Name: 마우스의 심장 수축력의 조사에 대 한 격리 유두 근육의 수축력 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-09-17T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 22 s
Description: 학습하세요 마우스 좌심실 유두근을 분리하여 심장 수축력을 측정하는 방법을. 심장 절제 후 카디오플레지아 용액 처리, 전기 자극을 통한 수축력 기록으로 생리학적 및 병리학적 조건의 영향을 평가합니다.

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이 작품은 독일 연구 협회 (KFO 196 &quot;Signaltransduktion BEI adaptativen 싶게 maladaptiven kardialen 리모델링-Prozessen&quot;, 1638 / 1-2 FR)에 의해 심장 혈관 연구, 건강 연구의 독일 센터의 일부에 대한 DZHK (독일 센터에 의해 지원되었다 , BMBF (교육 및 연구 독일 정부) 이니셔티브)이다.

주 : 분리 과정의 기본 단계는도 1에 도시 된 모든 단계가 다음 프로토콜에서 상세히 설명된다.. 유두근 분리, 기관 목욕 챔버에 장착, 수집 및 분석은 연속적인 의무 시간 척도에서 수행된다. 모든 동물 실험은 동물의 보호에 관한 독일 법률에 따라 수행하고, 하이델베르크 대학의 윤리 심사위원회에 의해 승인되었다. 계측 1. 준비 <ol><li> 수축력을 위해 측정은 다중 챔버 기관 목욕 설정을 사용합니다. 생체 수축력 기관 목욕 설정의 구성 요소는 그림 2에 표시됩니다. 참고 : 유두근의 준비 및 실험 프로토콜의 시작 사이의 시간 설정, 장비를 최소화하고 실험 tissue.This를 수집 제공하기로 버퍼를 사전 준비하려면조직 실험을 실시 가능한 남아있는 시간의 양을 최대 ES. </li><li> 컴퓨터와 데이터 수집 장비를 시작합니다. 장기 목욕 열 (사전에 32 ° C)의 전원을 켜고 설정 온도에 단위를 할 수 있습니다. </li><li> 수집 장비를 준비합니다. 소프트웨어 설명서에 언급 된 데이터를 기록 시작합니다. </li><li> 확인하고 각 채널 (필요한 경우) 캘리브레이션을 수행하고 인증 된 중량에 의해 공급 -2- g 력 (즉, 채널과 관련된) 각각의 힘 센서로부터 공급 된 전기 신호를 표준화하는 모든 채널을 제로. </li><li> 장기 목욕 챔버에 가스 공급 (95 %, O2 / 5 % CO 2)를 켭니다. 지속적으로 전체 프로토콜 측정하는 동안 모든 실 가스. </li></ol> 버퍼 및 생리 솔루션 2. 준비 <ol><li> 119 mM의 NaCl을 최종 농도를 달성하기-Henseleit 크렙스 완충액을 제조; 25 밀리미터의 NaHCO3; 4.6 밀리미터의 KCl; 11MM 혈당; 1 mM의 나-Pyruvate; 1.5 mM의 염화칼슘 (2); 1.64 mm의 4 황산; 1.18 mM의 KH 2 PO 4 (표 1 생리 솔루션을 참조) 7.4으로 산도를 조정합니다. </li><li> 추가 30MM 2,3- 부탄 monoxime (BDM) 50 IE 헤파린 / ml의 단계 2.1에 설명 된대로 분리시 사용하는 별도의 크렙스 - Henseleit 버퍼 ​​솔루션을 준비합니다. 4 ° C를 (표 1 제조 솔루션을 참조) 쿨 솔루션입니다. 표 1에 기재된 시뮬레이션 허혈, 허혈 용액을 제조 하였다. </li><li> 칼슘 +의 프로토콜 용 - 의존 수축력 요청 최종 농도 크렙스 - Henseleit 완충 용액에 칼슘을 추가합니다. 참고 : 직접 사용하기 전에이 솔루션을 준비하고 Calciumcarbonate의 침전을 방지하기 위해 carbogen와 GASS. 사용하기 전에 32 ° C에 Prewarm 솔루션입니다. </li></ol> 유두 절제술 절차를 수행하는 동안 사용되는 가스 처리 튜브 및 해부 접시 3. 준비 <ol><li> 부드러운 가스 연결전문가가 작동 가스와 연결 (산소 100 %, 또는 carbogen)에 튜브 (외부 직경 2-4mm)를 노래. </li><li> 해부 접시 내부 피팅 가스 처리 관의 닫힌 고리를 만듭니다. 가스 처리 튜브를 연속 기포가 보장 수회 천공. 이 관은 가스 배출은 여러 번 사용될 수있다. </li><li> 핀 그것에 결합 될 수 있도록 저부 (0.5 cm 두께)에 실리콘 엘라스토머와 해부 접시를 준비한다. 이 접시를 여러 번 사용될 수있다. </li></ol> 마우스의 왼쪽 전방 유두 근육 4. 분리 참고 : 유두근의 분리를 시작하기 전에, 가스 라인이 막힘의 명확 있는지 확인합니다. <ol><li> 유두근의 제조를 시작하기 전에 상기 프로토콜 1-3 절에서 설명한 바와 같이 기관 욕 설정을 준비한다. 실험의 날에 모든 솔루션을 준비합니다. </li><li> 자궁 경부 전위 accordi로 (약 8~12주 이전) 마우스를 희생전문적인 작업과 제도적 지침에 NG. </li><li> 앞발을 고정하여 지느러미의 위치에있는 동물을 수정하고 해부 보드에 발을 뒷다​​리, 날카로운 뼈 가위로 갈비뼈를 절단하여 양측의 흉부 측면을 연 다음 횡단 잘라 다이어프램을 잘라. 심낭을 제거합니다. 지금 심장과 대동맥 액세스 할 수 있습니다. </li><li> 심장에 가까운 혈관 truncus에 무딘 집게로 마음을 수정하고 폐에서 가위와 주변 조직에 신속하게 마음을 분리합니다. </li><li> 산소 (단계 2.2)과 가스실 냉각 준비 솔루션 가득 페트리 접시에 뛰는 심장을 전송합니다. 심장이 이길 집게로 심장 정점을 터치를 통해 부드럽게 심장의 수축을 자극 할 수 있습니다. </li><li> 즉시 마음이 완전히 exsanguinous이다, O 2로 냉각 준비 솔루션 (단계 2.2)로 가득하고 가스실 해부 접시에 전송할 수 있습니다. 사용이 단계 실체 현미경에서. </li><li> 난방 수정마음 (우심실이 운영자의보기에서 오른쪽에 위치) 지느러미에서 볼 수 있도록 우심실을 통해 작은 핀을 실온. </li><li> 사용하여 미세 수술 가위 심실에서 조직을 연결, 방실 수준 모두에서 심방을 잘라 분리하고 버린다. 기계적 압력을 피 마음의 정점에 AV-밸브 수준에서 심실 벽을 통해 상처를 수행합니다. </li><li> 뇌실을 열고, 따라서 좌심실 유두 근육 모두를 살펴 가진, 집게와 왼쪽면 무료 벽을 고정한다. </li><li> 약간 유두근 준비에 판막 항해의 일부를 보존 왼쪽 전방 유두근의 양쪽에있는 심실 조직 측면을 절단과 접촉을 피하거나 최대한 유두 근육을 스트레칭. 유두 근육에 남아있는 심실 벽의 조직을 해부하다. </li><li> 유두근 준비의 양쪽에 부착 실크 쓰레드 (7/0, 0.5 미터)aration, 판막 항해에 하나는 근육 부분에 하나. 온도 32 ° C가 제안으로, 장기 목욕 솔루션으로 가득 carbogen와 가스실 기관 목욕 실에서 준비를 수정합니다. </li></ol> 유두근 5. 평형과 자극 <ol><li> 즉시 기관 욕에 정착 후 1 Hz에서 자극의 주파수에서 직사각형 펄스 (2 MS의 기간 및 100mA의 전류) 유두근 제제를 자극한다. </li><li> 지속적인 변화 또는 사용 기관 목욕 유형의 설정에 따라 자주 사용 설명서 변경 (매 5 분)에 의해 중, 장기 목욕 솔루션의 빈번한 변화를 확인합니다. </li><li> 도달에 점차적으로 최대 트 힘까지 텐션을 증가시킨다. 겉치레의 증가가 트의 힘에 더 보강으로 따르지 않을 경우 최대 트 힘에 도달. </li><li> 평형의 45 ~ 60 분 후, 실험 프로토콜을 시작합니다. </li></ol> 참고 : 아래에 설명 된 실험 프로토콜은 생리와 병리 생리 학적 조건에서 심장 수축력의 특성을 표준 연습을 포함한다. 대표 섹션에서 우리는 또한 대표적인 결과를 보여주는 구체적으로 이러한 프로토콜을 설명 (또한 표 2 참조). <ol><li> 녹화 및 실험 프로토콜 분석 <ol><li> 기록을 위해, 적절한 시간 해상도 (취득 비율 ≥의 1kHz에서)에 적합한 소프트웨어를 사용합니다. </li><li> 트 힘의 크기 (높이), 긴장 (TTP)와 (예를 들어 그림 4 참조, ADInstruments의 5.5 도표를 포함합니다) 소프트웨어 프로그램에서 언급 한 바와 같이 반 최대한의 휴식 시간 (R 50는 각각 / TFall를) 피크 시간을 포함하여 매개 변수를 분석 할 수 있습니다. </li></ol></li></ol>

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<li>Moran, A. E., Forouzanfar, M. H., Roth, G. A., Mensah, G. A., Ezzati, M., Murray, C. J., Naghavi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+trends+in+ischemic+heart+disease+mortality+in+21+world+regions%2C+1980+to+2010%3A+the+Global+Burden+of+Disease+2010+stud%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Temporal trends in ischemic heart disease mortality in 21 world regions, 1980 to 2010: the Global Burden of Disease 2010 stud.</a> Circulation. 129 (14), 1483-1492 (1980).</li>
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</ol>

저자는 그들이 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

이 논문에서는 마우스에서 심장 생리학 및 병리학 관련된 여러 과학 질문에 응답뿐만 아니라 형질 전환 라인 분석 및 새로운 약학 적 접근법의 검색을 지원하는 데 사용할 수있는 시험 관내 뮤린 유두근 수축력을 조사하는 방법을 서술 심장 기능 장애를 치료한다. 우리는 심근 수축력의 생리 병리학 적 및 약리학 적 특성을 평가하기 위해,이 방법의 사용을 예시한다 (도 3 참조). 추가 응용 프로그램을 여기에 예시 된 다른 약리 에이전트를 사용하여 세포 내 경로의 평가를 포함하지 (도 12 참조). 같은 허혈성 심장 질환과 심장 마비 등 심장 질환 저명한 임상 문제를 표시하고 전세계 22 사망률과 이환율의 주요 원인이 남아있다. 중심부에 표현 된 많은 단백질, 심장 수축력을위한 그들의 역할은 STIL입니다난 제대로 이해 또는 지금까지 공부하지. 격리 된 유두 근육의 수축력 측정은 마우스 모델에서 <em...

심장 수축성 그들의 역할을 참조 이온 채널 단백질 등의 조사는 다른 pathomechanisms를 발견하고 그러한 허혈 및 심장 마비와 같은 심장 질환에 대한 새로운 치료 전략을 구축하는 것이 필수적이다. 포유류 심근 수축 기능은 다양한 이온 채널, 전송기 및 다른 단백질에 의해 조절되는 것으로 알려져있다. 활동 전위는 2 + 채널이 세포 외 공간에서 칼슘 유입에 이르게이어서 칼슘 2 +에 휴대 수축 2 트리거 칼슘 2 + 릴리스 (CICR 1), 유도 된 칼슘 전압 의존 sarcolemmal의 L 형의 활성화를 불러 일으켰다. 생리 학적 또는 병리학 적 스트레스에 심장 수축력과 적응에 중심적인 역할을 -signaling 칼슘. 카테콜아민 따라서 캠프를 합성 아데 닐 레이트 사이 클라 (AC)을 자극, 심장 β 아드레날린 수용체를 활성화합니다. 활성화되는, PROTEIN 칼슘 2 + 과도 심장 수축력의 1,3,4의 수정의 결과로 L 형 칼슘 채널, phospholamban 및 ryanodine 수용체와 같은 다른 세포와 막 관련 단백질을 인산화 (PKA)을 키나제. 캠프 포스 (PDE)에 의해 분해된다. β - 아드레날린 수용체 이외의 GS-결합 수용체의 활성화는 또한 캠프의 축적으로 이어집니다. 절연 심실 근육 스트립 수축력 측정 기술은 물론 더 큰 포유류 5-8 확립된다. 유전자의 가능성이 생쥐 대상에 기초하여, 쥐 심장 생리학을 분석하는 방법을 확립하는 것이 중요하다. 그러나 생쥐에서 고립 근육 준비의 생리적 특성에 대한 기존의 데이터는 실험 조건 9-12에 따라 다릅니다. 한 방법은 좌심실 유두근 사전의 심장 수축력을 분석하는 데 사용됩니다체외에서 parations. 심장 수축력의 조사는 혈압, neurohumoral 자극과 신체 대사 스트레스 등의 생체 내 심장 수축력을 수정 영향의 부재에서 수행된다. 계약 근육 준비의 박동 속도는 엄격하게 정의 임의로 변경 될 수 있습니다. 트 위치 력 특정 칼슘 농도로서 자극, 주파수 또는 온도를 상회의 맥락에서 분석 될 수있다. 또한,이 방법은 상이한 신호 경로 구성 요소를 조사하고, 상기 언급 된 실험 조건을 제어함으로써, 유전자 변형 마우스 모델의 심장 성능을 비교하기 위해 사용될 수있다.

<table><tbody><tr><td>염화나트륨</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S7653</td><td></td></tr><tr><td>중탄산나트륨</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S5761&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>염화칼</td>륨 <td>Sigma-Aldrich</td><td>P9333</td><td></td></tr><tr><td>포도당</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9434&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>나트륨 피루브산</td><td>시그마-알드리치</td><td>P5280&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>염화칼슘 이수화물</td><td>시그마-알드리치</td><td>223506</td><td></td></tr><tr><td>마그네슘 황산염 헵타하이드레이트</td><td>시그마-알드리치</td><td>230391</td><td></td></tr><tr><td>인산칼륨 일염기</td><td>성 시그마-알드리치</td><td>P 5655</td><td></td></tr><tr><td>2,3-부탄디온 모노심</td><td>시그마-알드리치</td><td>B0753</td><td></td></tr><tr><td>3-이소부틸-1-메틸크산틴</td><td>시그마-알드리치</td><td>I5879</td><td>위험 문구 H 302, DMSO Dimethyl</td></tr><tr><td>sulfoxide (DMSO)</td><td>에서 해결 Sigma-Aldrich</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>이소프레날린 염산염</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I5627</td><td>위험 문구 H 315-H319-H335</td></tr><tr><td>Sodium Heparine 250.000 IE/10 ml</td><td>ratiopharm</td><td>PZN 3874685</td><td></td></tr><tr><td>Histamine dihydrochloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H7250</td><td>위험 문구 H 315-H 317-H319- H334-H335</td></tr></tbody></table>

마우스의 심장 수축력의 조사에 대 한 격리 유두 근육의 수축력 측정

Contractility Measurements on Isolated Papillary Muscles for the Investigation of Cardiac Inotropy in Mice

성인 마우스 마음에서 격리 유두근는 다른 생리 / 병리 적 조건에서 심장 수축력을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 수축 특성은 독립적으로 혈관 TONUS neurohumoral 또는 상태와 같은 외부의 영향을 평가할 수있다. 그것은 고립 된 심장 근육 세포와 단일 세포 측정 사이와 심 초음파 등의 생체 내 연구의 과학적인 접근 방식을 보여줍니다. 우수한 모델이 심장 생리학 / 병태를 연구하고되는 약물에 의해 변조 또는 트랜스 제닉 동물 모델의 탐색과 같은 조사를 위해 사용될 수있다, 따라서, 유두근 제제는 역할을한다. 여기, 우리는 장기 목욕 설정에서 심장 수축력을 조사하기 위해 쥐의 좌전 유두근을 분리하는 방법을 설명합니다. 심실 벽으로부터 격리 근육 스트립 제제와 대조적으로, 유두근은 근육 tissu TOTO을 손상시키지 않고 제조 할 수있다심각 전자. 장기 화장실 설치는 여러 온도 조절, 기체를 첨가 전극 장착 된 장기 목욕 챔버로 구성되어 있습니다. 격리 된 유두 근육 기관 목욕 실에서 해결 전기적 자극한다. 경련 유발 력은 그러한 힘 진폭 트 및 동력학 분석되는 트 같이 압력 변환기 및 파라미터를 이용하여 기록된다. 다른 실험 프로토콜 같은 카테콜아민 또는 다른 약제로서 수축 화제의 칼슘 및 주파수 별 수축뿐만 아니라, 용량 - 반응 곡선을 조사하기 위하여 수행 될 수있다. 또한 허혈과 같은 병리학 적 급성 조건을 시뮬레이션 할 수있다.

절연 뮤린 유두근 제제의 수축력 측정이 원고의 프로토콜은 생리 학적 조건 하에서 실험 재현성있는 결과를 달성하기 위해 최적의 상태로 조정된다. 최적의 실험 조건을 정의하기 위해 우리는 기관 욕 온도 및 세포 외 칼슘 농도 (도 12 참조) 가변 파일럿 실험을 수행 하였다. 여기에 설명 된 프로토콜은 1.5 mm의 세포 외 칼슘 농도 및 32 ° C의 온도로 수행 하였다. 기저 수축 특성 시간 피크, 속도 경련, 경련 힘 진폭 기저 수축 특성, 매개 변수 특성화 및 휴식 50 시간 (반 최대 완화 시간 (5 % 기저부터 최대 수축력에 도달하는데 필요한 시간으로 정의)에 필요한 시간으로 정의 ) 휴식 힘의 절반에 도달이 프로토콜에 사용됩니다. TW의 대표적인 추적가렵다 이들 파라미터들의 분석은도 3A-B에 도시되어있다. 칼슘 의...

뮤린 좌심실 유두근는 체외에서 심근 수축력을 조사하는데 사용될 수있다. 이 문서 자세히 분리 실험 프로토콜 심장 수축 특성을 연구에 대해 설명합니다.

Papillary muscle isolated from adult mouse hearts can be used to study cardiac contractility during different physiological/pathological conditions. The ...

본 절차의 전반적인 목표는 마우스의 체외 심장 수축 기능을 연구하기 위해 건강하고 손상되지 않은 유두근을 분리하는 것입니다. 이를 위해 먼저 심장을 적출한 후, 허혈성 손상을 방지하기 위해 심정지액에 침전시켜 수축을 중단시킵니다. 두 번째 단계에서는 손상되지 않은 좌심실 전방 유두근을 분리하고 고정 봉합사를 장착합니다.그 후 근육을 힘 변환기에 장착하여 장기욕 챔버로 옮깁니다. 마지막 단계로, 유두근에 전기장 펄스를 가하여 인비트로(in vitro)에서 유두근 수축을 유도합니다. 최종적으로, 다양한 생리학적 및 병리학적 조건이 심근 수축력에 미치는 영향을 힘 변환기로 전달하여 기록할 수 있습니다.이 방법은 신경성, 체액성 및 혈관성 영향이 없는 상태에서 좌심실 유두근의 심장 수축력을 인비트로(in vitro)로 분석하여, 관심 있는 심장 수축 특성을 직접 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 유두근 준비물은 심장 생리학 및 병태생리학 연구를 위한 우수한 모델이 되며, 약물제가 심장 수축력에 미치는 영향을 조사할 수 있게 해줍니다.우리는 특정 칼슘 활성 비선택적 이온 채널이 결핍된 생쥐에서 심혈관 표현형을 발견했을 때 이 방법의 아이디어를 처음 얻었으며, 이는 beta AIC 신호 전달 경로의 특이적인 변력 변화 발견으로 이어졌습니다. 우선 8~12주령의 생쥐를 해부판 위에 등쪽이 위로 향하게 놓습니다. 다음으로, 날카로운 골절단 가위를 사용하여 흉부를 양측면으로 개방하고 횡격막을 절개합니다.그 다음 뭉툭한 포셉을 사용하여 혈관 덩어리 부분의 심장을 잡고, 가위로 폐 및 주변 조직으로부터 심장을 빠르게 분리합니다. 박동하는 심장을 산소가 공급된 냉각 준비 용액이 채워진 페트리 접시에 옮기고, 포셉으로 심장 첨단을 가볍게 건드려 심장 수축을 자극합니다. 심장에서 혈액이 완전히 제거되는 즉시, 심장을 해부 접시로 옮기고 우심실에 작은 핀을 꽂아 심장을 등쪽 자세로 고정합니다.이제 디쉬를 실체 현미경 아래로 옮기고, 미세수술용 가위(microsurgical scissors)를 사용하여 심방-심실 수준에서 양쪽 심방을 분리합니다. 심장을 약 180도 회전시킨 후, 심방-심실 판막 수준부터 심장 첨단부(apex)까지 좌심실 벽을 따라 절개합니다. 이때 심장에 기계적 압박이 가해지지 않도록 주의하십시오.그 다음 심장을 원래 방향으로 돌립니다. 이어서 좌심실을 절개하고 포셉으로 좌측 유리벽을 고정하여 좌심실 유두근 두 개가 모두 드러나게 합니다. 좌전방 유두근의 양측면에서 심실 조직을 조심스럽게 절개합니다.유두근 표본 준비 시 판막의 SA 일부가 보존되도록 주의합니다. 그런 다음 유두근에서 나머지 심실벽 조직을 분리하고, 근육 부위에 실크사 한 가닥을 두 번 매듭지어 연결한 뒤, 유두근의 판막 돛 부위에 한 번의 매듭으로 연결하여 준비합니다.미리 준비한 장기욕 챔버(organ bath chamber)에 표본을 고정하십시오. 고정 직후, 100 mA의 전류와 1 Hz의 자극 주파수로 2 ms의 직사각형 펄스를 가해 조직을 자극하십시오. 그런 다음 기록을 시작하십시오.사용하는 오건 배스(organ bath)의 유형에 따라 적절하게 용액을 교체하십시오. 45분에서 60분 동안 기계적 사전 긴장(pretension)을 점진적으로 증가시키며, 사전 긴장의 증가가 더 이상의 수축력(twitch force) 증가로 이어지지 않을 때까지 진행한 후, 원하는 후속 실험 분석을 시작하십시오. 심장 수축력은 수축력, 최고치 도달 시간 및 반-최대 이완 시간 등 다양한 파라미터로 특성화할 수 있습니다.박동률과 수축력 사이의 상관관계는 힘-주파수 관계를 통해 계산됩니다. 예를 들어, 본 실험에서는 자극 주파수를 0.1에서 5 Hz까지 단계적으로 증가시켜 심장 수축력의 변화를 유도했습니다. 휴식 후 강화 프로토콜은 이전의 자극 후 일정 기간의 휴식기를 가졌을 때 관찰되는 수축력 진폭의 변화를 보여줍니다.장기 욕조 내 생리적 용액의 칼슘 농도를 변화시킴으로써, 수축 장치의 칼슘 민감도를 평가하여 베타 수용체 활성화에 의해 매개되는 변력 작용(inotropic effects)을 분석할 수 있습니다. 본 대표 실험에서 시연된 바와 같이, 허혈 상태를 모사하기 위해 분리된 유두근에 이소프렌을 처리할 수 있습니다. 인비트로(In vitro)에서 근육을 95% 질소와 5% 이산화탄소가 공급되는 포도당 및 피루브산이 없는 세포외 용액에 노출시키면, 그래프에 나타난 것과 같이 수축력이 감소하고 허혈성 구축이 발생합니다.한 가지 표본의 박리 및 평형화 과정에 숙달되면, 기계적 또는 대사적 손상을 주지 않고 표본을 신중하게 분리하고 고정하는 시간을 포함하더라도 본 절차에 따라 약 19분 만에 근육 표본 준비를 완료할 수 있습니다. 표본 준비 후에는 추가적인 의문점을 해결하기 위해 날카로운 전극 측정, 효소 결합 면역 흡착 분석 및 웨스턴 블롯 분석과 같은 다른 방법들을 수행할 수 있습니다. 이 기술은 심장 생리학 및 약리학 연구와 다양한 형질 전환 설치류 모델에서의 심장 표현형 조사에 있어 필수적인 접근 방식입니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

형질 전환 생쥐는 유전자로 생리 기능을 ascribing에서 매우 유용한되었습니다. 일반적으로 같은, 연구하고,기도의 기능적 연구로서 특히, murine 모델 향한 놀라운 변화를받은. 여기에 대한 프로토콜을...

마우스를 사용 Tracheal 수축의 체외 측정에서

야생형 마우스와 돌연변이 마우스의 개별 심근세포는 수축성과 칼슘 과도 상태를 연구하기 위해 심장에서 분리할 수 있습니다. 이를 통해 모든 원인에서 심장 기능 장애에 대한 세포 기능 장애의 기여도를 특성화할 수 있습니다.

마우스 심근의 분리 및 생리 학적 분석

이 기사에서는 다양한 심박수에서 압력/부피 분석을 통해 쥐의 좌심실 기능을 측정하는 방법에 대해 설명합니다.

Bowditch 효과 조사 : 압력 볼륨 관계를 측정하기 위해 마우스의 심장 도관

이 논문은 쥐의 심장에서 분리된 심장 근세포에서 수축하는 동안 myofilament Ca2+ 감도의 변화를 평가하는 프로토콜에 대해 설명합니다. 심장 전기생리학, 수축기/이완기 세포질 Ca2+ 수치 및 수축/이완과 함께 이 측정은 건강한 심장과 질병이 있는 심장에서 심장 흥분-수축 결합을 매개하는 메커니즘을 뒷받침하는 데 필수적입니다.

Myofilament 칼슘의 평가<sup&gt; 2 +</sup&gt; 감도 근본적인 심장 여진 수축 커플 링

이 프로토콜은 마우스의 심장 및 심장 판막 기능의 포괄적인 표현형을 위한 심초음파 접근 방식에 대한 자세한 설명을 제공합니다.

마우스의 심장 판막 질환의 종합 표현형 특성에 대한 심 초음파 접근 및 프로토콜

우리는 뮤린 근세포를 분리하는 방법론과 동시 디지털 세포 기하학 측정을 통해 형광 광도계를 사용하여 sarcomere 단축 추적과 동시에 전압 또는 칼슘 흔적을 얻는 방법을 제시합니다.

고립 된 뮤린 심실 근세포의 광학 이미징

여기에 제시된 것은 혈관 동맥이 수납 및 가압되기 때문에, 모세관 침대 및 백혈구를 포함하는 혈관 나무 구성 요소뿐만 아니라 압력을 유지하는 동맥 관류 압력 및 흐름의 전 생체 모니터링에 의해 살아있는 뮤린 심장 조직에서 관상 동맥 미세 순환을 연구하는 프로토콜이다.

마우스 심장의 모세혈관, 동맥 및 페리사이클의 동적 측정 및 이미징

분리된 쥐 근세포에서 칼슘(Ca 2+) 과도 측정과 함께 근절 길이 검출을 통한 수축 기능의 측정을 설명하는 일련의 프로토콜이 제시됩니다. 심부전 동물 모델에서의 연구에 대한이 접근법의 적용도 포함됩니다.

설치류 근육 세포에서 심장 수축 기능 장애 및Ca 2+ 과도 현상 분석

이 프로토콜은 전임상 개발 중 약물에 의한 수축성 변화를 평가하기 위한 신뢰할 수 있는 플랫폼인 MyoBLAZER 시스템을 사용하여 기증자 심장에서 성인 인간 원발성 심근세포의 수축성을 측정하는 방법을 설명합니다.

고립된 성인 인간 원발성 심근세포의 심장 수축성 측정

빠른 심근 및 심장 이완은 정상적인 생리학에 필수적입니다. 기계적 이완 메커니즘은 이제 변형률에 의존하는 것으로 알려져 있습니다. 이 프로토콜은 이완의 기계적 제어를 추가로 연구하기 위한 실험의 획득 및 분석에 대한 개요를 제공합니다.

온전한 심장 섬유주를 이용한 이완의 기계적 제어

학습하세요 마우스 좌심실 유두근을 분리하여 심장 수축력을 측정하는 방법을. 심장 절제 후 카디오플레지아 용액 처리, 전기 자극을 통한 수축력 기록으로 생리학적 및 병리학적 조건의 영향을 평가합니다.

마우스의 심장 수축력의 조사에 대 한 격리 유두 근육의 수축력 측정

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