Name: 신생아 돼지에서 림프의 창자 림프 트렁크와 컬렉션의 장기 도관 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 25 s
Description: 학습하세요 신생아 돼지에서 장 림프 트렁크 카테터 삽입술을 통해 지질 대사를 연구하는 방법을. 이 기술은 연구자들이 장 림프를 수집하여 생체 내 지질 및 약물 대사 메커니즘을 조사할 수 있게 합니다.

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이 작업은 앨버타 축육류국(Alberta Livestock and Meat Agency)과 자연과학 및 연구 위원회(Natural Science and Research Council)의 디스커버리 보조금(Discovery grant to S. D. Proctor)의 자금 지원을 받았습니다.

비디오와 원고 모두에 설명 된 실험 동물의 모든 절차는 동물 케어의 캐나다위원회가 설정 한 가이드 라인을 기관 동물 관리 및 사용위원회의 승인을 관찰 하였다. 1. 수술 마취 및 신생아 돼지의 수술 준비 <ol><li> 된 azaperone (0.3 ㎎ / ㎏), 케타민 하이드로 클로라이드 (10 ㎎ / ㎏), 덱스 메데 토미 딘 (15 μg의 / kg) : 분리 대기실에서 25kg에 포함 된 근육 진정 마취 약물 칵테일 목의 기지 근처에 돼지를 premedicate. 참고 : 향상된 내 수술 통증 조절에 대한 사전 마취 약물 칵테일에 부 프레 노르 핀 (0.005-0.02 ㎎ / ㎏)를 추가합니다. </li><li> 안면 마스크를 사용하여 (500 ㎖-1000 ml / 분의 O이 4-5 %의 이소 플루 란) 흡입 이소 플루 란 흡입 가스 돼지 마취. 수의학 후두 범위 (17~25cm 긴 직선 칼날)를 사용하여 성대 시각화 및 보컬 국소 10 % 리도카인 중성화 적용코듀로이 바지. 리도카인 스프레이 성대 경련 및기도 폐쇄의 가능성을 줄이기 위해 삽관에 30 ~ 60 초 전에 성대에 문의 할 수 있습니다. </li><li> 이소 플루 란 가스로 마취 성대 사이에 수갑을 차고 기관 내 튜브 (5.0-7.0 mm 내부 직경 (ID))를 전달하여 돼지를 삽관 및 유지 보수 (/ 1,000-2,000 ml의에서 0.5 ~ 2.0 %의 이소 플루 란을 분 O 2)를 사용하여 폐쇄 수술을 통해 마취 시스템을 재 호흡 회로. 턱 톤에 의한 마취의 수준, 두 페달과 눈꺼풀 반사 반응을 평가합니다. 만료 된 마취 가스는 소기 및 수술 스위트 외부에 배출된다. </li><li> 70 % 이소 프로필 알코올 린스 2.0 %의 클로르헥시딘 수술 스크럽 솔루션 귀의 외부 표면을 청소합니다. 수술하는 동안, 20 G 정맥 카테터, 정맥 유체 (5-10 ㎖ / kg / hr로 락 테이트 화 링거액)을 제공 귀 정맥 카테 테르를 꽂다. 의대와 혀의 점막 표면에 맥박 산소 측정기를 고정iCal의 테이프 심박수 및 말초 혈액의 산소 포화도 (SPO 2)를 모니터링한다. </li><li> 지느러미 누운 위치에 마취 된 돼지를 놓고 치골의 복부 측면에 중반 흉부 꼬리 쪽의 복부 복부를 면도. 이 2.0 %의 클로르헥시딘에게 외과 수술 및 멸균 세척을 교대로이 지역을 청소합니다. </li><li> 수술 스위트 마취 돼지를 전송하고 70 % 이소 프로필 알코올 린스의 최종 수술 스크럽을 적용, 그것은 건조 할 수 있도록하고 동물을 드레이프. </li><li> 체온을 모니터링 직장으로 직장 온도 프로브로부터 약 2 ~ 4 cm의 삽입. 수술 중 정상 체온 (38 ~ 40 °의 C)를 유지하기 위해 물 순환 가열 패드에 돼지를 놓습니다. </li><li> 복부 주위의 상부 사분면 패턴에 배치 네 수건 커튼와 돼지 드레이프. 복부 약 5 (c)의 좌우 측면을 따라, 흉부의 검상 부부를 통해 두 번째 드레이프를 처음 드레이프를 놓습니다복부 정중선에 m의 측면. (반대편에 있지만), 약 5 센티미터 복부 정중선 측 방향 복부의 측면 측면을 따라 배치되는 제 2 드레이프처럼 골반의 회장 크레스트와 네 번째 드레이프에서 세 번째 드레이프를 놓습니다. </li><li> 기본 수건 커튼을 통해, 수술 부위에 대한 액세스를 허용하는 슬릿 개구, 큰 테이블 드레이프를 놓고 돼지와 전체 수술 테이블 커버. 마지막 드레이프가 큰 테이블 드레이프에 둔 일회용 steri - 드레이프이다. </li></ol> 창자 림프 트렁크 2. 복부 수술 및 도관 <ol><li> 기본 복부 근육을 노출 메스 블레이드 20cm의 피부 절개를합니다. 정수리 복막을 노출 모노 폴라 전기 소 (20 와트 설정)으로 복근 층 절개. 복부 내장과 림프관에 액세스 할 수 Metzenbaum 가위와 정수리 복막의 20cm의 직선 세그먼트를 엽니 다. </li><li&gt; 수술 기간 동안 열린 복강을 유지하기 위해 수술 절개의 두개골 측면에서 트랙터를 놓습니다. </li><li> 전체 수술 따뜻한 (37 ° C) 멸균 식염수로 모든 조직을 적셔. 조심스럽게 복강에서 결장, 맹장, 회장 및 공장을 포함한 대장의 큰 부분을 들어 올려 상단 복부, 간, 림프관에 액세스 할 돼지의 왼쪽 측면에 외면 화하다. 부드럽게 장을 지원하기 위해 슬링을 형성하기 위해 추가 수건 커튼과 위치에 표면화 소장을 고정합니다. </li><li> 림프관을 찾은는 약 4cm 오른쪽 신장 정맥, 6cm 꼬리-medial- 대정맥 반장의 복부 및 췌장 22,36,37 근처 오른쪽 간 엽의 내장 측면 아래의 두개골 - 중간을 낳는다. 포털 정맥 (36, 37)의 오른쪽 복부 세그먼트에 나란히 반투명 구조로 림프관을 확인합니다. </li><li> 림프의 VESS를 분리엘 부드럽게 Q 팁 어플리케이터와 함께 첨부 된 조직을 멀리 괴롭 히고하여 주변의 밴드에서. 용기의 측면 측면이 주변 조직으로부터 분리되면, 미세 무딘는 집게를 팁으로 용기 아래에 &quot;터널&quot;개방을 만들 수 있습니다. </li><li> 미세 집게로 림프관 아래에 세 2-0 실크 봉합사를 전달합니다. , 폐색 팽창과 림프와 혈관을 채우기 위해 먼저 대부분의 꼬리 봉합사를 결찰. 의도적으로 림프 혈관에 카테터를 확보하기 위해 상대적으로 긴이 봉합 (4cm)의 끝을 둡니다. 다른 두 봉합은 서로 1.0 cm를 분리하고 보안 꼬리 봉합에 두개골 1.0-1.5 cm 약입니다 놓습니다. 혈관에 카테터의 빠른 확보 할 수 있도록 &#39;하나의 느슨한 끈 넥타이&#39;로이 두 봉합을 둡니다. 참고 : 대부분의 꼬리 결찰 봉합하고 (두 개의 두개골 봉합의) 중간 봉합 사이에있는 림프관의 세그먼트는 카테터를위한 사이트입니다. 스와 관련하여필요한 경우 스트럭처 재료는 2-0 polyglactin 봉합사 2-0 실크 봉합사를 대체 할 수있다. </li><li> 홍채 가위로 배에 작은 구멍을 잘라 잘 무딘 집게로 혈관을 팽창. 용기에 경 사진 단부와 전문 카테터 튜브 (4.06 외경 (OD) X 2.31 mm의 ID)의 약 1.0-1.5 cm를 삽입하고 제자리에 카테터를 고정하는 두 개의 두개골 봉합을 묶어. 용기에 카테터를 확보하기 위해 꼬리 봉합의 긴 봉합 끝을 사용합니다. </li><li> 따뜻한 식염수의 풍부한 양으로 표면화 장을 세척하고 부드럽게 창자의 정확한 해부학 적 위치를 확보 복강으로 돌아갑니다. </li><li> (paralumbar 포사에서 5-10cm 복부) 왼쪽 중간 측면에서 카테터를 외면 화하다. 메스 피부 절개를하고 카테터의 exteriorization위한 개구를 만들 피부 표면에 복강에서 투관침을 통과한다. 복부 CAV에서 카테터를 외면 화하다하기 위해 큰 켈리 집게를 사용하여투관침 개방을 통해 ITY. </li><li> 라운드 (테이퍼) 바늘 2-0 polyglactin 봉합의 간단한 연속 봉합 패턴 정수리 복막을 닫습니다. 둥근 바늘에 2-0 polyglactin 봉합과 간단한 중단 봉합 패턴으로 복부 근육 레이어를 닫습니다. </li><li> 절단 바늘에 2-0 polyglactin 봉합과 표피 하 패턴으로 피부를 닫습니다. 지갑 문자열 봉합 패턴 피부와 절단 바늘에 2-0 나일론 봉합사로 표면화 카테터를 고정합니다. </li><li> 여전히 배치를 용이하게하고 복구하는 동안 돼지의 스트레스를 줄이기 위해 마취 상태에서 돼지 전문 재킷을 놓습니다. </li></ol> 3. 포스트 수술 복구 및 림프 컬렉션 <ol><li> 이전에 흡입 마취의 중단에 약 10 분, 즉시 수술 후 진통제를 제공하기 위해 근육 bupenorphine (0.1 ㎎ / ㎏)을 관리 할 수​​ 있습니다. bupenorphine 계속 (0.1 ㎎ / ㎏) 24 ~ 48 시간 유지하기위한 모든 12 시간수술 후 진통제. </li><li> 수술 후 합병증에 대해 7 일 동안 매일 8 ~ 12 시간을 돼지를 모니터링합니다. </li><li> 에틸렌 디아민 테트라 아세트산 (EDTA), 코팅 및 항생제로 보충 된 500㎖의 폴리 프로필렌 세척 병 림프를 수집; 페니실린 (6000 IU), 스트렙토 마이신 (6 mg) 및 암포 테리 신 B (3 mg)을 7 일 동안 매 12 시간. </li></ol> 지단백질 ApoB48, 중성 지방, 콜레스테롤 및 총 단백질의 정량 4. 림프에서 수집 <ol><li> 4 ℃에서 5 분 동안 1,800 XG에서 림프 샘플을 원심 분리기. 상층 액을 수집하고 중성 지방, 콜레스테롤 및 총 단백질의 정량을 위해 사용합니다. </li><li> 희석 샘플, 샘플 희석 1시 20분 증류수와 1 희석 최종 샘플 : 증류수로 100 세 샘플로 뜨는을 나눈다. </li><li> 시판의 키트, 콜레스테롤 수준을 측정하는 희석 상등액을 사용한다. </li><li> 1시 20분 1:10 사용0 희석 된 샘플은 시판 키트 각각 bicinchoninic 산 총 단백질 분석과 트리글리 세라이드 및 총 단백질 수준을 측정 하였다. </li></ol> 림프 (38)로부터 수집 된 지단백 ApoB48 5. 정량, <ol><li> 적응 면역 웨스턴 블로 팅 방법 (38) 지질 단백질 ApoB48의 농도를 결정합니다. 3~8% 트리스 초산 나트륨 도데 실 설페이트 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동 (SDS-PAGE)으로 분리 총 림프. </li><li> 항 - 염소 이차 항체로 바인딩 할 : 폴리 비닐 리덴 플루오 라이드 막 (0.45 μm의)로 분리 된 단백질을 옮기고 형 ApoB (4000 1)에 염소 폴리 클로 날 항체와이를 부화. </li><li> 정제 설치류 ApoB48 단백질 표준 선형 농도계 비교하여 화학 발광 지단백질 ApoB48 정량화. </li></ol>

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장 림프를 수집하는 다양한 실험 동물 모델에서 지질 8-12 및 약물 13-15 대사, 암 전이 16, 17, 셀 인신 매매와 면역 기능 18-26에 관여하는 메커니즘을 조사 할 수있는 좋은 방법입니다. 실제로, 장기간에 걸쳐 어느 주연 (심성) 및 중앙 (원심성 큰 트렁크 용기) 림프 다량 수확 할 수있는 능력은 면역 변조 제 18-22을 가진 도전 다음 세포 집단에서 발생하는 시간 변화를 이해하는데 특히 중요했다 , 25, 26. 마찬가지로, 중앙 림프의 컬렉션 지단백 대사 8-12에 관여하는 과정을 서술하는 데 도움이되고있다. 림프 컬렉션의 유틸리티는 카테터 절차의 성공과 림프 혈관 내 카테터의 개통에 따라 달라집니다. 관련된 주요 림프 혈관 카테터큰 동물의 창자 림프 배수는 일반적으로 세 가지 수술 방법 중 하나를 사용합니다. 제 1...

림프 시스템은 생리학의 파악 하였다 영역입니다. 림프 카테터의 전임상 모델은 다른 동물 종 1-8에서 발생하는 지질 8-12 및 약물 대사 13-15, 실험적인 치료 (17)와 암 전이 (16)에 관여하는 메커니즘을 조사하기 위해 제약 산업 및 연구 기관에 의해 사용되며, 면역 기능 (18) -26. 본 연구는 지단백질 대사의 성분을 측정하는 돼지 모델에서 장 림프 트렁크 카테터의 사용을 탐구한다. 지단백질 대사는 생산과 분비 킬로 미크론의뿐만 아니라 연관된 지질 및 총 단백질의 변화에​​ 관여한다. 일반적으로 사용되는 설치류 모델과 인간 사이와 같은 지질 대사에 큰 차이가 있기 때문에이 날 지질 연구를 더 비교 정보를 제공 할 수있는 장 림프를 수집하기 위해 돼지 모델을 사용, 중요한 고려 사항입니다사람들 27-31에서 tabolism. 여러 가지 수술 기법은 많은 동물 종에서 장 림프 수집하는 데 사용됩니다 두개골 어깨 접근 방식 (즉, 흉부 덕트 카테터) (5), 측면 상부 측면의 접근 방식 32-34, 및 복부 정중선 또는 paramedian 접근 22,35. 이 동영상은 자세히 장 림프 줄기의 카테터를위한 복부 정중선 수술 방법을 사용하여 돼지의 수술 절차를 설명합니다. 조심 수술 기법의 허가 림프 카테터의이 방법은 장시간에 걸쳐 큰 림프의 수량과 그 구성 요소를 수집합니다. 이 기술은 다양한 생리적 기능을 검사 다양한 분야에 응용 프로그램의 무수를 엽니 다. 응용 프로그램이 포함될 수 있지만, 전신 지질 및 지단백질 대사 immunosurveillance 종양 기원 및 전이, 장 기능, developm, 이에 한정되지 않는다엔트과 장 염증 질환의 진행.

<table><tbody><tr><td>밀러 후두경 블레이드</td><td>Welch Allyn</td><td>68044</td><td>182mm 길이</td></tr><tr><td>Surgivet advisor: 바이탈 사인 모니터</td><td>Surgivet</td><td>V9203</td><td></td></tr><tr><td>직장 온도 프로브</td><td>Surgivet</td><td>V3417</td><td></td></tr><tr><td>모노 폴라 전기 수술 발전기</td><td>Valley Lab</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum 가위</td><td>Fine Science</td><td>14518-18</td><td></td></tr><tr><td>Tuffier 견인</td>기 <td>스티븐스</td><td>162-11-676</td><td></td></tr><tr><td>모기 겸</td>자 <td>스티븐스</td><td>162-7-10</td><td></td></tr><tr><td>켈리 겸자 곡선 (14cm)</td> <td>스티븐스</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>알리스 조직 집게 스티</td><td>븐스</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>집게 드레싱 아이 (10.2cm)</td> <td>스티븐스</td><td>162-18-780</td><td></td></tr><tr><td>집게 옷 매무새 - 아디슨 (12.1cm)</td><td>Stevens</td><td>162-17-2510</td><td></td></tr><tr><td>니들 드라이버</td><td>Stevens</td><td>162-V98-42</td><td></td></tr><tr><td>아이리스 가위</td><td>파인 사이언</td>스 <td>14058-11</td><td></td></tr><tr><td>순환수 펌프</td><td>Jorvet</td><td>J-783X</td><td></td></tr><tr><td>Maxitherm-Vinyl 담요</td><td>Jorvet</td><td>J-784C</td><td></td></tr><tr><td>Q 팁 애플리케이터</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-037-960</td><td></td></tr><tr><td>카테터 삽입&nbsp; 튜빙 (4.06 OD X 2.31 ID)</td><td>Braintree Scientific Inc.</td><td>MRE-160</td><td>마이크로 르네탄 이식 튜브</td></tr><tr><td>2-0 실크 봉합</td>사 <td>Ethicon</td><td>LA556</td><td></td></tr><tr><td>2-0 폴리글락틴 봉합사</td><td>Ethicon</td><td>J443H</td><td>2-0 vicryl</td></tr><tr><td>대형 동물 재킷</td><td>Lomir Biomedical Inc.</td><td>SSJ2YC</td><td></td></tr><tr><td>폴리 프로필렌 세척 병</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-409-22C</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>페니실린-스트렙토마이신</td><td>시그마 알드리치</td><td>D4333</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>시그마 알드리치</td><td>60-00-4</td><td></td></tr><tr><td>암포테리신 B</td><td>시그마 알드리치</td><td>A2411</td><td></td></tr><tr><td>아자페론</td><td>엘랑코 동물 건강</td><td></td><td>스트레스닐</td></tr><tr><td>Dexmedetomidine hydrochloride</td><td>Zoetis</td><td>6295</td><td>Dexdomitor</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbott Animal&nbsp; 건강</td><td>05260-5</td><td>IsoFlo</td></tr><tr><td>케타민 염산염</td><td>Zoetis</td><td>2626</td><td>Ketaset</td></tr><tr><td>Bupenorphine 염산염</td><td>챔피언 Alstoe 동물 건강</td><td></td><td>DIN : 02347510</td></tr><tr><td>6mm 기관내 튜브</td><td>Jorvet</td><td>J-165d</td><td></td></tr><tr><td>10 % 리도카인 스프레이</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>DIN : 02003767</td></tr><tr><td>4 % 클로르헥시딘 수술 스크럽</td><td>Partnar 동물 건강</td><td>PCH-011</td><td>희석 : 2.0 % 용액</td></tr><tr><td>3M 외과 steri- 드레이프</td><td>3M 건강 관리</td><td>1040</td><td></td></tr><tr><td>SDS 페이지 젤</td><td>Invitrogen</td><td>EA0375BOX</td><td>3-8 % 트리스 아세테이트</td></tr><tr><td>폴리 비닐 리덴 플루오 라이드 막</td><td>Millipore</td><td>IPVH00010</td><td>0.45 &mu; m 기공 크기</td></tr><tr><td>ApoB 항체&nbsp;</td><td>EMD Millipore</td><td>AB742</td><td>1:4000 희석</td></tr><tr><td>당나귀 안티-염소 IgG-HRP</td><td>산타크루즈 생명공학</td><td>Sc-2304</td><td></td></tr><tr><td>ECL 프라임 웨스턴 블로팅 시약</td><td>GE 헬스케어 생명과학</td><td>RPN2232&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>트리글리세라이드 키트</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>998-40391/994-40491</td><td></td></tr><tr><td>총 콜레스테롤 키트</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>439-17501</td><td></td></tr><tr><td>총 단백질</td><td>&nbsp; 피어싱&nbsp;</td><td>23225</td><td>비신코닌산 분석</td></tr></tbody></table>

신생아 돼지에서 림프의 창자 림프 트렁크와 컬렉션의 장기 도관

Long-Term Catheterization of the Intestinal Lymph Trunk and Collection of Lymph in Neonatal Pigs

신생아 돼지에서 장 림프 줄기의 카테터 삽입은 대량의 장(중심) 원심성 림프를 장기간 수집할 수 있는 기술입니다. 중요한 것은 장에서 중앙 림프를 수집함으로써 연구자들이 지질 대사, 장 염증 및 암 전이와 관련된 메커니즘과 지질 구성물뿐만 아니라 면역 기능 및 면역 감시에 관여하는 세포를 모두 연구할 수 있다는 것입니다. 복부 정중선 수술 접근법은 두개골 복부에 대한 탁월한 수술적 노출을 허용하고 췌장 근처에 있는 장 림프통 혈관과 오른쪽 간엽의 내장 측면 아래에 있는 문맥의 오른쪽 복부 분절에 비교적 쉽게 접근할 수 있습니다. 혈관을 꼼꼼하게 해부하여 주변 근막에서 분리한 다음 봉합사로 확장시켜 카테터를 혈관에 삽입하고 고정할 수 있습니다. 카테터는 외부로 삽입되며 7일 동안 약 1L/24시간의 림프를 채취합니다. 이 기법을 사용하면 장기간에 걸쳐 많은 양의 중심 림프를 채취할 수 있지만, 성공 여부는 신중한 외과적 절개, 조직 취급 및 적절한 수술 기법에 대한 세심한 주의에 달려 있습니다. 이는 어린 동물을 대상으로 한 수술의 경우 림프관이 쉽게 찢어질 수 있어 수술 및 실험적 실패로 이어질 수 있기 때문에 특히 중요합니다. 이 비디오는 장 림프 채취를 위한 탁월한 수술 기술을 보여줍니다.

<html> 신생아 돼지의 창자 림프 트렁크의 림프 카테터는 7 일 동안 약 1 L 중앙 림프의 / 24 시간의 모음을 할 수 있습니다. 이 실험에서 수집 된 림프 지질 대사, 즉 총 림프 단백질, ApoB48 지단백, 중성 지방, 총 단백질, 콜레스테롤의 구성 요소가 포함되어 있습니다. 표 1 주요 세 돼지 풀 림프 샘플에서 이러한 지질 성분의 대표 양. 특히, 림프의 흐름과 지질 성분은 인라인 장 림프 혈관 카테터 다음 다른 연구자에 의해보고 중앙 림프의 값 (림프 570 ± 158-979 ± 284 ㎖ / 24 시간 25, 360 ± 120 MLL / 24 시간에 흐름이다 1080 720 ± ㎖ / 24 시간 (26), 중성 지방 687 ± 110 밀리그램 / dL로 9 콜레스테롤 63.1 ± 5.6 밀리그램 / dL로 9) 림프 혈관 내 카테터의 적절한 배치를 나타내는. onte...

원심성 림프에서 다량의 지질 대사 성분을 채취하기 위해 신생아 돼지의 장 림프통에 카테터를 삽입하는 수술을 제시합니다.

Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal ...

림프관 카테터 삽입술은 지질 및 약물 대사, 암 전이, 면역 기능과 관련된 메커니즘을 조사하는 데 사용되는 중요한 기술이며, 다양한 동물 모델로부터 다량의 림프액을 수집함으로써 연구자들이 이러한 과정을 연구할 수 있게 합니다. 본 영상에서는 복부 정중앙 접근법을 사용하여 신생 돼지의 장 림프관에 카테터를 삽입하는 외과적 수술 절차를 상세히 보여줍니다. 모든 절차는 앨버타 대학교 동물실험윤리위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았습니다.림프관에 접근하기 위해 복강을 절개하였습니다. 근육층을 열기 위해 절단 설정의 전기소작기를 사용하였습니다. 시술이 진행되는 동안 복벽을 개방 상태로 유지하기 위해 리트랙터를 배치하였습니다.림프관의 위치를 파악하는 데 도움을 주기 위해 주요 복부 기관들을 확인합니다. 소장과 결장의 림프관 분절에 더 쉽게 접근하기 위해, 해당 부위들을 신체의 왼쪽으로 외부로 노출시킵니다. 간과 문맥의 우측 복측 분절을 확인하여 림프관의 기준점을 잡습니다.신생 돼지의 림프관은 매우 섬세하여 쉽게 파열되므로, 면봉과 둔적 기구를 사용하여 세심하게 박리해야 합니다. 여기 장 림프관이 있습니다. 이제 둔적 포셉을 사용하여 림프관 아래로 봉합사를 통과시키고 있습니다.이제 림프관 아래로 세 개의 2-0 실크 봉합사가 통과된 상태입니다. 가장 꼬리 쪽의 봉합사는 혈관을 확장하고 카테터를 혈관에 고정하는 데 사용됩니다. 머리 쪽의 봉합사들은 카테터를 혈관 내에 고정하는 데 사용됩니다.림프관에 작은 절개를 내어 둔한 핀셋으로 혈관을 확장합니다. 카테터를 혈관 내로 삽입합니다. 이때 림프관이 찢어지지 않도록 주의하며 조심스럽게 수행해야 합니다.카테터가 잘 안착되도록 가장 앞쪽의 봉합선 너머까지 진입시켜야 합니다. 세 개의 2-0 실크 봉합사를 사용하여 카테터를 림프관에 고정합니다. 중요한 점은, 먼저 두 개의 앞쪽 봉합사로 카테터를 혈관에 고정한 후, 가장 뒤쪽의 봉합사로 카테터를 묶어 안정성을 더한다는 것입니다.복강을 닫기 전에 림프 흐름이 원활한지 확인하는 것이 중요합니다. 카테터는 돼지의 왼쪽 중간 옆구리로 외부로 노출시킵니다. 대형 포셉을 사용하여 카테터를 복강에서 돼지 옆구리의 외면으로 끌어냅니다.근육층은 테이퍼 바늘(tapered needle)에 2-0 vicryl 봉합사를 사용하여 단순 결절 봉합(simple interrupted suture) 방식으로 봉합합니다. 피부는 커팅 바늘(cutting needle)에 2-0 vicryl 봉합사를 사용하여 연속 피하 봉합(running subcuticular suture) 방식으로 봉합합니다. 카테터가 나오는 절개 부위는 피부를 통과하도록 하며, 커팅 바늘에 2-0 nylon 봉합사를 사용하여 주머니 봉합(purse-string suture) 방식으로 봉합합니다.이러한 폐쇄 조치는 카테터를 따라 내부로 전파되는 상행성 감염을 방지하는 데 도움이 됩니다. 림프 수집 병을 고정하는 재킷은 돼지가 여전히 마취 상태일 때 착용시킵니다. 돼지를 깨우기 전에 카테터를 수집 병에 삽입하고 림프액이 원활하게 흐르는지 확인합니다.돼지들은 시술 후 잘 회복되었으며, 실험 전반에 걸쳐 우수한 림프 흐름이 유지되었습니다. 표는 림프관에서 수집한 림프의 구성 성분을 보여줍니다. 이 성분에는 Apolipoprotein B48, 중성지방 및 콜레스테롤이 포함됩니다.Western Blot 이미지는 수집된 림프 샘플 내에 Apolipoprotein B48과 소량의 혈장 유래 Apolipoprotein B100이 모두 존재함을 보여줍니다. 어린 돼지에서 림프관이 섬세하고 부서지기 쉬워 림프관 카테터 삽입이 기술적으로 어려울 수 있지만, 본 영상은 어린 돼지에게 적절하고 세심한 외과적 기술을 적용함으로써 연구자들에게 장 림프 수집을 위한 훌륭한 모델을 제공할 수 있음을 입증합니다.

long-term-catheterization-intestinal-lymph-trunk-collection-lymph

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

우리는 양의 회장에서 '창자 고리'를 catheterizing위한 새로운 수술 방법을 설명합니다. 일단 동물이 수술에서 회복하고 항생제와 진통제를 통과해야 여러 치료는 카테터를 통해 루프에서 직접 입금하실 수 있습니다.

Ruminants에 창자 루프 Catheterization

이 비디오는 쥐의 장간막 림프관을 캐뉼레이션하는 기술을 보여줍니다. 이 방법을 사용하면 림프액에 존재하는 전체 성분에 직접 접근할 수 있습니다.

Mesenteric Lymph Duct Cannulation in a Rat Model to Harvest 림프액을 수확합니다.

여기에서는 쥐의 장간막 림프관을 캐뉼로화하는 기술을 설명하며, 이를 통해 장 전달 후 림프계를 통한 지질 및 약물 수송을 정량화할 수 있습니다. 이 기술은 장간막 림프 농도 및/또는 유체, 면역 세포, 펩타이드, 단백질 및 친유성 분자의 수송을 평가하는 데 적용할 수 있습니다.

장간막 림프 덕트 유관 쥐 모델 : 창자 림프 약물 운송의 평가에 응용

여기서는 흉부 덕트 림프구를 수집하고 시간 경과 사진을 사용하여 3 시간 동안 쥐 페이어의 패치에서 장 열대 림프구의 이동을 관찰하는 정확한 방법을 설명합니다. 이 기술은 림프구의 역학이 염증 성 조건하에서 어떻게 영향을 받는지 명확히 할 수 있습니다.

쥐 페이어의 패치에서 림프구 역학의 현미경 관찰

본 프로토콜은 마우스에서 십이지장내 영양소 주입에 반응하여 흐르는 장 림프를 분리하기 위한 상세한 수술 프로토콜을 설명합니다. 이를 통해 다양한 실험 영양소에 대한 반응으로 총 장내 지질 흡수 및 유미미크론 합성 및 분비를 생리학적으로 측정할 수 있습니다.

식이 지질 흡수 및 유미미크론 분비의 생체 내 동역학을 정량화하기 위한 마우스의 흐르는 장간막 림프의 분리

돼지의 장기 혈관 접근을 위한 터널형 Hickman 카테터의 삽입 및 유지를 위한 신뢰할 수 있고 재현 가능한 접근법이 설명됩니다. 중심 정맥 카테터를 배치하면 깨어 있는 동물의 전혈을 매일 편리하게 샘플링하고 약물 및 수액을 정맥 투여할 수 있습니다.

전임상 돼지 모델에서 장기 혈관 접근을 위한 Hickman 카테터 사용

이 프로토콜은 기관지폐 이형성증의 분자 유발 요인에 대한 이해를 용이하게 하고 치료 번역을 향상시키기 위해 적절하지 않은 계면활성제 양, 고산소증, 고압 환기 및 염증을 포함하여 미숙아 폐에서 발생하는 초기 병원성 사건을 모델링하는 급성 폐 손상의 신생아 새끼 돼지 모델의 개발을 설명합니다.

미숙아 폐의 초기 환경을 재현하는 신생아 새끼 돼지 급성 폐 손상 모델 개발

이 실험 프로토콜은 두부 영역에서 림프 배출을 직접적이고 정량적으로 평가할 수 있는 깊은 경추 림프관 캐뉼레이션 쥐 모델을 시연합니다. 이 모델은 중추신경계(CNS) 유래 용질, 면역 세포 집단, 그리고 CNS 표적 치료제의 분배 및 제거에 대한 상세한 분석을 지원합니다.

경추 림프관 캐뉴럴 쥐 모델을 이용한 머리와 뇌로부터의 림프 수송 평가

이 실험 프로토콜은 간 림프관 캐뉼 쥐 모델을 설명하여 간 림프 및 혈관 배출을 직접적이고 정량적으로 평가할 수 있게 합니다. 이 모델은 간림프와 전신 혈액을 동시에 샘플링하여 간 수송, 대사, 면역 신호 전달을 조사할 수 있게 하며, 약물 약물동학과 간 특이적 생물학 연구를 지원합니다.

림프와 혈관 동시 샘플링을 통한 간 수송 경로를 평가하는 포괄적인 쥐 모델

형광 이미징은 외과 종양학의 이미지 유도 수술 유망 혁신적인 양상이다. 이 비디오에서 우리는 gynecologic oncologicy에 전시로 형광 이미징을 사용하여 센티널 림프절의 탐지에 대한 기술적인 절차를 설명합니다. multispectral 형광 카메라 시스템이 함께 형광 에이전트 녹색 indocyanine, 적용됩니다.

Gynecologic 종양학의 센티널 림프절의 Intraoperative 감지 Multispectral 실시간 형광 이미징

학습하세요 신생아 돼지에서 장 림프 트렁크 카테터 삽입술을 통해 지질 대사를 연구하는 방법을. 이 기술은 연구자들이 장 림프를 수집하여 생체 내 지질 및 약물 대사 메커니즘을 조사할 수 있게 합니다.

신생아 돼지에서 림프의 창자 림프 트렁크와 컬렉션의 장기 도관

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