Name: 모든 레이저내피 세포 이식 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: 배우세요 펨토초 레이저를 이용한 최소침습 각막내피 이식술로 환자의 회복 시간을 단축하고 이식편 탈락 위험을 줄이는 방법을 알아보세요.

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저자는 토스카나 지역 (POR CREO FESR 2007-2013, 반도 유니코 R &amp; 2012 S)에 의해 투자 FORTE 프로젝트, 부분적으로 연구 활동을 지원하는 유럽 연합 (EU) FP7 ECHORD ++ 실험 LA-장미, 그리고 부여 된 FP7 BiophotonicPlus 프로젝트 &quot;라이트&quot;감사드립니다 토스카 지역별.

이 연구는 병원 윤리위원회의 전향 적으로 승인 하였다; 동의서를 얻었다. 이 연구는 헬싱키 선언의 원칙을 준수했다. 1. 기증자 내피 준비 <ol><li> 실온에서 지역 안구 은행에 의해 제조 된 기증자의 각막을 사용합니다. </li><li> 수술실에서의 배달 컨테이너에서 기증자의 각막을 당겨 각막 전송에 사용되는 조직의 보존과 영양에 대한 솔루션을 구별. </li><li> 액체가 흘러 변수 압력을 만들 수있는에 인공 전방, 이상 기증자 corneo - 공막 림을 놓고; 조직 유지 헤드와 각막을 커버합니다. </li><li> 각막 보존 및 영양 액체로 가득 주사기에 3 방향 커넥터를 통해 인공 전방 (AAC)를 연결합니다. </li><li> 장소에 안전하게 고정을 유지하기 위해 압축 링을 사용합니다. </li><li> SYR를 사용하여최적 압력 (1.7 참조​​)에 도달 할 때까지 조직 보존 용액으로 전방을 채우 인게은 전방 내 압력을 유지하기에 접속 AAC. 커넥터를 닫습니다. </li><li> 손가락으로 전방 내부의 압력을 테스트합니다. (범위 60 ~ 70 mmHg로에서) 오른쪽 내부 압력에 도달 할 때까지 내부 압력을 변경합니다. 3 방향 커넥터습니다. </li><li> 빛 간섭 Thomography OCT ()와 도너 각막의 두께를 측정한다. 악기 광학 앞에 고정 된 위치에 그 각막과 전방을 유지하고 전체 두께 10월 수집을. </li></ol> 기부자 내피 2. 펨토초 레이저 준비 <ol><li> 펨토초 레이저 장치에서 기증자의 각막의 압평을 수행합니다. 후방 사이드 컷, 전체 층상 및 전방 사이드 컷 : 세 이후의 상처와 기증자의 조직을 잘라 femtosec 레이저를 사용합니다. 세 인하에 대해 다음 매개 변수를 설정합니다.<ol><li> 전체 라멜라 컷 (래스터 패턴, 아웃 시작)의 경우, 항상 95 μm의 감산 (1.8에 기재된 바와 같이 OCT를 사용하여 측정) 공여자 각막의 얇은 포인트에 대응하는 절단 깊이를 설정한다. 범위 (작업 깊이에 따라 다름) 0.8-0.9 μJ의 펄스 에너지를 설정합니다. 8.7 mm의 직경을 설정합니다. 2 μm의 접선 장소의 분리를 설정합니다. 2 μm의 반경 자리 분리를 설정합니다. </li><li> 전방 사이드 컷의 경우, 이전의 전체 라멜라 컷 30 μm의 깊은 후방 깊이를 설정합니다. 2.10 μJ에 펄스 에너지를 설정; 8.6 mm의 직경; 층 분리 동안 3 μm의 3 μm의 자리 분리. </li><li> 후방 사이드 컷의 경우, 후방 측의 전방 깊이가 전체 라멜라 컷보다 전방으로 30 μm의 컷 찾습니다. 900 μm의 후방 깊이를 설정합니다. 2.10 μJ에 펄스 에너지를 설정; 8.3 mm의 직경; 2 μm의 자리 분리; 2 μm의 층 분리. </li></ol></lI&gt; </ol> 3.받는 사람 눈 준비 <ol><li> 수술 환자를 준비합니다. 블레이드를 사전 교정 4.0 mm의 12시 한 4.00 mm의 각막 절개를합니다. 2시에 배치 1.2 mm의 사전 교정 블레이드 하나 윤부 천자를 확인합니다. 30 ° 자상 칼과 6시 방향에서 다른 윤부 천자를 확인합니다. </li><li> 2시 천자를 통해, 환자의 전방에 전방 메인테이너를 삽입합니다. </li><li> 전용 후크 한 8.2 mm 직경의 원형 descemetorexis을 수행합니다. </li><li> 후방 기질에서 데스 메 막을와 내피를 벗겨과 데스 메 후크와 조직을 제거합니다. </li></ol> 4. 발색단 준비 <ol><li> 1.5 ml의 microcentrifuge 관에서 인도 사이 아닌 그린 분말 1 mg을 넣어. </li><li> 멸균 9 mg을 추가 (ICG 수용액은 W / W 10 %). </li><li> 수동 금속 교반기 ICG 가루와 물을 혼합한다. </lI&gt; </ol> 기부자 내피 5. 염색 <ol><li> 분사 장치 표면과 접촉하는 내부면이 되네요 인젝터의 넓은 부분에 도너 내피을 넣어. </li><li> 주걱을 사용하여, 그 주변 부분에, 발색 용액 도너 내피의 내측 얼룩. 제대로 스테인드 조직은 균일 한 녹색 색상을 가지고있다. 단계 5.3을 시작하기 전에 3 분을 기다립니다. </li><li> 되네요 - 인젝터의 앞쪽 부분에 기증자의 내피 세포를 당겨, 압연. </li></ol> 6. 기증자 내피 삽입 <ol><li> 잡고 내피 lenticule에 대한 외상성 동축 집게를 사용하여 접힌 기증자의 내피 세포를 삽입합니다. </li><li> 전방 메인테이너를 제거합니다. </li><li> 각막 절개와 나일론 10.0 단일 스티치와 천자 (3.1 단계에서 수행)를 봉합. </li><li> 공여 조직을 전개하고 수신자 각막에 대해 그것을 누르는 기포 주입한다. 공기 방울 미리보기 다운로드합니다letely 전방 공간을 채우기. </li></ol> 7. 레이저 용접 <ol><li> 후크 또는 주걱으로 각막의 외부로부터 공기 기포 이동 내부로부터, 수신자 각막의 중앙에 도너 lenticule 배치. </li><li> 개구 수 (NA) 0.22과 같이 300 μm의 코어 직경 멸균 광섬유 갖춘 810 nm에서 발광 다이오드 레이저를 사용한다. </li><li> 안구 외측 섬유 팁을 유지하고, 투명한 각막 조직을 통해 염색 내피 향해 레이저 광을 전달한다. 광섬유 팁은 비접촉 구성이다. </li><li> 단일 지점 방출 모드, 70 ~ 80 밀리 초 펄스 폭, 펄스 당 35 ~ 40 엠제이 : 레이저에 대해 다음 설정을 사용합니다. 그는 느가에 빔을 목표로합니다. </li><li> 기증자 내피 세포의 염색 주변에 하나의 레이저 스팟을 제공합니다. 순차적으로 스폿 배달 : 최종 형태는 도너 lenticule의 주위에 스폿의 링이다. 두 adja 사이의 거리센트 명소 센터 스폿 직경의 두 배입니다. </li><li> 토 브라 마이신 0.3 % 및 0.1 % 덱사메타손 안과 현탁액과 함께, 환자의 눈에 콘택트 렌즈를 적용. </li></ol>

<ol><li>Tan, D. T., Dart, J. K., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Corneal transplantation.</a> Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li>
<li>El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Ther%22%5BJournal%5D)">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmol Ther. , (2014).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+tissue+welding+in+ophthalmic+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Laser tissue welding in ophthalmic surgery.</a> J Biophotonics. 1 (4), 331-342 (2008).</li>
<li>Pini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+femtosecond+laser+ablation+and+diode+laser+welding+in+lamellar+and+endothelial+corneal+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XVIII%22%5BJournal%5D)">Combining femtosecond laser ablation and diode laser welding in lamellar and endothelial corneal transplants.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XVIII. 6 (844), 684411-1-684411-7 (2008).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All-laser%27+endothelial+corneal+transplant+in+human+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XXII%22%5BJournal%5D)">All-laser' endothelial corneal transplant in human patients.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XXII. 8209, 82091O-1-82091O-3 (2012).</li>
<li>Rossi, F., Pini, R., Menabuoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+model+analysis+on+the+temperature+dynamics+during+diode+laser+welding+of+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Experimental and model analysis on the temperature dynamics during diode laser welding of the cornea.</a> J Biomed Opt. 12 (1), 014031-1-014031-7 (2007).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+corneal+welding+in+cataract+surgery%3A+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted corneal welding in cataract surgery: retrospective study.</a> J Cataract Refract Surg. 33 (9), 1608-1612 (2007).</li>
<li>Buzzonetti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+Welding+in+Penetrating+Keratoplasty+and+Cataract+Surgery+in+Pediatric+Patients.+Early+Results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser Welding in Penetrating Keratoplasty and Cataract Surgery in Pediatric Patients. Early Results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (12), 1829-1834 (2013).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27anvil%27+profile+in+femtosecond+laser-assistedpenetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The 'anvil' profile in femtosecond laser-assistedpenetrating keratoplasty.</a> Acta Ophthalmol. 91 (6), e494-e495 (2013).</li>
<li>Canovetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+penetrating+keratoplasty%3A+one+year%E2%80%99s+results+in+patients%2C+using+a+laser-welded+%E2%80%9Canvil%E2%80%9D-profiled+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted penetrating keratoplasty: one year’s results in patients, using a laser-welded “anvil”-profiled graft.</a> Am J Ophthalmol. 158 (4), 664-670 (2014).</li>
</ol>

저자는 경쟁하는 금전적 이해관계가 없음을 선언합니다.

&quot;모든 레이저&quot;내피 이식은 원래의 접근 최소 침습 각막 이식하는 것입니다. 프로토콜 내에서 설명하는 모든 절차는 멸균 장갑, 가운, 마스크와 모자의 사용으로 수술하는 동안 일반적인 관행이다 위생과 살균 과정을 관찰, 수술 실에서 실시 하였다. ICG 용액은 곧 도너 내피 염색에서의 도장 전에, 수술실에서 제조 하였다. ICG 분말, 물 및 염색 용액을 제조하는 데 사용되는 모든 도구는 멸균 및 인체에 사용하기위한 상업적으로 입수 하였다. 레이저 광섬유는 살균하고 수술 현미경에 사용할 수 있도록, 특정 핸드 피스에 장착 하였다. 제안 된 접근법에서, 수술 중의 OCT 사용 도너 조직 두께의 정확한 측정을 제공한다. 이 정보를 사용하는 DESIGN 개인화 컷 프로필 원하는 감소 도너 lenticule 두께, 펨토초 레이저를 이용하여 공여 조직을 절단한다. 레이저 용접 절차에 따라서받는 침대 도너 lenticul...

본 연구에서 우리는 공여 조직 및 수신자 베드 상을 용접 근적외선 레이저 다이오드를 제조하는 펨토초 레이저의 사용을 기반 각막 내피에 원래 방식을 제시한다. 공여자 각막의 수술 측정 올바르게 공여 조직 치수를 설계하는 것이 필요하다. 각막 내피는 내피 1,2- 질병 치료에 각막을 교체하는 최근에 제안되었다. 이 기술의 가장 큰 장점은 수술, 이식 거부의 감소 위험과 눈의 무결성을 보존하는 동안 각막 감소 마취를 관통에 대하여, 빠른 시력 회복이다. 주요 위험 인자는 수술 후 기증자 lenticule 탈구이다. 표준 기법이 기포 주입에 의해 유지되는 최종 위치에 도너 내피를 삽입함으로써 수행된다 : 어떤 봉합사 때문에, 생 물리적 및 기계적 치수 체인지의 사용되지내피 세포의 cteristics. 또한, 시력 회복으로 인해 이식 두꺼운 조직에 주로 있기 때문에 기증자와받는 사람의 조직 사이의 불일치 제한 할 수 있습니다. 여기에서 우리는 이러한 주요 문제를 극복 할 수있는 내피 각막 이식술을 수행의 절차를 제시한다. 도너 내피는 레이저 용접 기술을 사용함으로써 최종 위치에 확보 할 수있다. 이 제어 및 지역화 광열 과정이다 : 그것은 기증자 /받는 사람 인터페이스에서 유도 될 수있다. 그것은 지난 10 년 동안 공부하고 각막과 내피 3-5의 이식에 제안되었다. 근적외선 (파장 810 ㎚) 저전력 레이저 다이오드에 의해 방출은 상처 부위에서 생체 조직을 향해 전달된다. 각막이 파장에 자연적으로 투명하다 : 레이저 광을 흡수하여이 조직을 만들기 위해서는, 발색단 그것을 염색하는 것이 필요하다. 제안 된 염료이다 멸균 포화인도 사이 아닌 그린 (ICG)의 D 수용액. 우리는 각막 조직이 제대로이 ICG 제제로 염색 할 때, 810 nm의 6에서 흡수 피크를 나타내고 있음을 보여 주었다. 또한, ICG 널리 임상 진단에 사용되며 안전성은 이미 인간의 과목에서 입증되었다. 각막 염색은 다이오드 레이저 광 에너지를 흡수하여 생성 된 주요 효과는 용접 부위의 온도 상승을 제어한다. 아니 열 효과는 흠없는 조직에서 유도되지 않습니다. 온도의 향상은 냉각시 상처 벽 즉각적인 closuring와, 간질 콜라겐 가역적 열 변성을 유도한다. 이 레이저 용착 효과 첫째 백내장 및 각막 7,8 9,10 관통에서 입증되었다. 우리는이 논문에서 제시되는 최적화 방법은 각막 내피 세포의 응용 프로그램에 대한 연구되고있다. 제안 된 수술에서, 하나의 레이저 반점 (밀리의 지속 수십) ARE는 스폿 사이즈 (직경 ㎛의 수백) 내에 국부적 광열 효과를 초래 조직에 전달 : 유도 효과는 도너 / 호스트 인터페이스에 국한 콜라겐 광응고술 이루어진 하드 레이저 용접이다. 용접 부위 콜라겐 변성의 결과는 표준 기술에 따라서 (바늘)을 얻을 수 없다 봉합 효과를 제공하고, 도너와 호스트 조직 사이에 강한 접착력이다. 조직은 짧은 후속 (1 개월)에 그의 천연 거리는은 도너 및 / 숙주 조직과의 밀착성은 치료상의 초기 단계에 설치된 용접에 의해 향상된다. 두꺼운 공여 조직 이식 즉 내피 각막의 다른 주요 위험을 피하기 위해, intrasurgical 광 간섭 단층 OCT ()이 사용되어 정확한 절단 프로파일이 설계 될 수 있도록 상업 디바이스, 도너 각막의 두께를 측정femtosec 레이저. 제안 된 &quot;모든 레이저&quot;내피 이식 따라서이 최소 침습 수술의 임상 결과를 개선하는 것 같다.

<table><tbody><tr><td>Indocyanine Green</td><td>Pulsion Medical Systems, 독일</td><td>ICG-PULSION (http://www.pulsion.com/international-english/perfusion/icg-pulsion/)</td><td>대체 제품: IC-GREEN, Akorn&nbsp; Inc., Lake Forest, Illinois- US (http://www.icginjection.com/)</td></tr><tr><td>Femtosecond Laser&nbsp;</td><td>애보트 메디컬 옵틱스,&nbsp; Abbott Laboratories Inc. 미국 일리노이주 애보트 파크</td><td>iFS150 (http://www.abbottmedicaloptics.com/products/refractive/ilasik/ifs-advanced-femtosecond-laser)</td><td></td></tr><tr><td>Optical Coherence Tomography (OCT)</td><td>Carl-Zeiss Meditec, Dublin, California- US (http://www.zeiss.com/meditec/en_de/home.html)</td><td>Visante</td><td></td></tr><tr><td>Diode Laser</td><td>E.l.En. Group s.pa., Calenzano-FI, 이탈리아 (http://www.elengroup.com/en/divisions/medical)</td><td>Mod. WELD 800</td><td></td></tr><tr><td>인공 전방 챔버</td><td>코로넷, 각막 이식 제품. Network Medical Products Ltd. Coronet House, Kearsley Road, Ripon, North Yorkshire, HG4 2SG, 영국</td><td>크고 작은 조직 유지 헤드가 있는 인공 전방 챔버(A.A.C.). Code 51-935 (http://www.networkmedical.co.uk/ophthalmic_artificial_ anterior_chamber.html)</td><td></td></tr><tr><td>조직 보존 및 영양 솔루션&nbsp; &nbsp;</td><td>알. CHI.MI.A. Srl, Viale Austria 14, 35020 - Ponte S. Nicol&ograve; - PD &nbsp; 이탈리아</td> 각<td>막 제거용 Carry-C 배지 - 실온 운송 - 12 x 50 ml (http://www.alchimiasrl.com/en/organ-culture-at-31&deg;-c-eb/carry-c-eb)</td><td></td></tr></tbody></table>

&quot;모든 레이저&quot;내피 세포 이식

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

"전체 레이저" 보조 내피 각막 성형술은 기증자 조직을 의도한 깊이로 절단하는 데 사용되는 펨토초 레이저와 각막 조직을 용접하기 위해 근적외선 다이오드 레이저로 수행되는 절차입니다. 제안된 기술은 내피 각막 성형술의 세 가지 주요 목표를 달성할 수 있게 해줍니다: 기증자 조직의 두께를 정밀하게 조절하는 것; 수혜자 침대에 쉽게 삽입할 수 있으며 기증자 렌티큘 탈구의 위험이 줄어듭니다. 기증자 각막 두께는 기증자 조직 치수를 올바르게 설계하기 위해 광간섭 단층촬영(OCT)으로 수술실에서 측정됩니다. 펨토초 레이저는 기증자의 각막을 절단하는 데 사용됩니다. 수용자 눈은 descemetic membrane을 수동으로 벗겨내어 준비합니다. 공여체 내피를 부신 주사기에 삽입하고, 주변 내부를 적절한 발색단(Indocyanine Green의 수용액)으로 염색한 다음 전방으로 끌어당깁니다. 이식된 조직을 최종적이고 정확한 위치에 배치한 다음 안구 외부에서 다이오드 레이저 용접을 유도합니다. 이 시술은 15명 이상의 환자에게 시행되었으며, 시력이 양호하게 회복되고 기증자 렌티큘 탈구 사건이 감소하는 등 수술 성능이 개선되었음을 입증했습니다.

&quot;모든 레이저&quot;수술은 최소 침습 각막 이식을 수행하기 위해 제안된다. 대하여 표준 내피 이식, 각막 두께 측정 공여 조직을 염색 첨가 레이저 광 전달의 단계들 : 절차 (도 1 참조)을 수행하기 쉽다. 달성 이점은 주로 몇 분의 증가 수술 시간을 보상한다. 공여자 각막 두께와 도너 lenticule 치수를 지정하는 데 사용 펨토초 레이저를 측정하기 위해 수술 중의 OCT 사용 도너 / 호스트 인터페이스의 밀착성을 개선하는 것이 가능하다 (도 2 참조). 이렇게함으로써, 수술이 필요하고 단일 환자의 형태 학적 특성은 다음 설계된다. 레이저 용접 과정은 도너 / 호스트 인터페이스 (4)의 폐쇄를 즉시 제공한다. 표준 기술에서는, O 때문에, 어떤 방식 으로든 공여 조직을 봉합 할 수 없다그것의 생체 역학적 특성과 위치 F. 일반적인 수술 위험 도너 lenticule 전위이다. 우리의 경험에 의하면, 기증자 내피 탈구는 15 치료를받은...

내피 이식에서는 모든 레이저 시술이 제안됩니다. 이 수술 기법은 펨토초 레이저를 사용하여 기증자 조직을 준비하는 것을 기반으로 합니다. 그런 다음 레이저 용접 기술을 사용하여 기증자 내피를 올바른 위치에 고정합니다.

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

이 절차의 전반적인 목표는 얇은 각막 이식을 위해 완전 레이저, 최소 침습 수술을 수행하는 것입니다. 이것은 먼저 기증자의 각막을 측정하고 Femto 두 번째 레이저로 절단하여 수행됩니다. 다음으로 수혜자의 각막층을 절개하고 기증자 조직을 준비하기 위해 desme membrane과 endothelium을 제거합니다.그런 다음 기증자 플랩을 염색하고 최종 위치에 삽입합니다. 마지막으로, 기증자가 빌려준 각막은 수혜자 각막에 레이저 용접됩니다. 궁극적으로 기증자의 내피 유착은 수술 후 하루 만에 볼 수 있습니다.표준과 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 개선 사항은 레이저를 휘두르면 수술 후 플랩 탈구 위험이 줄어든다는 것입니다. 이 기술의 의미는 레이저 용접 절차의 적용이 신경외과 및 이비인후과에서도 연구되었기 때문에 각막 이식 수술로 확장됩니다. 일반적으로 이 방법을 처음 사용하는 사람들은 수행하기가 매우 쉽기 때문에 어려움을 겪지 않을 것입니다.수술실에서 시작하려면 실온의 전달 용기에서 기증자 각막을 제거하고 각막 수송 용액을 따로 보관합니다. 인공 전방(anterior chamber) 또는 a a C를 3방향 커넥터를 통해 각막 보존 및 영양으로 채워진 주사기에 연결합니다. 액체. 액체가 흘러 들어가 다양한 압력을 생성할 수 있는 인공 챔버 위에 기증자 각막 공막 테두리를 놓습니다.그런 다음 조직을 유지하여 머리를 덮고 각막을 덮습니다. 그런 다음 압축 링을 사용하여 리테이너를 제자리에 단단히 고정합니다. 다음으로, 주사기를 A-A-C에 연결한 상태에서 실내압을 유지하기 위해 조직 보존 용액을 사용하여 최적의 압력에 도달할 때까지 전방을 채웁니다.그런 다음 손가락을 사용하여 3방향 커넥터를 닫습니다. 전방(anterior chamber) 내부의 압력을 테스트하고 올바른 내부 압력에 도달할 때까지 압력을 조정하십시오. 기증자 각막의 두께를 측정하려면 각막이 고정된 위치에 있고 광간섭 단층촬영(Optical Coherence Tomography, OCT)으로 전방(anterior chamber)을 유지하십시오.기증자 조직을 절단하기 위해 전체 두께 OCT 측정을 수행합니다 앱 설명 후 기증자 각막의 가장 얇은 지점에 해당하는 절단 깊이에서 95미크론을 뺀 값으로 설정하여 전체 램 또는 절단으로 시작합니다. 펄스 에너지를 0.8에서 0.9 마이크로 줄 범위로 설정합니다. 지름을 8.7mm로 설정합니다.접선 스폿 간격을 2마이크로미터로 설정하고, 방사형 스폿 간격을 앞쪽이 절단되는 2마이크로미터로 설정합니다. 이전 전체 층보다 30마이크로미터 더 깊은 후방 깊이를 설정합니다. 삭감. 펄스 에너지를 2.10마이크로줄로 설정하고 뒤쪽의 직경을 8.6mm로 설정합니다. 삭감.뒤쪽의 앞쪽 깊이를 찾아 전체 램 또는 컷까지 전방으로 30마이크로미터를 자릅니다. 후방 깊이를 900마이크로미터로 설정합니다. 펄스 에너지를 2.10마이크로줄로 설정합니다.직경은 8.3mm, 스폿 분리는 2마이크로미터, 층 분리는 2마이크로미터입니다. 그런 다음 1.2mm 사전 보정된 칼날로 환자가 수술을 준비할 수 있도록 절단합니다. 2시 방향에서 2시 방향의 천자를 통해 윤부 천자를 만듭니다.환자의 전방에 전방 챔버 유지 장치를 삽입합니다. 그런 다음 30도 찌르는 칼을 사용합니다. 6시 방향에 두 번째 변연계 천자를 만듭니다.2.0mm 사전 보정된 칼날을 사용하여 2.00시 방향에 12개의 각막 절개를 만듭니다. 그런 다음 전용 후크를 사용하여 8.2mm 직경의 원형 desme 또는 축을 수행합니다. 후방 기질에서 desme membrane과 endothelium을 제거하고 desme hook을 사용하여 조직을 제거합니다.기증자 조직을 염색하기 위해 발색단을 준비하려면 1.5ml 마이크로 원심분리 튜브에 인도시아닌 그린 또는 ICG 분말 1mg을 추가합니다. 그런 다음 금속 교반기로 9mg의 멸균수를 추가합니다. ICG 용액을 수동으로 혼합하여 분말을 현탁시킵니다.기증자 내피를 남용 및 주사기의 더 넓은 부분에 안쪽이 주사기 표면과 접촉하도록 놓습니다. 주걱을 사용하여 공여자 내피의 안쪽에 염색체 4 용액을 첨가하여 균일한 녹색으로 염색합니다. 3분 정도 기다린 후 내피를 굴려 부신 인젝터의 전방에 삽입합니다.무외상성 동축 겸자를 사용하여 접힌 기증자 내피를 잡고 단일 10.0 나일론 스티치로 삽입합니다. 각막 절개 부위와 천자 봉합. 전방(anterior chamber) 공간을 완전히 채우는 기포를 주입하여 기증자 조직을 펼치고 수혜자 각막에 대고 누릅니다.그런 다음 후크를 사용하거나 주걱을 사용하여 외부에서 기포를 이동시켜 내부에서 전방 챔버 유지 장치를 제거합니다. 기증자 렌티를 수혜자 각막 중앙에 놓습니다. 레이저에 대해 여기에 나열된 설정을 사용하여 300마이크로미터 코어 직경, 멸균 광섬유 및 0.22 개구수를 갖춘 810나노미터에서 방출되는 DDE 레이저를 설정하고 광섬유를 안구 외부에 유지하고 비접촉 구성을 순차적으로 유지하면서 투명한 각막 조직을 통해 염색된 내피 주변을 따라 단일 레이저 스폿을 전달합니다.마지막 측면은 기증자 렌티의 주변부에 있는 반점의 고리입니다. 인접한 두 스폿의 중심 사이의 거리는 스폿 지름의 두 배입니다. 레이저 용접이 완료되면 환자의 눈에 0.3%토브라마이신과 0.1%덱사메타손 안과 현탁액을 도포합니다.그런 다음 콘택트 렌즈를 착용하십시오. 이 모든 레이저 수술 절차는 표준 내피 이식과 관련하여 최소 침습적 각막 이식을 수행합니다. 각막 두께를 측정하고, 기증자 조직을 염색하고, 레이저 광을 전달하는 단계만 추가됩니다.달성된 이점은 몇 분의 증가된 수술 시간을 크게 보상합니다. 기증자 각막 두께를 측정하기 위해 수술 중 OCT를 사용하고 기증자 렌티큘 치수를 맞춤화하는 데 사용되는 펨토초 레이저를 사용하면 여기에 표시된 것처럼 기증자 각막 두께 측정을 수행하지 않는 것에 비해 기증자 호스트 인터페이스 접착력을 개선할 수 있으며, 이로 인해 주변부의 접착력이 저하됩니다. 이 과정에서 수술은 개별 환자의 필요와 형태학적 특성에 따라 설계됩니다.표준 기술에서는 생체 역학적 특성과 위치 때문에 어떤 식으로든 기증자 조직을 봉합할 수 없습니다. 그러나 레이저 용접 절차는 공여체 수용자 계면의 외경을 덮는 완전한 반점 고리를 제공하고 계면을 즉시 닫을 수 있습니다. 수술 후 하루 뒤, 부분적으로 용접된 내피는 용접 부위를 제외하고는 기증자의 후구 탈구를 보여줍니다.이 절차에 따라, 전치막 귀 성형술과 같은 다른 방법을 수행하여 개발 후 표준 소송의 사용을 피하는 방법과 같은 추가 질문을 할 수 있습니다. 이 기술은 미세수술 분야의 연구자들이 뇌 수술의 종단 간 문합과 같이 접근하기 어려운 부위인 얇은 조직의 봉합을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 수술 후 선형 변위의 위험이 낮은 내피 각막 성형술을 수행하는 방법에 대해 잘 알게 될 것입니다.이 문제는 환자의 좋은 만족으로 수혜자를 고수하는 매우 얇은 linical을 제공합니다.

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연구

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Medicine

의학

이 비디오는 돼지 눈의 각막 내피 세포를 선택적으로 손상시키는 비침습적 레이저 보조 절차를 보여줍니다. 개발된 내피 세포 손상 생체 외 모델은 각막 내피 질환을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.

돼지 각막 내피 세포의 레이저 보조 선택적 절제: 생체 외 연구를 위한 집속 돼지 각막 내피 손상을 유도하는 기술

혈관 복합 Allotransplantations (VCA)는 임상 현실이되었다. 그러나, VCA의 다양한 임상 적 적용은 만성 다중 약물의 면역 억제로 제한됩니다. 저자는 최소화하거나 잠재적 VCA에서 면역 억제의 필요성을 제거 할 수 신규 면역 전략을 번역하는 신뢰성 있고 재현 가능한 대형 동물 모델을 제시한다.

번역 상 혈관을 조성한 복합 동종 이식 (VCA) 연구를위한 수정 된 이소성 돼지 뒷다리 이식 모델

보조 간 이식은 실패 간 재생 될 때까지, 급성 간부전에 임시 지원을 제공합니다. 포털 정맥 arterialization (PVA)와 이소성 보조 간 이식 (HALT)는 충분한 간 기능을 렌더링합니다. 우리는 이식의 형태와 기능에 대한 포털 정맥 arterialization의 영향을 조사하기 위해, 쥐에서 유사한 기술을 개발했다.

이소성 보조 쥐 간 이식 급성 간 장애에 포털 정맥 Arterialization를 유량 조절

일부 환자에 대 한 다 산 보존에 대 한 유일한 옵션은 난소 직물의 cryopreservation. 불행히도, 지연된 revascularization follicular 생존을 위태롭게합니다. 여기, 우리는 공동 bioactive 분자의 직접 paracrine 배달 가속 결합 세포 기반 전략으로 활용 관류에 대 한 내 피 세포와 인간 난소 조직을 이식 하는 프로토콜을 제시.

공동 설계 된 내 피 세포와 인간 난소 조직 이식: 세포 기반 전략 결합 가속 직접 Paracrine 배달 관류

Descemet's Stripping Only는 Fuchs 내피 각막 이영양증으로 인한 중앙 각막 굿태를 가진 환자가 말초 세포가 내피층을 재생시키기 위해 Descemet의 막을 벗겨내는 실험 절차입니다. 우리는 eFGF1 (NM141)에 의해 자극된 가속화된 치유와 함께 영양 장애 인간 각막 생체외 에서 DSO를 시뮬레이션하는 새로운 방법론을 제시한다.

조작된 섬유아세포 성장 인자 1에 의해 자극된 가속화된 치유를 통해서만 Descemet의 스트리핑의 인간 각막 배양 모델

여기에서는 쥐 눈의 전방에 생착된 간 스페로이드의 비침습적 in vivo 이미징을 허용하는 플랫폼에 대해 설명합니다. 워크플로우는 일차 간 세포에서 스페로이드를 생성하는 것부터 마우스 눈에 이식하고 컨포칼 현미경을 통해 세포 해상도로 생체 내 이미징을 수행하는 것까지 다양합니다.

쥐 눈의 전방에 생착된 간 회전 타원체의 In vivo 이미징

이 프로토콜은 이식 거부 반응에 대한 약물 개입의 시간 경과 평가를 위해 회장루를 사용한 쥐 기반 장 이식 모델을 설명합니다.

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이 논문은 혈관 줄기세포를 대동맥 혈관 벽으로 정밀하게 초음파 유도하여 전달하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 이 기술은 혈관 벽을 효과적으로 표적으로 삼고 대동맥류 및 박리에서 혈관 복구를 촉진합니다.

대동맥 질환의 혈관 복구를 위한 정밀 초음파 유도 줄기세포 전달

우리는 이종 소성 후다리에서 목으로의 혈관 형성 종합 동체이식 마우스 모델을 제시합니다. 이 초미세수술 프로토콜은 0.3-0.5mm 혈관 문합을 포함하며, 나일론 필라멘트 유도와 정맥 커핑을 통합합니다. 이 연구는 관성 합성 동체 이식에서 내성, 허혈-재관류 손상, 면역학적 기전에 관한 번역 연구를 위한 신뢰할 수 있는 기반을 제공합니다.

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기증자 세포 engraftment을 결정하는 것은 잘 정의 phenotypical 마커를 부족 마우스 골수 이식 모델에서 도전을 선물한다. 우리는 여성 이식받는 마우스의 남성 기증자 세포 engraftment을 수량화하는 방법을 설명했다. 이 방법은 HSC 기능의 연구에 대한 모든 마우스 변종에 사용할 수 있습니다.

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"모든 레이저"내피 세포 이식

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