High-throughput Screening for Chemical Modulators of Post-transcriptionally Regulated Genes

Viktoryia Sidarovich; Valentina Adami; Alessandro Quattrone

doi:10.3791/52568

JoVE Journal
Biology

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JoVE Journal Biology

High-throughput Screening for Chemical Modulators of Post-transcriptionally Regulated Genes

후 전사적으로 규제 유전자의 화학 변조기에 대한 높은 처리량 검사

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09:44 min

March 3, 2015

DOI: 10.3791/52568-v

Viktoryia Sidarovich¹, Valentina Adami², Alessandro Quattrone¹

¹Laboratory of Translational Genomics, Centre for Integrative Biology,University of Trento, ²High Throughput Screening Core Facility, Centre for Integrative Biology,University of Trento

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기에서는 세포 기반 리포터 유전자 분석을 3' UTR을 통해 발휘되는 전사 후 제어 메커니즘을 조절하는 화합물에 대한 화학 라이브러리를 스크리닝하는 유용한 도구로 설명합니다.

이 실험은 전사체의 3개의 주요 번역되지 않은 영역을 통해 전사 후 제어 메커니즘을 조절하는 화합물에 대한 화학 라이브러리를 스크리닝합니다. 먼저, 표적 유전자에서 3개의 주요 비번역 관심 영역을 식별합니다. 이 3 프라임 UTR을 El luciferase control 리포터 플라스미드에 복제하여 El luciferase 3 프라임 UTR 키메라 전사체를 생성합니다.

그러면 안정적으로. 두 개의 플라스미드를 질병 관련 세포주에 통합하고, 96에서 키메라 전사체를 운반하는 세포를 시드합니다. 웰 플레이트는 24시간 동안 화합물 라이브러리로 처리한 다음 루시페라제 활성에 영향을 미치는 분자를 식별합니다.

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