Name: 발 - 드래그 : 소설, 마우스 실린더 시험의 민감성 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-29T16:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: 학습하세요 쥐 실린더 시험에서 발-드래그 행동을 정량화하여 뇌손상을 민감하게 분석하는 방법입니다. 이 기법은 소형 국소 허혈성 손상을 평가하고 운동 결손을 정확히 측정하는 데 활용됩니다.

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우리는 사진 및 비디오 그래피와 기술적 전문 지식과 지원 씨 존 크로 웰 씨 테리 Upshall 감사합니다. 이 작품은 뇌졸중 복구 촉매 보조금 건강 연구의 캐나다 연구소와 뉴 펀들 랜드의 연구 및 개발 공사와 심장과 캐나다 캐나다 파트너십의 스트로크 재단 JLV에 보조금을 운영에 의해 지원되었다. RBR은 키스 그리피스 기념 심장 및 뇌졸중 재단 대학원 장학금받는 사람이었다.

윤리 문 : 모든 실험 동물 관리에 캐나다위원회의 지침에 따라 뉴 펀들 랜드의 동물 관리 윤리위원회의 기념 대학에 의해 승인되었습니다. 1. 마우스 <ol><li> 성인 마우스를 사용합니다. 이 연구에서, 성인 남성 FVBN 마우스 (N = 10) 사이 2-4개월 사용 하였다. 12시 12분 시간에 집 마우스는 명암 사이클을 역 및 표준 설치류 식사 및 임의 량의 물을 제공한다. </li></ol> 실린더 테스트에 필요한 2. 재료 <ol><li> 실린더 테스트를 촬영하는 투명 상단에 표를 얻습니다. 테이블의 크기는 상단 플렉시 글라스 또는 유리이어야하며, 테이블 아래에 거울을 배치 할 수있는 충분한 공간이 있어야 무관하다. 마우스가 아래에 녹화되게한다. 실린더를 통해 이미지를 반영하기 위해 테이블​​ 아래에 거울을 사용합니다. 가능한 경우 다른 방법으로, 거꾸로 카메라를 사용합니다. 이 프로토콜에서 사용되는 테이블의 사이즈는 54 X 56 X 66.5cm 51 X 51cm 상단 (WXL)와 (wxlxh). </li><li> 거울을 얻습니다. 이 프로토콜에서 사용되는 미러의 크기는 34 X 58cm (WXL)이다. </li><li> 마우스에서 수행하기위한 투명 / 플렉시 글라스 실린더를 얻습니다.이 프로토콜에 사용되는 실린더의 크기는 높이 17.5cm, 8.8cm ID, 0.35cm의 벽 두께 9.5CM OD 있습니다. 키 실린더는보다 적극적으로 마우스 변종 필요할 수 있습니다. </li><li> 탁상에 실린더를 놓고 아래 거울에 반사 영화. </li><li> 비디오 카메라와 삼각대가 필요합니다. 약 실린더 비디오의 5 분 당 190MB 대략 650KB / s의 비디오를 녹화. 카메라가 실린더보기의 전체 필드를 포함하는지 확인하기 위해 줌 기능이 있는지 확인하십시오. 참고 :이 프로토콜에 사용되는 비디오 카메라는 표준 정의, NTSC 인터레이스 비디오를 사용하는 소니 DCR-SR42, 40 배 광학 줌, 2,000x 디지털 줌, 680kpix입니다). </li><li> 분석을 위해 소프트웨어를 구 - 미디어 (PL)을비디오 지원 및 재생 속도 변조 아이어. 이 프로토콜에 사용되는 미디어 플레이어는 VLC 미디어 플레이어 v2.1.2입니다. </li><li> 미디어 플레이어와 모니터를 실행할 수있는 운영 체제를 사용하는 컴퓨터를 구합니다. </li><li> 동영상에 대한 전자 스토리지가 필요합니다. 외장 하드 드라이브에 동영상을 다운로드하거나 장기 저장을위한 DVD에 복사합니다. 참고 : 비디오 당 190MB에서, 84 세션이 16 기가 바이트 SD 카드에 맞는 168 세션이 32 기가 바이트 SD 카드에 맞는 것입니다. 때문에 SD 미디어의 상대적 쌈, 일부 마우스는 20 배후를 완료하는 데 필요한 얼마나 많은 시간의 불확실성에, 32 기가 바이트 카드 사용을 권장합니다. 현재의 연구에서, 동영상은 2TB 외장 하드 드라이브에 카메라에서 복사 된 후 백업으로 DVD에 다시 복사. </li></ol> 실린더 시험 3. 실험 설정 <ol><li> 탁상에 45도 각도로 아래 표 거울을 고정합니다. 테이블 다리에 부착이 사용하여 두 개의지지 브래킷은 지원 절을 어떻게각각 미러의 상단과 하단을 t. 브라켓의 위치는 테이블 (그림 1A)의 사이드 뷰 및 테이블 (그림 1B)의 얼굴에보기에 설명되어 있습니다. </li><li> 테이블 중앙에 실린더를 놓습니다. 실린더는 검은 색 마커 (샤피) 실린더가 상승하고 같은 위치로 복귀 할 수 있도록한다 (그림 2)와 함께 테이블에 앉아 네 등거리 선을 그립니다. 투명 탁상의 하부에 그 그리기 탁상 마커 잉크를 용해하지 않고 동물 실험 사이에 세정 될 수있다. </li><li> 카메라와 삼각대를 연결합니다. 사진 실린더 배럴을 통해 직접보고되도록 거울 사진을 찍지. 실린더의 전체 내벽베이스 (그림 3)으로 표시하고 장애물이 있는지 확인하십시오. 카메라와 미러 설정의 상대 각도를 포함, 설치의 측면에서보기를 참조하십시오 위의 (그림 4A)에서와에서마우스 양육 (그림 4B)을 포함하는 테이블의 수준. </li><li> 촬영하기 전에 각 마우스를 식별하기 위해 큐 카드를 준비합니다. 카드는 일반적으로 각각의 마우스에 대한 식별 번호, 시험 시간 점 (예. 3 일 처리 후) 및 촬영 세션의 날짜를 포함하는지 확인하십시오. 실험은 눈을 멀게되어 있는지 확인하기 위해 큐 카드의 치료 그룹을 포함하지 마십시오. </li><li> 빛이 수준의 표준 실내 조명 조건에서 영화는 분명 실린더 주위의 마우스 움직임을 볼 필요가있다. 참고 : 충분할 수있다 붉은 빛이 카메라와 함께 어둠 속에서 촬영 가능한 경우, 그러나 하나가 먼저 발 터치와 드래그를 명확하게 정량화 볼 수 있습니다 여부를 테스트해야합니다. </li></ol> 4. 실행 <ol><li> 촬영 시작합니다. 카메라 렌즈 앞에 적절한 마우스 큐 카드를 표시합니다. </li><li> 즉시 큐 카드를 촬영 한 후 개방 된 상부로부터 실린더에 마우스를 낮 춥니 다. </li><li> 마우스를 촬영 시작합니다. 마우스가 깜짝 경우 탐구에 흥미를 잃게 될 수 있으므로이 기간 동안 소음을 최소화합니다. </li><li> 실린더를 탐구하는 마우스 후면을 준수하십시오. 마우스 스물 후방의 최소를 수행 할 때까지 비디오를 캡처. 참고 : 두 앞발은 바닥과의 접촉을 잃고 마우스가 뒷다리에 서 때 리어가 발생합니다. </li><li> 살균 및 마우스 냄새를 제거하는 각 마우스 사이의 적절한 세제를 탁상 실린더를 닦아주십시오. </li><li> 마우스 탐색을 중지하고 조용히 약 5 분 동안 모든 발로에 앉아 남아 때 냉동입니다. 스물 배후가 발생하기 전에 마우스는 동결 경우, 테스트를 시작하기 위해 10 ~ 20 분 동안 실린더에서 제거 할 필요가있을 수있다. 생쥐 스물 후방을 수행하지 않는 경우, 이들은 연구로부터 제거된다. 참고 : 우리의 경험에 의하면, 마우스 인해 실린더를 탐구하는 실패를 제외 할 필요 적이 없다. </li></ol> 발 드래그를 사용하여 실린더 시험 5. 평가분석 <ol><li> 마우스가 실린더를 탐구하는 속도에 따라 0.25 배씩 사이 0.67x 일정한 속도의 속도로 비디오를 재생합니다. 느린 재생 속도를 제공하는 미디어 플레이어를 사용합니다. </li><li> 발 접촉의 총 수를 정량화. 마우스 후방 (도 5A)은, 실린더 (도 5b)의 측면에 접촉 할 때 발 접촉 이후 모두 동시에 발 (도 5c) 및 랜드 (도 5D)로 분리합니다 발생. 발 수도 있고 전체 손바닥과 실린더 벽에 문의하지 않을 수 있지만, 실린더 벽과 약간의 접촉이 발생해야합니다. 후방 동안의 뒷다리에 서있는 동안 두 앞발 하나 또는과 실린더 벽 (아무리 간단한) 마우스를 접촉하는 횟수를 계산하지 않습니다에 의해 발 접촉을 평가합니다. 실린더 벽과 접촉이 참고 만 &quot;발 터치&quot;또는 &quot;발 드래그&quot;마우스가 후방 위치에있는 경우로 계산됩니다 - 서탁상의 오프 두 앞발과의 뒷다리에. 탁상에 뒷다리 하나의 앞발을 모두하고 무료 발과 벽을 터치로 진행 - - 마우스가 3 점 자세에 남아있는 경우이 발 터치로 간주되지 않습니다. 마우스는 후방 수 있으며, 하나의 앞발과 실린더 벽을 터치하고이 발 터치로 계산됩니다. 참고 : 마우스는 두 명 이상을, 후방 중에 실린더 주위에 몸을 이동할 수 있습니다. 각각의 왼쪽 앞발 터치 하나 각각의 오른쪽 앞발 터치 하나 -이 연락처가 집계됩니다. </li><li> 발-, 드래그의 수를 정량화. 발 드래그 동작은 정상적인 발 접촉 구별된다. <ol><li> 발 연락처 전체 오픈 손바닥 (그림 6B)와 실린더 벽 경우, 천천히 약간의 떨림 자주, 벽에서 멀리 떨어질 것이다. 운동은 COMPLET 멀리 떨어지는 전에 실린더 벽에 중 내측 또는 아래 방향 (그림 6C)에서 드래그 숫자로 시작엘리 (그림 6D). 마우스는 모든 발로 (그림 6 층)에 방문하기 전에 영향을받지 발 (그림 (e))로 분리됩니다. 이것은 발 드래그 간주되며 집계에서 계산되어야한다. </li><li> 발은 완전히 개방 손바닥 실린더 벽과 접촉하지 않는 경우, 실린더 벽으로부터 멀리 떨어지는 전에 자리 실린더 벽 방목 것이다. 마찬가지로, 마우스는 실린더 벽에 그것의 발을 끌어하지만 마운트 해제하기 전에 그것을 완전히 해제되지 않을 수 있습니다. 이들은 모두 터치뿐만 아니라 발은-드래그 및 집계에서 모두로 계산되어야한다 간주됩니다. </li><li> 마우스 실린더를 탐구하는 동안 발 또한 실린더 벽을 따라 드래그된다. 그것은 (도 7E)을 해체하기 전에 원래의 위치 (도 7A-D)의 좌측 또는 우측을 탐구이 경우, 발 마우스 몸통의 비틀림을 따를 것이다. 이 무작위로 선택 마우스에 의존 이것은, 발 드래그로 간주되지 않습니다방향을 모색하고 대뇌 피질 반구가 손상​​ 된에 의존하지 않는다. </li></ol></li><li> 발-, 드래그가의 백분율로 표시되는 세션을 수행하는 동안 발 접촉의 총 당 발 - 드래그. 개별적으로 각각의 앞다리 총 발 접촉의 백분율로 발-, 드래그의 수를 표현한다. </li><li> 발 드래그의 결과로 터치는 발 드래그 동시에 터치로 계산합니다. 마우스가 발 연락처마다 실린더 벽을 그 발을 드래그한다면, 발 드래그 비율은 100 %로 표시됩니다. </li></ol> 6. 추가 실험 설계 제안 <ol><li> 외부 변수를 최소화하기 위해 : <ol><li> 각 시험 날에 같은 시간에 쥐를 테스트한다. 자신의 각성주기 동안 마우스를 테스트합니다. 12 시간 역방향 빛을주기에 마우스를 유지하는 성능을 용이하게한다. </li><li> 마우스는 소음이나 새로운 환경 중 하나를 강조하는 경우 실린더를 탐험하기를 꺼려 할 수있다. 자신의 동물을 들고 방이나 방에 마우스를 테스트 그들은 ㄴ 한EEN은 스트레스를 감소 익숙. 마우스가 이전에 실린더를 입력 또는 습관화로 인해 떠밀 된 경우 방, 잡음이 경우에 발생할 수 있습니다. 참고 : 테스트는 기본 읽기 역할을 실험 조작하기 전에 한 번 수행해야합니다. 이 짧은 기간 동안 실린더에 노출 과다 수가 않도록 권고 되더라도 조작 후에 테스트 일, 실험자의 판단에있다. </li><li> 마우스는 실린더에 6-7 노출 후 뒤쪽 꺼려 질 수 있습니다. 현재 연구에서, 생쥐는 허혈 전 및 일 1, 3, 7, 14, 21, 28 후 수술에 7 회, 총 실린더 내에서 시험 하였다. 참고 :이 연구에서 우리는 FVBN 마우스 변형을 사용했다. 우리는 이전에 ET-1 허혈 손상 다음 실린더 및 관찰 발 드래그 동작 C57BL / 6 마​​우스를 테스트 한 (데이터가 표시되지 않음). C57BL / 6 마​​우스를 양육하는 경우 FVBN 마우스보다 더 활동적이었다 자주 실린더의 가장자리에 뛰어등반 전에. 마우스 점프에 의해 탈출을 시도하면 키 실린더를 사용해야합니다. </li></ol></li></ol> 7. 엔도 텔린 -1 수술과 경색 볼륨 측정 <ol><li> 이전에 발행 프로토콜 4에 따른 엔도 텔린 한 수술과 경색 량 측정을 수행. 전방 앞다리의 운동 피질을 대상으로, 각 마우스는 다음과 같은 좌표에 세 ET-1 주사를 받아야한다 (I) 0.7 anteriorposterior (AP가) /1.5 내측 - 외측 (ML) / - 1.2 지느러미 - 복부 (DV), ( ⅱ) +0.4 AP / 1.25 ㎖ / - 1.2 DV 및 (iii) +0.1 AP / 1.75 ㎖ / DV -1.2 4. </li></ol> 8. 통계 분석 <ol><li> 분산의 양방향 반복 측정 분석 (ANOVA)을 발 드래그 서로 다른 시점에서 영향을 영향을받지 발에 대한의 비율을 분석하는 것이 좋습니다. </li></ol>

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</ol>

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다음은 실린더 시험에서 발 드래그 동작을 정량화 할 때 요점 설정 : I)의 수 정량 기준을 설정하기 위해 뇌 손상 전에 각 발에 대한 총 발 접촉 대 발을-드래그; ⅱ) 허혈 손상 다음 각 발에 대한 총 발 접촉 대 발-, 드래그의 수를 정량화; 및 ⅲ) 발 드래그하고 마우스의 몸통의 측면 회전시 실린더 벽을 따라 발의 측면 움직임을 구별. 발 드래그은 앞다리의 감각 피질에 손상 후 나타나는 새로운 동작입니다. 발 - 드래그 동작의 외관 그러므로 앞다리 감각 피질 손상된 포지티브 지표로 사용될 수있다. 대표적인 결과가 보여 그 작은 ET-1 경색 약 2-4 볼륨 MM 3 발 드래그 동작의 앞다리의 감각 피질 결과에 지역화. 이 ASYM 앞다리 대조적이다ET-1 허혈성 대뇌 피질의 손상 4-6 다음 전체 터치에 비해 영향을받는 발 접촉의 비율에 일관성 적자를 감지하는 데 실패 metry 분석. 발 - 드래그 동작 분석 따라서 앞다리의 감...

신경 재생 전략 목표는 조직 복구 및 복구 기능을 모두 보여주는 것이다. 기능 회복은 일반적으로 특정 뇌 영역에 대한 손상과 관련된 운동 능력이 관련된 경우에, 기능적 결손을 측정 행동 시험으로 평가된다. 외상성 뇌 손상 또는 피질의 감각 앞다리 영역 허혈성 손상, 행동 시험에 의해 증명 될 수있다. 하나의 그러한 테스트는, 실린더 테스트는 앞다리 1 작용 성 활성을 평가하기위한 결손 래트에서 광범위하게 사용된다. 이 테스트는 투명 상단 만 실린더, 카메라와 테이블을 필요로하는 낮은 셋업 비용이 있습니다. 그것은이 설치류의 자연 탐구 행동을 기반으로 관리하기 쉽고, 그래서 사전 교육 및 음식 부족 또는 보상은 필요하지 않습니다. 이러한 많은 장점에도 불구하고, 실린더 시험은 앞다리 s의 초점 부상 다음 쥐에서 앞다리 적자를 평가하기 위해 아래-활용우리가 실린더 시험에서 마우스 동작의 분석 특성 피질, ensorimotor. 앞다리 비대칭 실린더 시험 분석의 고전 척도이다. 실린더에 배치하는 경우, 설치류 자연스럽게 자신의 뒷다리에 양육 및 자세 균형에 대한 자신의 앞다리의 발과 실린더 벽을 터치하여 실린더의 벽을 탐구한다. 각 앞다리와 벽 발 접촉의 수는 쉽게 실린더의 탐사 기간 동안 설치류 촬영에 의해 정량화된다. 영향을받는 앞다리 발은 영향을받지 앞다리 발보다 벽 적은 접촉을하고 반대측 감각 피질에 손상을 나타내는 경우 앞다리 비대칭이 발생합니다. 쥐에서 혈관 수축 화제의 피질 내 주사, 엔도 텔린은 앞다리 감각 피질로 (ET-1), 반대편의 앞다리 행동 결손 결과 국소 허혈성 병소가 발생. 반대측 앞다리 사용의 적자는 쉽게 F의 변화로 감지된다래트 1-3 실린더 테스트에 비대칭 orelimb. 그러나 래트 달리 앞다리 비대칭의 변화와 유사한 가변 ET-1 주사 4-6 다음 마우스에서 덜 일치한다. 여기에서 우리는 실린더 테스트에서 앞다리 행동의 새로운 해석을 보여 - 발 - 드래그 동작의 분석. 우리는 이전에 그 발 드래그 분석은 고전 앞다리의 비대칭 분석보다 쥐의 앞다리의 감각 피질의 손상에 더 민감 측정 따라서 초점 대뇌 피질의 손상 다양한 모델에 적용 할 수있다 보여 주었다. 4 발 - 드래그 - 어떻게 앞발 연락처 시험은 앞다리의 감각 피질에 허혈성 손상 다음과 실린더 벽은 마우스에 새로운 동작을 밝혔다. 마우스를 다음의 중간 선으로 또는 벽 동안 아래로 실린더 벽을 따라 그 영향을받는 (- 콘트라 병변) 발을 드래그 실린더 벽을 탐구하기 위해 뒷다리에 서 때 발 드래그가 발생그것의 영향을받지 앞발은 벽에 자세 지원을 제공합니다. 발은-를 드래그하는 거의 따라서 발 드래그의 모양은 앞다리의 감각 피질 (4) 부상의 긍정적 인 지표가 손상되지 않은 쥐에서 발생하지 않습니다. 우리는 이전에 앞다리의 감각 피질에 ET-1의 허혈성 손상을 다음 마우스에서 발 드래그 동작을 정량화하고 사후 행정 4 이주까지 생쥐에서 지속 발 드래그 동작을 보여 주었다. 여기에 우리가 발 드래그 동작이 사주 후 스트로크까지 지속되는 것으로 나타났다. 발 - 드래그 동작의 분석은 쥐의 앞다리의 감각 피질에 초점 허혈성 손상을 평가하기위한 새롭고 중요한 도구를 제공합니다. 그 저렴한 셋업, 관리의 용이성이 빠르게 마우스의 앞다리 행동 적자를 평가하는 간단하면서도 유용한 도구 만들기 득점.

<table><tbody><tr><td>플렉시 유리 실린더</td><td></td><td></td><td>높이 17.5cm, 외경 9.5cm, 내경 8.8cm, 벽 두께 0.35cm(또는 3.5mm)</td></tr><tr><td>보기 테이블</td><td></td><td></td><td>54x56x66.5cm(너비 x 길이 x 높이), 테이블 상단은 51x51cm 플렉시 유리 시트입니다.</td></tr><tr><td>미러</td><td></td><td></td><td>34x58 cm 미러</td></tr><tr><td>비디오 카메라</td><td>Sony</td><td>DCR-SR42</td><td>온보드 스토리지, SD 기능, 40x 광학 줌</td></tr><tr><td>컴퓨터</td><td>포함 Dell</td><td>Optiplex 760</td><td>프로세서: Intel, 3.0 GHz, 메모리 4.00GB (RAM)&nbsp;</td></tr><tr><td>컴퓨터 모니터</td><td>Samsung</td><td>S22C350H</td><td></td></tr><tr><td>Excel (Microsoft Office Professional Plus)</td><td>Microsoft</td><td>v14.0.7106.5003</td><td></td></tr><tr><td>VLC 미디어 플레이어</td><td>비디오 LAN</td><td>v2.1.2</td><td>재생 속도 변조 및 비디오 지원 미디어 플레이어</td></tr><tr><td>외장 하드 드라이브</td><td>Western Digital</td><td>WDBAAU0020HBK-01</td><td>2TB</td></tr></tbody></table>

발 - 드래그 : 소설, 마우스 실린더 시험의 민감성 분석

Paw-Dragging: a Novel, Sensitive Analysis of the Mouse Cylinder Test

실린더 테스트는 통상적으로 설치류 앞다리 운동 피질 허혈 손상에 초점을 예측하는 데 사용된다. 실린더에 배치하는 경우, 설치류는 양육과 자세 지원을위한 자신의 앞다리의 발과 실린더의 벽을 만져 탐구. 앞다리의 감각 피질에 허혈 손상 후, 쥐 앞다리 비대칭이라고한다 그들의 영향을받는 발을 적은 접촉의 결과로 자세 지원을 위해 자신의 영향을받지 앞다리의 발에 더 많이 의존하고있다. 반면에, 마우스의 뇌에 초점 허혈성 손상은 앞다리의 비대칭 성에서 비교 일치 적자가 발생되지 않습니다. 앞다리 비대칭 적자가 자주 관찰되는 반면, 마우스는 &quot;발 드래그&quot;라고 새로운 행동 포스트 행정을 보여 않습니다. 발 - 드래그는 4 다리 자세로 후면에서 분리 할 때 직접 벽에서 밀어보다는 실린더 벽을 따라 그 영향을받는 발을 끌어 마우스의 경향이다. 우리는 이전에 있음을 증명하고있다발 드래그 동작은 앞다리의 운동 피질에 작은 대뇌 피질의 허혈성 손상에 매우 민감하다. 여기에 우리가 발 드래그 분석에 대한 자세한 프로토콜을 제공합니다. 우리는 발 드래그가 무엇인지 정의하고 발 드래그 동작을 정량화하는 방법을 보여줍니다. 실린더 테스트 관리하는 간단하고 저렴한 실험이며 사전 훈련 또는 음식 박탈 전략을 필요로하지 않는다. 작은 초점 부상의 인기가 계속 증가하고 생산되는 두 가지 모델 - 실린더 테스트와 발 드래그 분석을 사용하여, 이러한 photothrombosis 및 엔도 텔린 -1 (ET-1) 유도 된 허혈과 같은 대뇌 피질의 허혈성 손상을 예측하는 틈새 시장을 채 웁니다 중간 대뇌 동맥 폐색보다. 마지막으로, 실린더 시험에서 발 - 드래그 동작을 측정하는 단계 이전 앞다리 비대칭 분석 일관성 결손을 검출하지 못한 트랜스 제닉 마우스 균주를 사용하여 넓은 코호트 피질 손상 후 기능 회복의 연구를 허용 할 것이다.

우리는 이전에 그 발 드래그 동작은 앞다리의 감각 피질에 초점 허혈 손상에 따라 표시 및 손상 (4)의 긍정적 인 지표가 증명하고있다. 앞다리의 감각 피질에 ET-1의 인트라 대뇌 피질의 주사는 허혈성 병변 (도 8a, B)를 유도하기 위해 사용되었다. 잠재적 사용 기능 회복을 평가하기 위해 발 드래그 동작이 이상 십사일 후 부상 연장 여부를이 연구는 조사 하였다. 마우스는 이전에 예비 수술 시점에 대한 ET-1 주사, 및 일 1, 3, 7, 14, 21 및 28 일 후 부상에 날 실린더 시험에서 시험 하였다. 각각의 시점에서, 발 터치와 발, 드래그의 수는 모두 영향을받는 영향을받지 발에 대한 정량화 하였다. 발 접촉의 수에 양방향 반복 측정 분산 분석은 상당한 주요 시간의 효과 [F (6,108) = 3.59, P = 0.0028]과 대상 [F (18,108) = 2.38, P = 0.0032]하지만 치료의 효과 없음을 밝혀(표 1). 반면,...

실린더 시험의 고전 앞다리 비대칭 분석 일상적 뇌 손상 또는 뇌졸중 다음 래트에서 행동 결손을 평가하기 위해 사용된다; 그러나, 쥐에서 일관된 적자를 감지하지 못한다. 이 연구는 발 드래그 동작을 정량화하는 것은 쥐의 뇌 손상에 더 민감 분석 것을 보여줍니다.

The cylinder test is routinely used to predict focal ischemic damage to the forelimb motor cortex in rodents. When placed in the cylinder, rodents explore ...

안녕하세요, Jackie Vander Loot 박사입니다. 안녕하세요, 저는 Brian Room입니다. 오늘은 실린더 테스트 paw dragging의 민감도 분석에 대해 논의하겠습니다.실린더 테스트는 설치류의 사지 운동 기능을 평가하는 시험입니다. 이 테스트에서 생쥐는 뒷발로 일어서고 네 발을 실린더 벽에 대어 자세를 지지하며 플렉시글라스 실린더 내부를 탐색합니다. 생쥐가 실린더를 탐색하는 동안 네 발의 사용 양상을 관찰함으로써 운동 결손 여부를 판단할 수 있습니다.구체적으로, 뇌졸중 발생 전후의 각 앞발 사용량을 비교합니다. 뇌졸중 이후에는 손상된 뇌 반구의 반대측 앞발의 사용 빈도가 감소합니다. 영향을 받은 앞발과 영향을 받지 않은 앞발 간의 이러한 사용량 변화가 사지 비대칭성을 측정하는 척도가 됩니다.현재 중대뇌동맥 폐쇄와 같은 광범위한 허혈성 손상을 입은 마우스와 랫드에서 뇌졸중의 행동학적 결정 인자로 네 다리 비대칭 분석이 사용되고 있습니다. 광범위한 손상과 달리, 국소적인 소규모 허혈성 손상을 입은 마우스에서는 네 다리 비대칭이 관찰되지 않습니다. 이는 실린더 테스트의 네 다리 비대칭 분석이 광범위한 손상에는 민감하지만, 더 작은 규모의 손상을 감지하는 데는 유용하지 않기 때문일 수 있습니다.광혈전증(photothrombosis) 및 내피세포 제거 유도 허혈(endothelium one induced ischemia)과 같은 작은 국소 허혈성 손상이 대부분의 모델에서 더 널리 사용되고 있습니다. 이는 이러한 더 작은 피질 손상을 평가하기 위한 기능적 행동 분석법의 필요성을 강조합니다. 저희 연구실의 Brian Room은 우리가 '발 끌기(paw dragging)'라고 부르는 실린더 테스트(cylinder test)의 새로운 분석법을 개발했습니다.내피-1 허혈성 손상 후 생쥐의 네 발이 실린더 벽에 닿는 방식을 조사함으로써, 손상된 발에서 나타나는 새로운 행동을 관찰하였습니다. 손상되지 않은 생쥐는 뒷발로 일어설 때 한쪽 발 또는 양쪽 발로 실린더 벽에 접촉하며, 탐색하는 동안 네 발을 벽에 단단히 고정하여 지지한 후 발을 사용하여 벽에서 밀어냅니다. 내피-1 허혈성 손상 후 다시 네 발로 내려올 때, 손상된 발은 실린더 벽에 접촉함에도 불구하고 단단한 지지력을 제공하지 못합니다.그 후 접촉이 일어나면 손바닥이 떨어지고, 완전히 떨어지기 전까지 손가락이 실린더 벽을 따라 끌립니다. 이러한 발 끌림 동작

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Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

베르 미 첼리와 앞발의 손재주의 Capellini 처리 검사는 숙련된 앞발과 자리 움직임을 사용하여 식품 항목을 조작하는 설치류의 자연 경사를 활용. 요리하지 않은 건조 파스타의 짧은 가닥을 처리하는 동안 동물을 촬영하고 있습니다. 슬로우 모션 비디오 재생 앞발 조정의 부량 수 있도록합니다.

베르 미 첼리와 Capellini 처리 시험 : 쥐 및 생쥐의 손재주가 앞발 기능의 단순 양적 측정

프로토콜은 두도 설립 모터 조정 작업 가속화 로타로드 및 수평 막대, 최근 옥스퍼드에서 개발 된 두 개의 테스트, 정적로드 및 병렬 막대를 위해 제공됩니다. 이 테스트는 모터 잠재적으로 자신의 권리에 대한 관심의 손상뿐만 아니라, 행동의 다른 지역의 시험에서 가능한 변수 인를 검색 할 수 있습니다.

마우스에 모터 조정을 측정

루게릭병 (ALS)에 대한 마우스 모델은 임상 및 behaviorally 면밀히 검토합니다. 동반 immunohistological 분석을위한 전제 조건으로서 척수의 준비가 상세하게 그려져 있습니다.

루게릭병에 대한 마우스 모델 (ALS)의 임상 시험 및 척수 제거

일반적으로 파킨슨 병 및 운동 장애에 민감하고 안정적​​인 행동 분석은 새로운 잠재적 인 치료를 테스트하기 위해 필수적입니다. 여기, 우리는 흑질 선조체 시스템에 손상의 정도를 변화와 전임상 연구에 유용에 민감한 쥐를위한 감각 테스트의 관리 배터리를 설명합니다.

파킨슨 병의 마우스 모델에서 감각 기능의 평가

Presented는 마우스 신생아 운동 테스트의 간결한 배터리입니다. 이러한 검사를 사용하면 다양한 신생아 운동 장애에서 신생아 운동 결손을 입증할 수 있습니다. 표준화된 테스트 세트를 통해 서로 다른 연구의 결과를 비교할 수 있으므로 그룹 간에 더 우수하고 정확한 보고가 가능합니다.

뇌성 마비의 신생아 마우스 모델에서 모터 테스트의 배터리

뇌졸중의 병태 생리를 이해하기 위해, 신뢰할 수있는 모델을 사용하는 것이 중요하다. 마우스에서 가장 자주 사용되는 뇌졸중 모델 중 하나를 설명한다 본 논문의 중간대 뇌동맥 폐색 (MCAO) 모델이라 재관류 (또한 관내 또는 필라멘트 봉합사 모델 지칭).

마우스의 중간 대뇌 동맥 폐색 및 재관류 유도 스트로크에 대한 수술 적 접근

Neuropathic 동물 모델에서 고통 응답의 정확한 평가 통증 질환의 병 태 생리학을 조사 하 고 새로운 진통제 개발에 중요 한. 우리는 뒷 다리 발 자동된 보 행 분석 시스템에 의해 설치류의 감각 기능을 결정 하는 과민 하 고 객관적인 방법을 제시.

만성 수축 부상으로 쥐에 있는 자동화 된 걸음 걸이 분석

우리는 MPTP, 실린더 및 오픈 필드 테스트를 사용 하 여 모터 기능을 측정 하는 행동 평가 사용 하 여 파 킨 슨 병에 대 한 murine 모델의 설립을 설명 합니다. 우리 다음 사용 하 여 l 아미노산의 일종 한 예로 PD 약물의 연구에서이 모델을 적용 하는 방법을 보여 줍니다.

Murine MPTP 유발 파 킨 슨 병 모델에서 자발적인 운동의 행동 평가

저가 프로토콜 발자국 분석의 구성 및 구속 스트레스 마우스 모델의 운동 장애를 평가 하는 데 유용 후 상자 테스트를...

공간 분석 및 쥐 상자 테스트 매달려의 저가 프로토콜 적용 구속 만성 스트레스

기계적 충돌-회피 분석은 다양한 마우스 통증 모델에서 정서적-동기 부여 반응을 더 잘 이해하기 위해 사용될 수 있는 마우스에서 통증 감수성의 비반사적 판독으로서 사용된다.

마우스의 통증 행동을 측정하기위한 기계적 충돌 회피 분석

이 글은 대형 스트로크 마우스에서 고도로 번역되고 독립적으로 입증된 마우스 mSU(Stroke Unit) 개념을 실행하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 또한 생쥐에서 초점 실험 뇌졸중 척도를 실행하기 위한 표준화된 프로토콜을 제공하며, 이는 장기간 감지된 뇌졸중 국소 결손을 평가합니다.

중개 마우스 스트로크 연구를 위한 표준화된 신경학적 점수를 사용한 마우스 스트로크 단위 프로토콜

학습하세요 쥐 실린더 시험에서 발-드래그 행동을 정량화하여 뇌손상을 민감하게 분석하는 방법입니다. 이 기법은 소형 국소 허혈성 손상을 평가하고 운동 결손을 정확히 측정하는 데 활용됩니다.

발 - 드래그 : 소설, 마우스 실린더 시험의 민감성 분석

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