Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Serum-free Monolayer Culture

Wikrom Wongpaiboonwattana; Marios P. Stavridis

doi:10.3791/52823

JoVE Journal
Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Serum-free Monolayer Culture

혈청이없는 단층 문화 마우스 배아 줄기 세포의 신경 분화

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06:09 min

May 14, 2015

DOI: 10.3791/52823-v

Wikrom Wongpaiboonwattana¹, Marios P. Stavridis¹

¹Division of Cancer Research, College of Medicine, Dentistry and Nursing,University of Dundee

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 프로토콜은 무혈청 단층 방법을 사용하여 배아 줄기 세포에서 신경 전구 세포를 생성하는 방법을 자세히 설명합니다. 이러한 전구 세포는 성숙한 신경 세포 유형을 유도하거나 신경 사양 과정을 연구하는 데 사용할 수 있으며 복합 스크리닝을 위한 멀티웰 형식 확장에 적합합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 마우스 배아 줄기 세포를 무혈청 단층 세포 배양에서 신경 계통으로 분화시키는 것입니다. 이것은 먼저 배양 용기를 젤라틴으로 코팅함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계에서, 배아 줄기 세포는 분화 배지에서 단일 세포 현탁액으로 결합되고 적절한 도금 밀도로 희석됩니다.

마지막 단계에서 세포는 겔 ENC 코팅 플레이트에 파종됩니다. 궁극적으로, 면역형광 현미경 검사는 관심 있는 신경 마커의 시각화를 통해 분화의 성공 여부를 확인하는 데 사용됩니다. 일반적으로 이 방법을 처음 접하는 개인은 적절한 밀도의 도금이 우수한 차별화를 달성하는 데 중요하기 때문에 어려움을 겪을 것입니다.

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