)">Preparation of targeted microbubbles: Ultrasound contrast agents for molecular imaging.</a> Medical Biological Engineering Computing. 47 (8), 875-882 (2009).</li>
<li>Cosgrove, D., Lassau, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+perfusion+using+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+Of+Nuclear+Medicine+And+Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Imaging of perfusion using ultrasound.</a> European Journal Of Nuclear Medicine And Molecular Imaging. 37 (S1), 65(2010).</li>
<li>Williams, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+microbubble+contrast-enhanced+US+to+measure+tumor+response+to+targeted+therapy%3A+A+proposed+clinical+protocol+with+results+from+renal+cell+carcinoma+patients+receiving+antiangiogenic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Dynamic microbubble contrast-enhanced US to measure tumor response to targeted therapy: A proposed clinical protocol with results from renal cell carcinoma patients receiving antiangiogenic therapy.</a> Radiology. 260 (2), 581(2011).</li>
<li>Burns, P. N., Wilson, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+liver+masses%3A+Enhancement+patterns+on+contrast-enhanced+Images+-+Concordance+of+US+scans+with+CT+scans+and+MR+images%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Focal liver masses: Enhancement patterns on contrast-enhanced Images - Concordance of US scans with CT scans and MR images.</a> Radiology. 242 (1), 162(2006).</li>
<li>Phoon, C. K. L., Aristizabal, O., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((40+MHz+doppler+characterization+of+umbilical+and+dorsal+aortic+Blood+flow+in+the+early+mouse+embryo.+Ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22In+Medicine+And+Biology%22%5BJournal%5D)">40 MHz doppler characterization of umbilical and dorsal aortic Blood flow in the early mouse embryo. Ultrasound.</a> In Medicine And Biology. 26 (8), 1275-1283 (2000).</li>
<li>Phoon, C. K. L., Aristizabal, O., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+velocity+profile+in+mouse+embryonic+aorta+and+doppler-derived+volumetric+flow%3A+A+preliminary+model%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Spatial velocity profile in mouse embryonic aorta and doppler-derived volumetric flow: A preliminary model.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 283, H908-H916 (2002).</li>
<li>Aristizábal, O., Williamson, R., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAristiz%C3%A1bal%2C+O+%2212A-4+in+vivo+3D+contrast-enhanced+imaging+of+the+embryonic+mouse+vasculature.+Paper+presented+at+Ultrasonics+Symposium%22">12A-4 in vivo 3D contrast-enhanced imaging of the embryonic mouse vasculature. Paper presented at Ultrasonics Symposium</a>. , IEEE. New York, NY. (2007).</li>
<li>Bartelle, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+genetic+approach+for+in+vivo+vascular+imaging+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.Res%22%5BJournal%5D)">Novel genetic approach for in vivo vascular imaging in mice.</a> Circ.Res. 110 (7), 938-947 (2012).</li>
<li>Endoh, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+gene+transfer+by+intrauterine+injection+with+microbubble-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Fetal gene transfer by intrauterine injection with microbubble-enhanced ultrasound.</a> Molecular Therapy. 5 (5), 501-508 (2002).</li>
<li>Yamada, M., Hatta, T., Otani, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+exo+utero+development+system%3A+Protocol+and+troubleshooting%5BTitle%5D)+AND+%22Congenital+Anomalies%22%5BJournal%5D)">Mouse exo utero development system: Protocol and troubleshooting.</a> Congenital Anomalies. 48 (4), 183-187 (2008).</li>
<li>Denbeigh, J. M., Nixon, B. A., Hudson, J. M., Purin, M. C., Foster, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGFR2-targeted+molecular+imaging+in+the+mouse+embryo%3A+An+alternative+to+the+tumor+model%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+medicine+and+biology%22%5BJournal%5D)">VEGFR2-targeted molecular imaging in the mouse embryo: An alternative to the tumor model.</a> Ultrasound in medicine and biology. 40 (2), 389-399 (2014).</li>
<li>Paauwe, M., Dijke, ten, P,, Hawinkels, L. J. A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoglin+for+tumor+imaging+and+targeted+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+On+Therapeutic+Targets%22%5BJournal%5D)">Endoglin for tumor imaging and targeted cancer therapy.</a> Expert Opinion On Therapeutic Targets. 17 (4), 421-435 (2013).</li>
<li>Bourdeau, A., Faughnan, M. E., Letarte, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoglin-deficient+mice%2C+a+unique+model+to+study+hereditary+hemorrhagic+telangiectasia%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cardiovasc.+Med%22%5BJournal%5D)">Endoglin-deficient mice, a unique model to study hereditary hemorrhagic telangiectasia.</a> Trends Cardiovasc. Med. 10 (7), 279-285 (2000).</li>
<li>Whiteley, K. J., Adamson, S. L., Pfarrer, C. D. Vascular corrosion casting of the uteroplacental and fetoplacental vasculature in mice. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWhiteley%2C+KJ+%22Placenta+And+Trophoblast%3A+Methods+And+Protocols%22">Placenta And Trophoblast: Methods And Protocols</a>. 121 (121), Humana Press. Totowa, NJ. 371-392 (2006).</li>
<li>Kulandavelu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+and+neonatal+phenotyping+of+genetically+engineered+mice%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Embryonic and neonatal phenotyping of genetically engineered mice.</a> ILAR Journal. 47 (2), 103-10 (2006).</li>
<li>Kalaskar, V. K., Lauderdale, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+embryonic+development+in+a+serum-free+whole+embryo+culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Mouse embryonic development in a serum-free whole embryo culture system.</a> Journal of Visualized Experiments. 85, (2014).</li>
<li>Willmann, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+contrast-enhanced+ultrasound+imaging+of+tumor+angiogenesis+with+contrast+microbubbles+conjugated+to+integrin-binding+knottin+peptides%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Targeted contrast-enhanced ultrasound imaging of tumor angiogenesis with contrast microbubbles conjugated to integrin-binding knottin peptides.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 51 (3), 433-440 (2010).</li>
<li>Deshpande, N., Ren, Y., Foygel, K., Rosenberg, J., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+angiogenic+marker+expression+levels+during+tumor+growth%3A+Longitudinal+assessment+with+molecularly+targeted+microbubbles+and+US+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Tumor angiogenic marker expression levels during tumor growth: Longitudinal assessment with molecularly targeted microbubbles and US imaging.</a> Radiology. 258 (3), 804-811 (2011).</li>
<li>Lyshchik, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+of+vascular+endothelial+growth+factor+receptor+2+expression+using+targeted+contrast-enhanced+high-frequency+ultrasonography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Of+Ultrasound+In+Medicine%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging of vascular endothelial growth factor receptor 2 expression using targeted contrast-enhanced high-frequency ultrasonography.</a> Journal Of Ultrasound In Medicine. 26 (11), 1575-1586 (2007).</li>
<li>Jerkic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoglin+regulates+nitric+oxide-dependent+vasodilatation%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Endoglin regulates nitric oxide-dependent vasodilatation.</a> The FASEB Journal. 18 (3), 609-611 (2004).</li>
<li>Denbeigh, J. M., Nixon, B. A., Lee, J. J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDenbeigh%2C+JM+%22Contrast-Enhanced+Molecular+Ultrasound+Differentiates+Endoglin+Genotypes+in+Mouse+Embryos%22">Contrast-Enhanced Molecular Ultrasound Differentiates Endoglin Genotypes in Mouse Embryos</a>. , Angiogenesis. Press. (2014).</li>
<li>Adamson, S. L., Lu, Y., Whiteley, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+between+trophoblast+cells+and+the+maternal+and+fetal+circulation+in+the+mouse+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Interactions between trophoblast cells and the maternal and fetal circulation in the mouse placenta.</a> Dev Biol. 250, 358-35 (2002).</li>
<li>Needles, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+contrast+imaging+with+an+array-based+micro-ultrasound+system.+Ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+Biology%22%5BJournal%5D)">Nonlinear contrast imaging with an array-based micro-ultrasound system. Ultrasound.</a> Medicine Biology. 36 (12), 2097(2010).</li>
<li>Watson, E. D., Cross, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+structures+and+transport+functions+in+the+mouse+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology%22%5BJournal%5D)">Development of structures and transport functions in the mouse placenta.</a> Physiology. 20 (3), 180-193 (2005).</li>
<li>Shalaby, F., Rossant, J., Yamaguchi, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+blood-island+formation+and+vasculogenesis+in+Flk-1-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Failure of blood-island formation and vasculogenesis in Flk-1-deficient mice.</a> Nature. 376, 62-66 (1995).</li>
<li>Kwee, L., Baldwin, H. S., Shen, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defective+development+of+the+embryonic+and+extraembryonic+circulatory+systems+in+vascular+cell+adhesion+molecule+%28VCAM-1%29+deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Defective development of the embryonic and extraembryonic circulatory systems in vascular cell adhesion molecule (VCAM-1) deficient mice.</a> Development. 121, (1995).</li>
<li>Mercurio, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+the+%CE%B12+integrin+knockout+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+journal+of+pathology%22%5BJournal%5D)">Lessons from the α2 integrin knockout mouse.</a> The American journal of pathology. , 161-163 (2002).</li>
<li>Hodivala-Dilke, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B1v%CE%B23+integrin+and+angiogenesis%3A+a+moody+integrin+in+a+changing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">αvβ3 integrin and angiogenesis: a moody integrin in a changing environment.</a> Curr Opin Cell Biol. 20, 514-519 (2008).</li>
<li>Pysz, M. A., Gambhir, S. S., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging%3A+current+status+and+emerging+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+radiology%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging: current status and emerging strategies.</a> Clinical radiology. 65, 500-516 (2010).</li>
<li>Cybulsky, M. I., Iiyama, K., Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+major+role+for+VCAM-1%2C+but+not+ICAM-1%2C+in+early+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">A major role for VCAM-1, but not ICAM-1, in early atherosclerosis.</a> J Clin Invest. 107, 1255-1262 (2001).</li>
<li>Xu, H., Gonzalo, J. A., St Pierre,, Y,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leukocytosis+and+resistance+to+septic+shock+in+intercellular+adhesion+molecule+1-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Leukocytosis and resistance to septic shock in intercellular adhesion molecule 1-deficient mice.</a> J Exp Med. 180, 95-109 (1994).</li>
<li>Gerwin, N., Gonzalo, J. A., Lloyd, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+eosinophil+accumulation+in+allergic+lung+interstitium+of+ICAM-2-deficient+mice+results+in+extended+hyperresponsiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Prolonged eosinophil accumulation in allergic lung interstitium of ICAM-2-deficient mice results in extended hyperresponsiveness.</a> Immunity. 10, 9-19 (1999).</li>
<li>Johnson, R. C., Mayadas, T. N., Frenette, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+cell+dynamics+in+P-selectin-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Blood cell dynamics in P-selectin-deficient mice.</a> Blood. 86, 1106-1114 (1995).</li>
<li>Corrigan, N., Brazil, D., McAuliffe, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-frequency+ultrasound+assessment+of+the+murine+heart+from+embryo+through+to+juvenile%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Sciences%22%5BJournal%5D)">High-frequency ultrasound assessment of the murine heart from embryo through to juvenile.</a> Reproductive Sciences. 17 (2), 147-14 (2010).</li>
<li>Turnbull, D. H., Bloomfield, T. S., Baldwin, H. S., Foster, F. S., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+backscatter+microscope+analysis+of+early+mouse+embryonic+brain+development%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Ultrasound backscatter microscope analysis of early mouse embryonic brain development.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 92, 2239-2243 (1995).</li>
<li>Greco, A., Mancini, M. L., Gargiulo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+Biomicroscopy+in+Small+Animal+Research%3A+Applications+in+Molecular+and+Preclinical+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedicine+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Ultrasound Biomicroscopy in Small Animal Research: Applications in Molecular and Preclinical Imaging.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2012, (2012).</li>
<li>Pysz, M. A., Guracar, I., Foygel, K., Tian, L., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+tumor+angiogenesis+using+real-time+motion-compensated+contrast-enhanced+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of tumor angiogenesis using real-time motion-compensated contrast-enhanced ultrasound imaging.</a> Angiogenesis. 15, 433-442 (2012).</li>
<li>Larina, I. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+blood+flow+in+mammalian+embryos+using+doppler+swept-source+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J.Biomed.Opt%22%5BJournal%5D)">Live imaging of blood flow in mammalian embryos using doppler swept-source optical coherence tomography.</a> J.Biomed.Opt. 13 (6), 060506-06 (2008).</li>
<li>Garcia, M. D., Udan, R. S., Hadjantonakis, A. K., Dickinson, M. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGarcia%2C+MD+%22Live+imaging+of+mouse+embryos%22">Live imaging of mouse embryos</a>. 4 (4), Cold Spring Harbor. 104-10 (2011).</li>
<li>Teichert, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+nitric+oxide+synthase+gene+expression+during+murine+embryogenesis.+Commencement+of+expression+in+the+embryo+occurs+with+the+establishment+of+a+unidirectional+circulatory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Endothelial nitric oxide synthase gene expression during murine embryogenesis. Commencement of expression in the embryo occurs with the establishment of a unidirectional circulatory system.</a> Circulation Research. 103 (1), 24-33 (2008).</li>
<li>Walls, J. R., Coultas, L., Rossant, J., Henkelman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+analysis+of+vascular+development+in+the+mouse+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional analysis of vascular development in the mouse embryo.</a> PLoS One. 3 (8), (2008).</li>
</ol>

F.S. Foster는 VisualSonics Inc.의 컨설턴트로서의 역할을 인정합니다.

초음파 조영제가 말기 임신 마우스 배아 및 비선형 대비 이미지로 주입 하였다는 관류 매개 변수를 측정하기 위해 취득 및 바인딩 마이크로 버블을 대상으로 하였다. 배아의 혈관계 내의 미세 기포 성공적인 이미징은 다수의 인자, 제 인 배아 생존에 의존했다. 모든 장치 및 장치가 분사의 시작에서 배아의 자궁 분리에 필요한 시간을 최소화하기 위해 사전에 준비 하였다. 쥐 배아 마취 단일 또는 반복 노출의 효과를 상세하게 연구되지 않았으므로, 어머니 마취 사용 전에 회피 16을 희생시켰다. 배아 분리 동안, 난황의 손상을 방지하고, 배아 자주 리프레쉬 배아 매체에서도 항상 냉장 보관 하였다 보장하기 위해 중요하다. 주사 전에 피닝 동안 배아 exteriorizing 때 주요 난황 혈관 likelihoo를 제한 하였다 회피치명적이 될 수 출혈, d의. 우리는 배아를 되살리는 때, 처음 앞뒤로 움직이는 태아에 초음파 젤을 적용하고 집게로 어떤 큰 거품을 제거하기 전에, PBS와 태반 다음 배아를 충당하기 위해 최선의 것...

조영 증강 초음파 영상 시각화하고 혈관 환경의 특성을 미세 기포 조영제를 사용한다. 이러한 에이전트는 미세 순환, 혈관 및 심장 혈관 기능의 비 침습적 평가를 할 수 있습니다. 또한, 기포 표면의 개질이 가능 혈관 질환의 분자 초음파 영상을 혈관 신생, 염증 및 아테롬성 경화증의 임상 1,2- 애플리케이션에서 입증 된 바와 같이, 내피 표적 바이오 마커에 ​​대한 결합 미세 기포가 발생할 수있다. 콘트라스트 향상 초음파 따라서 혈관 질병과 건강 상태에 영향 3-5 복잡하고 다양한 환경을 식별하기 위해 사용될 수있다. 년의 과거 수 년, 마이크로 버블 영상의 유용성에 대한 관심이 다양한 마우스 배아 모델을 확장했다. 포유류의 개발 모델로, 배아 미세 기포 맥관계 내로 도입 생리 향상개발 순환 시스템 (예를 들어, 혈류, 심장 출력) 및 형질 전환 사례 및 심장 질환 6,7의 대상으로 돌연변이 마우스 모델에서의 연구는 심장 혈관 기능을 변경하는 방법 유전 적 요인에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다. 사실, 양적 및 질적 2D는 배아 뇌 혈관 분석 이미 8을 달성했다. 더욱이, 마우스의 배아는 생체 내에서 혈관 마커 타겟팅 결합 미세 기포를 검사하는 우수한 모델로서 제시한다. Bartelle 등. (9)는, 예를 들어, Biotag - 피라 유전자 변형 배아에 바인딩 및 혈관 해부학을 검토하여 대상을 평가하기 위해 태아 심장의 심실에 아비딘 미세 기포를 도입했습니다. 병원에이 기술을 번역에서 중요한 벤치 마크 - 이질 동형 접합 마우스 모델의 생성은 분자 초음파의 양적 특성을 정의하는 것을 목표로 종양 모델 연구를위한 대리로 사용할 수 있습니다. 8-10 통해 노출로 단일 배아 심장 내 주사를 통해 순환 배아에 도입된다. 자궁 내 주사 그러나 난제에 직면하고있다. 이러한 주입 안내, 어머니 표면화 배아 움직임에 대응하는 필요, 어머니 혈역학 생존을 유지하고 (11)에 의한 출혈 합병증 마취 장기적인 효과를 어드레싱 표면화 배아를 포함한다. 따라서, 조사의 목적은 거실 절연 말기 배아 미세 기포 (12) 내로 주입하는 기술을 개발하는 것이었다. 이 옵션은 분사 제어 및 위치, 장애물없이 촬상면의 재현성 간단한 이미지 분석 및 정량의 관점에서 더 많은 자유를 제공한다. 본 연구에서는 FO 살아있는 쥐의 배아에 미세 기포를 주입위한 새로운 절차 개요R 마이크로 버블 운동 동작을 연구하고의 목적은 내인성 내피 세포 표면 마커에 결합 마이크로 버블을 목표로 공부. 비선형 대비 특정 초음파 영상은 피크 향상 (PE), 세척 된 속도와 시간 고립 E17.5 배아에 (TTP)을 피크를 포함하는 기본 관류 매개 변수들로 측정하는 데 사용됩니다. 우리는 또한 활성 혈관 (13)의 부위에서 혈관 내피 세포에서의 고 발현에 endoglin은 임상 적으로 관련된 대상 함수 트랜스 제닉 마우스 모델의 배아 endoglin 손실 분자 초음파의 정량적 특성을 평가하기위한 배아 모델의 타당성을 입증 . endoglin 타겟 (MB E) 쥐 이소 IgG의 2 제어 (MB C) 및 타겟이 불분명 한 (MB U) 마이크로 버블의 접착 이형 endoglin (영어 +/-)과 동형 접합 endoglin (영어 +가 / +) 표현 배아에서 평가된다. 대상 BINDI 분석NG 분자 초음파 endoglin 유전자형을 구별 정량화 초음파 분자 수준 수용체 밀도를 관련시킬 수 있음을 보여준다.

<table><tbody><tr><td colspan="4">시약</td></tr><tr><td colspan="4">항체 (biotinylated, eBioscience) &#8212; 항체 선택은 실험에 따라 다릅니다</td></tr><tr><td><ul style="padding:0px; margin:0px"><li>rat isotype IgG2 control</li></ul></td><td>eBioscience</td><td>13-4321-85</td><td>이 항체/마이크로버블 조합은 종종 실험 대조군으로 필요합니다&nbsp;</td></tr><tr><td><ul 스타일 = "패딩 : 0px; margin:0px"><li>biotin anti-mouse CD309</li></ul></td><td>eBioscience</td><td>13-5821-85</td><td></td></tr><tr><td>Biotinylated rat MJ 7/18 항체 마우스 엔도글린에 대한 항체</td><td>집 내 하이브리도마</td><td></td><td>외부 항체도 적절할 수 있습니다: 우리는 과거에 eBioscience (13-1051-85)를 사용했습니다.</td></tr><tr><td>증류수</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Embryo media</td></tr><tr><td><ul 스타일 = "패딩 : 0px; 여백:0px"><li>500ml Dulbecco' 의 변형된 독수리' s 포도당이 높은 매체</li></ul></td><td>Sigma</td><td>D5796</td><td></td></tr><tr><td><ul style="padding:0px; 여백:0px"><li>50 ml 소 태아 세럼</li></ul></td><td>ATCC</td><td>30-2020</td><td>lot #</td></tr> <tr><td>7592456<ul style="padding:0px; 여백:0px"><li>Hepes</li></ul></td><td>Gibco</td><td>15630</td><td>5 ml, 1 M</td></tr><tr><td><ul style="패딩:0px; 여백:0px"><li>페니실린-스트렙토마이신</li></ul></td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td>5 ml, 10,000 units Pen., 10,000 &#956; g 스트렙</td></tr><tr><td>에탄올, 70%</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ice</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>파라포름알데히드</td><td>시그마</td><td>76240</td><td>4%</td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수 [1x]&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>D8537</td><td>1x, 염화칼슘 및 염화마그네슘</td></tr><tr><td>없음 임산부 마우스, CD-1</td><td>Charles River Laboratories Inc.&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.9% 염화나트륨(식염수)</td><td>Hospira</td><td>0409-7984-11</td><td></td></tr><tr><td>초음파 조영제, 표적 준비 및 비표적</td><td>MicroMarker; 비주얼소닉스 Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>초음파 젤 (Aquasonic 100, 무색)</td><td>CSP Medical</td><td>133-1009</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Equipment</td></tr><tr><td>Cell culture plates (4) :&nbsp; 100&nbsp; 엑스&nbsp; 20&nbsp; mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-772-22</td><td></td></tr><tr><td>세포 배양 플레이트 (12) : 60&nbsp; 엑스&nbsp; 15&nbsp; mm</td><td>Sigma</td><td>D8054</td><td></td></tr><tr><td>원심분리기</td><td>Sorvall Legend RT 원심분리기&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>원뿔형 튜브, 50ml BD Falcon</td><td>VWR</td><td>21008-938</td><td></td></tr><tr><td>희석제</td><td>Beckman Coulter</td><td>Isoton II 희석제, 8448011</td><td></td></tr><tr><td>해부 가위 (Wagner)</td><td>Fine Science</td><td>Tools Wagner 14068-12</td><td></td></tr><tr><td>집게 (2), Dumont SS (0.10 x 0.06 mm)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11200-33</td><td></td></tr><tr><td>집게, 파편</td><td>VWR</td><td>25601-134</td><td></td></tr><tr><td>유리 비커, 2 L (Griffin 비커)</td><td>VWR</td><td>89000-216</td><td></td></tr><tr><td>유리 모세관, 1 x 90&nbsp; 필라멘트가 있는 mm GD-1</td><td>Narishige</td><td>GD-1</td><td></td></tr><tr><td>유리 바늘 풀러</td><td>Narishige</td><td>PN-30</td><td></td></tr><tr><td>장갑</td><td>Ansell</td><td>4002</td><td></td></tr><tr><td>총 해부학 프로브</td><td>Fine Science Tools</td><td>10088-15</td><td></td></tr><tr><td>핫 플레이트</td><td>VWR</td><td>89090-994</td><td></td></tr><tr><td>얼음 양동이</td><td>Cole Parmer</td><td>RK 06274-01</td><td></td></tr><tr><td>이미징 플랫폼</td><td>: VisualSonics Inc.</td><td>통합 철도 시스템</td><td></td></tr><tr><td>광원, 광섬유</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-562-36</td><td>이상적으로는 조정 가능한 암</td></tr><tr><td>Luers (12), 폴리 프로필렌 가시 암컷 &frac14; -28 UNF 스레드</td><td>Cole Parmer</td><td>45500-30</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 초음파 시스템, 고주파</td><td>VisualSonics Inc.</td><td>Vevo2100</td><td></td></tr><tr><td>바늘, 21 게이지&nbsp; (1인치)</td><td>VWR</td><td>305165</td><td></td></tr><tr><td>입자 크기 분석기</td><td>Beckman Coulter</td><td>Multisizer 3 Coulter 카운터</td><td></td></tr><tr><td>천공 스푼 (Moria)</td><td>Fine Science Tools</td><td>MC 17 10373-17</td><td></td></tr><tr><td>핀 (6), 검은색 양극 산화 minutien 0.15 mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>26002-15</td><td></td></tr><tr><td>Pipettors [2-20 &#956; l, 20-200 &#956; l, 100-1,000 &#956; l]</td><td>Eppendorf</td><td>Research Plus&nbsp; 조절 가능한 3120000038; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 3120000054; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td>3120000062</tr><tr><td>피펫터 팁 [2-200&nbsp; &#956; 엘, 50-1,000&nbsp; &#956; l]</td><td>Eppendorf</td><td>epT.I.P.S.&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 22491334; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td>022491351</tr><tr><td>가위</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sylgard 184 실리콘 엘라스토머 키트</td><td>Dow Corning</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubing, Tygon 실험실 1/32 "x 3/32"</td><td>VWR</td><td>63010-007</td><td></td></tr><tr><td>나무 애플리케이터 스틱 (면봉, 면 머리)</td><td>VWR</td><td>CA89031-270</td><td></td></tr><tr><td>수술용 현미경 5-8X 배율</td><td>Fisher Scientific</td><td>Steromaster</td><td></td></tr><tr><td>주사기, 1 ml Normject</td><td>Fisher</td><td>14-817-25</td><td></td></tr><tr><td>주사기 (10개), 30 ml</td><td>VWR</td><td>CA64000-041</td><td></td></tr><tr><td>주사기 주입 펌프&nbsp;</td><td>바이오 링크스&nbsp;</td><td>NE-1000</td><td></td></tr><tr><td>온도계, -20-110&nbsp; &#176; C</td><td>VWR</td><td>89095-598</td><td></td></tr><tr><td>타이머</td><td>VWR</td><td>33501-418</td><td></td></tr><tr><td>튜브, Eppendorf</td><td>VWR</td><td>20170-577</td><td></td></tr><tr><td>튜브 랙 (3)</td><td>VWR</td><td>82024-462</td><td></td></tr><tr><td>초음파 변환기, 20 MHz</td><td>VisualSonics Inc.</td><td>MS250</td><td></td></tr><tr><td>Vannas-Tubingen, 앵글업</td><td>파인 사이언스 도구</td><td>15005-08</td><td></td></tr></tbody></table>

고주파 초음파를 사용하여 마우스 태아에 대비 이미징

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

초음파 조영제 강화 이미징은 조직 혈관 및 관류에 관한 필수 정량적 정보를 전달할 수 있으며, 표적 응용 분야에서 분자 수준에서 혈관 바이오마커의 검출 및 측정을 용이하게 할 수 있습니다. 마우스 배아 내에서 이 비침습적 기술은 초기 마우스 순환계와 심혈관 질환의 유전자 모델에서 혈관 발달의 기저에 있는 기본 메커니즘을 밝히는 데 사용될 수 있습니다. 마우스 배아는 또한 혈관 생성 표적(혈관 내피 성장 인자 수용체 2(VEGFR2) 또는 αvβ3 포함)에 대한 미세 기포의 접착을 연구하고 분자 초음파의 정량적 특성을 평가하기 위한 우수한 모델로 제시됩니다. 따라서 우리는 살아 있는 고립된 배아의 혈관 구조에 초음파 조영제를 도입하는 방법을 개발했습니다. 이를 통해 주입 제어 및 위치 지정, 장애물 및 움직임이 없는 이미징 평면의 재현성, 단순화된 이미지 분석 및 정량화 측면에서 자유로움을 누릴 수 있습니다. 임신 후기(배아일(E)16.6 및 E17.5)의 쥐 배아를 자궁에서 분리하여 난황낭에서 부드럽게 외부화하고 마이크로버블 조영제를 태반 디스크의 융모막 표면에서 접근할 수 있는 정맥에 주입했습니다. 그런 다음 비선형 조영제 초음파 이미징을 사용하여 여러 가지 기본 관류 매개변수(피크 향상, 세척 속도 및 피크까지의 시간)를 수집하고 엔도글린 마우스 모델에서 표적 미세 기포 결합을 정량화했습니다. 우리는 살아있는 배아 내에서 미세 기포의 성공적인 순환과 배아 혈관 구조 및 미세 기포 행동을 특성화하는 데 있어 이 접근 방식의 유용성을 보여줍니다.

전 자궁 마우스 배아에 초음파 조영제의 주입은 주입 및 관련 초음파 영상의 과정을 통해 자궁과 생존의 유지 보수에서 생활, 늦은 임신 단계 배아의 성공적인 분리에 따라 달라집니다. 배아가 표면화하고도 1에 도시 된 바와 같이, 위치되면 배아 혈관에 조영제 주입 조심 가능하다. E17.5 마우스 태아의 전형적인 B 모드 초음파 이미지는도 2a에 도시된다. 미세 기포 및 세척 - 대응 인핸스 대정맥에서, 심장, 뇌, 전체 동물 내함으로써이 기술의 가능성을 보여주는 비선형 콘트라스트 이미징 방법을 사용하여 포착 될 수있다. 개별 시점은도 2b에 도시 된 시간 경과에 콘트라스트의 변화를 표시한다. 전체 세척 -에 기록 및 세척 아웃으로 O마이크로 버블 루스 F를 관류 다양한 파라미터를 측정 할 수있다. 오프라인 분석에서 대조 영역 추적 도구는 배아 좌우 뇌 반구의 관심...

여기서 우리는 생활에 초음파 미세 기포 조영제, 고립 늦은 임신 단계 쥐의 배아를 주입하는 프로토콜을 제시한다. 이 방법은 관류의 매개 변수 및 조영 증강 고주파 초음파 영상을 이용한 혈관 내 배아 분자 마커의 연구를 가능하게한다.

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

본 절차의 전체적인 목표는 분리된 살아있는 생쥐 배아에 마이크로버블을 주입하는 것입니다. 이는 조영 증강 초음파 영상을 얻기 위함입니다. 우선 임신한 생쥐로부터 살아있는 E 16.5 또는 E 17.5 배아를 채취하여 이를 수행합니다.표적 미세기포를 준비한 후, 태반 혈관 네트워크를 통해 살아있는 배아에 미세기포를 주입합니다. 마지막 단계는 초음파 영상을 사용하여 미세기포를 촬영하는 것입니다. 궁극적으로, 조영 증강 초음파 영상을 통해 혈관 관류 파라미터를 측정하고 배아 내 표적 미세기포 결합을 평가할 수 있습니다.일반적으로 이 방법을 처음 접하는 연구자는 성공적인 실험에 필요한 바늘과 포셉의 압력을 조절하는 충분한 연습을 하기 전까지 배아 취급 및 주입 단계에서 어려움을 겪을 수 있습니다. 본 절차를 시연할 사람은 저희 실험실의 코옵 학생인 Brian Nixon입니다. 타겟 준비 바이알을 재구성하려면 먼저 20 micrograms의 항체 용액을 saline 1 milliliter의 최종 부피로 희석하십시오. 바이알은 얼음 위에 보관하십시오. 다음으로, 주사기에 saline 1 milliliter를 채웁니다.모든 기포를 제거합니다. 21 gauge 바늘을 장착하고 마이크로버블 바이알에 용액을 천천히 주입합니다. 플런저를 천천히 당겨 공기 1 mL를 제거한 다음, 바늘을 뽑습니다.바이알을 부드럽게 흔들어 섞은 후 얼음 위에 5분 동안 둡니다. 5분 후, 새 주사기에 항체 희석액을 채워 해당 바이알에 첨가합니다. 흔들어 섞은 후, 혼합물이 2 mL가 되도록 조심스럽게 맞춥니다.얼음 위에서 10분 동안 방치합니다. 타겟팅되지 않은 바이알을 재구성하려면, 시린지에 생리식염수 1 mL를 채웁니다. 이때 모든 기포를 제거하십시오.21 gauge 바늘을 장착하고 용액을 새로운 마이크로버블 바이알에 천천히 주입합니다. 플런저를 천천히 당겨 공기 1 mL를 제거한 다음, 바늘을 뽑습니다. 부드럽게 흔들어 섞어준 후 5분 동안 그대로 둡니다.부피를 2 mL로 맞추기 위해 식염수 1 mL를 추가한 후, 가볍게 흔들어 섞고 얼음 위에서 10분 동안 방치합니다. 원하는 마이크로버블 바이알을 가볍게 흔든 다음, 1 mL 주사기에 21 gauge 바늘을 장착하여 용액 약 50 µL를 흡입합니다. 그 후, 마이크로버블을 빈 2 mL 마이크로 원심분리 튜브에 주입합니다.다음으로 마이크로버블(Microbubble) 스톡 용액 10 µL를 희석액 10 mL에 피펫으로 분주합니다. 부드럽게 혼합한 후, Coulter counting을 사용하여 마이크로버블 집단의 농도와 크기 분포를 평가합니다. 바이알 샘플당 최소 세 번, 각각 50 µL씩 측정하여 계수합니다.30 µm 조리개를 사용합니다. 이 단계는 배아에 마이크로버블을 주입하는 과정과 병행하여 수행됩니다. 외과의가 배아에 주입하는 동안, 보조자는 주입되는 버블의 종류를 외과의가 알 수 없도록(blind) 다음 주입 준비를 합니다.400 µL의 부피에서 최종 농도가 mL당 1억 개의 마이크로버블이 되도록 하는 데 필요한 스톡 버블 용액의 부피를 결정하십시오. 해당 부피만큼의 식염수를 빈 마이크로 원심분리 튜브에 분주하십시오. 선택한 마이크로버블 바이알을 부드럽게 흔든 후, 21 gauge 바늘이 장착된 1 mL 주사기를 사용하여 용액을 충분한 양으로 흡입하십시오.그런 다음 마이크로버블을 빈 마이크로 원심분리 튜브에 주입합니다. 이어서 Microbubble 스톡 용액의 필요한 부피를 피펫으로 취해 식염수 분주액(Ali quad)에 추가합니다. 피펫 팁으로 부드럽게 저어 섞어줍니다.그런 다음 21 gauge 바늘을 사용하여 희석된 마이크로버블 용액을 깨끗한 주사기로 흡입합니다. 바늘을 제거한 후, 주사기 내의 기포를 모두 제거하고 루어와 튜브를 연결합니다. 기포가 생성되지 않도록 주의하며 용액을 튜브 끝까지 천천히 밀어 넣습니다.마지막으로, 마이크로 버블을 분당 20 µL의 속도로 분사하도록 설정된 시린지 인퓨전 펌프에 시린지를 장착합니다. 총 부피 20 µL를 위해 튜빙 끝에 풀드 글라스 니들을 부착합니다. 펌프를 주입 스테이지 가까이로 이동시킵니다.구멍 뚫린 스푼을 사용하여 냉각된 배양액 접시에서 배아 하나를 무작위로 선택하여 꺼냅니다. 스테레오 현미경 아래 초음파 스테이지 위에 놓인 해부 접시에 배아를 옮깁니다. 다음으로, 배아에서 혈관 형성이 가장 적게 나타나는 측면을 찾습니다.여기 머리 부위와 인접한 일반적으로 혈관 분포가 적은 영역이 있습니다. 그다지 미세 핀셋을 사용하여 배아를 내부에서 꺼낼 수 있을 만큼만 난황낭과 양막을 절단하거나 찢어내되, 그 이상으로 훼손하지 마십시오. 다음으로, 배아 주변의 낭을 조심스럽게 제거합니다.그런 다음 태반과 제대 혈관이 앞으로 오도록 배아를 옆으로 눕힙니다. 미리 45 °C로 가온한 용액이 든 주사기를 사용하여 주요 혈관을 피해 난황낭과 태반 가장자리에 4개의 곤충 핀을 꽂고, 플라스틱신 조각들을 이용해 해부 접시를 고정합니다.혈액이 배아 내부로 흘러 들어가는 것이 보일 때까지 PBS로 배아를 세척합니다. 맥동하는 밝은 붉은색 혈액을 통해 제동맥을 식별합니다. 제정맥과 그와 연관된 혈관망은 혈액 색이 더 어두우며, 일반적으로 태반 쪽에서 제동맥의 혈관들과 겹쳐져 나타납니다.이 시점에서 주입 작업을 편하게 수행할 수 있도록 배양 접시의 위치를 잡으십시오. 배아가 회복되면 태반을 제외한 나머지 부분을 덮어줍니다. 미리 데운 초음파 젤을 바르고, 미세 핀셋을 사용하여 배아 주변의 공기 방울을 조심스럽게 제거하며, 과정 전반에 걸쳐 미리 데운 PBS를 배양 접시에 보충해 주십시오.PBS 및 겔 주사기의 용액 수위를 계속 확인하고, 필요에 따라 가열 비커에 예비 주사기를 추가하십시오. 다음으로, 해부 접시 가장자리에 있는 커다란 플라스티신 덩어리에 유리 바늘을 고정하고 바늘 끝을 PBS에 넣으십시오. 태반 원반의 융모막 표면에서 주분지와 가능한 한 멀리 떨어진 정맥을 선택하십시오.그런 다음 가위를 사용하여 바늘 끝을 혈관 크기에 맞게 다듬습니다. 이때 끝부분을 약간 사선으로 자릅니다. 스프링 가위의 날을 이용하여 유리 표면의 거친 부분을 제거합니다.이제 시린지 펌프를 사용하여 마이크로버블 용액을 분당 20 µL의 속도로 유리 바늘에 천천히 주입하십시오. 바늘 끝에서 모든 공기가 배출되고 마이크로버블이 PBS 내부로 자유롭게 흐르는 것이 보일 때까지 주입합니다. 펌프를 멈추고 주입 부피를 20 µL로 재설정하십시오. 배아의 혈관계에 공기가 주입되는 것을 방지하기 위해 주입 바늘에 공기가 들어가지 않도록 주의하십시오.유리 니들 팁을 태반의 선택된 정맥에 조심스럽게 삽입하고 고정되었는지 확인합니다. 실체 현미경 헤드를 옆으로 밀어내고, 배아가 6mm와 10mm의 초점 사이에 균등하게 위치하도록 초음파 트랜스듀서를 배치합니다. 그다음, 이미징을 시작하고 마이크로버블의 볼루스 주입을 시작하며, 1분 후 주입이 완료되면 데이터 획득 단계의 타이머를 시작합니다.이 B 모드 초음파 이미지는 표적 마이크로버블 주입 직전의 외부에 노출된 E 17.5 배아를 보여줍니다. 이 비선형 대조 초음파 이미지는 마이크로버블 주입 전의 배아를 보여주며, 이때는 연조직의 신호가 최소화되어 뼈와 같이 강하게 반사되는 인터페이스만 보입니다. 마이크로버블을 주입하면 하대정맥, 심장 및 뇌를 포함하여 동물 전체의 대조도가 향상됩니다.배아 뇌의 단일 관심 영역 내에서 시간에 따른 마이크로버블의 강도 플롯을 통해, 기울기로 나타나는 최대 강화 또는 PE wash-in rate와 피크 도달 시간인 TTP를 포함한 다양한 관류 파라미터를 식별할 수 있습니다. 엔도글린(endoglin) 표적 마이크로버블의 평균 조영제 평균 전력비는 비표적 마이크로버블의 대조군에서 수집된 값보다 유의하게 높았습니다. 또한, 엔도글린 표적 마이크로버블의 결합은 ogly plus minus 배아에 비해 ogly plus plus 배아에서 유의하게 더 높은 것으로 나타났습니다.기술을 제대로 익히면, 적절한 수행 시 배아 하나당 주입 및 이미징을 15분 이내에 완료할 수 있습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Developmental Biology

발생생물학

마우스에 utero 서바이벌 수술 개발하는 동안 유전자 발현의 분자 조작 수 있습니다. 여기 우리는 배아 하루 마우스 뇌 (E) 9.5에 r​​etroviral 벡터의 주사를 안내 고주파 초음파 이미징의 사용을 설명합니다.

마우스 Forebrain에 초음파 유도 Microinjection Utero에서 E9.5에서

심장 개발에 영향을 미치는 유전자 변경을 공부할 때 태아 및 perinatal 죽음은 일반적인 기능입니다. 고주파 초음파 이미징은 2-D 해상도를 개선하고 조기 심장 개발에 우수한 정보를 제공 할 수 있으며 죽기 전에 심장 구조와 기능에 미치는 영향을 감지 할 수있는 이상적인 방법입니다.

손쥐 태아 Echocardiography

이 비디오는 격리된 임신 후기 마우스 배아에 마이크로버블 조영제를 주입하는 절차를 보여줍니다. 마이크로버블 조영제 기반 초음파 영상은 배아의 혈관 환경을 시각화하고 특성화하는 데 도움이 됩니다.

고립된 쥐 배아에 microbubbles의 주입: 살아있는 쥐 배아의 혈관 구조로 microbubble 조영제를 전달하는 기술

이 비디오에서는 임신한 쥐 모델에서 배아 착상 부위를 이미지화하는 고주파 초음파를 시연합니다. 이 이미징 기술은 생존 가능한 임신을 성공적으로 감지하고 쥐 임신 초기의 배아 착상 부위를 특성화합니다.

고주파 초음파 기반 임신 초기 특성화: 임신한 쥐 모델에서 배아 착상 및 임신 진행을 연구하는 기술

매우 높은 주파수의 초음파는 작은 동물의 심장 이상을 검사 할 수있는 강력한 라이브 이미징 도구입니다. 그 noninvasiveness는 태아의 생리 학적 상태를 유지 할 수 있습니다. 여기서, 우리는 자궁에서 E18.5에서 태아의 심장 박동수를 측정하는 M-모드 초음파의 사용을 보여줍니다.

비 침습 M-모드 초음파 심장 검진 법에 의한 마우스의 심장 박동의 자궁 측정

마우스 널리 임신 생물학을 공부 하는 데 사용 됩니다. 그러나, 임신 종료는 이러한 연구는 경도 조사 하는 걸로 하 고 동물의 큰 숫자의 사용을 필요로 필요 합니다. 따라서 조기 발견에 대 한 높은 주파수 초음파의 비-침략 적 기법 및 임신 마우스에서 후 이식 이벤트 모니터링 설명 합니다.

마우스에서 초기 임신 특성에 대 한 3 차원 높은-주파수 초음파의 새로운 사용

태아 마우스의 높은 주파수 초음파 이미징 영상 해상도 개선 하 고 심장 개발 및 구조적 결함의 정확한 비-침략 적 특성을 제공할 수 있습니다. 여기에 설명 된 프로토콜은 실시간 태아 쥐 심장 초음파에서 vivo에서수행 하도록 설계 되었습니다.

태아 마우스 심장 혈관 이미징 높은 주파수 초음파 (30/45 m h Z) 시스템을 사용 하 여

여기는 vivo에서 쥐에 있는 태아의 분석에 대 한 높은 주파수 초음파의 기법에 설명합니다. 이 메서드는 태아의 속 행 및 placental 매개 변수 뿐만 아니라 임신에 걸쳐 임산부 및 태아 혈액 흐름의 분석을 수 있습니다.

비보에 태아 및 태 반 개발의 분석에 대 한 높은 주파수 초음파

고해상도 초음파는 임신 상태, 임신 연령 및 임신 손실을 결정하여 임신 시간 임신 마우스를 요구하는 실험을 간소화하는 데 도움이 될 수 있습니다. 여기에 제시된 것은 임신을 모방할 수 있는 잠재적인 함정 (이미지 아티팩트)뿐만 아니라 마우스 임신을 평가하는 방법을 설명하는 프로토콜입니다.

내 마우스가 임신? 고주파 초음파 평가

이 프로토콜은 조영제 강화 초음파 영상 및 마이크로버블 매개 약물 전달을 연구하기 위해 생체 내 모델로 5-8일 된 닭 배아와 융모막(CAM)을 획득하고 사용하는 방법에 대한 세 가지 방법을 설명합니다.

조영제 강화 초음파 영상 및 마이크로버블 매개 약물 전달 연구를 위한 생체 내 모델로서의 닭 Ex Ovo 배아 및 융모막 막 혈관의 준비

우리는 심장 전구 세포의 3D + 시간 이미징을 가능하게 하는 마우스 배아 배양 및 이미징을 위한 자세한 프로토콜을 제시합니다. 이 비디오 툴킷은 텍스트 전용 출판물에서 얻기 어려운 성공적인 라이브 이미징에 필요한 핵심 기술을 다룹니다.

생쥐 배아에서 초기 심장 전구체의 생생한 영상

배우세요 고주파 초음파를 이용한 마우스 태아 혈관 대비 이미징 기법입니다. 미세기포를 태반 혈관망에 주입하여 혈관 관류 매개변수와 표적 결합을 평가하는 방법을 익혀보세요.

고주파 초음파를 사용하여 마우스 태아에 대비 이미징

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