Name: 분석 미세 유체 장치의 열 측정 기술 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: 학습하세요 분석 미세 유체 장치에서 열 측정 기술을 활용한 민감한 검출 방법을. 저항 기반 온도 감지기를 결합하여 측정 복잡성을 줄이고 검출 범위를 확장하는 이 기법은 다양한 생물학적 및 화학적 분석에 활용됩니다.

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이 작품에 대한 부분적인 재정 지원은 물 장비 및 위스콘신 - 밀워키 (IIP-0968887)과 마켓 대학 (IIP-0968844)의 대학에있는 정책에 대한 산업 / 대학 협동 연구 센터를 통해 미국 국립 과학 재단 (National Science Foundation)에 의해 제공되었다. 우리는 도움이 토론 글렌 M. 워커, 우 진 장과 샨 Radhakrishnan 감사합니다.

1. 열 입자 감지 (TPD) <ol><li> 표준 반도체 공정 기술을 이용하여 2, 마이크로 머신에 의한 박막 실리콘 질화물 막, 및 온도 센서가 내장 마이크로 제조 실리콘 장치를 준비한다. 탈 (DI) 물 제조 장치를 씻어. 주 : 열 입자 탐지기를위한 미세 유체 소자의 제조 방법은 선행 문헌 2에 설명되어있다. </li><li> 마이크로 채널이 폴리 디메틸 실록산 (PDMS) 기판을 제조, (5)를 처리 표준 리소그래피를 이용한 몰드를 만들 SU8. 참고 : 채널 크기는 각각의 특정 입자의 차원을 위해 설계되었습니다. <ol><li> 염기의 1 비율 (30 mL) 및 제 (3 ml)에 경화 : 10 혼합하여 PDMS합니다. 금형에 PDMS를 붓고 잠시 진공 (5 ~ 10 분)에 노출하여 거품을 제거합니다. 진공 탈기 레벨에 임계 값이 아니며 가스 bubb까지 계속한다 : 참고레 완전히 혼합 된 PDMS에서 제거됩니다. </li><li> PDMS를 치료하기 위해 2 시간 동안 열판 (~ 70 ° C)에 금형을 놓습니다. 금형 손상되지 않도록 매우 조심스럽게이어서 PDMS 벗겨져. 주 : 진공 레벨이 임계 값이 아니다. </li></ol></li><li> 수동 펀치를 사용하여, 일단 PTFE 관용 단단한 구멍 (1 mm)를 펀치. PDMS 저수지를 만들기 위해 다른 쪽 끝에서 큰 펀치 (2mm)를 사용합니다. 현미경 장치 위에 펀칭 미세 통로를 배치하고, 마이크로 채널 (도 1a)의 중심에 정렬 RTD. </li><li> 전기 인터페이스에있어서, 콘택 패드의 위치에서의 전기 핀을 연결하고 잠금 나사를 조여. 높이 조절 핀 (포고 핀) 장치의 올바른 전극 패드에 앉아 있는지 확인하십시오. </li><li> 1.5 ㎖의 튜브에 DI 물 100 ㎕의 농축 PS 비드의 10 μl를 희석. </li><li> (글리세롤의 2.7 μl를 추가, 1.26 구슬이 중성 부력을 유지 PS를 보장하기 위해g / cm 3) DI 물에 폴리스티렌 (PS) 비드 밀도 유체 밀도 (일치 1.05 g / cm 3). </li><li> 일단 채널 및 1 mL 유리 주사기 타단에 PTFE 튜브를 연결한다. DI 물 0.5 mL를 유리 주사기를 입력합니다. 참고 : 튜브의 누설을 방지 할 수있는 권리 펀치 크기를 선택하여 만든 단단한 피팅. </li><li> 컴퓨터 제어 주사기 펌프에 주사기를 가득 탈 이온수를 놓습니다. 유체 저장조 줄곧 전체 채널을 채우기 위해 채널에 물 (5-20 μL / 분)를 누른다. </li><li> 저장조에 평형 비드 용액 10 ㎕를 부하하고 주사기 펌프에 흐름 방향을 변화시켜 마이크로 채널에 비드 용액을 소개한다. </li><li> (그림 2) 원 / m로 저항을 측정하는 동안 컴퓨터 제어 소스 / 미터를 통해 직류 전류 1mA 바이어스하고 측정 된 데이터를 정렬하여 RTD를 켭니다. 주 : 실험 기간 동안, 센서 바이어스; 따라서, 온도를 연속적으로 카운팅 실험이 끝날 때까지 측정한다. RTD 센서가 전기적으로 연속적으로 카운팅 실험이 끝날 때까지의 온도를 측정하기 위해 100 μA에서 1mA의 범위 DC 전류를인가함으로써 바이어스된다. 이는 잡음 레벨과 검출 신호 진폭 간의 트레이드 오프가 존재하기 때문에 정확한 전류 레벨을 선택하는 것이 중요하다. 주사기 펌프는 마이크로 채널의 플로우를 생성하기 위해 사용된다. TPD 실험을 수행 할 수있는 적절한 유량을 선택하면 측정 속도로 제한된다. 이 속도는 전기 장치 및 측정 속도의 열 시상수의 함수이다. 열 입자 검출 실험 결과를도 3에 나타낸다. </li><li> Callendar-van Dusen 방정식 (6)을 이용하여 온도 측정 저항의 데이터를 변환하기 위해 개발 된 데이터 처리 소프트웨어 (LabVIEW를) 사용. </li></ol> 열 (2)마이크로 열량계를 사용하여 액체 물질의 특성 <ol><li> 이 과정에서, 열 확산율 및 샘플의 비열을 측정하는 온 - 칩 열량계 장치 (도 4a) (3)를 사용한다. 참고 : 각 죽을에서 2 마이크로 열량계 챔버 (도 4b는)이있다. 각 챔버는 2 입구와 하나의 출구가 있습니다. 그리고 각 챔버는 히터와 통합 RTD 센서를 가지고 있습니다. </li><li> 장치 홀더 (그림 4C)에 마이크로 열량계 장치를 놓습니다. 홀더 피팅 미세 유체 입구 및 출구에 장치를 맞 춥니 다. 장치의 상단에있는 PDMS 도장 층을 놓습니다. </li><li> 장치 홀더에 전기 연결 핀을 설치하고 홀더 나사를 잠급니다. 참고 : 높이 조절 포고 핀은 전기 접촉 패드와 정렬되어 있는지 확인합니다. </li><li> 장치 홀더 (그림 4D)에 자기 래치와 미세 유체 인터페이스 층을 설치합니다. PT를 연결합니다FE는 입구와 출구 모두 튜브. 샘플 로딩 주사기 펌프에 하나의 입구를 연결 엔탈피이 경우 측정되지 않는 한, 다른 하나를 닫는다. </li><li> 마이크로 채널 및 챔버로 샘플을로드하기 위해 개발 된 컴퓨터 제어 프로그램을 사용하십시오. 참고 :이 프로그램은 박막 중단 챔버에 과도한 압력을 해제 중단 흐름을 사용합니다. <ol><li> 유리 주사기로 300 μL 샘플을로드하고 주사기 펌프에 놓습니다. 점도가 높은 샘플 (예를 들어, 글리세롤 및 이온 성 액체)에 대한 매우 느린 (0.25 μL / 분) 일정한 유량을 사용합니다. 비열 측정을위한 열 확산율 측정 및 이온 성 액체 글리세린 샘플을 사용합니다. </li></ol></li><li> 측정 <ol><li> 열 확산율 측정 <ol><li> 도 5a에 도시 된 바와 같이, 측정 설정을 연결합니다. 마이크로 열량계 챔버로 글리세롤 샘플을로드합니다. 난방을위한 수정 된 컴퓨터 제어 프로그램을 실행<html> T 침투 시간 측정. </li><li> 측정 된 열 침투 시간 7에서 열 확산을 계산하는 보정 열 침투 방정식을 사용하여 <img alt="식 (1)" src="/files/ftp_upload/52828/52828eq1.jpg" width="100" /> α는 열확산이고, L은 실의 두께가 (P)으로 인해 제조 공정 변화에 두께 보정 인자이고, t는 0 열 침투 시간이다. </li></ol></li><li> 비열 측정 <ol><li> 도 5b에 도시 된 바와 같이 TWA 측정 설정을 사용한다. 동일한 샘플 로딩 프로그램을 사용하여 챔버 내에서 이온 성 액체를 넣습니다. AC 온도 변동 (∂ T AC)의 진폭을 얻을 수있는 TWA 프로그램을 실행하고 계산하는 비열 식을 사용하는 특정, C P는, 각각의 이온 성 액체 샘플 8 열 : 28eq2.jpg &quot;폭 =&quot;117 &quot;/&gt; C 0 입력 파워 교정 인자이고, 입력 힘 P에서, ω는 구동 신호의 주파수이고, m은 액체 시료의 질량이다. </li></ol></li></ol></li></ol> 종이 기반 미세 유체 소자 3. 열량 생화학 감지 <ol><li> 미세 박막 (40 ~ 50 nm의 니켈) RTD 센서를 사용합니다. RTD 센서의 제조 단계 이전 작품 4에 설명되어 있습니다. </li><li> 종이 기반의 채널 제조 4, 용지를 디자인 패턴 (L 자형)과 미세 유체 채널을 절단 칼 플로터를 사용합니다. , 커팅 매트 위에 종이를 놓고 종이와 칼 플로터 커팅 매트를로드하고, 미세 유체 종이 채널 4를 잘라 적절한 조리법을 사용합니다. </li><li> 장치 및 채널 통합, RTD 센서에 용지를 통합하는 아크릴계 점착제 층 (5 μm의)를 사용합니다. 깨끗한 B를 사용하여짐을 싣다는 장치에 용지를 밀어 기포를 (그림 6A)를 제거합니다. 아크릴 필름은 RTD 센서 위에 종이를 보유하는 접착제 층이다. </li><li> 효소 활성화를위한, GOD 효소 활성화의 50 mM 아세트산 나트륨 완충액을 사용한다. 1 ㎎ / ㎖ 솔루션을 만들기 위해 아세트산 나트륨 완충액 1 ㎖로 신 효소의 1 mg을 추가합니다. 5.1 용액의​​ pH를 조정한다. 주 : 5.1 용액의​​ pH를 유지하기 위해 아세트산 나트륨 완충액, 아세트산의 양을 조정한다. </li><li> 바이어스 1mA의 DC 전류 RTD는 RTD를 활성화하고 저항 실험 (~ 4 분) 이후에 정착하면서 지속적으로 저항 소스 / 미터 측정을 시작합니다. 참고 : 그림 6b는 종이 기반의 열량 테스트의 측정 설정을 보여줍니다. </li><li> 피펫을 통해 종이 마이크로 채널 (고정 부위)의 중심 제조 GOD 용액 2 μl를 소개한다. 검출 된 온도 (그림 7A)는 T 시작해야합니다O 감소. 참고 :이 냉각 효과가 함께 샘플의 높은 동작 측온 저항체의 온도와 증발 때문이다. </li><li> 글루코스 농도를 측정하기 위해, 채널 입구 표준 혈당 조절 용액 (9)을 도입하고, 반응에 의한 저항 변화를 측정한다. 모든 (높음, 보통 및 낮은 농도) 다른 혈당 조절 솔루션이 실험을 반복 저항 데이터를 저장합니다. </li><li> 니켈 -은 Callandar RTD 및 반 Dusen 방정식 저항 (TCR)의 온도 계수를 이용하여, 온도에 대한 저항 변화를 변환한다. 글루코오스 반응 엔탈피 및 GOD 효소 (Δ H = -80 kJ의 / 몰)을 고려하고 수학 식 (10)의 농도를 이용하여 각 샘플에서 포도당의 농도를 계산한다 : <img alt="식 (3)" src="/files/ftp_upload/52828/52828eq3.jpg" width="83" /> N p를 몰 농도, C가 감지되는 경우 <sub&gt; P는 시스템의 열용량 및 ΔT는 온도를 계산한다. </li></ol>

<ol><li>Zhang, H., Chon, C., Pan, X., Li, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+counting+particles+in+microfluidic+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Microfluid+Nanofluid%22%5BJournal%5D)">Methods for counting particles in microfluidic applications.</a> Microfluid Nanofluid. 7 (6), 739-749 (2009).</li>
<li>Vutha, A. K., Davaji, B., Lee, C. H., Walker, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microfluidic+device+for+thermal+particle+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Microfluid+Nanofluid%22%5BJournal%5D)">A microfluidic device for thermal particle detection.</a> Microfluid Nanofluid. 17 (5), 871-878 (2014).</li>
<li>Davaji, B., Bak, H. J., Chang, W. J., Lee, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+On-chip+Three-dimensional+Micromachined+Calorimeter+with+Fully+Enclosed+and+Suspended+Thin-film+Chamber+for+Thermal+Characterization+of+Liquid+Samples%5BTitle%5D)+AND+%22Biomicrofluidics%22%5BJournal%5D)">A Novel On-chip Three-dimensional Micromachined Calorimeter with Fully Enclosed and Suspended Thin-film Chamber for Thermal Characterization of Liquid Samples.</a> Biomicrofluidics. 8 (3), 034101-034113 (2014).</li>
<li>Davaji, B., Lee, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+paper-based+calorimetric+microfluidics+platform+for+bio-chemical+sensing%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens.+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">A paper-based calorimetric microfluidics platform for bio-chemical sensing.</a> Biosens. Bioelectron. 59, 120-126 (2014).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Process+research+of+high+aspect+ratio+microstructure+using+SU-8+resist%5BTitle%5D)+AND+%22Microsystem+Technologies%22%5BJournal%5D)">Process research of high aspect ratio microstructure using SU-8 resist.</a> Microsystem Technologies. 10, 265-268 (2004).</li>
<li>Dusen, M. S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platinum-resistance+thermometry+at+low+temperatures%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Platinum-resistance thermometry at low temperatures.</a> J. Am. Chem. Soc. 47 (2), 326-332 (1925).</li>
<li>Arpaci, V. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArpaci%2C+VS+%22Conduction+Heat+Transfer%22">Conduction Heat Transfer</a>. , Addison-Wesley Pub. Co. Reading, MA. (1966).</li>
<li>Garden, J. L., Chteau, E., Chaussy, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+sensitive+ac+nanocalorimeter+for+microliter-scale+liquids+or+biological+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Phys.+Lett%22%5BJournal%5D)">Highly sensitive ac nanocalorimeter for microliter-scale liquids or biological samples.</a> Appl. Phys. Lett. 84, 3597-3599 (2004).</li>
<li>Kilo, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+New+Blood+Glucose+Monitoring+System+with+Auto-Calibration%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Technol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a New Blood Glucose Monitoring System with Auto-Calibration.</a> Diabetes Technol. Ther. 7 (2), 283-294 (2005).</li>
<li>Scheper, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aScheper%2C+T+%22Thermal+Biosensors+Bioactivity+Bioaffinity+%28Advances+in+Biochemical+Engineering%2FBiotechnology%29%22">Thermal Biosensors Bioactivity Bioaffinity (Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology)</a>. , Springer-Verlag. (1999).</li>
</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

이 작업에서는 미세유체 장치의 다양한 열 측정 기술과 각각의 설정 절차를 제시합니다. 열전도율 모니터링, 열 침투 시간, AC 열 변동의 진폭, 생성된 열의 진폭 측정과 같은 이러한 열 측정 방법은 특정 물질을 감지하고 다양한 반응 및 상호 작용을 조사하는 데 사용됩니다. 
열 시간 상수는 앞서 언급한 열 측정 기술에서 중요한 역할을 합니다. 미세유체 장치 설계에서는 열 시상수의 최적화를 고려해야 합니다. 열 시간 상수는 각 구성 요소의 재료에 따라 달라지는 제조 장치의 열 질량과 열전도율의 함수입니다. 박막 재료와 미세 제조 기술을 사용하면 시스템의 열 질량을 줄일 수 있습니다. 열전도율은 매달린 구조와 높은 열전도율 재료를 사용하여 주변 조건에 대한 열 연결을 줄임으로써 향상됩니다. 또한 열 절연을 사용하여 측정 방해를 피하기 위해 주변 온도를 제어하는 것이 중요합니다.
박막 RTD는 광범위한 온도에서 도입된 장치에서 고감도 ...

세 가지 다른 마이크로 크기의 열 측정 기술은이 문서에 제시되어있다. 미세 유체 장치의 세 가지 상이한 구성은 열 입자 검출부 (TPD), 열적 특성 (열전도율 및 비열), 및 화학 반응과 상호 작용 열량 검출에 사용된다. 열 입자 검출 검출 및 미세 유체 장치에서 입자를 계산하는 것은 널리, 환경 산업, 생물 응용 프로그램 (1)에 사용됩니다. TPD는 미세 유체 장치 2 열 측정의 새로운 응용 프로그램 중 하나입니다. 검출 및 입자 크기에 기초하여 입자를 계수 열 전달을 사용하여 시스템의 복잡성, 비용 및 크기를 감소시킨다. 다른 방법, 복잡한 광학 또는 복잡한 전기 측정 및 고급 신호 처리 소프트웨어에서 입자를 검출하기 위해 사용된다. 열 체인지마이크로 열량계를 사용하여 액체 물질의 cterization 액체 시료의 열 특성은 미세 유체 장치의 열 측정의 두 번째 응용 프로그램입니다. 마이크로 스케일 열량을 수행하면 샘플 소모를 줄이고, 종래의 벌크 열량 방법에 비해 더 높은 반복성을 제공하여 정확도를 증가시킬 것이다. 온 - 칩 마이크로 - 열량계 장치를 이용하여 열전도율 및 비열 측정을위한 절차는 다른 세 제시된다. 열전도율 측정 용 히트 침투 시간 기술 및 마이크로 유체 디바이스들에서 비열 측정을위한 열 파 분석 (TWA)의 세부 사항은 프로토콜 절에서 설명된다. 열량 바이오 화학에있는 검색, 탐지 종이 기반 미세 유체 소자 열 측정의 또 다른 응용 프로그램은 종이 기반 미세 유체에서 생화학 감지입니다. 에서 모세관 작용종이의 다공질 구조가 액체를 운반 마이크로 채널 거품 개시 문제를 피할 수있다. 종이 기반의 미세 유체 소자에서 가장 일반적인 검출 메커니즘은 광학 또는 전기 화학적 기술이다. 광 검출은 높은 복잡성 앓고 고급 화상 처리 소프트웨어의 필요성이 검출 된 신호를 양자화하는. 이들은 활성 반응 부산물을 생산에 적용 할 수 있기 때문에, 전기 화학 탐지가 또한 제한된다. 최근 소개 열량 종이 기반 생화학 센서 플랫폼 (4)은 종이 기반 마이크로 유체 시스템 및 라벨없는 열 감지 메커니즘을 이용한다. 종이 기반의 미세 유체 플랫폼에 글루코스 옥시 다제 (GOD) 효소를 이용한 글루코스의 열량 검출 절차는 프로토콜 부분에 제시되어있다. 본 연구의 목적은 미세 유체 소자에서 열 측정 기술의 능력을 입증하는 것이다. 장치 혼합물 준비N, 액체 시료 처리 및 저항 온도 감지기 (RTD) 센서 여기 및 측정은 다음 절에 제시되어있다.

<table><tbody><tr><td>폴리디메틸실록산(PDMS)&nbsp;</td><td>다우 코닝</td><td>실가드 184</td><td></td></tr><tr><td>PS 비즈 - 90 &#956; m</td><td>미립자</td><td>100265</td><td></td></tr><tr><td>PS 구슬 - 200 &#956; m</td><td>미립자</td><td>100271</td><td></td></tr><tr><td>글리세롤</td><td>SigmaAldrich</td><td>G5516</td><td></td></tr><tr><td>GOD 효소</td><td>SigmaAldrich</td><td>G7141</td><td></td></tr><tr><td>포도당 조절 용액 - Low</td><td>Bayer contour</td><td>저제어</td><td></td></tr><tr><td>포도당 조절 용액 - Normal</td><td>Bayer contour</td><td>정상 제어</td><td></td></tr><tr><td>포도당 조절 솔루션 - High</td><td>Bayer contour</td><td>고제어</td><td></td></tr><tr><td>크로마토그래피 필터지</td><td>Whatman</td><td>3001-845</td><td></td></tr><tr><td>유리</td><td>VWR&nbsp;</td><td>48393-106</td><td></td></tr><tr><td>아크릴 필름</td><td>Nitto Denko</td><td>5600</td><td></td></tr><tr><td>유리 주사기 (1ml)</td><td>Hamilton</td><td>1001</td><td></td></tr><tr><td>주사기 펌프</td><td>New Era</td><td>NE-500</td><td></td></tr><tr><td>나이프 플로터</td><td>실루엣</td><td>초상화</td><td></td></tr><tr><td>현재 프리 앰프</td><td>Stanford Research</td><td>SR-570</td><td></td></tr><tr><td>Ocilloscope</td><td>Agilent</td><td>DSO 2420A</td><td></td></tr><tr><td>신호 발생기</td><td>HP</td><td>HP3324A</td><td></td></tr><tr><td>락인 앰플리파이어</td><td>스탠포드 리서치</td><td>SRS-830</td><td></td></tr><tr><td>소스/미터 2400</td><td>Keithley</td><td>2400</td><td></td></tr><tr><td>소스/미터 2600</td><td>Keithley</td><td>2436A</td><td></td></tr></tbody></table>

분석 미세 유체 장치의 열 측정 기술

Thermal Measurement Techniques in Analytical Microfluidic Devices

열 측정 기술은 재료의 열 특성화 및 화학 반응 감지와 같은 많은 응용 분야에 사용되어 왔습니다. 미세 가공 기술을 사용하면 제작된 구조물의 열 질량을 줄일 수 있으며 마이크로 스케일 및 나노 스케일 장치에서 고감도 열 측정을 수행할 수 있는 가능성을 제공합니다. 열 측정 기술과 미세유체 장치를 결합하면 소형 시스템을 단일 칩에 통합하여 적은 시료 소비량과 단축된 측정 시간으로 다양한 분석 측정을 수행할 수 있습니다. 이 백서에서는 입자 검출, 재료 특성화 및 화학적 검출을 위한 열 측정 기술의 절차를 소개합니다.

그림 3은 측정 된 온도 신호의 플롯을 보여줍니다. 해당 광학 이미지 비드의 존재 하에서 생성 된 신호는 마이크로 채널에서 미세 구 PS 비드의 성공적인 검출을 나타낸다. 마이크로 채널을 통과하는 액체의 열전도 PS 비드의 존재로 인해 변경된다. 채널의 열전도율의 변화는 마이크로 채널에서의 열전달에 영향을주지한다. 마이크로 채널에서의 열 전달의 변화는 저항의 변동 (도 3A와 B)의 형태로 RTD에 의해 검출된다. 검출 된 신호는 또한 상기 채널에서의 열전달에 영향을 미칠 것이다 로컬 유동장 (도 3C 및 D)의 변화에 의해 영향을받을 수있다. 열전도율의 변화는 온도를 증가시킬 것이다. 또한, 마이크로 채널에서 로컬 속도 변경 기초채널 크기 PS 비드의 크기에 필적하는, 로컬 열전달을 증가하게한다. 그것이 검출 저항의 감소로 나타난다이 경우, 열 전달의 변...

여기에서는 미세유체 장치의 열 측정을 위한 세 가지 프로토콜을 제시합니다.

Thermal measurement techniques have been used for many applications such as thermal characterization of materials and chemical reaction detection. ...

다음 실험의 전반적인 목표는 미세유체 장치 내에서 민감한 검출을 위한 열 측정을 수행하는 것입니다. 세 가지의 서로 다른 제작된 미세유체 장치를 사용하여 분석용 미세유체 장치에서의 다양한 열 측정 기술을 시연할 것입니다. 두 번째 단계로, 저항 기반 온도 검출기를 장치에 결합하고 해당 설정을 컴퓨터에 연결합니다.다음으로, 샘플을 장치에 로딩하고 컨트롤러를 통해 열 검출을 활성화합니다. 결과는 미세유체 장치 내 열 측정의 확장된 검출 능력을 보여줍니다. 색도 측정 및 전기화학적 검출과 같은 기존 방법 대비 이 기술의 주요 장점은 검출 범위가 확장되는 동시에 측정의 복잡성을 줄여준다는 점입니다.Vota 등이 설명한 기술을 사용하여 온도 센서가 통합된 박막 질화 규소 막을 미세 가공함으로써 시작합니다. 완성된 장치를 탈이온수로 헹구고 질소 가스를 사용하여 건조합니다. 다음으로, 이전에 발표된 기술을 사용하여 미세 채널이 있는 SU-8 몰드를 제작하며, 검출하려는 입자 크기 범위에 맞게 미세 채널의 길이와 너비를 조정합니다.베이스 30 milliliters와 경화제 3 milliliters를 혼합하여 PDMS를 제조합니다. 혼합 후, 진공 상태에 5~10분 동안 노출시켜 기포를 제거합니다. 그런 다음 PDMS를 몰드에 붓습니다.그런 다음 몰드를 70 °C의 핫플레이트에 2시간 동안 둡니다. 경화가 완료되면 마이크로채널이 손상되지 않도록 PDMS를 매우 조심스럽게 벗겨냅니다. 매뉴얼 펀치를 사용하여 PTFE 튜브를 연결할 마이크로채널의 한쪽 끝에 1 mm 크기의 구멍을 뚫습니다.반대편 끝에 2mm 펀치를 사용하여 리저버를 만듭니다. 다음으로, 펀칭된 마이크로채널을 장치 위에 놓고, 전기 인터페이스의 현미경을 이용하여 저항 온도 검출기를 마이크로채널 중앙에 맞춥니다. 접촉 패드 위치의 전기 핀을 연결하고 고정 나사를 조입니다.높이 조절 핀이 장치의 정확한 전극 패드에 위치했는지 확인하십시오. 다음으로, 1.5 milliliter 튜브에 DI water 100 microliters를 넣고 폴리스티렌 비즈를 1:10 비율로 희석하여 준비합니다. PS 비즈의 중성 부력을 유지하기 위해 혼합물에 glycerol 2.7 microliters를 추가하고 피펫팅으로 섞어줍니다.1mL 유리 주사기에 0.5mL의 DI water를 채웁니다. 유리 주사기를 PTFE 튜브의 한쪽 끝에 연결하고, 튜브의 다른 쪽 끝을 미세유체 채널에 부착합니다. DI water가 채워진 주사기를 컴퓨터 제어 주사기 펌프에 장착하고 유속을 5~20µL/min 사이로 설정합니다.리저버까지 채널 전체를 유체로 채웁니다. 다음으로, 리저버에 10 µL의 균형 잡힌 비드 용액을 로드하고, 시린지 펌프의 흐름 방향을 변경하여 비드 용액을 마이크로채널로 유입시킵니다. 마지막으로, 컴퓨터 제어 계측기를 통해 1 mA의 DC 전류를 바이어싱하여 저항 기반 온도 검출기를 켜고, 저항을 측정하며 측정된 데이터를 분류합니다.먼저, 다른 곳에 기술된 바와 같이 온칩 열량계 장치와 미세유체층을 제작합니다. 마이크로 열량계 장치를 장치 홀더에 배치하고, PDMS 밀봉층의 홀더 피팅과 함께 장치를 미세유체 유입구 및 유출구에 맞추어 장치를 조립합니다. 다음으로, 장치 홀더에 전기 연결 핀을 설치하고 홀더 나사를 고정합니다.그 다음 PTFE 튜브를 양쪽 입구와 출구에 연결합니다. 한쪽 입구는 시료가 채워진 시린지 펌프에 연결하고, 이번 경우에는 엔탈피를 측정하지 않으므로 다른 쪽 입구는 닫습니다. 그런 다음 유리 시린지에 300 µL의 시료를 채워 시린지 펌프 위에 놓습니다.글리세롤 및 이온성 액체와 같이 점도가 높은 시료의 경우 매우 느린 일정한 유량을 사용하십시오. 열확산도 측정 시, 여기 표시된 대로 측정 장치를 연결하십시오.글리세롤 시료를 마이크로 칼로리미터 챔버에 넣고 수정된 컴퓨터 제어 프로그램을 실행합니다. 열 침투 시간을 측정하십시오. 여기에 표시된 보정된 열 침투 방정식을 사용하여 측정된 열 침투 시간으로부터 열확산율을 계산합니다.비열 측정을 위해 여기와 같이 표시된 열파 분석 측정 장치를 사용하십시오. 이번에는 챔버에 이온성 액체를 넣고 동일한 시료 로딩 프로그램을 사용합니다. 열파 분석 프로그램을 실행하여 AC 온도 변동의 진폭을 구하고 각 이온성 액체 시료의 비열을 계산하십시오.이 과정은 다른 곳에 더 자세히 설명되어 있습니다. 열량 측정 검출을 위해, 이전에 설명한 대로 40 내지 50 nanometer 두께의 니켈 박막 저항 온도 검출기를 미세 가공하십시오. 다음으로, 나이프 플로터를 사용하여 L자 모양의 종이를 자르십시오.긴 쪽의 다리는 너비 3 mm, 길이 10 mm이며, 짧은 쪽의 다리는 길이가 3 mm인 미세유체 채널입니다. 깨끗한 핀셋을 사용하여 센서에 5 µm 두께의 양면 아크릴 접착제를 부착하고 그 위에 종이 채널을 올립니다. 깨끗한 칼날을 사용하여 종이를 장치에 밀착시키고 기포를 제거합니다.1 mg의 glucose oxidase 효소를 1 mL의 sodium acetate 완충액에 첨가하십시오. 1 mg/mL 용액을 만들기 위해, 필요한 경우 sodium acetate 완충액으로 용액의 pH를 5.1로 조정하십시오. 그다음, 1 mA의 DC 전류로 저항 온도 검출기(RTD)에 바이어스를 가하십시오.검출기를 활성화하고 저항을 연속적으로 측정하기 위해, 준비된 glucose oxidase 용액 2 µL를 종이 마이크로채널의 이동 지점 중앙에 투입합니다. 검출된 온도가 감소하기 시작하면 포도당 농도를 측정하기 위해 채널 입구에 포도당 표준 용액을 주입하고, 반응으로 인해 발생하는 저항 변화를 측정합니다. 모든 서로 다른 포도당 대조 용액을 사용하여 이 실험을 반복하고 저항 데이터를 저장합니다.마지막으로, 함께 제공된 텍스트 프로토콜 및 기타 문서에 나열된 식을 사용하여 저항 변화를 포도당 농도로 변환합니다. 여기에 표시된 폴리스티렌 비드는 분당 5 µL의 유량으로 저항 온도 검출기 위를 통과하고 있습니다. 비드가 센서를 통과할 때 저항이 약간 급증하며, 이러한 변화를 기반으로 입자의 크기를 검출할 수 있습니다.종이 기반 열량 측정 센서의 전형적인 출력 결과가 여기에 표시되어 있습니다. 글루코스 산화효소를 첨가하면, 효소가 글루코스 용액과 만날 때까지 온도가 빠르게 감소하기 시작합니다. 효소가 용액과 접촉하면 반응이 일어나 온도가 급격히 상승한 후 다시 식기 시작합니다.이러한 온도 변화를 포도당 농도로 변환하여 샘플 볼 내의 포도당 수치를 정확하게 측정할 수 있습니다. 이 절차를 수행할 때, 장치의 설계와 구조가 열 측정에서 핵심적인 역할을 한다는 점을 기억하는 것이 중요합니다. 열 파라미터, 열 질량, 단자 저항 및 센서 파라미터에 대한 자세한 내용은 참고 문헌에 설명되어 있습니다.

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연구

JoVE Journal

Engineering

공학

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분석 미세 유체 장치의 열 측정 기술

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