Name: 모리스 물 미로 테스트 : 마우스 스트레인 및 테스트 환경을위한 최적화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: 학습하세요 모리스 물 미로 테스트를 통해 알츠하이머병 마우스 모델의 공간 학습 및 기억 능력을 평가하는 방법을 알아보세요. 이 프로토콜은 스트레스 완화와 시각·운동 기능 평가를 포함합니다.

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신경 질환 및 뇌졸중의 국립 연구소, -이 작품은 일반 의료 과학 국립 연구소 (U54GM104942 리드 / 잉글 러 - Chiurazzi)에 의해 지원되었다 (애쉬 - R01NS33249, R01NS63249 및 R01NS79374), 코 브레 (잉글 러 - Chiurazzi - P20GM109098) 알츠하이머 협회 (리드 - NIRG-12-242187), WVU 교수 연구 상원 그랜트 (리드), 의학 딘의 사무실의 WVU 대학 (잉글 러 - Chiurazzi)에서 WVU PSCOR 보조금 (리드) 및 내부 자금. 내용은 전적으로 저자의 책임이며 반드시 NIH 또는 알츠하이머 협회의 공식 견해를 대변하지 않습니다.

<ol><li>Ramsden, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+neurofibrillary+tangle+formation%2C+neuron+loss%2C+and+memory+impairment+in+a+mouse+model+of+human+tauopathy+%28P301L%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Age-dependent neurofibrillary tangle formation, neuron loss, and memory impairment in a mouse model of human tauopathy (P301L).</a> The Journal of Neuroscience. 25, 10637-10647 (2005).</li>
<li>Attar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+shortened+barnes+maze+protocol+reveals+memory+deficits+at+4-months+of+age+in+the+triple-transgenic+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A shortened barnes maze protocol reveals memory deficits at 4-months of age in the triple-transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> PLoS One. 8, e80355(2013).</li>
<li>Johnson, J. M., Bailey, J. M., Johnson, J. E., Newland, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+BALB%2Fc+and+C57BL%2F6+mice+under+an+incremental+repeated+acquisition+of+behavioral+chains+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Processes%22%5BJournal%5D)">Performance of BALB/c and C57BL/6 mice under an incremental repeated acquisition of behavioral chains procedure.</a> Behavioural Processes. 84, 705-714 (2010).</li>
<li>Crawley, J. N. What's wrong with my Mouse Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice. , 1st edition, Wiley-Liss. 94-95 (2000).</li>
<li>Westerman, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+abeta+and+memory+in+the+Tg2576+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The relationship between abeta and memory in the Tg2576 mouse model of Alzheimer's disease.</a> The Journal of Neuroscience. 22, 1858-1867 (2002).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Applications of the morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Research Reviews. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Santa Cruz, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tau+suppression+in+a+neurodegenerative+mouse+model+improves+memory+function%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Tau suppression in a neurodegenerative mouse model improves memory function.</a> Science. 309, 476-481 (2005).</li>
<li>Hunsberger, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+size+of+memory+deficits+in+mice+with+adult-onset+P301L+tau+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect size of memory deficits in mice with adult-onset P301L tau expression.</a> Behavioural Brain Research. 272, 181-195 (2014).</li>
<li>Yue, M., Hanna, A., Wilson, J., Roder, H., Janus, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+difference+in+pathology+and+memory+decline+in+rTg4510+mouse+model+of+tauopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Aging%22%5BJournal%5D)">Sex difference in pathology and memory decline in rTg4510 mouse model of tauopathy.</a> Neurobiology of Aging. 32, 590-603 (2011).</li>
<li>Sandi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+and+mechanisms+of+action+of+glucocorticoid+involvement+in+memory+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+plasticity%22%5BJournal%5D)">The role and mechanisms of action of glucocorticoid involvement in memory storage.</a> Neural plasticity. 6, 41-52 (1998).</li>
<li>Hölscher, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C.+impairs+performance+in+spatial+water+maze+learning+tasks%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">C. impairs performance in spatial water maze learning tasks.</a> Behavioural Brain Research. 100, 225-235 (1999).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> Journal of Neuroscience Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Reed, M. N., Liu, P., Kotilinek, L. A., Ashe, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+size+of+reference+memory+deficits+in+the+morris+water+maze+in+Tg2576+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect size of reference memory deficits in the morris water maze in Tg2576 mice.</a> Behavioural Brain Research. 212, 115-120 (2010).</li>
<li>Huang, Y., Zhou, W., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bright+lighting+conditions+during+testing+increase+thigmotaxis+and+impair+water+maze+performance+in+BALB%2Fc+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Bright lighting conditions during testing increase thigmotaxis and impair water maze performance in BALB/c mice.</a> Behavioral Brain Research. 226, 26-31 (2012).</li>
<li>Baker, R. Water maze. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.watermaze.org">http://www.watermaze.org</a> (2013).</li>
<li>Ivonen, H., Nurminen, L., Harri, M., Tanila, H., Puolivali, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermia+in+mice+tested+in+Morris+water+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Hypothermia in mice tested in Morris water maze.</a> Behavioural Brain Research. 141, 207-213 (2003).</li>
<li>Rubinow, M. J., Arseneau, L. M., Beverly, J. L., Juraska, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+estrous+cycle+on+water+maze+acquisition+depends+on+the+temperature+of+the+water%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Effect of estrous cycle on water maze acquisition depends on the temperature of the water.</a> Behavioral Neuroscience. 118 (4), 863-868 (2004).</li>
</ol>

저자가 공개하는 게 없다.

MWM 태스크 널리 공간 학습 및 기억을 평가하는 데 사용된다. 그러나,이 작업의 안정성은 많은 요인들에 의해 영향을 배경 균주 및 테스트 환경 모두의 최적화를 필요로 할 수있다. 도 4는 동일한 트레이닝 프로토콜에 나타낸 두 개의 다른 테스트 실 (동등한 크기 및 레이아웃)에 사용되는 시각적 적용된 상당히 상이한 프로브의 성능을 수득 하였다. 테스트 룸의 많은 기능이 공간 큐 4에 기여할 수 있기 때문에,이 두 개의 객실이 시험을 더 어렵게 만든 알 수없는 방식으로 유의 한 차이가 있다고 추측했다. 추가 미로 큐 수정에서는 효과적으로 시각적 큐의 수를 늘리는 것을 정했다. 또한, 커튼의 사용을 최소화하여, 존재할 수도있는 청각이나 후각 큐는 변경되고 있습니다. 두 개의 테스트 룸의 조명 수준은 그러나 새로운 동식물 사육장에서 홈 케이지 빛 레벨이 결과, 낮았다, 상당했다높은 조명 수준 차이에서 시험 방에 홈 케이지에서 갈 때. 그것은 BALB / c 마우스는 광 레벨을 제공하...

형질 전환 마우스 모델은 알츠하이머 병 (AD)의 병태 생리학뿐만 아니라, 치료 적 개입의 가능성을 평가하는 수단이되어왔다. 이러한 모리스 물 미로 (MWM)인지 적 작업은 일반적으로 기억력 결핍의 분자 상관 관계를 파악하고 전임상 약물의 효능을 평가하기 위해 이러한 모델과 함께 사용된다. 이는인지 작업의 동적 범위는 치료 효과 미묘한 검출 충분히 넓은 것이 그러나 중요하다. 광고의 마우스 모델,인지 적자는 일반적으로 나이에 따라 달라집니다, 그리고 마우스는 성능이 점진적 감소를 표시 (예를 들면, 1). 민감한 태스크인지를 사용하여 동물 노화와 관련된 비용을 줄일 이전 동물의 생명에 미묘한 차이를 검출 할 수있다. 예를 들면, 해마 의존적 반스 훈련 실험의 수를 줄이는 것이 15-5 미로 D 결과, 작업의 어려움을 증가보다 이른 나이에 3xTg 모델에서 적자의 금 속 탐은 이전에 2를보고했다. 적자 이전 검출뿐만 아니라 이것은 또한인지 결핍의 기초 분자의 변화를 식별 할 수있는 가능성이 높아, 상당한 시간과 비용 절감을 제공한다. 인지 작업의 감도에 영향을 미치는 하나의 요인은 마우스 모델의 유전 배경 균주이다. 예를 들어, BALB / c 마우스는 C57BL / 6 (3)과 같은 다른 균주에 비해 과제 학습 및 기억에 우수한 성능을 나타낸다. F1 FVB / N X 129S6 배경은 AD의 가장 널리 사용되는 모델 Tg2576 및 RTG (TauP301L) 4510 모델이 사용된다. 이 균주는 B6 / SJL 마우스 (4)를 포함하여 다른 균주에 MWM 상대적으로 우수한 학습 능력을 나타낸다. 이 때문에 우수한 학습 능력, 광범위한 훈련 후 단일 프로브의 사용은 오버 - 트레이닝으로 인한 그룹 차이를 마스크 할 수있다. 또한, sensitivit프로브 시험의 Y는 연령에 따라 달라질 수 있습니다. 우리는 이전에 이전 프로브 시험은 제한 숨겨진 플랫폼 훈련 후,보다 젊은 형질 전환 유전자 음성 한배의 새끼 컨트롤에 비해 젊은 Tg2576의 차이에 더 민감 더 광범위한 훈련 (5) 다음에 삽입 프로브 시험 있음을 보여 주었다. 이전 프로브 시험 5보다 대조적으로, 광범위한 교육을 다음과 같은 검사 시험은 이전 한배 새끼에 비해 Tg2576 마우스 이전 (20 ~ 25 월)에 더 민감하다. 길이 시험이 수행되고, 특정 프로브 시험의 감도 연령 의존적 인 경우 특히 훈련 ​​내내 프로브 시험을 산재하여 민감한 재판이 식별 될 가능성이 증가된다. 1 F1 FVB / N (X)의 우수한 성능을 보여준다 더 광범위한 훈련 프로토콜에서 훈련 B6 / SJL 배경의 마우스에 비해이 변형에 최적화 된 프로토콜에 따라 129S6 마우스. MWM은일반적으로 시간과 실험실 (6) 모두에서 재현 할 수있는 신뢰할 수있는 수단을 제공하기 위해 생각했다. 예를 들어, 원래 우리의 미네소타 실험실 1,7에서 사용되는 기본 프로토콜이 성공적으로 웨스트 버지니아 대학 8에 약간의 수정으로 구현되었습니다. 마찬가지로, 손상 동등한 수준 무균 또는 통상 조건 하에서 구 수납 경우 한배 새끼를 제어하기 위해 4510 생쥐 상대 RTG (TauP301L)에서 관찰되었다. 그러나, 테스트 환경 MWM 태스크의 민감도에 영향을 미칠 수있다. 같은 실내 조명, 환기구, 온도 구배 및 소음 등의 모든 요소가 궁극적으로 성능에 영향을 미칠 수있는 환경 단서 4에 기여한다. 우리 미네소타 실험실 동물 사육장은 신축 이동 하였을 때, 최대 야생형 성능의 38 % 감소는 실질적으로 작업 및 트랜스 - 관련 결핍을 탐지 할 수있는 능력의 동적 범위를 감소가 관찰되었다. PE의 변화rformance 동등한 크기 및 구성으로 검사실을 설계하고, 동일한인가 시각적 큐를 사용에도 불구하고 발생 하였다. 본래의 프로토콜 A &quot;재 최적화가&quot;새로운 테스트 환경에서 MWM 태스크의 동적 범위를 증가시키기 위해 요구되었다. 여기에 F1 FVB / N와 함께 사용하기위한 맞춤형 원래 프로토콜은 129S6 배경 5 설명 X. 일부 연구는 응력을 제시하기 때문에 성능 (11)이 스트레스 유도 결손 완화 불량한 MWM 성능 (10) 및 사전 처리와 연결되어, 사전 처리 프로토콜은 풀의 도입 및 제거 전에 MWM 테스트 행에 쥐를 순응하도록 설계되었다 . 사전 처리 후, 마우스 제기 플랫폼 플래그가 표시되는 볼 플랫폼 교육을 받다. 눈에 보이는 플랫폼 훈련은 감각 이상과 관련된 성능 문제로 쥐를 식별하는 데 사용됩니다. 제자에 설명 된 배제 기준을 사용하여ocol 섹션, 성능 무능한 마우스 숨겨진 플랫폼 교육 및 프로브 시험 이후의 시험에서 제거됩니다. 감각 성능 데이터에서 고려되기 때문에 숨겨진 플랫폼 교육 및 프로브 시험에서 장애인지 적자로 해석됩니다. 가시 플랫폼 훈련 종료 후, 마우스는 플랫폼을 물에 잠긴 외부 큐에 대해 동일한 위치에 유지된다 숨겨진 플랫폼 트레이닝을 시작. 플랫폼 (프로브 시험)을 제거하는 시험이 추가 교육의 영향을 평가하기 위해 숨겨진 플랫폼 교육 전반에 걸쳐 산재되어있다. 프로브 실험은 하루의 시작 부분에서 발생하기 때문에 추가적인 숨겨진 플랫폼 트레이닝 전에, 프로브 실험은 20 시간 지연에 따라 플랫폼의 위치를 기억하는 동물의 능력을 측정하고, 기준 메모리 (12)의 측정 값을 고려 하였다. 마지막으로, 방법은이 프로토콜은 원래 다시 최적화 될 때 테스트 환경 변화중단 제어 성능이 설명되어 있습니다.

<table><tbody><tr><td>Viewer Tracking Software</td><td>Biobserve</td><td></td><td>이 특정 소프트웨어는 필수 사항이 아닙니다 - 다른 추적 시스템을 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>사전 처리 풀</td><td></td><td></td><td>크기 대략 1 피트 너비 x 2 피트 길이 x 1.5 피트 깊이</td></tr><tr><td>플라스틱 비커</td><td></td><td></td><td>1 L</td></tr><tr><td>스쿱</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>작은 그물</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>스톱워치</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>무독성 백색 템페라 페인트</td><td></td><td></td><td>모든 색상의 페인트를 사용할 수 있지만 대부분의 추적 소프트웨어 프로그램에서는 페인트가 동물의 색상과 대비되어야 합니다.</td></tr><tr><td>눈에 보이는 플랫폼</td><td></td><td></td><td>색상은 미로의 색상과 대조되어야 함</td></tr><tr><td>커튼봉</td> 커튼 <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr> 커튼 원형 <tr><td>욕조</td><td></td><td></td><td>일반적으로 흰색, 직경 약 4피트</td></tr><tr><td>숨겨진 플랫폼</td><td></td><td></td><td>물과 같은 색으로 칠함</td></tr></tbody></table>

모리스 물 미로 테스트 : 마우스 스트레인 및 테스트 환경을위한 최적화

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

MWM(Morris water maze)은 알츠하이머병과 같은 신경인지 장애를 포함한 질병의 형질전환 마우스 모델에서 해마 의존성 공간 학습 및 기억을 평가하는 데 일반적으로 사용되는 작업입니다. 그러나 사용된 마우스 모델의 배경 변형은 관찰된 행동 표현형에 상당한 영향을 미칠 수 있으며, 일부 변형은 다른 균주에 비해 우수한 학습 능력을 나타냅니다. 전이유전자 음성 마우스와 전이유전자 양성 마우스 간의 차이를 감지할 수 있도록 하려면 배경 변형에 민감한 훈련 절차를 식별하는 것이 필수적입니다. MWM 프로토콜을 마우스 모델의 배경 변형에 맞게 조정하지 않으면 훈련이 부족하거나 과도하게 진행될 수 있으며, 이로 인해 프로브 시험에서 그룹 차이가 가려질 수 있습니다. 여기에서는 F1 FVB/N x 129S6 배경과 함께 사용하도록 조정된 MWM 프로토콜에 대해 설명합니다. 이것은 알츠하이머병과 관련된 기억력 결핍에 대한 돌연변이 P301L 타우(rTg(TauP301L)4510 마우스)의 연령 의존적 효과를 연구하기 위해 자주 사용되는 배경 균주입니다. 또한 사용된 특정 테스트 환경에 따라 다시 최적화하기 위한 전략도 설명되어 있습니다.

우리는 그림 3은 베타 - 아밀로이드 (Tg2576 마우스) 및 돌연변이 P301L 타우 공간 참조 메모리 (RTG (TauP301L) 4510 마우스) (예를 들면, 1,5,7,8).의 효과를 연구하기 위해 모리스 물 미로를 사용했다 대표적인 결과는 모터 및 시각적 능력을 평가하기 위해 테스트 환경 A.을 이용하는, 학습 및 기억 8 성인 발병 P301L 타우 발현의 효과를 조사 연구에서보고 된 마우스는 각 트레이닝 블록으로 이루어져 볼 플랫폼 트레이닝 블록들간에 비교 하였다 3 시험. 눈에 보이는 플랫폼 훈련 경로 길이는 유전자가 긍정적 인 제안, 컨트롤 및 TauP301L 마우스 (그림 3A) 사이에 차이가 없었다 음의 마우스는 비교 수영을 나타내는 두 그룹은 시각적 (플래그) 플랫폼을 표시를 볼 수 있습니다. 어떠한 마우스 배제 기준에 따라 성능 무능으로 확인되지 않았다. 숨겨진 플랫폼 훈련 블록에서 다음...

이 원고는 일반적으로 사용되는 알츠하이머병의 마우스 모델과 함께 사용하도록 맞춤화된 Morris water maze(MWM) 프로토콜을 설명합니다. MWM은 형질전환 마우스 모델에 널리 사용됩니다. 마우스 모델의 배경 변형률에 민감한 절차의 구현은 그룹 차이를 감지하는 데 필수적입니다.

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

본 실험 절차의 목적은 1 2 9 6 FBB 배경 계통에 맞게 조정된 모리스 수중 미로(Morris Water maze) 프로토콜을 사용하여 알츠하이머병 마우스 모델의 인지 결손을 확인하는 것입니다. 이는 먼저 스트레스로 인한 수행 능력 저하를 완화하기 위해 마우스를 과제에 적응시킴으로써 수행됩니다. 두 번째 단계는 시각적 및 운동 기능 능력을 평가하기 위해 플랫폼을 수면 위 1인치 높이로 올린 시각적 플랫폼 과제를 사용하는 것입니다.다음으로, 플랫폼을 수면 아래 5 mm 지점에 잠기게 한 상태에서 숨겨진 플랫폼 시험을 수행합니다. 마지막 단계는 플랫폼을 제거한 상태에서 프로브 시험을 실시하여 공간 참조 기억을 평가하고 사용된 탐색 전략의 유형을 결정하는 것입니다. 궁극적으로, 이렇게 맞춤화된 수중 MAs 절차를 통해 흔히 사용되는 알츠하이머병 마우스 모델에서 공간 학습 및 기억력을 평가할 수 있습니다.일반적으로 이 방법을 처음 접하는 연구자들은 마우스 계통의 배경 균주와 실험 환경에 따라 훈련 시행 횟수 및 사용되는 프로브(probe) 수와 같은 테스트 절차를 최적화해야 하므로 어려움을 겪을 수 있습니다. 이 단계의 절차는 마우스가 풀 진입 및 제거 과정에 적응하도록 하는 것입니다. 먼저, 박스를 적절한 높이로 올린 다음, 21 °C 온도의 물 2 L를 약 1 cm 높이까지 채웁니다.마우스를 테스트실로 옮긴 후, 케이지에서 실험 동물을 꺼내 개체 식별을 확인하고, 절차를 거치지 않은 마우스와 구분하기 위해 독성이 없는 유성 마커로 꼬리에 표시합니다. 마우스를 이동용 비커에 약 5초 동안 둡니다. 그 다음 마우스를 비커에서 사전 핸들링 풀(pre handling pool)로 천천히 쏟아붓고, 마우스를 풀에 20초 동안 둡니다.시간이 경과한 후, 스쿱을 기울이지 않고 마우스 앞에 조심스럽게 놓습니다. 마우스가 스쿱 안으로 들어가 탐색하게 합니다. 필요한 경우, 스쿱을 천천히 들어 올리면서 마우스 아래로 부드럽게 밀어 넣어 마우스가 스쿱 위로 올라가도록 유도합니다. 스쿱으로 인해 마우스가 놀라지 않도록 주의하십시오.이 절차를 케이지 내의 각 마우스에 대해 하루에 한 번씩 10일 동안 반복합니다. 각 동물에 대한 처치 후, 케이지 간 이동용 비커와 뜰채를 사용하여 풀(pool)에서 분변 덩어리와 베딩을 수거합니다. 테스트 1일, 2일, 3일에 가시적 훈련을 수행하며, 매일 6회의 시행을 실시하고 각 시행 사이에는 약 10분의 간격을 둡니다.먼저, 프로토콜의 텍스트 부분에 안내된 지침에 따라 마우스 수행 능력 추적 소프트웨어를 설정하고 런 시트를 작성하십시오. 소프트웨어 설정이 완료되면, 공간적 단서가 보이지 않도록 커튼을 쳐서 실험실 환경을 조성하십시오. 다음으로, 수조에 21 °C의 수돗물을 채워 준비하십시오.온도계를 사용하여 테스트 전 과정 동안 수온이 해당 온도의 1도 이내로 유지되는지 확인하십시오. 높이가 13 cm이고 크기가 4.5 x 4.5 cm이며 굵은 S자 모양의 문자가 양각된 깃발이 장착된 플랫폼을 욕조의 첫 번째 예정된 위치에 배치하여, 수면 위로 약 1인치 정도 올라오게 합니다.이제 케이지에서 첫 번째 마우스를 꺼냅니다. 개체 식별 번호를 확인하고, 해당 색상의 유성 마커로 꼬리에 표시한 후 옮기기용 비커에 넣습니다. 마우스를 조심스럽게 통에 넣습니다.타이머를 시작하고 추적 소프트웨어가 동물을 추적하고 있는지 확인하십시오. 마우스가 플랫폼을 찾을 때까지 최대 2분간 기다립니다. 마우스가 플랫폼을 찾으면, 플랫폼 위에서 20초 동안 머물게 하십시오.동물이 2분 이내에 플랫폼을 찾지 못하면, 마우스를 들어 올려 플랫폼 위에 20초 동안 둡니다. 플랫폼 위에 20초간 머문 후, 순화 훈련 때와 마찬가지로 마우스를 플랫폼에서 제거하여 종이 타월이 깔린 가열 케이지에 넣고, 히팅 패드와 가열 램프를 이용해 약 31 °C로 30초 동안 따뜻하게 합니다. 그 다음, 마우스를 가열 램프 없이 히팅 패드만 있는 유지 케이지로 옮겨 시도 간 회복 시간을 갖게 합니다.그물로 수조의 부유물을 제거한 후, 그룹 내의 각 마우스에 대해 이 단계들을 반복하십시오. 각 마우스의 첫 번째 시도가 완료되면, 플랫폼을 두 번째로 예정된 위치로 옮기십시오. 커튼을 설치한 후 4일부터 10일까지 숨겨진 플랫폼 훈련을 수행하십시오.이전과 마찬가지로 커튼의 전략적인 위치에 큐(cue)를 배치하십시오. 가시성을 높이기 위해 큐의 크기가 충분히 크고 대비되는 색상으로 구성되었는지 확인하고, 조(tub) 내부에서 마우스가 볼 수 있는 거리와 높이에 설치하십시오. 프로토콜의 서면 지침에 따라 소프트웨어를 설정하십시오.그런 다음, 플랫폼이 수면보다 약 5 mm 아래에 위치하도록 물을 채워 수조를 준비합니다. 플랫폼을 미리 정해진 위치에 놓습니다. 플랫폼의 위치는 모든 실험일과 시행 횟수 동안 거의 동일하게 유지됩니다.동물이 공간적이지 않고 해마를 이용하지 않는 운동 전략을 개발하지 않도록 시작 위치를 변경하는 것이 필수적입니다. 미로를 해결하기 위해, 무독성 흰색 템퍼라 물감을 사용하여 물을 불투명하게 만드십시오. 이는 동물이 수영하는 동안 동물의 눈높이에서 플랫폼 윗부분이 보이지 않게 하기 위함입니다.이전에 마우스들을 식별하고 표시한 후, 마우스의 꼬리(ENT)가 벽을 향하도록 하여 미로 속에 조심스럽게 넣습니다. 각 마우스는 개별 시행 시 동일한 시작 위치에 배치됩니다. 마우스를 처음 놓아주는 시점에 타이머를 시작하며, 테스트 담당자는 마우스에게 쉽게 보이지 않는 구역에 서 있습니다.동물이 플랫폼에 도달하면, 방 내에서 공간적 위치를 파악할 수 있도록 15초 동안 플랫폼 위에 머물게 합니다. 만약 마우스가 60초 이내에 플랫폼을 찾지 못하면, 마우스를 조심스럽게 들어 올려 플랫폼 위에 놓아줍니다. 플랫폼 위에서 15초가 지난 후, 마우스를 미로에서 꺼내 가온 케이지로 돌려보냅니다.앞서 미로의 잔해물을 청소한 후, 그룹 내 나머지 마우스들에 대해 이 절차를 반복하십시오. 따라서 4일 차부터 9일 차까지의 테스트 기간 동안, 각 시행 사이에 약 20분의 간격을 두고 하루에 4회의 숨겨진 플랫폼 훈련을 실시하십시오. 6일, 7일, 8일 차의 플랫폼 훈련 전과 최종 프로브 시험(probe trial) 전에는 프로브 시험을 수행하십시오.10일 차에는 미로 내에 플랫폼을 두지 않는다는 점을 제외하고, 숨겨진 플랫폼 훈련과 유사한 방식으로 프로브 시험(probe trials)을 수행합니다. 미리 정해진 방출 지점에서 마우스를 풀어주고 60초 동안 미로에서 수영하게 합니다. 10일 차의 프로브 시험 이후에는 추가적인 시험을 진행하지 않습니다. 동물 추적 소프트웨어를 사용하여 동물의 이동 거리, 미로의 각 사분면에서 동물이 머문 시간의 비율, 그리고 이전에 플랫폼이 있던 구역 위를 동물이 수영한 횟수를 추적합니다.실험 목록 탭을 열고 데이터 분석 탭과 워터 메이즈 탭에서 측정값을 확보하십시오. 이를 엑셀 스프레드시트로 직접 내보내십시오. 그런 다음 프로토콜의 서술 부분에 기재된 지침에 따라 데이터를 분석하십시오.인간 P 3 0 1 LTL 유전자를 포함하는 41마리의 TP 3 0 1 L 마우스와 46마리의 대조군을 대상으로 약 6.5개월령에 본 프로토콜을 사용하여 테스트하였습니다. 이는 형질전환 마우스에서 Tau P 3 0 1 L이 3개월 동안 발현되었음을 나타냅니다. 각 그룹은 수컷과 암컷이 거의 동일한 수의 경로 길이로 구성되었습니다.가시적 플랫폼 훈련에서는 대조군과 TP 3 0 1 L 마우스 사이에 차이가 없었습니다. 이러한 차이의 부재는 대조군과 tau P 3 0 1 LM의 시각적 또는 운동 능력에 차이가 없음을 나타내며, 따라서 숨겨진 플랫폼 시험에서의 수행 능력 저하는 기억 장애에 기인한 것으로 볼 수 있습니다. 하지만 숨겨진 플랫폼 훈련 동안, TP 3 0 1 LM은 모든 훈련 블록에서 유의하게 더 긴 이동 거리를 보였습니다.마지막으로, 4회의 탐색 시험 전반에 걸쳐 대조군의 성적이 향상되었습니다. Tau P 3 0 1 L 마우스와 달리, 대조군 마우스는 과제를 해결하기 위해 공간 전략을 더 잘 사용할 수 있었으며 타겟 구역에서 플랫폼의 위치를 더 잘 학습했습니다. 이 절차를 다른 마우스 계통에 적용할 때는 대조군의 학습 속도를 평가하여 필요한 플랫폼 접촉 훈련 횟수를 확인하고, 첫 번째 탐색 시험을 언제 삽입할지 결정하는 것이 중요합니다.

morris-water-maze-test-optimization-for-mouse-strain-testing

Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

모리스 물 미로는 행동 작업에 해마의 참여를 문서화하는 데 사용하는 잘 접수 도구입니다.

모리스 워터 메이즈 실험

레쉴리 III의 미로가 자극 aversive 또는 Visual 단서에 의존하지 않는 경로 학습 작업입니다. 그것은 따라서 특히 노화 생쥐의하거나 어디에 스트레스가 고려, 학습 및 메모리를 평가하기위한 매우 매력적인 옵션입니다.

마우스에 레쉴리 III 메이즈를 사용하여 낮은 스트레스 루트 학습

마우스의 물 미로 시험의 얕은 물 (패들링) 변종

모리스 워터 미로는 hippocampal 종속적인 학습과 기억을 테스트하는 행동 작업입니다. 이것은 널리 설치류 모델에서 신경 생물학, 신경 약리학과 neurocognitive 장애의 연구에 사용되었습니다.

알츠하이머병 모델 마우스에서 학습 및 메모리 적자에 대한 모리스 워터 메이즈 테스트

뇌 종양의 radiotherapeutic 관리로 인한인지 장애에 부정적인 삶의 질을 영향 임상 처치하기 어려운 상태를 나타냅니다. 비판적으로 방사선 - 유발인지 감소를 ameliorating에 대한 잠재적인 개입을 평가하는 능력은 궁극적으로인지의 엄격한 양적 평가를 수행하는 기능에 따라 달라집니다.

두개골 방사선 치료에 의한인지 감소를 Quantifying

마른 땅 반스 미로 널리 응답 약간 혐오 자극에 공간 탐색 능력을 측정하는 데 사용됩니다. 연속 일 동안 대조군의 성능 (탈출 케이지를 찾습니다 예를 들어 지연 시간) 일반 학습과 기억을 나타내는 향상. 쥐와 생쥐의 차이는 여기에 자세히 설명되어 있습니다 장치 및 방법의 변경을 필요로.

크고 작은 설치류 모델 바네스 미로 테스트 전략

모터 기술의 포괄적인 행동 테스트 배터리 분위기-사회적 상호 작용, 우울증, 불안 등-인식 neurodegeneration 관련 행동 변화 생쥐에서의 반복 된 평가 위해 설계 되었습니다.

모터 기술, 분위기, 그리고 쥐에 있는 인식의 반복 된 평가 행동 테스트 배터리

본 명세서에서, 알츠하이머병 모델 마우스의 학습 및 기억 능력을 평가하고 이를 치료하기 위한 수동 침술의 효과를 평가하기 위한 모리스 수질 미로 시험을 수행하는 프로토콜이 기재되어 있다.

모리스 워터 미로를 이용한 알츠하이머 병 마우스 모델의 학습 및 기억 능력 분석

여기에서는 신생아 마우스에서 다양한 산소 농도로 통제된 환경에서 투여하여 저산소증을 유도하는 프로토콜을 제시합니다. 출생 시 산소 변화에 노출된 마우스 모델은 자폐증과 같은 행동 표현형 변화의 유도에 관여하는 miRNA의 발현을 지속적으로 변화시켰습니다.

저산소증은 마우스에서 자폐증 스펙트럼 장애의 비멘델 유전과 관련된 miRNA 수준을 변경합니다.

팔이 여덟 개인 방사형 물 미로는 피험자가 탈출 플랫폼을 찾기 위해 미로 밖의 신호를 사용하도록 요구하고 지상 기반 방사형 팔 미로 설계에서 관찰된 한계를 해결함으로써 참조 및 작업 기억 성능을 동시에 평가하도록 설계되었습니다.

Using of a Eight-arm Radial Water Maze to assess Working and Reference Memory following Neonatal Brain Injury(신생아 뇌 손상 후 작업 및 참조 기억을 평가하기 위한 8개의 팔 방사형 물 미로 사용)

학습하세요 모리스 물 미로 테스트를 통해 알츠하이머병 마우스 모델의 공간 학습 및 기억 능력을 평가하는 방법을 알아보세요. 이 프로토콜은 스트레스 완화와 시각·운동 기능 평가를 포함합니다.

모리스 물 미로 테스트 : 마우스 스트레인 및 테스트 환경을위한 최적화

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