DOI: 10.3791/52722-v
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이 프로토콜은 적게 10 μL의 혈청 샘플에서 세포 외 소체 (전기 자동차), 셀로부터 방출 멤브레인 작은 입자를 분리하는 방법을 자세히 설명. 이 접근법은, 초 원심 분리의 필요성을 회피 분석 시간의 몇 분을 필요로하고, 제한된 양의 시료로부터 전기차의 분리를 가능하게한다.
이 절차의 전반적인 목표는 종이 기반 플랫폼을 사용하여 세포 외 소포체를 분리하는 것입니다. 이것은 먼저 원형 셀룰로오스가 있는 두 개의 폴리스티렌 시트로 라미네이팅하여 수행되며, 등록된 관통 구멍 배열에 정렬된 종이 컷아웃이 있습니다. 두 번째 단계는 세포 외 소포체를 종이 테스트 영역에 결합하는 분자를 화학적으로 접합하는 것입니다.
다음으로, 생물학적 샘플을 종이 테스트 영역에 직접 피펫으로 주입할 수 있으며, 헹굼 단계 후에 세포외 소포체를 분리할 수 있습니다. 마지막 단계는 전자 현미경, Eliza 또는 전사체 분석을 사용하여 캡처된 세포외 소포체를 특성화하는 것입니다. 궁극적으로, 10마이크로리터 정도의 작은 혈청 샘플에서 추출한 세포외 소포체의 부분 집합을 정제하고 농축할 수 있습니다.
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