2015년 10월 20일
이 원고의 목표는 동맥 문합에 대한 세부 사항에 특히 주의를 기울여 마우스에서 신장 이식을 수행하는 데 필요한 단계를 설명하는 것입니다.
이 절차의 전반적인 목표는 마우스의 신장 이식을 위한 변형된 동맥 문합 기술을 시연하는 것입니다. 이것은 먼저 기증자에서 관련 혈관을 주의 깊게 해부함으로써 수행됩니다. 두 번째 단계는 신장 동맥에 인접한 기증자 복부 대동맥의 발뒤꿈치와 발가락 커프를 만드는 것입니다.
다음으로, 이 발뒤꿈치와 발가락 커프는 수혜자의 동맥 문합을 형성하는 데 사용됩니다. 궁극적으로 이 기술은 동맥 혈전증의 사례를 매우 낮출 것입니다. 이 비디오는 구강 내 신장 이식을 용이하게 하기 위해 동맥 뒤꿈치와 발가락 커프를 만드는 방법을 보여줍니다.
이 저항 방법 기술의 주요 장점은 수혜자 대동맥에서 기증자 신장 동맥으로의 혈류 경로가 곧게 펴져 혈소판 활성화 및 혈전증 형성이 감소한다는 것입니다. 작동 현미경 아래에서 무균 기술을 사용하여 기증자의 신장을 적출하고 제대로 수행합니다. 수확 시간은 15-20 분입니다. 털을 제거한 다음 동물을 구속하십시오.
포비돈 요오드로 피부를 씻어내고 마우스를 드레이프한 다음 2cm 정중선 복부 절개로 수술을 시작하여 수술 부위를 준비합니다. 장을 가슴 쪽으로 집어넣고 촉촉한 거즈로 감쌉니다. 시술 내내 거즈를 촉촉하게 유지하십시오.
이제 거대한 복부 혈관을 찾아 동원하십시오. 모든 요추 가지는 소작하거나 10 제로 나일론 봉합사로 접합해야 합니다. 다음으로, 직설적으로 하대정맥(inferior vena cava)과 왼쪽 신장 혈관 원위부의 대동맥(aorta distal)의 2mm 부분을 해부합니다.
그런 다음 신장 혈관에 연결된 작은 동맥 및 정맥 가지를 결찰하고 분할합니다. 신장 정맥과 신장 동맥을 분리하기 위해 무딘 박리를 계속하여 나중에 신장 정맥의 근위 끝에 캐롤 패치를 만들 수 있으며, 이 패치는 정맥 문합 형성에 사용됩니다. 다음으로, 그것을 좋아하고 왼쪽 부신 혈관을 나누어 상부 신장 대동맥에 접근합니다.
접근하면 6개의 제로 실크를 고리로 만듭니다. 나중에 사용할 수 있도록 신장 대동맥 주위를 봉합합니다. 이제 주변 근막에서 신장 혈관과 요관을 동원하십시오.
신장을 뒤쪽에서 오른쪽으로 회전시키고 요관에 초점을 맞춘 혈관 가지를 결찰하고 나눕니다. 주변 근막에서 요관을 조심스럽게 분리하십시오. 신장 문턱을 방해하지 말고 발기 혈관을 보존하십시오.
다음으로, 요관을 관 딘 수준에서 나눕니다. 이제 신장을 회복할 수 있습니다. 먼저 300단위의 헤파린을 원위 IVC에 천천히 주입하여 기증자를 헤파린화합니다.
둘째, supra renal aa를 둘러싼 6개의 0 봉합사를 묶습니다. 그런 다음 복부 대동맥에서 왼쪽 신장을 관류하여 0.8ml의 헤파린 식염수를 100ml/ml로 주입합니다. 관류 후 즉시 정맥 카릴 패치를 만들어 신장으로의 역류를 방지합니다.
신장 정맥을 신장 쪽으로 수축시켜 AA와 신장 동맥을 드러냅니다. 이제 신장 동맥에 인접한 대동맥을 나눕니다. 발뒤꿈치와 커프스를 만듭니다.
그런 다음 0분의 저온 허혈이 필요한 경우 회수된 신장을 준비된 수혜자에게 이식합니다. 또는 장기를 섭씨 4도의 보관실로 옮긴 다음 텍스트 프로토콜에 표시된 대로 기증자를 안락사시킵니다. 이 절차는 기증자 마취와 마찬가지로 35-45분이 소요됩니다.
수혜자는 또한 필요에 따라 초기 볼루스를 보충합니다. 수혜자에게 안과 크림을 제공하십시오. 그런 다음 동물에게 부프레노르핀을 주사하고 시술 후 투여를 계속하고, 초기 절개를 하고 기증자와 마찬가지로 장을 변위시킨 후, 오른쪽 신장 절제술을 진행하고 6개의 제로 봉합사 결찰물로 신장 동맥과 정맥을 결찰하고 6개의 제로 봉합사로 신장 근위부의 요관을 분할합니다.
그런 다음 혈관 봉합사 원위부의 신장을 절제합니다. 이제 신장 혈관 아래에서 AA와 IVC를 분리한 다음 문합 부위보다 상부합니다. 대동맥 주위에 4개의 0면 넥타이를 놓고 IVC는 해당 부위보다 열등한 동일한 작업을 수행합니다.
이 지역에서 발견되는 모든 요추 혈관은 소작하거나 10 제로 나일론 봉합사로 접합해야 하며, 하부 봉합사가 아닌 단단히 고정해야 하며, 우수한 봉합사가 아닌 단단히 고정해야 합니다. 이렇게 하면 대동맥에 약간의 혈액이 유지되어 AOR 자가절개술을 촉진할 수 있습니다. 30게이지 바늘로 아토미를 수행한 다음 미세한 마이크로 가위를 사용하여 절개 부위를 약 2mm 길이로 연장합니다.
다음 단계는 기증자의 발뒤꿈치와 발가락 커프에서 수혜자의 대동맥까지 내궁 내궁 문합을 만드는 것입니다. 먼저 기증자 대동맥의 뒤꿈치에 10 제로 봉합사로 스테이 스티치를 합니다. 수혜자의 대동맥 절개 부위 아래쪽 끝을 통해 이 작업을 계속하고 묶습니다.
둘째, 대동맥 절개 부위의 상부 끝에 10 제로 봉합사를 배치하고 기증자 커프의 발가락을 통해 이를 계속하고 묶습니다.셋째, 상쪽 끝에서 시작하여 대동맥의 측벽에 콧물을 흘리는 봉합사를 만들고 이전에 배치된 하부 스테이 스티치에 묶습니다. 그런 다음 신장을 뒤집고 내벽을 따라 달리기 봉합을 계속하고 상부 스테이 스티치에 묶습니다.
바늘을 사용하여 IVC에 구멍을 뚫고 미세한 마이크로 가위로 절개 부위를 연장하여 정맥 문합을 완성합니다. 10 제로 나일론을 사용하여 기증자 신정맥을 IVC의 아래쪽 모서리에 묶습니다. IVC와 기증자 정맥의 상부 끝에 또 다른 10 제로 봉합사를 놓고 양쪽을 따라 흐르는 봉합사를 만듭니다.
동맥 문합과 마찬가지로 조직 가장자리의 혐오감은 밀봉과 치유에 도움이 됩니다. 이제 작업을 확인하십시오. 반대쪽 벽이 바늘에 걸리거나 혈류가 너무 수축되어서는 안 됩니다.
또 다른 매우 중요한 요소는 문합 봉합 라인의 장력이 최적임을 확인하는 것인데, 너무 느슨하면 돌이킬 수 없는 누출이 너무 꽉 조이고 흐르기 위한 협착이 있을 것입니다. 동맥 쪽에 있으면 이식편이 잘 나오지 않습니다. 정맥 쪽에 있으면 신장이 울혈됩니다.
문합이 완료되면 원위부 면 넥타이를 풀어 정맥 흐름을 확립합니다. 그런 다음 점차적으로 근위 넥타이를 풀고 동맥 문합에서 지혈을 위해 씻습니다. 두 문합이 모두 안전한 것으로 확인되면 수혜자의 방광에 20게이지 바늘이 있는 두 개의 구멍을 뚫어 집게를 구멍을 통과시키고 방광을 통해 기증자 요관을 당깁니다.
그런 다음 요관의 근위부 끝을 2 10 0 봉합사로 방광 벽에 고정합니다. 돌출된 요관의 과도한 길이를 잘라내어 방광 내에서 수축되도록 합니다. 그런 다음 10 제로 봉합사로 방광의 다른 구멍을 닫습니다.
장을 교체하고, 5개의 제로 실크 봉합사로 복부를 두 겹으로 봉합하고, 봉합하기 전에 복부에 식염수 1마이크로리터를 주입하여 수술을 마칩니다. 복부를 봉합한 후 0.8ml의 식염수를 피하주사하고 따뜻한 담요에 싸워 동물을 회복시킵니다.데이터 수집 1년 만에 이 기술은 동맥 혈전증의 발생률을 35%에서 0%로 크게 감소시켰으며, 비이식 신장과 이식된 신장에 대한 면역조직화학이 수행된 이후 이 0%의 혈전증 발생률이 유지되었습니다. 설명된 기술을 사용하여 주기적인 산 이동 염색을 통해 대조군과 공여자에서 정상적인 근위 세뇨관 세포가 드러났습니다.
세포는 투명한 세포질이 있고 두 화살표 모두에 대해 세포 중앙에 둥근 가벼운 핵이 있는 직육면체입니다. 가벼운 덤불 테두리 손상의 증거를 지적하지만 대부분의 브러시 테두리는 규칙적이고 잘 보존되어 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 동맥 발뒤꿈치와 발가락 컵 문합을 수행하는 방법을 잘 이해하게 되어 혈전증 사례가 줄어들고 신장 이식이 더 성공적으로
이루어질 것입니다.전체 스크립트를 보고 수천 개의 과학 동영상에 액세스하세요
본 논문은 마우스 신장 이식 시 사용되는 수정된 동맥 문합 기술에 대해 상세히 설명합니다. 특히 혈관의 정밀한 박편 제작과 공여자 복부 대동맥을 이용한 힐 앤 토(heel and toe) 커프 제작을 강조합니다.
동맥 혈전증은 전임상 이식 모델에서 여전히 심각한 실패 요인으로 남아 있으며, 이는 데이터 신뢰도와 화합물 평가 일정에 직접적인 영향을 미칩니다. 본 기술은 혈역학적 최적화를 통해 이식편 관류의 일관성을 개선함으로써, 핵심적인 메커니즘적 리스크 감소 과제를 해결합니다. 향상된 모델 예측 가능성은 이식 관련 치료제 개발 과정에서 더 빠른 go/no-go 결정을 내릴 수 있도록 지원합니다.
이 방법은 하위 분석을 위한 신뢰할 수 있는 수술 플랫폼을 제공함으로써, 특히 신장 안전성이나 효능이 주요 평가 지표인 경우, 발견 단계부터 전임상 단계까지의 연속 과정에 적합합니다.