과도 대뇌 저산소증 - 허혈을 기반으로 혈전 성 뇌졸중 모델

이 절차의 전반적인 목표는 안정적인 뇌경색에 대한 간단한 혈전성 뇌졸중 모델을 확립하고 조직 플라스미노겐, 활성제 또는 TPA 요법의 보호 효과를 평가하는 것입니다. 첫째, 일과성 대뇌 저산소증 허혈 또는 THI의 유도는 우측 총경동맥 또는 RCCA의 이중 결찰과 혈전증 유도를 위한 저산소 상태에 결찰된 동물의 노출을 통해 입증됩니다. 30분간의 저산소 상태가 끝나면 경동맥의 두 매듭이 풀립니다.

마지막 단계에서는 TPA 요법의 효과에 대한 투여 및 평가를 보여줍니다. 또는 뇌 혈류, 혈전증의 형성 및 혈관 폐색의 정도를 실시간으로 기록하여 조사할 수 있습니다. 이 마스터는 성인 마우스에 혈전성 뇌졸중을 도입하고 자체 응고 시스템을 사용하여 휴식을 취할 수 있습니다.

우리는 이 마스터를 사용하여 가설 허혈 상태에서 뇌가 자신의 혈류를 어떻게 조절하는지 연구하고 싶습니다. 또한 혈전 요법을 개선할 수 있는 방법을 연구하는 데 사용하십시오. 뇌 감염 중에는 적절한 체온과 부드러운 호흡을 유지하기 어려울 수 있으므로 이 방법을 시각적으로 시연하는 것이 중요합니다.

유도 단계: 절차를 시작하기 최소 15분 전. 수술 침대를 보온 패드에 놓고 섭씨 37도로 설정한 다음 3mm 주사기 배럴로 만든 넥 롤을 침대에 놓습니다. 산소 7.5%와 질소 92.5%의 균형을 이루는 2%의 불소를 전달하도록 저산소증 시스템을 설정하고 온도 조절기를 조정합니다.

10-13 주, 22-30 그램 수컷, C 57 검은 6 마리의 마우스를 수술 침대에 놓습니다. 발가락 꼬집으로 마취를 확인한 후 동물의 눈에 연고를 바릅니다. 목을 따라 네 개의 팔다리를 펴고 굴려 의료용 테이프로 고정합니다.

그런 다음 제모 크림을 사용하여 동물의 목에 있는 털을 제거하고 수술 부위를 청소합니다. 이제 해부 현미경으로 수술 침대를 옮기고 정중선을 따라 피부를 0.5cm 오른쪽 경추 절개합니다. 한 쌍의 가는 집게를 사용하여 기관과 근육을 분리하여 오른쪽 총경동맥을 노출시키고 동맥 아래에 미리 절단된 5개의 실크 봉합사 2개를 놓습니다.

RCCA에서 두 개의 미리 절단된 이형 가능한 5개의 실크 봉합사가 아닌 살아있는 미주신경에서 경동맥을 분리하도록 주의하십시오. 그런 다음 4개의 oh 나일론 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 피부를 닫고 마우스를 저산소증 시스템으로 빠르게 옮깁니다. 동물의 코와 입에 안면 마스크를 대고 직장 프로브를 사용하여 저산소증 분만 내내 섭씨 37.5도의 체온이 유지되도록 합니다.

열 l을 조정하십시오.amps 30분 후. 마우스를 다시 수술 침대로 옮기고 두 개의 봉합사를 풀어줍니다. 그런 다음 조직 접착제로 상처를 봉합하고 쥐를 우리로 되돌려 완전히 회복 될 때까지 동물을 모니터링합니다.

또는 레이저 스페클 콘트라스트 이미징을 사용하여 저산소증 허혈 중 및 후의 대뇌 혈류를 검사할 수 있습니다. 동물을 엎드린 자세로 놓습니다. 다음으로 1cm 길이의 정중선 절개로 두피를 열어 두개골을 노출시키되 두개골은 열지 않습니다.

그런 다음 즉시 동물을 혈류 영상 장치로 옮기고 뇌 혈류를 기록하기 시작합니다. 선택한 영역을 실시간으로 분석하기 위해 더 많은 FLPI 소프트웨어를 사용하여 제조업체의 지침에 따라 뇌 혈류 이미지를 봅니다. TPA 요법의 효과를 평가하기 위해 일시적인 편측 경동맥 폐색 및 저산소증 후 적절한 시간에 꼬리 정맥에 동물을 정맥 주사합니다.

그런 다음 일과성 대뇌 저산소성 허혈 후 24시간 후에 생체 내 TTC로 경색 부피를 정량화합니다. 다음날 비브람을 사용하여 1mm 두께의 절편을 얻습니다. 마지막으로, 디지털 현미경으로 일련의 4개 절개 뇌 이미지를 얻고 적절한 이미징 소프트웨어를 사용하여 손상되지 않은 반대쪽 반구 영역에 대한 흰색 경색 영역의 비율로 경색 부피를 정량화합니다.

이 절차와는 별개로, 다른 혈전용해술 방법을 사용하여 그 효과와 임상적 잠재력을 평가할 수 있습니다. 이 기술은 허혈성 뇌졸중 분야의 연구자들이 뇌의 혈전용해 요법을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다.