Name: 풍부한 환경에서의 주택 마우스를위한 프로토콜 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-08T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 30 s
Description: 배우세요 마우스 풍부한 환경 설치 및 유지 관리 방법을 통해 대사 건강 개선과 항암 효과를 유도하는 실험 동물 관리 기술을 익히세요.

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NIH에 의해 지원되었다이 작품은 LC에 CA163640, CA166590 및 AG041250을 부여합니다.

아래에서 설명하는 절차는 오하이오 주립 대학의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 승인되었습니다. 주택 마우스에 농축 환경 1. 준비 이전 <ol><li> 청소 및 악기를 유지. <ol><li> 케이지 세척을 통해 큰 농축 빈 (120cm X 90cm X 76cm)를 실행합니다. 일반적인 동물 시설 케이지 세척 프로토콜은 82 ºC에 도달하는 마지막주기에 5-6 세척주기를 포함한다. 전체 세탁은 약 40 분 소요됩니다. 빈 공기 - 건조. <ol><li> 큰 농축 빈, 및 기타 주택 악기가, 케이지 세척을 통해 전송 될 수없는 경우, 스프레이 및 제조업체의 지침에 따라 sporicidal 소독제와 빈의 내부를 닦아. 이전 살균제에서 어떤 냄새 없애 종이 수건으로 수돗물 적신 종이 타월 또는 30 % 에탄올 건조와 빈를 닦아냅니다. </li></ol></li><li> 사용 PLASTIC 튜브, 접시 형 바퀴 이글루, 그리고 전자 기타 다양한 플라스틱 허치 같은 장난감. 케이지 세척을 통해 이러한 장난감을 씻으십시오. 당신은 케이지 세척 후속 단계 1.1.1.1에 액세스 할 수없는 경우. </li><li> EE 금속 실행 바퀴를 사용합니다. 케이지 세척을 통해 바퀴를 씻으십시오. 바퀴에 페인트가 너무 동물이 그것을 실행할 때 바퀴가 시끄러운가되도록 퇴색하기 시작하면, 바퀴와 악셀을 연결하는 지점에 소량의 석유 젤리를 적용합니다. </li><li> EE에 나무 로그를 사용합니다. 손으로 어떤 침구 또는 기타 이물질을 제거하여 로그를 청소합니다. 그런 다음 15 분 동안 121 ºC의 온도에 도달 건조 사이클 또는 섬유 사이클에이를 오토 클레이브에 의해 멸균 로그. </li><li> 공급 마시는 와이어가 케이지의 전면 바닥에서 구멍을 직경이 적어도 5cm를 rack.Cut 개최 29cm X 18cm X 12.5 cm이고, X 19cm가 X 14cm 30.5 cm의 크기 사이에 케이지를 사용하여 마우스는 EE에서와 밖으로 이동합니다. 케이지 세척을 통해 이러한 공급 새장을 청소합니다. </li></ol></li><li> 환경 설정 <ol><li> 큰 농축 통에 1/4 인치 옥수수 속 실험실 동물 침구를 따르십시오. 침구 2-2.5 cm의 깊이까지 빈의 전체 바닥면을 커버. </li><li> 빈의 한 구석에 두 개 또는 세 개의 로그를 놓습니다. 구석에 배치 로그에 대한 1,225cm 2의 영역을 격리시키는합니다. 로그에 의해 압수 영역에서 상단에 접시 바퀴 세 이글루를 놓습니다. 바퀴가 자유롭게 회전 할 충분한 공간이되도록 바퀴, 빈, 로그, 또는 서로의 벽을 건드리지 않았는지 확인하십시오. </li><li> 조각 함께 플라스틱 튜브 있도록 centeral 연결 부분에서 밖으로 여러 무기 분기. 빈의 중간에이 튜브를 놓습니다. </li><li> 빈의 두 코너에서, 하나의 먹이 케이지 빈과 같은 침구 가득 각각 배치하고 공급 케이지의 앞면에있는 구멍은 빈의 중심을 향해 향해야합니다. 이러한 공급 케이지 깨끗한 음식과 물을 와이어 위에음식과 물을 유지하기 위해 배치해야합니다. 케이지에있는 뚜껑을 올려 놓지 마십시오. 케이지 와이어에서 음식과 물을 넣습니다. </li><li> 서로에 불구하고 다음의 모든, bin에 3 개의 금속 바퀴를 놓습니다. 바퀴의 세 가지 유형 중 하나는 11.5 cm 휠 번 2​​0.5 cm 휠 및 한 28cm 휠이다. 그런 다음 농축 빈을 통해 4 ~ 5 개 플라스틱 허치 같은 장난감 또는 터널을 배치합니다. </li><li> 마이크로 아이솔레이터 필터 종이 함을 커버. 빈에 필터 종이 클립에 바인더 클립을 사용합니다. </li><li> 참신은 전자에 중요하다. 동물을위한 새로운 환경을 조성하기 위해 전자의 프레임 워크로이 설정을 사용하여 상기 케이지, 개체 및 장난감의 위치를​​ 다양합니다. </li></ol></li></ol> 2. 주택 동물 <ol><li> EE 일반 실험실 하우징 아니라 실험 동물을 번식. 선택적으로, 이유에 전자 연령의 빠르면 21 같은 일을 동물을 배치합니다. 이전에 전자 하우징 유전자형과 귀 펀치 / 태그 동물. </li><li> 배치 할 때동물 농축 빈에 표준 케이지에서 자유롭게 이동할 수 있도록 표준 케이지에서 농축 빈에 동물, 옆에 빈에서 케이지를 놓습니다. 중첩 물질이 농축 빈으로 전송 될 수 없습니다. </li><li> 집 전자의 같은 연령, 성별, 유전 적 변형의 10 ~ 20 동물. </li></ol> 3. 환경을 유지하고 연구하는 동안 마우스를 관찰 <ol><li> 매일 <ol><li> 조용히 질병이나 고통의 징후 동물을 관찰합니다. 필요한 경우, 더 부드럽게 건강 상태를 검사 동물을 처리한다. 기록 이상 관찰과 실험에서 제거를 필요로하는 동물 표시 조건의 경우 건강 기술자 또는 수의사 직원에게 문의하십시오. </li><li> 작은 상처 나 딱지 트리플 항생 연고와 국소 치료를 제공합니다. 동물이 만성 질병이나 부상으로 인해 제거해야하는 경우, 안락사에 대한 실험에서 동물을 제거합니다. 동물의 경우다시 EE에 동물을 반환하지 않습니다, 감독 동물 연구 관리위원회 또는 수의사 조기 제거 기준을 충족. </li></ol></li><li> 일주일에 두번 <ol><li> 사료와 물 수준을 확인합니다. 그 피드를 확인하고 물은 3-4 일 동안 지속됩니다. 가 확산되고 마우스에서 사용할 수 있도록 실행 바퀴와 농축 장난감을 똑 바르게. 너무 더러운 그 중 하나를 교체합니다. </li></ol></li><li> 주간 <ol><li> 깨끗한 물 병 물 병을 교체합니다. 1.2 절에서 설정을 다음 방법으로 농축 장치를 재 배열. 아직 전주의 설정과 다릅니다. 참고 : 실험 활동에 대한 풍부한 환경에서 제거 할 동물을 필요로하는 경우 (체중, 혈액 무승부, 행동 테스트 등을 기록)는 동물 멀리 농축 함에서있는 동안 환경을 재 배열하는 것이 가장 좋습니다. </li><li> 손으로 전자에 공급 새장을 청소 또는 케이지 세척을 통해 보내같은 섹션 1.1.5에 설명. 뿐만 아니라 깨끗한 와이어 랙에 음식과 물을 가지고 와이어 랙을 장착합니다. </li><li> 2.2 절의 지시 사항을 따르십시오. 농축 다시 동물을 배치 할 때. 필요한 경우 더러운 쓰레기를 떠서 새로운 깨끗한 침구를 확산하여, 큰 농축 빈 청소의 나머지 부분을 확인 스팟. </li></ol></li><li> 격주 <ol><li> 주간 사육을 수행하는 동안, 손으로 장난감을 청소하거나 제 1.1.2에 설명 된대로 케이지 세척을 통해 보낼 수 있습니다. 필요한 경우, 청소에 필요한 시간에 대한 표준 마이크로 아이솔레이터 케이지에 마우스를 놓습니다. </li></ol></li><li> 월별 <ol><li> 농축 장난감을 이동 케이지를 공급하고 쓰레기를 떠서하여 쓰레기를 밖으로의 대부분을 청소합니다. 신선한 쓰레기로 교체하십시오. 케이지의 모든 영역에서 침구의 1 인치가 있는지 확인합니다. 필요한 경우, 청소에 필요한 시간에 대한 표준 마이크로 아이솔레이터 케이지에 마우스를 놓습니다. </li></ol></li><li> 매 3개월 (또는 실험의 끝) <ol><li> 모든 침구, 장난감 및 청소를 제거하고 절 1.1.1에 설명 된대로 농축 함을 소독. 실험이 진행중인 경우, 케이지, 장난감의 구색을 공급, 새로운 침구로 교체 한 후 용지함에 마우스를 반환합니다. </li></ol></li><li> EE가 보관되어있는 연구 기관에서 요구하는 경우 3 개월보다 더 자주 전체 농축 함을 소독. 이 필요하고, 또 다른 큰 농축 컨테이너는 1.2 절에서 설명하는대로 추가 농축 용기를 설정, 사용할 수있는 경우. 이전 세정되는 동안, 새로운 컨테이너 동물 옮긴다. </li></ol> 4. 제어 주택 조건 <ol><li> 치수 30.5 cm X 19cm X 14cm의 마이크로 아이솔레이터 케이지에서 대조군 주택의 동물. 케이지는 자동 관개 시스템에 매여 있지 않은 경우, 음식과 물 한 병을 들고위한 케이지에 그물 선반을 포함합니다. </li><li>EE에서와 같이 제어 케이지에서 같은 옥수수 속 침구를 제공합니다. 마우스에서 둥지을 할 수있는 4cm X 4cm의 nestlet을 제공합니다. </li><li> 일주일에 한 번 전선, 음식과 물을 공급, 교체 및 / 또는 새장을 청소합니다. 케이지 와이어 선반 청소 케이지 세척을 통해 또는 제 1.1.1.1에서 상세한. 동물이 더 자주 또는 침구 상에 마시는 물 누수 경우 소변 경우 더 자주 새장을 청소합니다. </li><li> 제어 주택 일상에서 동물의 상태를 모니터링합니다. 동물들이 음식과 물을 많이 가지고 확신합니다. </li><li> 일반 마우스 케이지에서 같은 성별의 집은 3 ~ 5 마우스. 케이지의 모든 장난감, 튜브, 또는 허치을 제공하지 않습니다. </li><li> 기관 실험실 동물 보호 시설의 건강과 실험실 기술자는 이러한 제어 쥐 사육을 제공 할 수있다. </li><li> EE의 쥐와 같이 12 시간 조명 / 어두운주기에 동물을 유지합니다. </li></ol>

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</ol>

저자는 이익에 대한 갈등을 선언하지 않습니다.

뇌에서의 유전자 발현에 EE의 강력한 효과는 아직, 비만증 및 마우스에서 암 성장이 신체 활동, 사회적 상호 작용과인지 적 도전을 촉진하는 방식으로 동물을 신규 한 환경을 유지하고 처리하는 연구자의 능력에 크게 의존 감소 하지 고통 동물을 수행합니다. 기억해야 할 가장 중요한 두 가지 절차 단계가 있습니다. 첫째, 매주 장난감, 개체 및 케이지의 위치를​​ 변경해야합니다. 장난감 및 개체 전주에서 동일 할 수있다하더라도, 마우스는 신규로 환경 인식. 장난감을 변경하고 다른 모든 주에 다른 사람과 자신을 객체. 둘째, 깨끗한 환경을 유지해야합니다. 더러워진 침구 제거하지 않는 경우, 증가 된 질소 수준은 동물에게 스트레스 요인 일 수있다. 또한,이 프로토콜 EE 참고 많은 기술이있다. 다른 또는 고유 장난감 및 다른 사용플라스틱 튜브 미로의 디자인은 권장합니다. 환경은 어려울 수 있지만, 동물의 건강에 위협이 안된다. 장애 장난감 잡힐 마우스 사지의 위험을 증가하거나 씹는에 의해 소비되는 경우 동물에 독성이있을 수 있기 때문에 또한, 기능 장애 장난감 조심. EE에 대한 하나의 상수는 2-3 로그 의해 빈의 모서리 또는 측면에 압수 이글루 위에 세 접시 바퀴의 사용이다. 로그 뒤에 접시를 실행이 설정은 우리의 모든 농축 연구에 존재하고있다. 다른 목적의 이용 및 배치의 관점에서, 레이아웃의 설명은 상기 EE 셋업 기초 청사진이다. 플라스틱 튜브의 기초 프레임 워크,보고 된 결과를 재현하기에 충분한 새로운 환경을 제공해야 접시, 케이지와 로그를 실행, 바퀴를 실행하는 설정의 변화. 당뇨병이나 다른 대사가 형질 전환 동물들과 함께 작업하는 경우질병은 동물들이 음식과 물이 부족하지 않도록 보장하기 위해 음식과 물 소비에주의. 동물 당뇨병이있는 경우, 그들은 더 많은 소변, 그래서 전자 하우징의 침구 자리 확인하고 더 자주 청소해야 할 수도 있습니다. 침구는 자주 제거해야 EE 하우징 장소 코너입니다. 그들은 동물에 의해 사용될 수 있도록, 다른 바퀴기구를 조정하는 기억. 동물 침구로 접시 바퀴를 실행 이상 실행 바퀴를 노크 할 수있다. 동물이 시대의 3-5주, 젊은 경우, 그들은 동물이있는 곳에 관한 단서 연구원을 떠나, EE의 케이지에서 발굴하고 거기에서 함께 숨길 수 있습니다. , 오염 된 침구를 제거하는 장난감을 교체, 또는 새장을 청소할 때, 그들의 환경을 조절하면서 그들에게 스트레스가되지 않도록 깨끗한​​ 표준 새장에 동물을 넣어하는 것이 좋습니다. 그것은 그들이 ENV에 숨어 적은 곳이있는 경우 한 장에 모든 동물을 얻기 위해 쉽게ironment. 따라서, 새장에 동물을 금속 이온 봉쇄하기 전에 장난감을 제거하는 과정을 쉽게. 청소를 위해 대기 또는 EE 환경을 조절하면서 또한, 하나의 표준 케이지 이상 5-6 동물을 놓지 마십시오. EE는 성인기에 시작된다 특히 전자의 수컷은 공격적이 될 수 있습니다. 따라서, 어떤 부상이나 죽은 동물에 대한 환경을 관찰하는 것이 중요하다. 또, 용기의 큰 크기 EE 집 동물의 전형적인 개수는 10-20 마우스이다. EE에 집 동물의 수를 결정할 때 약 10 이하 생쥐를 사용하는 다른 연구자들이 다양 EE에 사용할 동물의 수, 및 카 또는 빈의 크기는 고려되어야한다. 생활 환경에 너무 많은 동물을 갖는 것은 남성 생쥐의 침략으로 이어질 수 있습니다. 우리는 전자에 보관 한 마우스 C57BL / 6 배경으로왔다. 다른 계통의 마우스는 다소 공격적으로, 또는 더 쉬운 건강 문제에의 할 수있다이 전자 설정. 이것은 마우스 및 농축 환경 축산 계획을 결정 고려해야한다. 네 개의 주 EE 하우징은 비만의 감소, 렙틴의 수준 저하 및 B16 흑색 종의 성장 억제를 유도하기에 충분하다. 긴 전자는 신진 대사와 암 억제에 강한 효과로 이어질 수 있습니다. 생쥐 중이나 EE에 노출 전에 수술 절차를 거칠 경우, 그대로 봉합 수용 될 수있다. 여부 동물 수술 스테이플 또는 연구되지 ​​않았다 그대로 카테터이 특정 EE 설정에 잘 반응. 또한, 우리는 현재이 특정 전자는 세 동물의 수명 또는 healthspan에 미치는 영향을 조사하고있다. 예비 데이터는 여성 C57BL / 6 마​​우스, 나이 10 개월 젊은 쥐와 유사 EE에 응답하는 것이 좋습니다. 전자 하우징의 한 제한은 우선적으로 성별 특정 방에, 동물 시설의 공간에서 같은 큰 빈을 수용한다. EFF에 따라서 미래 연구작은 규모의 EE ECTS뿐 아니라, 청소 고온 세정 견딜 쉽고 동물 건강 안전 찾는 장난감, 대사 및 암 연구에서 EE의 애플리케이션을 개선 할 것이다.

환경 농축 (EE)는 동물 (1)을 강조하지 않는 복잡하고 어려운 환경의 영향을 탐구하는 데 사용되는 실험 패러다임이다. 전자 차례로 감각,인지, 모터, 사회적 자극이 증가 증가 공간, 신체 활동, 사회적 상호 작용, 구성 동물 하우징 기술이다. 주거 환경의 이글루, 실행 바퀴, 접시 바퀴, 튜브 미로 및 기타 개체는 탐사 및 상호 작용을 촉진하여이 감각,인지, 사회, 모터 자극을 육성. 인클로저 변화 오브젝트의 배치는 규칙적으로 생쥐에 적응하도록 강요되는 신규 한 환경을 제시한다. 이 전략은 더 혐오, 적대적 환경이나 부적응 고통 3,4 반대로, eustress로 알려진, 유익한 양성, 건강한 적응 반응을 유도 온화하고 간단한 문제를 제공합니다. 쥐를 eustress을 촉진하고 유해 고통을 제한함으로써유리한 표현형의 다양성을 보여줍니다. 전통적 같은 스트레스 1 생각 요소의 결여하면서 EE는 다양한 애플리케이션과 신뢰성 실험 모델이다. 설치류에 EE의 효과는 반세기 이상 연구되어왔다. 1960 년대 초 연구는 대뇌 피질의 콜린 에스 테라 제 수준이 감소 피질 콜린 에스 테라 수준이 증가 생활 공간, 쥐의 수가 증가하고, 나무 장난감, 미로, 및 플랫폼 5,6의 다양한 환경에 보관 된 쥐에서 증가 된 것으로 나타났다. 또한, EE는 다양한 연령 및 유전 배경의 마우스에서 뇌, 행동, 및 대사에서 많은 적응 변화와 관련된다. 따라서, EE 생쥐에 환경의 영향을 연구 실험의 넓은 범위에 대한 패러다임 유용하다. EE 효과 일주일 노광 빨리 마우스에서 관찰 될 수 있으며, 십팔개월 7 오래된 같은 동물에서 볼 수있다. EE는 유 자주기능의 회복, 학습과 기억 (2)를 연구하는 신경 과학 및 신경 행동 실험에 나오지. 또한, EE 독소 유도 헌팅턴 병, 알츠하이머 병, 파킨슨 병, 간질, 뇌졸중, 신경 질환을 포함하여, 인간의 유전자 변형 동물 모델의 다양한 표현형에 상당한 충격을 가지며, 2 개. 그러나 수년에 걸쳐 농축 디자인 어려운 다른 실험실에서 연구 사이의 비교를하여 불일치가 있었다. 예를 들어, 앞서 언급 된 인간 신경 질환에 대하여 EE 효과에 연구의 각각 농축 파라미터를 변화했다. 헌팅턴 병에 대한 연구는 이틀 8,9 변경된 판지 상자, 터널, 및 시트 포함하는 큰 케이지 (44 X 28 X 12.5 cm 3)뿐만 아니라 나무와 플라스틱 물체에 4-6 쥐를 보관. 알츠하이머에 수행 된 연구 중 하나# 8217;의 2 실행 바퀴, 플라스틱 튜브, 골판지 상자 및 변경 또는 10 주간 재 배열했다 둥지 재료를 포함하는 더 큰 케이지 (1m 3) 20 쥐를 보관. EE 많은 설정 등의 실행하거나 숨길 사물 유사한 테마가 아직 EE 하우징, 거실 당 마우스의 수, 환경 변화의주기가 매우 다양하다. EE의 일관성이 디자인은 전자 효과의 실패 복제을 주도했다. 암과 대사에 우리의 데이터를 함께 제시하는 중요한 항암 및 항 비만 효과 14, 15에 대한 상세한 EE 주택 프로토콜 리드에서 제공하는 자극의 조합. 그러나, 하나에서 본 바와 같이, EE의 결과에 영향을 줄 수있는 다른 실험실에 의해 채택 EE 설정의 차이는 마우스 (11)에 주입 된 특정 암 종양의 성장에 EE 효과를 재현하기위한 시도가 실패. 다른 결과는 이리저리 이르는 다양한 원인에 기인 할 수있다하우징 (11)을 세정 장치에 사용되는 세제의 종류의 종양 세포 배양의 다른 성장 속도 미터. 실험 결과에서 알을 복제하기 위해, 농축 및 축산의 특정 설계가 요구된다. 다음 절차는 다른 연구자가 성공적으로 우리의 효능이 농축 모델을 복제 할 수 있도록 전자 하우징을 자세히 설명합니다.

<table><tbody><tr><td>대형 농축 쓰레기통 (120cm x 90cm x 76cm)</td><td>맞춤 제작.</td><td>맞춤 제작.</td><td>폴리프로필렌으로 제작되었습니다. 쓰레기통의 가장자리 두께는 1.5cm입니다.</td></tr><tr><td>대형 농축 빈 대체품(120cm x 110cm x 76cm)</td><td>글로벌 산업용</td><td>155202</td><td>필요한 경우 이 빈은 위의 빈 대신 사용할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>Habitrail 미니 튜브</td><td>Habitrail</td><td>62720; 62705; 62725; 62715; 62054</td><td>-</td></tr><tr><td>접시 바퀴가 달린 플라스틱 이글루</td><td>Bio Serv</td><td>K3327; K3250</td><td>-</td></tr><tr><td>금속 러닝 휠</td><td>Super Pet</td><td>61392; 61394; 61396-Manzanita</td><td></td></tr> <tr><td>Wood Gnawing Sticks, 3"</td><td>Bio Serv</td><td>W0016</td><td></td></tr><tr><td>마우스 터널</td><td>Bio Serv</td><td>K3322</td><td>-</td></tr><tr><td>대형 EE 빈에 들어가는 마우스 케이지.</td><td>Lab Products Inc</td><td>10027 마우스 케이지</td><td>-</td></tr><tr><td>케이지 Klenz 180 알칼리 케이지 세척 세제, 케이지 Klenz 250 산성 세제</td><td>Steris Life Sciences</td><td>1K1802; 1K2502</td><td>이 세제는 장난감, 대형 농축통 및 케이지의 케이지 세척에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>Sporklenz</td><td>Steris Life Sciences</td><td>6526Q8</td><td>케이지 워시에서 장난감, 쓰레기통 및 케이지를 세척하는 대체 살포자/소독제.</td></tr><tr><td>Bed-O-Cobs 1/4" 침구</td><td>The Andersons, Inc.</td><td>4B</td><td>옥수수 속대 침구는 직경이 1/4"입니다.</td></tr><tr><td>방제 용 Nestlets 사육 마우스</td><td>Ancare</td><td></td><td>Cotton 사각형</td></tr></tbody></table>

풍부한 환경에서의 주택 마우스를위한 프로토콜

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Environmental enrichment (EE)는 표준 실험실 주택에 비해 정신적, 신체적 건강을 증진시키는 쥐의 주거 환경입니다. 우리의 최근 연구는 환경 풍부화가 비만증을 감소시키고, 에너지 소비를 증가시키고, 다이어트로 인한 비만에 저항하고, 생쥐에서 암 완화 및 억제를 유발한다는 것을 보여줍니다. EE는 일반적으로 더 넓은 생활 공간, 상호 작용할 수 있는 다양한 '장난감', 달리는 바퀴로 구성되며 다른 여러 가지 새로운 환경 변화를 포함할 수 있습니다. 이 모든 것은 더 복잡한 사회적 참여, 인지적, 신체적 자극을 촉진한다. 중요한 것은 장난감의 위치와 장난감 유형이 정기적으로 변경되어 생쥐가 자주 변경되고 새로운 환경에 적응하도록 장려한다는 것입니다. 마우스의 건강 효과를 촉진하기 위해 EE에서 많은 변수를 조작할 수 있습니다. 따라서 이러한 접근 방식은 제어하기 어렵고 관련 표현형을 성공적으로 복제하기 위해 적절하게 관리해야 합니다. 따라서 이 비디오의 목표는 다른 연구자들이 비만과 암에 대한 EE의 보호 효과를 쉽게 재현할 수 있도록 복잡하고 도전적이며 통제된 환경을 보장하기 위해 EE를 적절하게 설정하고 유지하는 방법을 보여주는 것입니다.

EE는, 성장 인자의 발현에 영향을 중추 신경계 (CNS) (12, 13) 내에서 신경 세포의 생존을 증가시킨다. 보다 최근의 연구는 EE의이 기술은 생식계 돌연변이를 포함하고 자발적 선종 형성에 매우 민감하다 B16 흑색 종, MC38 결장암 및 APC 최소 / + 마우스 등 3 마우스 암 모델에서 암 성장의 현저한 억제를 초래 것으로 나타났다 장 (14). 도 2에서 확인 결과 5주 (~ 종양 질량의 80 % 감소)에 대해 EE에 노출 된 마우스에 이식 된 B16 흑색 종 종양 성장의 억제. 종양 14 설립되었던 후 EE 개시하고 나서 암 성장 억제에도 마우스에서 관찰되었다. 전자는 정상 체중 (~ 종양 질량의 50 % 감소) (14)의 마우스에 비해 높은 지방 다이어트 유발 된 비만 생쥐에서 흑색 종의 성장 (~ 종양 질량의 70 % 감소)의 큰 저해 결과. EE의 IND<html> 강력한 렙틴의 감소, IGF-1의 감소 및 아디포넥틴 수치 (14)의 증가를 포함하여 혈청 바이오 마커의 uced 서명 변경됩니다. 또한, EE의 이러한 기술은, 비만증을 감소 에너지 소비 증가,식이 유도 비만에 대해 저항에 이르게하고, 축 (15) 시상 sympathoneural - 지방 세포를 활성화시켜 갈색 지방 표현형 스위치 백색을 유도한다. 비만의 감소는 전자에 노출 빠르면 6 개의 일을 보였다 (그림 3a는, B) 및 다시 사주 (그림 3C, D)에 대한 EE에 노출 된 동물에서 확인했다. 이 (즉, 하나, EE와 관련된 항암 및 항 비만 효과가 두 EE 효과는 뇌 유래 신경 영양 인자의 과발현에 의해 재생 될 수 있고, 단독으로 신체 활동에 의해 차지 될 수없는 유의도 BDNF 중요 ) 시상 하부 14, 15에. <html> 2874fig1.jpg &quot;/&gt; 그림 1 : 농축 환경 빈은 설정 풍부한 환경은 X 90cm 120cm의 영역을 가지고 있으며, 접시 바퀴, 플라스틱 관, 나무 로그 및 기타 플라스틱 농축 장난감이 수정 케이지, 실행 바퀴, 이글루를 포함한다.. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig2.jpg" /> 그림 2 : 농축 환경은 C57BL / 6 수컷 마우스에서 종양 성장을 감소 3 주 오래 된 남성 생쥐 종양 접종 이전에 오주에 대한 전자 또는 제어 케이지의 집이었다.. 오른쪽 측면 위의 동물 피하 당 10 5 세포의 접종 후 십칠일에서 B16 흑색 종 종양 무게 (N = 그룹 당 10. 학생의 T는 - 테스트, * P &lt;0.05). <img alt="그림 3a" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3a.jpg" /> <img alt="그림 3b" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3b.jpg" /> S / ftp_upload / 52874 / 52874fig3c.jpg &quot;/&gt; <img alt="도 3d" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3d.jpg" /> 그림 3 : 농축 환경은 C57BL / 6 수컷 생쥐에서 비만을 감소 3 주 오래 된 생쥐는 EE을 실시 하였다. 4 주 동안 육일, 또 다른 하나의 그룹. () EE에 엿새 동안은 (* P &lt;0.05, N = 그룹 당 5. 학생의 T의 -test) 지방 패드의 무게를 감소. (B) EE에서 엿새 동안은 (* P &lt;0.05, N = 그룹 당 5. 학생의 T는 - 테스트) 상대 체중에 지방 패드의 무게를 감소. (C)는 전자의 4 주 (* P &lt;0.05, N = 그룹 당 5. 학생의 T의 -test) 지방 패드의 무게를 감소. (D)는 전자의 4 주 (* P &lt;0.05, N = 그룹 당 5. 학생의 T는 - 테스트) 상대 체중에 지방 패드의 무게를 감소. BAT : 갈색 지방 조직, IWAT : 사타구니 흰색 지방 조직, EWAT : 부고환 흰색 지방 조직,RWAT : 복막 흰색 지방 조직.

생쥐의 환경 강화는 복잡하고 도전적인 설정뿐만 아니라 생쥐의 강력한 대사 및 항암 효과를 보장하기 위한 포괄적인 사육 및 취급 기술을 필요로 합니다. 이 프로토콜은 마우스에서 위에서 언급한 효과를 재현하기 위한 자세한 절차를 제공합니다.

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

이 절차의 목적은 마우스에서 강력한 대사 및 항암 효과를 유도하는 환경 풍부화 조건에서 동물을 사육하고 유지하는 데 필요한 세부 사항을 제공하는 것입니다. 이를 위해 먼저 휠, 달리기 도구, 은신처, 튜브, 통나무, 케이지 등의 물건이 포함된 대형 빈에 풍부화된 사육 환경을 조성합니다. 두 번째 단계로, 동물을 이러한 새로운 환경에 도입합니다.다음으로, 빈(bin) 내 물체의 위치와 종류를 변경하고 정기적으로 신선한 먹이와 물을 제공하여 풍부한 환경을 유지합니다. 마지막 단계는 환경 내에서 교체된 물체들을 세척하여 향후 다시 교체할 수 있도록 준비하는 것입니다. 최종적으로, 동물 안락사 후 조직 분석을 수행합니다.이 환경 풍부화 기술은 시상하부-교감신경-지방세포 축을 활성화함으로써 지방량 감소, 에너지 소비 증가, 식이 유도 비만 저항성 및 백색 지방의 갈색 지방 표현형 전환을 보여줍니다. 본 방법은 암 및 대사 질환에 대한 저항성을 높이는 실험용 설치류용 풍부화 환경 조성에 관한 세부 사항을 설명합니다. 먼저, 대형 풍부화 빈 내부를 sporicidin 소독제로 뿌리고 닦아냅니다.제조사의 지침에 따라, 30% ethanol 또는 수돗물을 적신 종이 타월로 빈 케이지를 닦아낸 후 종이 타월로 건조시켜 이전 소독제의 잔류 냄새를 제거합니다. 풍부화 환경(enriched environment)에는 SOR 타입 휠이 달린 플라스틱 튜브 이글루와 기타 다양한 플라스틱 은신처 형태의 장난감을 사용합니다. 이러한 장난감들은 앞서와 동일하게 세척하여 사용하고, 마찬가지로 세척 완료된 금속 러닝 휠을 사용합니다.동물이 휠 위에서 달릴 때 휠의 도색이 벗겨져 소음이 발생하기 시작하면, 휠과 축이 연결되는 부위에 바셀린을 소량 도포하십시오. 풍부화 환경에는 나무 토막을 사용하십시오. 나무 토막에 묻은 깔짚이나 기타 이물질을 손으로 제거하여 세척하십시오.그런 다음 건조 사이클 또는 섬유 사이클로 오토클레이브하여 121 °C의 온도에서 15분 동안 로그를 멸균합니다. 이를 보관하기 위해 29 cm × 18 cm × 12.5 cm에서 30.5 cm × 19 cm × 14 cm 사이 크기의 깨끗한 급이 케이지를 사용하십시오. 급이 및 급수용 와이어 랙은 마우스가 출입할 수 있도록 케이지 앞면 하단에 직경 최소 5 cm의 구멍을 냅니다.시작 단계입니다. 깨끗하고 큰 풍부화 빈(enrichment bin)에 1/4인치 크기의 옥수수 속대 실험동물 베딩을 2~2.5cm 깊이로 채웁니다. 다음으로, 이전에 준비한 대동맥 클레이 로그(aortic clave logs) 2~3개를 빈의 한쪽 구석에 배치하여 약 1,225cm²의 구역을 분리합니다.그다음 통나무로 격리된 구역에 SOR 휠이 달린 접착제 세 개를 위에 배치하십시오. 휠이 자유롭게 회전할 수 있는 공간이 있는지 확인하십시오. 이제 플라스틱 튜브를 조립하여 중앙 연결 부품에서 여러 개의 암(arm)이 뻗어 나오도록 하십시오.이 튜브를 빈의 중앙과 두 모서리에 배치하십시오. 빈에 사용한 것과 동일한 깔짚이 채워진 급여 케이지를 배치하십시오. 각 급여 케이지 앞면의 구멍이 빈의 중앙을 향하도록 해야 합니다.각 급이 케이지 상단에 마우스 사료가 담긴 먹이 및 식수 와이어를 배치합니다. 물병을 추가합니다. 빈(bin) 안에 11.5 centimeter 휠, 20.5 centimeter 휠, 그리고 28 centimeter 휠을 넣습니다.그런 다음 플라스틱 은신처 형태의 장난감이나 터널을 4~5개 더 풍부화 상자 곳곳에 배치합니다. 상자를 마이크로 아이솔레이터 필터지로 덮고 바인더 클립을 사용하여 필터지를 상자에 고정합니다. 표준 케이지에서 풍부화 상자로 동물을 옮길 때는 케이지를 상자 안에 옆으로 눕혀 동물이 표준 케이지에서 풍부화 상자로 자유롭게 이동할 수 있도록 합니다.둥지 재료가 풍부화 빈(enrichment bin)으로 옮겨지지 않도록 하십시오. 동일한 연령, 성별 및 유전적 계통의 동물 10~20마리를 풍부화 환경에 동시에 수용할 수 있습니다. 동물이 질병이나 스트레스 징후를 보이는지 매일 관찰하십시오.필요한 경우, 주 2회 동물을 조심스럽게 다루어 상태를 추가로 점검하십시오. 사료와 물의 양을 확인하여 다음 이틀 동안 충분히 유지될 수 있도록 하십시오. 또한, 쳇바퀴와 환경 풍부화 장난감들이 고르게 배치되어 쉽게 사용할 수 있도록 정돈하십시오.오염된 환경 풍부화 물품은 일주일에 한 번, 가급적 마우스를 환경에서 꺼냈을 때 교체하십시오. 실험 목적을 위해, 급여 케이지와 와이어 랙을 제거하고 신선한 먹이가 채워진 깨끗한 케이지와 랙으로 교체하십시오. 물병은 깨끗한 물병으로 교체하십시오.설정의 핵심적인 측면들은 유지하되, 풍부화 항목들의 배치를 다르게 하여 중요하게 재배열하십시오. 대형 풍부화 빈의 나머지 부분을 점검하고 필요 시 청소하십시오. 2주마다 한 번씩 오염된 베딩을 퍼내고 새로운 깨끗한 베딩을 깔아줌으로써 수행합니다.주간 사육 관리를 수행할 때, 장난감을 손으로 세척하거나 케이지 세척기를 통해 세척하십시오. 매달 풍부화 장난감과 급이 케이지를 제거하고 베딩을 걷어내어 대부분의 깔짚을 청소하십시오. 깨끗한 깔짚로 교체하여 케이지의 모든 영역에 2 cm의 베딩이 유지되도록 하십시오. 3개월에 한 번 또는 동물 실험 프로토콜에 따라 필요한 경우, 모든 베딩과 장난감을 제거하고 이전과 동일하게 세척하여 풍부화 보관함을 소독하십시오. 하우스 컨트롤 대조군 동물들은 동일한 12시간 명암 주기에 맞추어 사육하십시오.마이크로 격리 케이지의 풍부한 환경에 있는 마우스와 동일하게, 대조군 케이지에도 풍부한 환경과 동일한 옥수수 속대 베딩을 제공하고, 4 cm × 4 cm 크기의 마이스터 메이커(maister maker) 둥지를 추가합니다. 동일한 성별의 마우스 3~5마리를 일반 마우스 케이지에 수용하십시오. 케이지 내에 장난감 튜브나 은신처는 제공하지 마십시오. 케이지가 자동 급수 시스템에 연결되어 있지 않은 경우, 먹이용 와이어 랙과 물통을 케이지에 포함하십시오.동물의 건강 상태를 매일 모니터링하여 먹이와 물이 충분한지 확인하십시오. 케이지, 급여 와이어, 먹이 및 물을 교체하거나 세척하십시오. 일주일에 한 번, 이전과 동일하게 케이지와 와이어 랙을 세척하십시오.생후 3주 된 수컷 마우스들을 종양 피하 접종 5주 전부터 풍요로운 환경 또는 대조군 케이지에서 사육하였으며, 동물당 10⁵ cells를 접종하였습니다. 결과는 접종 17일 후의 B 16 흑색종 종양 무게를 나타냅니다. 각 그룹은 10마리의 동물로 구성되었습니다.별표는 여기에서 students'T-test로 계산된 P-value가 0.05 미만임을 나타냅니다. 3주 된 마우스를 6일 동안 환경 풍요화에 노출시켰습니다. 풍요로운 환경에서의 6일은 후복막 백색 지방 조직의 지방 패드 무게를 감소시켰습니다.이 그래프는 풍요로운 환경에서 6일간 머물렀을 때, 체중 대비 갈색 지방 조직, 표피 백색 지방 조직 및 후복막 백색 지방 조직의 지방 패드 무게가 감소했음을 보여줍니다. 다음 두 그래프는 여기에서 보는 바와 같이 4주 동안 풍요로운 환경에서 사육된 생쥐의 결과를 공유하며, 4주간의 환경 풍요화 결과 갈색 지방 조직을 제외한 모든 지방 유형에서 지방 패드 무게가 감소했습니다. 4주간의 환경 풍요화로 인해 갈색 지방 조직을 제외한 모든 지방 유형에서 체중 대비 지방 패드 무게가 감소했습니다.이 영상을 시청한 후, 항암 및 항비만 효과를 유도하는 풍요로운 환경을 구축하고 마우스에 적용하여 유지하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

내는, 둥지 및 비장은 쥐가 쉽게 실험실에서 수행하는 종 - 전형적인 활동입니다. 이 문서들은 쉽고 저렴하게 평가하는 방법을 설명합니다. 이러한 프로토콜은 마우스 스트레인, 뇌 병변 및 질환에 매우 민감합니다. 또한 그들은 생쥐에 대한 "환경 농축"를 구성하고, "3 RS"18 "다듬 는다"부분을 구현.

평가는 마우스에 둥지 건설, 그리고 비장을내는

이 프로토콜은 성인 마우스의 적응 행동 및 뇌 복구의 기저에 있는 환경적으로 유발된 뇌 변화를 연구하기 위한 두 가지 다른 환경 조작과 동시 뇌 주입 프로토콜을 설명합니다.

성인 마우스의 중간 뇌 도파민 뉴런의 수의 환경 변조

환경 농축 (EE) 생활, 스트레스, 질병 사이 연결의 기반이 되는 메커니즘을 공개 하는 데 사용 되는 동물 주택 환경입니다. 이 프로토콜에서는 콜론 tumorigenesis EE의 마우스 모델을 사용 하 여 특별히 microbiota 생물 다양성 동물 사망률에 영향을 줄 수 있는 변경을 정의 하는 프로시저를 설명 합니다.

마우스 결 장 종양 모델에서 콜론 미생물 생물 다양성에 환경 농축의 효과 정의 하는 방법

이 문서에서는 새로운 마우스 판단 편향 프로토콜에 대한 자세한 설명을 제공합니다. 정서적 상태에 대한이 후각 파기 작업의 민감성에 대한 증거도 입증되고 다양한 연구 분야에서 그 유용성이 논의됩니다.

후각 파기 작업을 통한 마우스 판단 편향 평가

설치류 모델은 자폐 스펙트럼 장애(ASD)와 관련된 핵심 행동을 연구하는 데 유용한 도구입니다. 이 기사에서는 생쥐에서 ASD의 핵심 기능을 모델링하기 위한 두 가지 행동 테스트, 즉 반복적인 행동을 평가하는 셀프 그루밍(self-grooming)과 사회적 장애를 문서화하는 3개의 챔버 사회적 상호 작용 테스트(three-chamber social interaction test)에 대해 설명합니다.

생쥐의 자폐증과 유사한 행동을 평가하기 위한 전략

이 프로토콜은 출생 후 초기에 빈곤한 환경과 예측할 수 없는 산모의 보살핌으로 인한 초기 삶의 역경이 뇌 발달과 정신 장애의 미래 위험에 어떻게 영향을 미치는지 연구하기 위한 동물 모델을 설명합니다.

제한된 침구와 둥지는 생쥐의 초기 삶의 역경에 대한 모델입니다.

여기에서 우리는 가상 현실 환경에서 동작하는 동안 마우스 피질의 두 광자 영상에 포함 된 실험 절차에 대해 설명합니다.

가상 현실 환경을 탐색 마우스의 두 광자 칼슘 이미징

이 프로토콜은 오픈 필드와 전통적인 홀 보드의 특성을 구성하는 동작 테스트 설정인 수정된 홀 보드를 설명합니다. 이 설정을 통해 작은 실험실 포유류의 무조건적인 행동에 대한 차등 분석과 인지 능력의 분석이 가능합니다.

수정 된 구멍 보드 - 마우스 및 쥐의 행동,인지 및 사회적 상호 작용을 측정

이 원고는 일반적으로 사용되는 알츠하이머병의 마우스 모델과 함께 사용하도록 맞춤화된 Morris water maze(MWM) 프로토콜을 설명합니다. MWM은 형질전환 마우스 모델에 널리 사용됩니다. 마우스 모델의 배경 변형률에 민감한 절차의 구현은 그룹 차이를 감지하는 데 필수적입니다.

모리스 물 미로 테스트 : 마우스 스트레인 및 테스트 환경을위한 최적화

현실적인 일상 생활 환경에서 지속적인 활동을 포함하는 WMMS(Wearable Mobility Monitoring System)에 대한 표준화된 평가 방법이 개발되었습니다. 일련의 일상 생활 활동으로 테스트하면 활동 인식 민감도가 감소할 수 있습니다. 따라서 WMMS 성능의 유효한 평가를 위해 현실적인 테스트 회로를 사용하는 것이 좋습니다.

일상 생활 환경에서 스마트 폰 기반의 인간 활동 인식 시스템의 평가

배우세요 마우스 풍부한 환경 설치 및 유지 관리 방법을 통해 대사 건강 개선과 항암 효과를 유도하는 실험 동물 관리 기술을 익히세요.

풍부한 환경에서의 주택 마우스를위한 프로토콜

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