Delivery of Proteins, Peptides or Cell-impermeable Small Molecules into Live Cells by Incubation with the Endosomolytic Reagent dfTAT

Kristina Najjar; Alfredo Erazo-Oliveras; Jean-Philippe Pellois

doi:10.3791/53175

Endosomolytic 시약 dfTAT와 배양 라이브 세포에 단백질, 펩타이드 또는 세포 투과성 작은 분자의 배달

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Bioengineering

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Delivery of Proteins, Peptides or Cell-impermeable Small Molecules into Live Cells by Incubation with the Endosomolytic Reagent dfTAT

Endosomolytic 시약 dfTAT와 배양 라이브 세포에 단백질, 펩타이드 또는 세포 투과성 작은 분자의 배달

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10:30 min

September 2, 2015

DOI: 10.3791/53175-v

Kristina Najjar¹, Alfredo Erazo-Oliveras¹, Jean-Philippe Pellois¹

¹Biochemistry and Biophysics,Texas A&M University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

우리는 단백질과 세포 불투과성 소분자를 배양된 포유류 세포에 전달하는 방법을 내포세포 소기관을 누출시키는 시약과 함께 간단한 공동 배양 프로토콜

로 설명합니다.

다음 실험의 전반적인 목표는 세포를 손상시키지 않고 매우 효율적으로 침투할 수 있는 이량체, 형광 tat 또는 df tat 시약을 사용하여 거대분자를 살아있는 세포에 전달하는 것입니다. 이것은 먼저 전달 대리인을 생성하고 정제함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계로 DFTA.

Dfta는 관심 있는 거대분자 화물이 있는 상태에서 섭씨 37도에서 1시간 동안 세포와 함께 배양되며, df tat은 세포내 소포 내부의 화물 흡수를 유도합니다. 소포는 초기 엔도솜으로 성숙하여 최종적으로 DF tat이 세포의 세포질 공간으로 화물을 방출할 수 있는 후기 엔도솜 단계에 도달합니다. 다음으로, detta와 관심 화물의 전달 효율을 평가하기 위해 형광 현미경으로 세포를 이미지화합니다.

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