Immunohistochemistry and Multiple Labeling with Antibodies from the Same Host Species to Study Adult Hippocampal Neurogenesis

Anne Ansorg; Katja Bornkessel; Otto W. Witte; Anja Urbach

doi:10.3791/52551

동일한 호스트 종에서 항체와 면역 조직 화학 및 다중 라벨은 성인 해마 신경 발생을 연구하기 위해

JoVE Journal
Neuroscience

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Neuroscience

Immunohistochemistry and Multiple Labeling with Antibodies from the Same Host Species to Study Adult Hippocampal Neurogenesis

동일한 호스트 종에서 항체와 면역 조직 화학 및 다중 라벨은 성인 해마 신경 발생을 연구하기 위해

Full Text

27,226 Views

09:24 min

April 22, 2015

DOI: 10.3791/52551-v

Anne Ansorg*¹, Katja Bornkessel*¹, Otto W. Witte¹, Anja Urbach¹

¹Hans Berger Department of Neurology,Jena University Hospital

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 비디오 기사는 동일한 조직 절편 내에서 성체 해마 신경 발생의 모든 단계를 감지하고 정량화하는 포괄적인 프로토콜을 보여줍니다. 우리는 다른 숙주 종의 적절한 항체를 사용할 수 없을 때 발생하는 간접 다중 면역 형광의 한계를 극복하기 위한 방법을 정교하게 만들었습니다.

이 절차의 전반적인 목표는 간접 면역형광의 한계를 우회하여 신경전구세포를 연구하는 것입니다. 다른 숙주 종의 적절한 1차 항체를 사용할 수 없는 경우. 처음에는 티미딘 유사체를 주입하여 분열하는 세포를 라벨링한 후 조직을 수확, 가공 및 극저온 절편으로 절단합니다.

그런 다음 순차적인 다중 면역형광을 수행하여 시작합니다. 표지되지 않은 1차 항체가 적용되고, 이 항체는 형광 표지된 2차 항체에 의해 결합됩니다. 다음으로, 1차 2차 항체의 개방 페리콥스를 1차 항체 종의 혈청으로 차단하고, 2차 항체에 의해 인식될 수 있는 모든 면역글로불린을 접합되지 않은 fab 단편으로 덮습니다.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos