Name: 수정 된 구멍 보드 - 마우스 및 쥐의 행동,인지 및 사회적 상호 작용을 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 16 s
Description: 학습하세요 수정된 구멍 보드 방법을 통해 마우스와 쥐의 비조건적 행동 및 인지 능력을 측정하는 기법입니다. 이 방법은 행동신경과학 연구에서 동물 수를 줄이고 실험 편향을 최소화하여 효율적인 인지 평가를 제공합니다.

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저자는 Annemarie Baars와 José Lozeman-van 't Klooster가 mHB 설정을 사용하여 실험을 수행, 지원 및 가르친 것에 대해 감사를 표합니다.

참고 : 실험 대학 의료 센터 위트레흐트와 위트 레흐트 대학, 네덜란드의 동물 실험위원회에 의해 승인되었습니다. 또한, 동물 실험은 실험 동물 관리의 원칙을 따라 관리 및 신경 과학 및 행동 연구에 포유류의 사용에 대한 가이드 라인을 참조하십시오. (25) 1. 실험 장치 주 : 표준 MHB 장치는 실험 동물의 그룹 메이트 시험 기간 중에 배치 될 수있는 추가의 구획 (50 X 50 X 50cm)로부터 분리 회색 PVC 실험 상자 (100 X 50 X 50cm)로 구성 투명, 천공 파티션 1 일까지. 그룹 메이트의 존재가 원치 않는 또는 개별적으로 보관되어 동물 시험을하는 경우, 회색 PVC로 만든 파티션에 의해 투명 파티션 교체 할 경우 (그림 1;.) 또한 참조 OHL 등 (2001 1). MHB (WI인지 테스트에 사용 된 다른 측정 일) 프로토콜의 섹션 5에 기술되어있다. <ol><li> 보드 배치 (60 X 20 X 0.5 cm를, 회색 PVC로 만들어진) 상자의 중간에. 참고 : 이사회는 20 실린더 (ᴓ 1.5 cm)를 포함 할 수 있습니다 (14) 두 줄 또는 23 실린더 (ᴓ 3cm) 8 세 줄에 비틀 거렸다에 비틀 거렸다. </li><li> 10 직사각형 (20 × 15cm) 2 사각형 (20 × 20cm)에 검은 색 선으로 보드 주변을 나눈다. </li><li> 보드 사이의 빛의 강도에 더 큰 대조 (오픈 필드 또는 명암 전환 시험의 빛 구획의 중심에 대등 보호되지 않은 영역을 나타내는)와 상자 (보호 구역)을 작성하기 위해 보드 위에 무대 조명의 위치를 보드의 4,8- 혐오 캐릭터를 증가시키기 위해. </li><li> 하우스는 12 시간에서 동물 (예 : 오전 7시 소등하고 오후 7시에 점등) 일 밤주기를 반전. 참고 : 그러나, MHB도 수기존의 광 일정에 따라 사용할 수 1,6 (잠재적 인 단점에 대한 설명을 참조). </li><li> 4,15 (오전 10시부터 오후 2시까지, 예를 들면) 동물의 가장 활동적인 단계에서 행동 테스트를 수행합니다. </li><li> 시설에서 동물의 도착 후 이주의 습관화 기간을 유지한다. 이 기간 동안 동일한 사람이 행동 실험 동물 주 네 번 행하는 처리가 실제 테스트 동안 수행 될 수있는 모든 처리 과정을 포함한다. 동물 나중에 테스트에 노출 될 때 하루의 시간 동안 독점적으로 동물을 처리합니다. </li><li> 동영상에 대한 데이터 저장과 결과를 최적화하고 관찰자 간 변이성을 감소시키기 위해 실험을 녹음, 이전 실험 2의 녹화를 사용 행동 점수 연습. 관찰자에 의해 실행되는 모든 행동과 절차를 표준화해야합니다. </li></ol> 2. Behavioral 테스트 - 그룹 메이트의 존재없이 <ol><li> 동물 정기적으로 보관되어 방에 행동 테스트를 수행합니다 (테스트 위치에 운송 가능한 효과를 피하기 위해) 및 시설 (장비의 존재로 동물을 길들)에서 동물의 도착하기 전에 모든 시험 장비를 설치합니다. </li><li> 홈 케이지에서 꼬리의 기본으로 동물을 들고 직접 MHB에 넣습니다. </li><li> (도 1에 나타낸 바와 같이) 벽에 대향 모서리에 동일한 장치에서 각 동물을 놓는다. </li><li> 동물이 자유롭게 일정 기간 (보통 5 분 1,6,16-18)에 대한 MHB를 탐험 할 수 있습니다. </li><li> 숙련 된 관찰자가 라이브 행동 채점 소프트웨어를 사용하여 행동 매개 변수를 점수 되세요. 표 1에 나열된 매개 변수를 사용합니다. 참고 : 일부 행동 매개 변수 (예를 들면, 전동 및 탐색 행동이) 예를 들면 자동으로 획득 될 수있다, </em&gt; 헨리 등 알 논의. (2010) 19 MHB의 필요한 조정 후. </li><li> 후각 큐에 기초하여 바이어스를 피하기 위해 모든 재판 후에 수돗물 종이 타월 청소 장치. 참고 : 가능한 테스트 차 효과 사회적으로 수용 동물을 테스트하는 마음 17, 20에 보관해야합니다. </li></ol> 3. 행동 테스트 - 그룹 메이트의 존재에 <ol><li> 그룹 하우징의 경우에, 실험 동물 및 테스트 동안 그 케이지 메이트와의 상호 작용을 측정한다. <ol><li> 습관화 (주로 10 ~ 30 분, 12)를 허용하는 실험 동물의 실험 전에 그룹 함의 그룹 메이트를 놓습니다. 참고 : 사회적 스트레스 조건에서 테스트하는 것은 사회적으로 패배 개인 (13)을 테스트 할 때 그룹 구획에 지배적 인 케이지 동료를 배치 가능합니다. </li><li> 테스트 실에서 실험 동물을 배치하고 무료 할 수 있도록2 절에 설명 된대로하게도 MHB을 탐구한다. 참고 : 가능한 테스트 차 효과 사회적으로 수용 동물을 테스트하는 마음 17, 20에 보관해야합니다. </li><li> 숙련 된 관찰자가 라이브 행동 채점 소프트웨어를 사용하여 행동 매개 변수를 점수 되세요. 표 1에 나열된 매개 변수를 사용합니다. </li><li> 후각 큐에 기초하여 바이어스를 피하기 위해 모든 재판 후에 수돗물 종이 타월 청소 장치. </li></ol></li></ol> 4. 새로운 물체 인식 및 음식 섭취 억제 <ol><li> 이일 실험 전에 자신의 홈 케이지의 객체 (예를 들어 주사위 또는 음식 펠릿)로 동물을했습니다. </li><li> 시작 지점 맞은 편 구석에 새로운 물체 (예를 들어 볼트 또는 익숙하지 않은 음식)에서 2cm 떨어진 장치에 익숙해 객체를 배치합니다. </li><li> 동물이 새롭고 익숙한 객체 / 음식에 접근하는 데 걸리는 시간을 측정한다. 의 매개 변수를 사용하여 &lt;강한&gt; 표 1. </li><li> 후각 큐에 기초하여 바이어스를 피하기 위해 모든 재판 후에 수돗물 종이 타월 청소 장치. </li></ol> 5.인지 테스트 <ol><li> 쥐 3,22을 시험하기위한 상자의 중간에 10 실린더 (그림 1)과 작은 보드 (35 X 22 X 1cm)을 놓습니다. 회색 PVC로 만든 파티션을 삽입하여 마우스 (21)를 테스트하기 위해 50 X 50cm의 크기의 상자를 줄입니다. </li><li> 맛 동물 (예를 들면, 바닐라)에 매료되어 모든 실린더 향기 동물 제거 할 수 있도록 보상 (아몬드의 예를 들면, 조각, 마우스 및 쥐 매우 맛이 보상) 그리드 아래 모든 미끼. </li><li> (회색 PVC 대조) 컬러 링과 함께 큐 실린더 (자주 세) 이동식 보상 (아몬드의 예를 들면, 0.05 g 조각)로 미끼. </li><li> 실험 전에 이일 매일 보상과 동물을 잘 알아족집게로 제공하고, 동물이 먹을 것을 확인하여 자신의 홈 케이지. </li><li> 숙련 된 관찰자가 라이브 행동 채점 소프트웨어를 사용하여 행동 매개 변수를 점수 되세요. 인식 또는 음식 섭취 억제 대상에 관한 파라미터를 제외한 부분이 (표 1)에 언급 된 행동 파라미터를 표 2에 열거 된 파라미터를 측정. </li><li> 1 단계 : 각 동물로, 시험을 완료하는 데 일정한 시간까지 일정한 간 시험 간격 (예를 들어, 30 ~ 60 분) 매일 네 개의 임상 시험을 수행 도달 할 때 (즉, 세 아몬드 조각이 수집 된 경우). </li><li> 2 단계 : 큐와 미끼 세 가지 다른 실린더와는 반전 학습 능력을 테스트하기 위해 네 가지 시험에 대한 설치에 동물을 배치합니다. </li><li> 후각 큐에 기초하여 바이어스를 피하기 위해 모든 재판 후에 수돗물 종이 타월 청소 장치. </li></ol>

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MHB 패러다임은 무조건 동작의 다수의 차원을 측정하는데 사용될 수있다. 프로토콜은 약간의 실험 목적에 따라 변경 될 수있다. 이 프로토콜에서 우리는 설정, 시간과 측정은 일반적으로 우리가 실험실에서 사용에 대해 설명합니다. 그러나, 장치의 측정에 약간의 편차가 과거에 사용되었고 또한 보드 실린더의 양은 3 변할 수있다. 인지 재판이 성공적으로 또는 시험 시간 연장에 완성 된 바와 같이 동물이 매우 불안 또는 물리적으로 손상된 경우 즉시 테스트를 종료, 즉, 종종 연구는 시험 당 5 분의 시험 시간을 사용하지만, 다른 테스트 시간도 적합 할 수 있습니다. 시험 하루의 시간은 설치류 야행성 동물 및 초기 어두운 단계에서 가장 활동하기 때문에 붉은 빛 조건 하에서로 선정되었다. Roedel 등 알. (2006) 행동 및인지 성능에 밝거나 어두운 단계 테스트의 효과를 보여줍니다MHB 16 DBA 마우스에. 다른 연구는 백색광 조건 하에서 1,6- MHB 실험을 수행 한, 그러나, 백색광 조건에서 테스트하는 행동 억제 및 (DBA 마우스에서와 같이),인지 장애 (16)을 유도 할 수 있음을 유의해야한다. 표 1 및 표 2는 파라미터 행동 다량 함유 측정한다. 데이터 분석을하는 동안이 아니라 같은 동기 부여 시스템의 다른 매개 변수에 (이 경우 &#39;회피&#39;에서), 예를 들어 &#39;첫 번째 항목 보드에 대기 시간&#39;의 상당한 증가를 나타내는 일부 매개 변수가 발생할 수 있습니다. 어떤 경우에는이 결정적 결과를 초래할 수있다. Guilloux 외. (2011) 마우스 (24)의 행동 표현형에 통합 된 행동 Z-점수를 도입했다. Z-행동 통합 스코어를 이용하여 다수의 파라미터를 설명하는 특정 motivati​​o 단일 Z 점수에 결합 될 수있다최종 시스템. 이후 Z-점수는 자신의 차례에 행동 검사와 실험을 통해 비교하여보다 쉽게​​ 할 수 있습니다. 이 패러다임의 설명 기능 외에, 더 깊은 사용 Salomons 등의 등의 연구에서 명백하게되었다. (2012). MHB에서 두 개의 마우스 계통 (BALC / CJ 및 129P3 / J)의 신규성 습관화, 129P3 / J 마우스 (4)의 비 - 적응 적 행동 프로파일을 나타내는 행동 유연성의 차이를 나타내는, 비교 하였다 아마도 적응 능력을 손상 미러링 심지어는 병적 인 불안. 결론은, MHB은 하나의 실험에서 여러 행동 치수를 측정 할 수 있습니다. 즉, 기존의 구멍 보드와 오픈 필드 테스트, 무조건 행동, 사회적 상호 작용,인지 및 적응 능력에서 기능을 결합함으로써, 복지 조사 할 수있다. 이는 예를 들어 테스트 캔 pharmacological-에 의한 행동 변화를 평가하기 위해 사용될 수 및 / 또는유전자 조작, 선택적 번식 및 적응 능력. 고전적 테스트 전지에 비해, 필요한 동물의 수는 분명히 감소되고 시험 중 동물 스트레스 경험은 매우 낮다.

변성 구멍 보드 (MHB)는 주로 한 마우스 및 래트에서 행동 무조건 다각적 평가하는 데 사용된다. 널리 사용되는 테스트의 숫자는 완전히 행동​​ 차원의 전체 표현형을 커버하지 않는 하나의 행동 매개 변수를 측정합니다. MHB은 설치류는 풍부한 테스트 환경이 자신의 풍부한 행동 레퍼토리를 표시하고, 따라서 복잡한 ethological 관찰을 가능하게 할 수있는 개념을 기반으로 개발되었다. 셋업 (즉, 동물의 수는 1,3,4 사용 줄이는 우회에서 시험 전지의 단점을 극복 한 복합 패러다임의 결과, 기존의 정공 보드와 오픈 필드 테스트의 특성을 포함 시험 순서 (5), 시간 효과 및 비용 6) 감소 미칠 수있는 영향. 대부분의 행동 검사 (예를 들면, 마크 룬드 Hånell 및 2014)는 대조적으로 7 &lt;/ SUP&gt;, MHB의 장점은 동물이 작업을 해결하는 동기를 증가시키기 위해 음식 박탈 될 필요가 없다는 것이다. 또한, 사회적 고립은 시각 청각 후각 접촉 8,9 허용, 투명 천공 분할하여 시험 구획 구분 (그룹 -) 구획에 실험 동물의 그룹 동료를 배치하여 테스트 기간 동안 회피 할 수있다. MHB은 (약리학) 모두 마우스 및 쥐 1,6에 대한 검증되었습니다. 행동의 넓은 범위는 이러한 회피 행동, 위험 평가, 각성, 탐사, 운동 활성, 습관화 사회적 친화력과인지 2,8-10로 측정 할 수있다. 또한 MHB는 식품 섭취 억제 시험뿐만 아니라, 새로운 물체 인식 테스트 10,11와 결합 될 수있다. 마지막으로,도 MHB에서 지배적 개별 배치하면서 패배 사회적 동물을 시험함으로써 사회적 응력 실험을 수행하는 데 사용될 수있다그룹 구획 12,13. 마우스 및 쥐에 대한이 프로토콜은 MHB의 여러 응용 프로그램에 대한 개요를 제공합니다.

<table><tbody><tr><td>인지 mHB 장치</td><td></td><td></td><td>인지 테스트를 위한 상자는 표준 mHB에 회색 PVC로 만든 칸막이를 삽입하여 50x50cm입니다. 10개의 실린더가 있는 더 작은 보드(35x22x1cm)가 상자 중앙에 배치됩니다. 모든 실린더에는 동물들이 끌리는 맛(예: 바닐라)이 나는 냄새가 나며, 모든 실린더에는 동물이 제거할 수 없도록 그리드 아래에 보상(예: 아몬드 조각)이 미끼로 되어 있습니다. 실린더(종종 3개)에는 유색 링(회색 PVC와 대조됨)이 부착되어 있으며 이동식 보상(예: 0.05g 아몬드 조각)으로 미끼가 제공됩니다.</td></tr><tr><td>바닐라 향</td><td></td><td></td><td>물에 녹은 바닐라 향(0.02%)</td></tr><tr><td>카메라</td>: <td>비디오의 동작을 다시 득점할 수 있는 충분한 품질의 출력을 생성하는 카메라</td><td></td><td></td>입니다.</tr><tr><td>Stage light</td><td></td><td></td><td>빛의 강도와 조명이 켜지는 표면의 치수를 조정할 수 있는 극장 조명입니다.</td></tr><tr><td>행동 채점 소프트웨어</td><td></td><td></td><td>행동 채점 소프트웨어.</td></tr></tbody></table>

수정 된 구멍 보드 - 마우스 및 쥐의 행동,인지 및 사회적 상호 작용을 측정

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

이 프로토콜은 기존의 구멍 보드와 오픈 필드에서 기능을 결합하고 작은 실험실 포유 동물 (예를 들어, 마우스, 쥐, 나무 잔 소리꾼 작은 영장류)에 무조건 행동의 여러 차원을 측정하도록 설계되어 수정 된 구멍 보드 (MHB)에 대해 설명. 동물의 행동 프로파일의 넓은 스펙트럼 행동은 하나의 단일 시험에서 조사 할 수 있기 때문에이 패러다임은, 행동 시험 전지의 사용을위한 유용한 대안이다. 장치 그룹 구획실로부터 분리 &#39;보호&#39;영역을 나타내는 박스로 구성된다. 작은 실린더가 세 줄에 엇갈리게되는 보드는, 셋업의 &#39;보호&#39;지역을 대표하는 상자의 중앙에 배치됩니다. 동물의인지 능력은 보드에 몇 실린더 탄압 및 작업 메모리 및 기준을 측정함으로써 측정 될 수있다. 이러한 activit 같은 다른 무조건 행동,Y-related-, 불안 related- 및 사회적 행동이 패러다임을 사용하여 관찰 할 수있다. 행동 유연성 및 신규 한 환경에 길들 능력은 또한 MHB에서 여러 실험 동물에 실시 동물의 적응 능력에 대한 통찰력을 계시하여 관찰 할 수있다. 행동 테스트 배터리에 차 효과를 테스트로 인해, 순진한 동물들은 각각의 실험을 위해 사용되어야한다. 단일 패러다임 차원에서 여러 행동을 테스트함으로써,이 문제를 회피함으로써, 사용 된 실험 동물의 수가 감소된다. 동물을 박탈 테스트 동안 및 식품 없이도 사회적 고립을 피하고 또한, MHB 스트레스가있는 경우, 매우 낮은 양의 유도 행동 테스트 시스템을 나타낸다.

MHB 측정 할 수있는 매개 변수의 많은 양의 수많은 행동 치수를 측정 할이 설정이 적합합니다. 하나의 예는 시험에 반복 노출에 의해 신규 한 환경 적응 행동의 식별이다. . Salomons 등 (2010) (두 개의 서로 다른 빛 조건에서 MHB에 마우스 (BALB / CJ와 129P3 / J)의 두 근친 균주의 습관을 공부 붉은 빛 : 45 럭스 대 백색광 : 상자와 보드 사이의 대조 : 상자와 보드 사이의 대조 : 115 룩스) 4 (또한 프로토콜 섹션 1.3 참조). 도 2a에 도시 된 바와 같이 BALC / CJ 마우스는 1 기판 엔트리까지 감소 (habituating) 대기 시간을 표시 적색광 조건 (표 1 참조). 이에 대해서, 129P3 / J 마우스는 그림 2b는 흰색 빛 조건에서 실험을 보여줍니다. 시험을 통해 습관화의 흔적을 보여주지. BALB / CJ 마우스는 그 불구하고 다시 시험을 통해 최초의 보드 항목에 감소 대기 시간을 보여줍니다nimals는 붉은 빛의 조건에 비해 느린 습관화 패턴을 보여줍니다. 129P3 / J 마우스뿐만 아니라 다시 습관화를 손상뿐만 아니라 백색 조명 조건에서 감작을 향한 경향을 보여줍니다. 마찬가지로, Salomons의 연구에 (2012) 129P2 / OlaHsd 마우스는 참신 BALB / cOlaHsd 마우스 (23)에 비해에 대한 응답으로 장애 행동의 유연성을 보여 주었다. MHB 4에서 테스트 할 때 습관화 능력의 차이는 따라서 쥐의 두 근친 균주 사이에 분명해진다. MHB의 버전인지는 예를 들면 마우스의인지 장애를 측정하는데 사용될 수있다. 반 데르 Kooij 보낸 외 알. (; HI-45 저산소증의 45 분), 심한 HI (저산소증 75 분, HI-75) 및 sham- (2010)인지 가벼운 뇌 저산소증 - 허혈 C57BL / 6J 마우스의 기능을 측정하기 위해이 셋업을 사용 제어 마우스 (9). 시험을 완료 할 수있는 능력 (즉, 5 분 이내 미끼 구멍 찾기)도 3a에 도시된다. </stroNG&gt; 단기 기억 실수의 수는, 장기 기억 실수 (비 미끼 구멍 방문) 및 누락 오류 (미끼 구멍없이 구경) (미끼 구멍 재 방문)도 3B-D에 도시 각각. HI-45 그룹이 더 인식 손상이 없다고 확인하기 위해,이 그룹은 반전 작업에서 가성 컨트롤에 대해 테스트 하였다. 세 미끼 구멍은 세 개의 상이한 실린더로하고, 동물 실험 (4)에 대해 시험 하였다. 반전 스테이지의 제 재판 첫번째 단계의 마지막 시험을 비교할 때 반전 효과가 명백해진다. 네 반전 시험을 완료하는 데 시간이 전체 성능에 대한 표시를 제공합니다. 그림 4는 두 그룹과 명확한 전반적인 치료 효과는 분명하다에 대한 시험을 완료하기 위해 대기 시간을 보여줍니다. 이 반전 작업에서뿐 아니라 할 HI-45 그룹의인지 적 유연성 (재 학습)에 손상이 있음을 의미<html> MHB (9)를 사용하여 검출되었다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig1.jpg" /> 수정 된 구멍 보드의 도식 개요를 그림. (A) 세트 업 (보호) 보드가 지그재그 라인과 그룹 구획으로 표시 중간에와 테스트 실 (상자)로 구성되어 있습니다. <img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig5.jpg" /> = 새로운 개체, <img alt="그림 6" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig6.jpg" /> = 익숙한 개체, <img alt="그림 7" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig7.jpg" /> = 시작점. (B)에 대한 상기 변형 마우스 홀 기판의 버전인지의 개요도. 실린더 (C)의 측면보기 변성 홀 기판의 버전인지에 사용. 아몬드의 조각은 모든 실린더의 눈금 아래에 배치됩니다.대상 = &quot;_ 빈&quot;&gt;이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig2.jpg" /> 그림 2. 붉은 빛 또는 흰색 조명 조건. (A) 대기 시간 먼저 보드 항목까지 BALB / CJ와 붉은 빛 조건 (상자 0-5 룩스 보드 45 룩스)에서 측정 123P3 / J 마우스 (+ SEM을 의미). Huyn-FELDT 조정과 반복 측정 ANOVA는 변형 (P = 0.025), 재판 (P &lt;0.001) 및 재판 X 균주의 상호 작용 (P &lt;0.001) 효과를 밝혀 특별 사후 분석 :. 균주 사이 : * = P &lt;0.0026 사이 두 개의 연속 된 시험 : $ = P &lt;0.0026 (BALB / CJ) (B) 첫 번째 보드 항목의 대기 시간 흰색 조명 조건 (상자 0-5 룩스 보드 120 룩스)에서 (+ SEM을 의미).. Huyn-FELDT 조정과 반복 측정 ANOVA는 변형 (P = 0.031), 재판 (P &lt;0.001) 및 재판 X 변형 상호 작용을 밝혀 (P &lt;0.001) EFFE. CT 사후 분석 : 두 개의 연속적인 시험 사이 * = P &lt;0.0026, : $ = P &lt;0.0026 (BALB / CJ)과 T = P &lt;0.0026 (123P3 / J) 균주 사이. 이 그림은 Salomons 등. 2010 년 5 월 4 일에서 수정되었습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52529/52529fig2highres.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig3.jpg" /> MHB 그림 3.인지 시험 (1 단계). 모든 수치는 평균 ± SEM을 보여줍니다. (A) 가짜 제어 쥐의 재판 (초)을 완료하는 데 대기 시간, 45-HI 및 HI-75. (B) 누락 오류의 수, (C) 비 미끼 정공 방문 및 (D)는 미끼 허점 재 방문. * = P &lt;0.05, ** = P &lt;0.01, *** P = &lt;HI-75 대 0.001 가짜, # = P &lt;0.05, ## = P &lt;0.01, P = ### &lt;0.001HI-45 대 HI-75. 이 수치는 반 데르 Kooij 보낸 사람 등 알에서 수정되었습니다. 2010 9. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52529/52529fig3highres.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig4.jpg" /> 그림 4. 반전 학습 과제 (2 단계). 대기 시간은 반전 학습 작업의 재판 (초) (+ SEM을 의미) 완료합니다. 시험 효과 : # = P &lt;0.05, ## = P &lt;0.01 (이전 재판 대 첫 시도 반전 작업). 치료 효과 : * = P &lt;0.05, ** = P &lt;0.01 (HI-45 가짜 대). 이 수치는 반 데르 Kooij 보낸 외. 2010 9에서 수정되었습니다. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> 체계 </td><td> 활동 </td><td> 측정 매개 변수 </td></tr><tr><td> 아보idance </td><td> 보드 항목 </td><td> 보드의 주파수, 지연 시간 (들), 기간 (%) 평균 기간 (들) </td></tr><tr><td> 위험 평가 </td><td> 뻗어 참석 </td><td> (뒷다리 포함) 주파수 및 대기 시간 (들)을 뻗어 몸의 자세 </td></tr><tr><td> 각성 </td><td> 손질 </td><td> 주파수, 지연 시간 (들), 기간 (%) 평균 기간 (들) 자기 정리 </td></tr><tr><td></td><td> 깨끗하게 함 </td><td> 주파수 및 boli의 대기 시간 (들) 생산 </td></tr><tr><td></td><td> 배뇨 </td><td> 주파수 및 urinations의 대기 시간 (들) </td></tr><tr><td> 감독 탐사 </td><td> 홀 방문 </td><td> 주파수 및 실린더 방문의 대기 시간 (들) </td></tr><tr><td></td><td> 소설 개체 탐사 </td><td> 주파수, 지연 시간 (들), 기간 (%) 평균 기간 (들) 새로운 객체를 탐험 </td></tr><tr><td> 방향성 탐색 </td><td> 상자를 사육 &lt;/ TD&gt; <td> 상자에서 주파수 및 rearings의 대기 시간 (들) (앞발 벽을 터치하지 않음) </td></tr><tr><td></td><td> 양육 보드 </td><td> 보드 주파수 및 rearings의 대기 시간 (들) </td></tr><tr><td></td><td> 구멍 탐사 </td><td> 주파수 및 실린더 탐험의 대기 시간 (들) </td></tr><tr><td> 기억 </td><td> 친숙한 객체 탐사 </td><td> 주파수, 지연 시간 (들), 기간 (%) 평균 기간 (들) 익숙한 객체를 탐험 </td></tr><tr><td> 사회 친 화성 </td><td> 그룹의 상호 작용 </td><td> 그룹 구획과 상호 작용하는 주파수, 지연 시간 (들), 기간 (%) 평균 기간 (들) </td></tr><tr><td> 운동 활성 </td><td> 선 횡단 </td><td> 주파수 및 라인 횡단 대기 시간 (들) </td></tr></tbody></table> 표 1 : 행동 매개 변수의 목록 <table border="0" cellpadding="0" cellspacING = &quot;0&quot;&gt; <tbody><tr><td> 메모리 시스템 </td><td> 매개 변수 </td><td> 기술 </td></tr><tr><td> 장기 기억 </td><td> 잘못된 선택 </td><td> 비 미끼 실린더에 방문; 림 아래 코 </td></tr><tr><td> 생략 오류 </td><td> 미끼 실린더의 생략 </td><td> 미끼를 실린더에 어떤 방문하지 </td></tr><tr><td> 단기 기억 </td><td> 반복 선택 </td><td> 미끼를 실린더에 다시 방문; 림 아래 코 </td></tr><tr><td> 전반적으로 성능 </td><td> 총 시험 시간 </td><td> 시간 모든 미끼 실린더가 방문 할 때까지 </td></tr></tbody></table> 표 2 :인지있는 파라미터의리스트

이 프로토콜은 오픈 필드와 전통적인 홀 보드의 특성을 구성하는 동작 테스트 설정인 수정된 홀 보드를 설명합니다. 이 설정을 통해 작은 실험실 포유류의 무조건적인 행동에 대한 차등 분석과 인지 능력의 분석이 가능합니다.

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

다음 실험들의 전반적인 목표는 소형 실험 포유류의 무조건적 행동을 측정하고 이들의 인지 능력을 분석하는 것입니다. 이는 동물들을 변형된 홀 보드(hole board)에 배치하여 케이지 동료의 존재 여부에 따른 무조건적 행동을 관찰하고 점수화함으로써 달성됩니다. 또한, 테스트 전에 장치 내에 새로운 물체, 익숙한 물체 또는 먹이 펠릿을 배치할 수 있으며, 이를 통해 물체 인식 또는 음식 섭취 억제 정도를 측정할 수 있습니다.이 방법의 세 번째 응용 사례는 보상이 대조되는 색상의 식별자와 함께 대기 중인 수정된 전체 보드(modified whole board)의 인지 버전으로 동물을 배치하는 것입니다. 피험체의 인지 능력을 측정하기 위해 결과를 분석하면 무조건적 행동의 스펙트럼이 나타납니다. 이 방법은 전통적인 홀 보드(hole board)와 오픈 필드 테스트(open field test)의 특징을 포함하여 단일 패러다임 내에 여러 행동 차원을 결합합니다. 이 기술의 주요 장점은 사용되는 동물의 수를 줄이고, 가능한 테스트 순서 효과를 방지하며, 시간적 영향과 비용을 절감함으로써 테스트 배터리(test battery)의 단점을 극복한다는 점입니다. 테스트는 동물이 가장 활동적인 시기인 암기(dark phase) 동안 일반 사육실에서 수행되어야 하지만, 본 비디오 테스트의 목적을 위해 밝은 조명 조건 하에서 수행되었습니다.행동 테스트는 환경 및 실험자의 핸들링에 적응한 동물들을 대상으로 수행해야 합니다. 실린더가 포함된 보드를 실험 박스의 중앙에 배치하십시오. 그다음 보드 위에 스테이지 라이트를 설치하여 보드와 박스 사이의 빛 강도 대비를 만들고, 보드의 혐오적 특성을 증가시키십시오.시작하려면, 출발 지점 맞은편 모서리에 익숙한 물체와 새로운 물체를 2 cm 간격으로 배치합니다. 그런 다음, 테스트할 동물을 홈 케이지에서 꺼내 장치의 특정 모서리에서 벽을 마주보게 놓습니다. 동물이 약 5분 동안 자유롭게 탐색하도록 둡니다.숙련된 관찰자가 행동 분석 소프트웨어를 사용하여 행동 파라미터를 점수화하도록 합니다. 이 표에 나열된 파라미터를 사용하고, 동물이 새로운 물체 및 익숙한 물체 또는 새로운 먹이 및 익숙한 먹이에 접근하는 데 걸리는 시간도 함께 측정하십시오. 매 시험이 끝난 후에는 수돗물과 페이퍼 타월로 장치를 세척하십시오.후각적 단서에 의한 편향을 방지하기 위해, 실험 동물을 테스트하기 전 그룹 동료들을 그룹 구획에 10분에서 30분 동안 두어 적응 시간을 갖게 합니다. 그 다음, 실험 동물을 테스트 구획에 넣고 수정된 전체 보드 상에서 5분 동안 또는 자체 프로토콜에서 요구하는 시간만큼 자유롭게 탐색하도록 합니다. 이전과 마찬가지로, 숙련된 관찰자가 표 1에 나열된 파라미터를 사용하여 행동 분석 소프트웨어로 행동 파라미터를 실시간으로 점수화하게 합니다.본 실험을 시작하기 전에 동물들에게 기호성이 높은 보상물에 익숙해지도록 합니다. 여기서는 아몬드 조각을 사용합니다. 실험 전 이틀 연속으로 하루에 한 번씩 홈 케이지 내에서 핀셋으로 보상물을 제공하며, 칸막이를 삽입하여 박스의 크기를 50 by 50 centimeters로 줄입니다.마우스 테스트를 위해 상자 중앙에 더 작은 보드를 배치하십시오. 이 도식은 수정된 홀 보드의 설정을 보여줍니다. 다음으로, 바닐라와 같이 동물이 끌리는 향이나 미끼를 사용하여 10개의 실린더 모두에 향을 입히고, 보상을 제거할 수 없도록 그리드 아래에 배치하십시오.PVC와 대조되는 색상의 링이 있는 Q3 실린더를 준비하고, 해당 실린더들에 제거 가능한 보상을 넣어 유인합니다. 다시 동물들을 장치의 동일한 모서리에 배치하고, 숙련된 관찰자가 실시간으로 점수를 매기도록 합니다. 행동 분석 소프트웨어를 사용하여 행동 파라미터를 측정합니다.객체 인식 또는 음식 섭취 억제와 관련된 파라미터를 제외하고, 표 1에 앞서 제시된 파라미터 외에 표 2에 나열된 파라미터를 측정하십시오. 세 개의 아몬드 조각을 모두 수집하는 시간이 일정해질 때까지 일정한 시도 간격을 유지하며 매일 4회의 훈련 시도를 수행하십시오. 역전 학습을 테스트할 때 후각적 단서에 의한 편향을 방지하기 위해, 매 시도 후 수돗물과 종이 타월로 장치를 세척하십시오.동물의 훈련이 완전히 끝나면, 3개의 서로 다른 실린더 또는 해당 프로토콜에서 요구하는 만큼의 실린더에 신호와 미끼를 제공하고, 정해진 횟수의 시행으로 동물을 테스트합니다. 처음 4개의 이미지는 경미한 뇌 저산소-허혈(HI 45로 표시), 중증 저산소-허혈(HI 75로 표시) 및 가짜 대조군 쥐의 인지 기능을 측정하는 인지 테스트 패러다임의 결과입니다. 이 그래프는 테스트일의 4회 시행을 완료하는 데 걸린 평균 잠복기를 보여줍니다.이 그래프는 각 테스트 날짜별로 미끼가 놓인 구멍에 다시 방문한 횟수를 보여줍니다. 이는 단기 기억 오류의 측정 지표입니다. 여기서는 미끼가 놓이지 않은 구멍에 방문한 횟수가 표시되어 있습니다.이것은 장기 기억 오류의 측정값입니다. 여기에서는 누락 오류 횟수에 대한 데이터가 표시됩니다. 누락 오류는 방문하지 않은 미끼 실린더의 수로 정의됩니다.I 45 그룹에 인지 장애가 없음을 확인하기 위해, 이 그룹을 가짜 대조군(sham controls)과 비교하여 테스트했습니다. 역전 과제(reversal task)에서, 미끼가 놓인 세 개의 구멍을 서로 다른 세 개의 실린더에 지정하고 동물을 대상으로 4회 시행의 테스트를 진행했습니다. 역전 효과는 첫 번째 단계의 마지막 시행과 역전 단계의 첫 번째 시행을 비교할 때 분명하게 나타납니다.이 이미지는 두 그룹 모두의 시행 완료까지 소요된 잠복기를 보여주며, 전반적인 처치 효과가 분명하게 나타납니다. 이는 역전 과제를 포함한 수정된 전체 보드를 사용하여 HI 45 그룹에서 인지적 유연성 저하가 감지되었음을 의미합니다. 이 영상을 시청한 후에는 일반 버전과 인지 버전 모두에서 수정된 전체 보드를 사용하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다.

the-modified-hole-board-measuring-behavior-cognition-social

Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

여기 크롤리의 사교성과 사회 노벨티 테스트를위한 환경 설정을 사용하여 생쥐에서 사교성의 시험에 대한 자세한 프로토콜을 설명합니다. 우리는 결과의 올바른 해석에 중요한 중요한 세부 사항을 포함하여이 절차에 대한 장점과 가능한 응용 프로그램을 설명합니다.

사회적 상호 작용 동작 평가

에 유전 및 약리 조작의 효과를 평가하기 위해, 공간 지역화 시간적 지역화, 재생 시간, 속도 및 확률 추정, 위험 평가, 충동 성, 및 정확도와 메모리의 정밀도를 중재 메커니즘의 생리 학적 의미있는 특성을 측정하기위한 완전 자동화 시스템 마우스에있는 인식의 기초 메커니즘.

마우스의 자동화, 정량인지 / 행동 검사 : 유전학, 약리학, 동물인지 및 학부 교육을위한

가정 케이지 환경에서 마우스의 장기간 포괄적 인 모니터링은 뇌 질환의 쥐 모델에서 벗어난 행동의 깊은 이해를 제공한다. 이 논문은 현대 행동 분석의 핵심 구성 요소로 통합 행동 역 (INBEST)에 대해 설명합니다.

통합 행동 역으로 설치류 질병 모델의 행동 표현형 (INBEST)

이 프로토콜은 마우스 사교성을 정량하는 방법을 설명한다. 그들이 이동하고 특별한 케이지에서 상호 작용하는 마우스는 녹화됩니다. 동영상 처리가 뛰어난 정확성과 신뢰성 사교성의 자동화 된 정량화 수 있습니다.

자동화 된 이미지 처리 방식을 사용하여 마우스 사교성의 실험 평가

이 기사는 사회적 보상을 위해 조작적 조건화를 사용하여 생쥐의 사회적 동기를 정량적으로 측정하기 위한 새로운 프로토콜에 대해 설명합니다. 이 프로토콜은 자폐증 및 기타 사회적 행동 장애의 마우스 모델에서 사회적 동기를 측정하는 데 유용합니다.

조건화를 사용하여 마우스 사회적 동기 부여를 정량화

이 프로토콜은 공간 학습 및 반 즈 미로 사용 하 여 메모리를 측정 합니다. 새로운 계 집 아이-에서-조 난 패러다임 쥐에서 prosocial 동작과 운동 활동을 평가 하는 데 사용 됩니다.

공간 학습 및 반 즈 미로 계 집 아이-에서-조 난 패러다임을 사용 하 여 마우스 Prosocial 동작 분석

여기에 설명된 새로운 자동화 된 실험 시스템은 3 챔버 테스트에 대한 대안을 제공하고 또한 몇 가지 주의 사항을 해결합니다. 이 시스템은 사회적 선호도 및 사회적 신규성 선호도 테스트 중에 작은 설치류 행동 역학을 엄격하게 분석할 수 있는 여러 행동 매개 변수를 제공합니다.

작은 설치류에서 사회적 선호 행동의 역학을 추적하기위한 시스템

신경 정신 장애의 병인에 있는 최근에 발견된 질병 관련 유전자의 역할은 모호하게 남아 있습니다. 자궁 전기 기화 기법에서 수정된 양자간은 뉴런의 큰 인구에서 유전자 전송을 허용하고 사회적 행동에 대한 유전자 발현 변화의 원인 효과의 검사를 허용한다.

자궁 전자기화에서 양자 간을 사용하여 설치류 행동에 대한 유전적 영향을 심문하는 파이프라인

설치류 모델은 자폐 스펙트럼 장애(ASD)와 관련된 핵심 행동을 연구하는 데 유용한 도구입니다. 이 기사에서는 생쥐에서 ASD의 핵심 기능을 모델링하기 위한 두 가지 행동 테스트, 즉 반복적인 행동을 평가하는 셀프 그루밍(self-grooming)과 사회적 장애를 문서화하는 3개의 챔버 사회적 상호 작용 테스트(three-chamber social interaction test)에 대해 설명합니다.

생쥐의 자폐증과 유사한 행동을 평가하기 위한 전략

이 프로토콜은 튜브 테스트를 사용하여 설치류의 사회적 우세를 평가하기 위한 행동 분석을 설명합니다. 사회적 우위는 시간이 지남에 따라 안정적으로 유지되며, 발달 및 신경 장애의 여러 모델은 강력한 사회적 지배 이상을 나타냅니다. 따라서 튜브 검사는 기계론적 연구 또는 전임상 치료 스크리닝을 위한 편리한 결과 측정 역할을 합니다.

튜브 테스트를 사용한 마우스 모델의 사회적 지배력 평가

학습하세요 수정된 구멍 보드 방법을 통해 마우스와 쥐의 비조건적 행동 및 인지 능력을 측정하는 기법입니다. 이 방법은 행동신경과학 연구에서 동물 수를 줄이고 실험 편향을 최소화하여 효율적인 인지 평가를 제공합니다.

수정 된 구멍 보드 - 마우스 및 쥐의 행동,인지 및 사회적 상호 작용을 측정

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