Name: 침략 유학을위한 처리 제거하는 새로운 접근하고 낙오자효과 초파리 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-12-30T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 19 s
Description: 학습하세요 Drosophila melanogaster 공격 행동 연구를 위한 새로운 챔버 설계 방법을 통해 취급을 완전히 제거하여 스트레스를 줄이고 패자 효과 측정의 신뢰성을 높입니다.

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이 연구는 출자자는 연구 설계, 자료 수집 및 분석, 게시하는 결정, 또는 원고의 준비를 전혀 역할을 없었다 EAK 할 수있는 국립 종합 의료 과학 연구소 (GM099883와 GM074675)에서 보조금에 의해 지원되었다. (: 접촉 우리는 행동 장치의 설계를 위해 하버드 의과 대학에서 우리의 기계 공장에서 사람들에게 감사 <a href="http://mikesmachine.com">http://mikesmachine.com</a> ). 저자 공헌 : ST는, 기원전 행동 장치를 설계했다. ST의 설계 및 실험 프로토콜을 최적화. ST와 BC 수행하고 실험을 분석 하였다. ST, EAK와 BC는 종이를 썼습니다.

참고 : 다음은 우리가 남성 초파리 쌍의 사이에 신뢰할 수있는 침략의 트리거를 허용하는 데 사용하는 실험 프로토콜 (D. melanogaster의)의 단계별 설명입니다. 이 절차는 &quot;패자&quot;효과의 형성을 유도한다. 이 프로토콜을 사용하여도있다 단기 &quot;승자&quot;효과는 최근 5,6를보고했다. 그림 1은 행동 실험의 타임 라인을 보여줍니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig1.jpg" /> 침략 실험 1. 타임 라인을 그림. 1 일에, 말기 남성 번데기는 (날개는 검은 색이 될 때) 새로 제조 된 절연 유리 병에 격리됩니다. 성인으로 부상 후 5 일에서 4 일 된 수컷 파리는 이산화탄소로 마취하고 식별을 위해 서로 다른 색상으로 색칠. 7 일에, 음식 컵과 싸움 챔버는행동 실험을 설정할 준비. 두 6~7일 된 성인 남성은 챔버에로드와 상호 작용을 할 수있다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 1. 1 일 : 번데기의 사회적 고립 <ol><li> 올려 25 ℃, 상대 습도 50 %에서 환경 제어 12 시간 조명 / 12 시간 어두운주기 배양기에서 플라이 주식을 유지한다. </li><li> 절연 유리 병을 준비 녹은 때까지 신선한 플라이 음식을 가열한다. 파스퇴르 피펫을 사용하여, 하나의 빈 유리 테스트 튜브 (1.6 X 10cm)에 약 1.5 ml의 용융 플라이 음식을 전송합니다. 음식이 응고하도록 허용합니다. </li><li> 번데기를 분리 (날개는 검은 색이 될 때) 좋은 붓으로 부드럽게 주식 유리 병에서 말기 남성 번데기를 제거하고 신선하게 준비된 음식을 포함하는 테스트 튜브의 측면에 배치합니다. 면과의 긴밀한 절연 튜브 (그림 2). </li><lI&gt; 25 ° C와 50 %의 상대 습도에서 12 시간 조명 / 12 시간 어두운 인큐베이터에 번데기를 포함하는 장소 격리 병. </li></ol><img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig2.jpg" /> 그림 2. 사회적 고립. 한 말기 남성 번데기가 새로 제조 된 절연 유리 병에 측면에 배치됩니다. 번데기를 포함하는 절연 유리 병은 25 ℃, 상대 습도 50 %에서 12 시간 조명 / 12 시간 어두운 인큐베이터에 배치됩니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 2. 제 5 일 : 개인 식별 목적으로 파리 회화 <ol><li> CO 2 마취의 부정적인 영향을 최소화하기 위해 사일 세 남자 파리와 행동 실험 전에 이일과 5 일에서이 단계를 수행합니다. </li><li> CO 2와 함께 파리를 마취. </lI&gt; <li> 고급 이쑤시개로, 가슴에 아크릴 물감의 작은 점을 배치합니다. 머리, 날개, 복부 또는 다리 (그림 3)에 페인트를 두지 마십시오. </li><li> 약 10 초 동안 페인트 건조하자, 부드럽게 원래 절연 유리 병에 다시 파리를 전송합니다. </li><li> 25 ° C와 50 %의 상대 습도에서 12 시간 조명 / 12 시간 어두운 인큐베이터에 절연 튜브를 돌려줍니다. </li></ol><img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig3.jpg" /> 그림 3. 개인 식별이. CO 2, 아크릴 페인트의 작은 방울과 함께 파리를 마취 한 후 흉부에 적용됩니다. 개인 식별 목적을 위해 서로 다른 색상 (흰색, 여기에 파란색) 사용됩니다. 이 단계에서 이산화탄소의 사용에 대한 아래의 설명을 참조하십시오. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig3large.jpg" target="_blank">이 figu의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오</a>레. 3 일 7 : 장치 준비 <ol><li> 식품 컵을 준비합니다 : <ol><li> 이 녹을 때까지 신선한 플라이 음식을 가열한다. </li><li> 파스퇴르 피펫을 사용하여 스크류 캡 바이알 (1.5 cm 직경 1cm 높이)의 뚜껑에 약 0.8 ml의 음식을 전송하고 냉각 할 수 있습니다. 공기 방울을 피하십시오. </li><li> 물을 몇 방울과 건조 효모를 혼합하여 신선한 효모 붙여 넣기를합니다. 두꺼운 경우, 이쑤시개 (도 4)와 음식물 컵 표면의 중심에 효모 페이스트의 작은 방울을 적용한다. </li></ol></li></ol><img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig4.jpg" /> 식품 컵 준비 그림 4. 음식 컵 신선한 플라이 음식을 준비한다. 음식 응고 후, 효모 페이스트의 점은 음식 컵 표면의 중앙에 배치됩니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig4large.jpg" target="_blank">V하려면 여기를 클릭하십시오</a>이 그림의 더 큰 버전을 서평. <ol start="2"><li> 개인 파이팅 챔버를 준비합니다 : <ol><li> 철저하게 사용하기 전에 물을 때마다 장치 및 개별 전투 실을 씻는다. 사용하기 전에 종이 타월 드라이. </li><li> 각 전투 실의 중심에 음식 컵을 놓고 퍼티의 드롭 위치에 고정한다. </li><li> 장치 뚜껑 (그림 5)와 전투 실을 커버. </li><li> 25 ° C에서 고습 환경 (60 %)로 장치를 배치했다. </li><li> 전투 실을 조명하고 위에서 기록하는 비디오 카메라를 설정하는 장치 위에 광원을 배치합니다. </li></ol></li></ol><img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig5.jpg" /> 그림 5. 개별 전투 실을 준비. 표면에 효모 페이스트의 점이 신선하게 준비된 음식 컵 세척 개별 인터넷에 고정되어실을 조명. 챔버스는 개별 전투 실에 불투명 한 플라스틱 디바이더의 삽입을 허용 투피스 커버 닫혀있다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 4. 7 일 : 행동 실험 <ol><li> 6-7일 세 남자 파리와 행동 실험을 수행합니다. </li><li> 각 전투 실에 플라스틱 칸막이를 삽입합니다. </li><li> 분리 튜브로부터 면화 플러그를 분리 장치의 측면에 열린 구멍 아래 튜브를 위치. </li><li> 비행은 일반적으로 몇 초 내에, 부정적인 geotaxis에 의해 전투 실에 들어 보자. </li><li> 비행 튜브를 떠나 챔버를 입력 한 후 슬라이딩 벽을 닫습니다. </li><li> 상기 장치의 다른 측면에 싸움 챔버로 제 2 플라이를 도입하는 과정을 반복한다. </li><li> 조명 videotapi 다시 장치를 배치NG 위치. </li><li> 비디오 녹화를 시작하고 파리가 상호 작용할 수 있도록 플라스틱 칸막이를 제거합니다. <ol><li> 침략 실험의 경우 : <ol><li> 이 실험에서 기록 강한 지배 관계의 형성을 보장하기 위해, 적어도 20 분 동안 싸운다. </li><li> 원하는 시간 후, 비디오 녹화를 중지합니다. </li><li> 위에서 설명한 절차를 반대로하여 전투 실에서 파리를 제거합니다. </li><li> 철저하게 각 사용 린스 후 중성 세제와 물을 행동 장치를 씻는다. </li></ol></li><li> &quot;패자&quot;효과 실험 : 주 :이 실험에서, 제 싸움은 시험 위상 조절 단계 및 제 시합으로 간주된다. 싸움 사이의 휴식 기간은 다를 수 있지만 10 분 강력한 &quot;패자&quot;효과의 형성을 할 수 있습니다. <ol><li> 첫 시합을 수행하기 위해 위에서 설명한 절차를 따르십시오. </li><li> 중요한 단계는 : 「패자 &quot;지성, (E)의 형성을 유도 할제 싸움은 적어도 20 분 강한 우성 관계를 설정하기 위해 긴 nsure. 20 분 후, 파리를 분리하는 전투 실에 플라스틱 디바이더를 다시 삽입합니다. </li><li> 나머지의 10 분 기간 후, 부드럽게 파리는 두 번째 경기에 대한 상호 작용을 할 수 있도록 플라스틱 칸막이를 제거합니다. </li><li> 제 20 분간 싸움의 끝에서, 녹화를 중지. </li><li> 위와 같이 행동 챔버에서 파리를 제거합니다. </li><li> 다시 한번, 철저하게 행동 장치를 청소하십시오. </li></ol></li></ol></li></ol> 5. 행동 분석 <ol><li> 동영상을 전송 <ol><li> 컴퓨터에 카메라를 연결합니다. </li><li> &quot;선택한 클립에 가입&quot;비디오 변환 소프트웨어와 옵션을 사용하여, 파리를 하셔도과 함께 영화 클립을 가입 파리의 MTS에 변환합니다. </li><li> 관찰하고 비디오 판독기 소프트웨어와 각 영화를 분석 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 채점 행동 이 수동으로 수행 할 수 있습니다 또는 우리 참고 :가능한 경우 행동 분석 프로그램 소프트웨어를 보내고. 아래 그림은 &quot;패자&quot;효과를 가능한 수동 분석을 설명합니다. <ol><li> 음식 컵 파리 사이의 첫 만남의 시간을 점수 및 제 찌르기의 외관의 시간 (한 비행에 높은 상승하는 행동 패턴 (만남은 적어도 2 초 지속 파리 쌍 사이의 상호 작용은) 그 뒷다리와 아래에 스냅) 상대를 잡기 위해 시도합니다. 이어서, (제 만남과 제 런지 간의 간격) 런지하는 지연 점수. </li><li> 싸움을하는 동안 만남과 런지의 총 수를 계산합니다. 참고 : 원하는 경우, 하나는 날개 위협, 복싱, 펜싱, 후퇴 또는 예를 들어 첫 번째 찌르기 전에 만남의 숫자, 같은 다른 행동 패턴을 득점 할 수 있습니다. </li><li> 우성 (첫 만남과 하나가 음식 컵 선미 떨어져 세 번 연속을위한 피정 비행 시간 사이의 시간의 설립시 점수어) 런지를 수신하는 단계를 포함한다. 비행 주 승자와 어떤 싸움의 패자입니다. </li></ol></li><li> &quot;패자&quot;효과를 계산 <ol><li> 이전 패자는 2 차 싸움 (손실 패자 : LL)을 잃게하는 싸움의 수를 나누어 싸움의 총 수에 의해, 그리고 100 얻은 백분율이 &quot;패자&quot;효과를 나타냅니다 곱 : [(#은 LL 파리) / (# 총 싸움)] × 100 </li><li> &quot;패자&quot;효과가 50 %의 기대 값에서 통계적으로 차이가 있는지 비교하기 위해 카이 제곱 테스트를 사용합니다. </li></ol></li></ol>

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<li>Cabral, L. G., Foley, B. R., Nuzhdin, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+sex+trade+with+violence+among+genotypes+in+Drosophila+melanogaster%3F%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Does sex trade with violence among genotypes in Drosophila melanogaster?</a> PLoS One. 3 (4), e1986(2008).</li>
</ol>

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침략의 연구를위한 모델 생물로 강력한 유전 적 방법과 초파리를 사용하는 현대 시대, 안정적인 전투 행동이 파리 1,7의 단일 쌍으로 얻을 수있는 새로운 실험 무대의 도입으로 12 년 전 약 시작 8,17,19. 이 경기장은 원하는 자원 (식품 컵, 잠재적 인 동료)와 패자를위한 공간으로 후퇴 (으)로 운항하는 항공사를 포함했다. 이 경기장 얻은 결과는 초파리의 싸움 동작에 대한 사전 지식에 추가되었을 때, 초파리 단단히 침략과 같은 복잡한 행동을 조사하기위한 매우 바람직한 모델 시스템으로 설립되었으며, 많은 실험실에서 사용됩니다. (가) 식품 자원, 동료 또는 지역 14, 15의 방어를위한 접근을위한 경쟁에 전시 침략을 날아; 얻어진 합산 결과는 것으로 나타났다 (b)의 싸움은 전형적인 행동 패턴 1의 연속 시리즈로 구성되어 있습니다; (기음)남성과 여성의 파리 (일부 패턴이 일부 특정 여성이고 일...

동물 시스템의 침략 강하게 수집 및 식품, 영토와 동료와 같은 자원의 유지와 연관되어있다. 이 개인의 피트니스에서 활약 중요한 역할을 감안할 때, 그것은 침략은 동물의 왕국에 걸쳐 진화 것은 놀라운 일이 아니다. 직접 개인에게 혜택을 적응 특성으로, 강한 학습과 기억 구성 요소는 침략과 연관되어 있습니다. 사회 계급에 대한 경쟁에서, 이전의 전투 경험은 이후 대회의 결과에 영향을 미친다. 일반적으로, 이전의 패배 경험이 증가하고, 우승 경험은 감소, 나중에 경연을 잃을 확률은 ( &quot;패자&quot;과 &quot;승자&quot;효과라고도 함). &quot;패자&quot;효과 종의 넓은 범위에서 관찰하고, 일부 리포트는 &quot;승자&quot;효과는 일반적으로 짧은 시간 동안의 2,10,11이 며칠 동안 지속될 수 있다는 것을 시사하고있다. 공격적인 행동의 첫 번째 보고서초파리에서 (D.의 ampelophila) 성 인식과 성 선택 (12)과 관련 논문에서 1915 년 Sturtevant로했다. 나중에, 남성 과일의보다 완벽한 검사가 침략을 비행 반세기가 초파리의 싸움 중에 관찰 된 행동 패턴의 대부분을 설명하는, 만들어졌다. 이들 실험은 대부분 13-15 시간 동안 관찰 암수 파리의 소그룹을 실시 하였다. 최근 강력한 유전자 도구, 이항 단일 섹스 싸움 설정과 관찰, D의 짧은 시간의 추가와 melanogaster의 침략 1.16의 생물학의 연구에 중요한 모델 시스템으로 떠오르고있다. 남성과 여성의 파리의 동성 쌍 사이의 싸움의 분석은 침략가 통계적으로 신뢰할 수있는 방식으로 1,17의 다른 하나의 전환에 박힌 행동 패턴을 포함 것을 보여 주었다. 다른 사람이 싸움에서 관찰하는 동안 관찰 된 행동 패턴 중 일부는 성 특정남녀 모두의. 남성 싸움은 분명 &#39;승자&#39;와 &#39;패자&#39;와 지배 관계의 형성에 여성 싸우면 결과보다 더 높은 강도의 레벨로 이동합니다. 현재, 많은 실험실은 생화학 (18), 신경 7,19-21, 침략의 유전 (22) 토대 조사를 시작했습니다. 불행하게도, 연구의 메타 분석으로 인해 서로 다른 실험실에서 실험 절차의 다양성의 사용 싸움 역학에 대한 통찰력과 형성과 지배 관계의 유지 보수 문제가를 얻을 수 있습니다. 본질적으로 문헌에 기재된 기술은 모두 경기장 밖으로 날아 전송 경기장으로 19,23,24 및 행동 실험 중에 3,4-들을 소개하는 파리의 취급 및 조작을 포함한다. 부드러운 흡입은 파리에게 3,4,23-25를 조작하는 가장 일반적인 방법이지만, 감기 또는 CO 2 마취는 심지어 P 불구하고, 9,26를 사용하는revious 연구는 이미 이러한 절차가 비행 행동 27, 28에 해로운 영향을 미칠 것으로보고있다. 적어도 24 시간의 기간은 동작 (29, 30)에 미치는 영향을 최소화하기 위해 임의의 마취제의 사용 후 권장된다. 파리는 이전 전투 경험에서 배우고 학습과 기억이 동반 아고 니스트 만남의 결과임을 시사, 새로운 상황에서 자신의 행동 패턴의 사용을 수정합니다. 그런 의미에서, 싸움은 이후의 만남 동안 점점 더 자주 사용 후 전략이 일 것을 배우고 날아간 조건화 학습 상황과 유사 비행. 지배 관계가 싸움 중에 설립 된 후 파리 승자는 점점 더와 패자가 갈수록를 lunging으로, 자신의 전투 전략을 변경합니다. 분리의 기간이 지난 후에, 이전 패자는 훨씬 더 복종하는 동작을 보여 순진한 플로리다와 결합 할 때 싸움 차 2를 잃을 가능성이 높다이거 또는 이전 수상자 3,4. 그러나, 파리 처리는 제외된다 실험 절차의 부재는 어렵다 &quot;패자&quot;효과의 상세한 연구를했다. 최근의 연구에서, 우리는 일상적으로 처리를 제거 새로운 절차와 행동 챔버에 파리를 소개하는 실험실 (흡인과 추위 마취)에 사용되는 두 개의 실험 절차를 비교했다. 결과는 저온 마취가 흡인보다 공격에 훨씬 더 큰 부정적인 영향을했지만, 심지어 열망은 파리에서 공격성의 수준을 감소 것을 보여 주었다. 포부는, 그러나, 침략을 함께 학습과 기억에 매우 심각한 영향을 야기했다. 두 실험 절차 (흡인없이 처리), 파리의 처리가 실험 절차 5,6에서 제거 될 때 강력한 &quot;패자&quot;효과 만 관찰과 동일한 프로토콜을 다음과 같습니다. 이상적으로, 라보에 초파리 침략의 연구ratories는 일반적으로 (탈출을 방어하기 위해 자원에 대한 경쟁, 영토와 공간) 야생에서 발생 날아 환경 상황을 포함해야한다. 또한, 실험 조건은 확실하게 유도 관찰 및 검사 하에서 동작을 해석하도록 최적화되어야한다 (동물의 취급을 최소화 마취제 CO (2)의 사용을 제한하고, 실험 방법을 표준화하려고). 대부분 또는 모든 이러한 문제를 해결하기위한 시도에서, 우리는 동안 행동 경기장에 도입 전후 파리의 처리를 없애 새로운 행동 장치를 설계 하였다. 이 장치로, 파리는 자신의 타고난 부정적인 geotaxis이 이동로와 싸움 챔버 밖으로 전송하는 데 사용합니다. (a) 개인 중 행동 변화를 감소; 파리의 취급을 제거함으로써, 프로토콜은 목표 파리는 상호 작용하고 맑은 우성 관계 (수컷)를 생성하는 (b) 필요한 시간을 감소; 및 (c) 안정적으로 충분히 강한 behavio을 유도RAL 변화는 &quot;패자&quot;효과의 형성을 허용합니다. 이 프로토콜은 새로운 실험 장치 및 단계 절차에 의해 단계 공격성을 분석하고 D.에 강한 &quot;패자&quot;효과의 형성을 허용하도록 설명 melanogaster의. 우리는이 행동 장치는 쉽게 초파리에 의해 전시 다른 사회적 행동의 연구에 적용 할 수 있습니다 기대합니다.

<table><tbody><tr><td>Drosophila melanogaster 번데기</td><td>블루밍턴 재고 센터</td><td></td><td></td></tr><tr><td>표준 플라이 식품</td><td></td><td></td><td>사내에서 제작.&nbsp;</td></tr><tr><td>행동 챔버</td><td>마이크 기계</td><td></td><td>사내에서 제작. 직접&nbsp; 자세한 내용은 회사에 문의하십시오.</td></tr><tr><td>붕규산 유리 바이알</td><td>VWR International&nbsp;</td><td>47729-576</td><td>16 x 10 mm</td></tr><tr><td>면</td><td>Fisherbrand</td><td>22-456-881</td><td>모든 브랜드에서 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>파스퇴르 피펫</td><td>VWR International&nbsp;</td><td>53300-567</td><td></td></tr><tr><td>페인트브러시&nbsp;</td><td>Blick Art Material</td><td>06157-7030</td><td>라운드, 크기 3/0</td></tr><tr><td>치아 꼬치</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>어떤 브랜드든 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>. 아크릴 페인트 (파란색/흰색)</td><td>Blick Art Material</td><td>01637-5172/01637-1022</td><td>어떤 브랜드든 사용할 수 있습니다</td></tr>. <tr><td>건조 활성 효모</td><td>Sigma</td><td>YSC2-500G</td><td></td></tr><tr><td>Srew cap tube</td><td>VWR International&nbsp;</td><td>10011-394년&nbsp;</td><td>지름 15mm, 높이 10mm</td></tr><tr><td>에펜도르</td>프 <td>VWR 국제공항&nbsp;</td><td></td><td></td>22363212</tr><tr><td>테이프</td><td>N/A</td><td>N/</td><td>A 어떤 브랜드든 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>플라스틱 슬라이스</td><td>전자 현미경 과학</td><td>70329-40</td><td>22 x 40 x 0.25 mm 두께</td></tr><tr><td>광원 (전구)</td><td>VWR International&nbsp;</td><td>500003-418</td><td>어떤 브랜드든 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>타이머</td><td>VWR International&nbsp;</td><td>62344-641</td><td>모든 브랜드를 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>인큐베이터</td><td>Percival</td><td></td><td>자세한 내용은 건설자에게 직접 문의하십시오.</td></tr><tr><td>이산화탄소 건조 (CO2)</td><td>Medical-Technical Gases, Inc</td><td>14H31</td><td></td></tr><tr><td>쌍안경</td><td>Nikon</td><td>SMZ-745</td><td>모든 브랜드의</td></tr><tr><td>카메라 (SONY Handycam&nbsp; HDR-CX330)</td><td>B& H</td><td>SOHDRCX330B</td><td>모든 브랜드를 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>최소</td><td>1.4Ghz 프로세서가 있는</td>컴퓨터<td></td><td></td>, Microsoft Windows 또는 Machintosh HD</tr><tr><td>ClipWrap</td>을 실행합니다 <td>온라인</td><td></td> 다운로드 <td>모든 가져오기 소프트웨어를 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>QuickTime Player</td><td>온라인 다운로드 모든</td><td></td><td>읽기 소프트웨어를 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>GraphPad 소프트웨어</td><td>온라인</td><td></td><td>모든 통계 소프트웨어를 사용할 수 있습니다.</td></tr></tbody></table>

침략 유학을위한 처리 제거하는 새로운 접근하고 &quot;낙오자&quot;효과<em&gt; 초파리</em

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

초파리의 공격적인 행동은 전형적인 행동 패턴의 연속 식으로 구성된다 (분석 1 참조). 이 복잡​​한 동작은, 유전, 호르몬, 환경 적 요인에 의해 영향을 받는다. 많은 생물과 마찬가지로, 이전 전투 경험은 파리의 전투 전략과 이후 대회의 결과에 영향을 미친다 : 싸움을 잃고 가능성이 학습과 기억 2-4을 포함 &quot;패자&quot;효과를 공개, 나중에 경연을 잃을 확률이 높아집니다. 침략 같은 복잡한 사회적 행동의 발현을 함께 학습과 기억은, 동물 5,6의 처리 테스트 사전에 민감합니다. 많은 실험 절차는 그러나 침략 7-9, 파리의 처리는 현재 사용할 제외없이 일상적으로 사용되는 프로토콜을 연구하기 위해 다른 실험실에서 사용된다. 여기, 우리는 instea를 사용하여, 파리의 처리하지 않고 새로운 행동 장치를보고D 자신의 타고난 부정적인 geotactic 응답으로 또는 전투 실에서 동물을 이동합니다. 이 프로토콜에서는, 음식 컵을 포함하는 작은 원형의 싸​​움 경기장 전에 파리의 도입에 이동식 플라스틱 슬라이더에 의해 동일한 두 반으로 나누어집니다. 파리 챔버 문과 geotaxis 슬라이딩을 통해 자신의 집에 격리 병에서 챔버를 입력합니다. 플라스틱 슬라이더를 제거하여, 파리는 상호 작용하는 무료입니다. 지정된 기간 후, 파리 후속 실험에 대한 슬라이더로 다시 분리된다. 이 모든 개별 파리 처리없이 쉽게 이루어진다. 이 장치는 침략과 비행 싸움에서 &quot;패자&quot;효과의 형성을 포함한 관련 학습과 기억을 연구하는 새로운 접근 방식을 제공한다. 또한,이 새로운 행동 범용 장치는 파리의 다른 사회적 행동을 연구하기 위해 이용 될 수 있고, 일반적으로, 기본적인 행동 공정에서 경험 관련 변화를 조사하는 관심을 가져야한다.

이 섹션은 행동 챔버의 설계 및 공격성 ​​&quot;패자&quot;효과의 형성을 측정하는 상술 프로토콜에 따라 행동 실험의 전형적인 세트의 분석을 제시한다. 또한,이 장치를 이용하여 측정 될 수있는 다른 행동의 샘플은 그림. 도 6은 신규 장치의 개략도를 나타낸다. 장치는 세 개의 원통형 우물 구성되어 (크기 : 22.86 mm 직경 17 mm 높이) 전투 실 수 있습니다. 두 조각 커버 상단의 전투 실을 닫고 두 개의 동일한 섹션으로 챔버를 분할하는 얇은 불투명 한 플라스틱 디바이더의 삽입을 할 수 있습니다. 세 개의 구멍 (15.88 mm 직경)로 벽을 슬라이딩 장치의 각면에 자신의 절연 튜브에서 직접 부정적인 geotaxis에 의해 전투 실에 파리의 로딩을 할 수 있습니다. 파리가 싸움 챔버를 입력 한 후, 슬라이딩 벽이 사용됩니다d는 모든 챔버의 측면을 닫습니다. 이 시점에서, 두 파리는 싸움 경기장 내에 있지만 분할에 의한 상호 작용할...

과일 동안 행동 패턴은 역학 싸움, 관찰 및 관련 학습과 기억은 실험 조건에 의해 영향을 받는다, 싸움을 비행. 여기에 제시된 프로토콜은 전체 실험 기간 동안 파리의 처리를 제거하는 새로운 절차를 설명합니다. 이 싸움 역학을 개선하고 강력한 &quot;패자&quot;효과의 형성을 할 수 있습니다.

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

이 방법의 전반적인 목표는 행동 절차에서 파리 핸들링 과정을 제거함으로써 초파리(Drosophila melanogaster)에게 패배자 효과와 승리자 효과의 형성을 도입하는 것입니다. 실험실 환경에서 수행되는 대부분의 동물 행동 연구에는 동물을 핸들링하는 과정이 포함됩니다. 동물 핸들링은 결과적으로 동물에게 스트레스를 유발하며, 이러한 스트레스는 수행하려는 행동 연구를 방해할 수 있으므로 스트레스성 동물 핸들링을 제거하고자 합니다.본 연구진은 초파리의 공격성 연구를 위해 실험 전, 중, 후에 동물을 전혀 핸들링할 필요가 없는 새로운 챔버를 개발하였습니다. 이 새로운 챔버를 사용함으로써 측정된 모든 행동 파라미터가 개선된 것으로 나타났습니다. 이 방법을 통해 개체 간의 행동 변동성을 최소화할 수 있습니다.우리는 명확한 우열 관계를 형성하는 데 필요한 시간을 단축했으며, 강한 패배자 및 승리자 심리를 유도할 수 있었습니다. 이 챔버들은 사용이 간편하며 다양한 초파리 행동을 연구하는 다목적으로 활용될 수 있습니다. 실험을 시작하려면, 25°C의 온도와 50% 상대 습도가 유지되는 12시간 광-암 주기 인큐베이터에서 초파리 계통을 사육 및 유지하십시오.다음으로, 신선한 파리 먹이를 녹을 때까지 가열하여 분리용 바이알을 준비합니다. 파스퇴르 피펫을 사용하여 녹은 파리 먹이 약 1.5 milliliters를 빈 유리 시험관에 각각 옮기고, 세밀한 붓을 사용하여 먹이가 굳도록 합니다. 스톡 바이알에서 후기 단계의 수컷 번데기를 조심스럽게 꺼내어 갓 준비한 먹이가 들어 있는 시험관의 측면에 배치합니다.분리 바이알을 솜으로 막고 배양기에 보관합니다. 분리가 완료되면 초파리를 도색할 준비가 된 것입니다. 이산화탄소로 초파리를 마취한 다음, 가는 이쑤시개를 사용하여 도색합니다.흉부에 아크릴 물감을 소량 점찍듯 바르되, 머리, 날개, 복부 또는 다리에는 묻지 않도록 주의합니다. 물감을 약 10초 동안 말린 후 파리들을 원래의 격리 바이알로 조심스럽게 옮깁니다. 격리 바이알을 다시 인큐베이터에 넣습니다.신선한 초파리 먹이를 녹을 때까지 가열하여 장비 준비를 계속합니다. 후방 피펫을 사용하여 0.8 milliliters의 먹이를 스크류 캡 바이알의 뚜껑에 옮기고, 먹이가 식을 때까지 기다립니다. 먹이가 식으면신선한 효모 페이스트 한 방울을 먹이 컵 표면 중앙에 바릅니다. 매회 사용 전, 장치와 개별 투쟁 챔버를 물로 세척하고 페이퍼 타

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

(과일 파리) Drosophila의 침략을 유학

Drosophila의 애벌레는 gustatory 보상과 냄새 자극을 연결 할 수 있습니다. 여기 appetitive 연관 후각 학습의 분석을 할 수있는 간단한 행동 패러다임을 설명합니다.

에 Appetitive 연관 강한 학습<em&gt; Drosophila</em&gt; 애벌레

공격성은 타고난 행동이며 이전의 전투 경험은 전투 전략과 이후 파리 대회의 결과에 영향을 미칩니다. 이 비디오는 초파리의 공격적인 행동을 연구하는 데 사용되는 분석법을 설명합니다. 예시 프로토콜은 파리 취급을 제거하여 동물의 스트레스를 줄이는 설정에서 수행되는 분석을 특징으로 하며, 그렇지 않으면 피험자의 성능에 영향을 미칠 수 있습니다.

초파리 공격성 분석: 파리의 행동 가소성을 테스트하는 방법

여기에서는 스트레스를 받는 개인의 회피를 정량화하는 프로토콜을 제시합니다. 이 패러다임은 강력하면서도 사용자 친화적이며 Drosophila melanogaster의 한 종류의 사회적 상호 작용에 대한 유전자와 환경의 영향을 평가하는 데 사용할 수 있습니다.

사회 회피의 정량화에 대한 간단한 분석 초파리

이 프로토콜은 단일 동물 해상도에서 Drosophila melanogaster의 산란 선호도를 테스트하기 위한 고처리량 분석을 설명합니다.  이 분석은 간단한 의사 결정 과정을 제어하는 유전자 및 회로 구성 요소를 식별할 수 있는 간단하고 효율적이며 확장 가능한 플랫폼을 제공합니다.

높은 처리량 분석은 개인의 알을 낳는 환경 설정을 검사합니다<em&gt; 노랑 초파리</em

우리는 보람 유도 및 보상 상태의 변화에 대한 조치로 자발적인 에탄올 소비를 사용하여 초파리 (Drosophila의 melanogaster의) 경험을 nonrewarding위한 프로토콜을 설명합니다.

사용 보상 추구 행동의 변화를 측정하는 간단한 방법<em&gt; 노랑 초파리</em

이 작품은 성인 과일 파리에서 역경 연관 학습의 분석을 허용하는 간단한 행동 패러다임을 설명합니다. 이 방법은 특정 환경 적 맥락과 감전 사이에 형성된 협회로 인해 타고난 음극식 행동을 억제하는 데 기반을 두고 있습니다.

초파리 연관적 역경 학습을 연구하는 새로운 패러다임으로서의 수동적인 회피 행동

자폐 스펙트럼 장애(ASD)는 사회적 및 의사소통 행동의 장애 및 반복적 행동의 출현과 관련이 있습니다. 초파리 모델에서 ASD 유전자와 행동 결핍 사이의 상관 관계를 연구하기 위해 이 논문에서는 사회적 간격, 공격성, 구애, 그루밍 및 습관화 행동을 분석하기 위한 5가지 행동 패러다임을 설명합니다.

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임

여기에 제시된 방법은 특정 그루밍 행동을 위해 Drosophila melanogaster 에서 얻은 영상의 수동 주석을 포함합니다. 이를 통해 그루밍 횟수와 그루밍에 소요된 전체 시간을 모두 정량화하여 비정형 자가 그루밍 표현형을 평가할 수 있습니다.

과도한 그루밍 표현형 평가를 위한 Drosophila melanogaster 그루밍 행동의 정량화

이 프로토콜은 전통적인 포유류 모델에 대한 대안으로 운동 기능 장애의 정량화를 통해 초파리의 신경 독성을 평가하기 위한 고처리량, 비용 효율적인 방법을 제시합니다. 민감하고 재현 가능하며 윤리적으로 유리한 모델을 사용하여 제약 화합물, 환경 제제 또는 유전자 변형의 신경독성 영향을 평가하는 것을 목표로 합니다.

신경독성에 대한 판독으로서의 Drosophila melanogaster 의 운동 기능 장애에 대한 행동 분석

학습하세요 Drosophila melanogaster 공격 행동 연구를 위한 새로운 챔버 설계 방법을 통해 취급을 완전히 제거하여 스트레스를 줄이고 패자 효과 측정의 신뢰성을 높입니다.

침략 유학을위한 처리 제거하는 새로운 접근하고 "낙오자"효과

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