2016년 3월 5일
원심성 림프에서 다량의 지질 대사 성분을 채취하기 위해 신생아 돼지의 장 림프통에 카테터를 삽입하는 수술을 제시합니다.
림프 카테터 삽입은 지질 및 약물 대사, 암 전이 및 면역 기능과 관련된 메커니즘을 조사하는 데 사용되는 중요한 기술이며 다양한 동물 모델에서 많은 양의 림프를 수집함으로써 연구자들은 이러한 과정을 연구할 수 있습니다. 이 비디오는 복부 정중선 접근법을 사용하여 신생아 돼지의 장 림프관을 카테터로 삽입하는 데 사용되는 수술 절차를 자세히 보여줍니다. 모든 절차는 University of Alberta Institutional Animal Care and Use Committee의 승인을 받았습니다.
림프관에 접근하기 위해 복강을 열었습니다. 절단 설정의 전기 소작술은 근육층을 여는 데 사용되었습니다. 시술이 진행되는 동안 복벽을 열어 두기 위해 견인기를 배치했습니다.
주요 복부 기관은 림프관의 국소화를 돕기 위해 확인됩니다. 림프관에 대한 접근성을 높이기 위해 소장과 결장의 분절은 신체의 왼쪽으로 외부화됩니다. 림프관은 간과 문맥의 오른쪽 복부 분절을 식별하여 랜드마크가 됩니다.
신생아 돼지의 경우 림프관이 연약하고 쉽게 찢어지기 때문에 면봉과 둔기로 꼼꼼하게 해부해야 합니다. 다음은 장 림프관입니다. 이제 봉합사는 뭉툭한 집게로 림프관 아래를 통과
하고 있습니다.이제 림프관 아래를 통과하는 3개의 2-0 실크 봉합사가 있습니다. 꼬리의 가장 봉합사는 혈관을 확장하고 카테터를 혈관에 고정하는 데 사용됩니다. 두개골 봉합사는 혈관 내부의 카테터를 고정하는 데 사용됩니다.
림프관을 작게 절개하면 뭉툭한 집게로 혈관을 확장할 수 있습니다. 카테터가 혈관에 삽입됩니다. 이것은 림프관이 찢어지지 않도록 부드럽게 이루어져야 합니다.
카테터는 잘 안착되도록 두개골 봉합사 너머로 전진해야 합니다. 3개의 2-0 실크 봉합사는 카테터를 림프관에 고정합니다. 중요한 것은 두 개의 두개골 봉합사를 먼저 사용하여 카테터를 혈관에 고정한 다음 꼬리 봉합사를 사용하여 카테터를 묶어 안정성을 더한다는 것입니다.
복강을 닫기 전에 림프액이 잘 흐르는지 확인하는 것이 중요합니다. 카테터는 돼지의 왼쪽 중앙 측면에 돌출되어 있습니다. 큰 집게를 사용하여 카테터를 복강에서 돼지 옆구리의 외부 표면으로 당깁니다.
근육층은 단순 중단 봉합사 패턴으로 테이퍼 바늘에 2-0 비크릴 봉합사로 닫힙니다. 피부는 달리는 피하 봉합사 패턴으로 절단 바늘에 2-0 비크릴 봉합사로 닫힙니다. 출구 절개를 통해 카테터는 피부를 통과하고 지갑 끈 봉합사 패턴의 절단 바늘에 2-0 나일론 봉합사로 닫힙니다.
이 봉합은 카테터를 따라 안쪽으로 추적되는 상행 감염을 방지하는 데 도움이 됩니다. 림프 채취 병을 담고 있는 재킷을 돼지가 마취 중인 동안 돼지에 씌웁니다. 카테터를 채취 병에 삽입하고 돼지를 깨우기 전에 양호한 림프 흐름을 보장합니다.
돼지는 시술에서 잘 회복되고 실험 내내 우수한 림프 흐름이 유지됩니다. 이 표는 림프관에서 채취한 림프액의 성분을 보여줍니다. 이러한 성분에는 아포지단백질 B48, 트리글리세리드, 콜레스테롤이 포함됩니다.
웨스턴 블롯(Western Blot)의 그림은 수집된 림프 샘플 내에 아포지단백 B48과 소량의 혈장 유래 아포지단백 B100이 모두 존재함을 보여줍니다. 어린 돼지의 림프 카테터 삽입은 림프관이 연약하고 부서지기 쉽기 때문에 기술적으로 어려울 수 있지만, 이 비디오는 어린 돼지에서 적절하고 신중한 수술 기법을 사용하는 것이 연구자들에게 장 림프를 채취하기 위한 훌륭한 모델을 제공할 수 있음을 보여줍니다.
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본 논문은 신생 돼지의 장 림프관에 카테터를 삽입하는 상세한 외과적 절차를 제시합니다. 이 기술을 통해 수출 림프에서 상당량의 지질 대사 성분을 수집할 수 있으며, 이를 통해 지질 및 약물 대사 연구가 용이해집니다.
이 수술 기법은 신생 돼지로부터 장 림프액을 지속적으로 채취할 수 있게 하여, 아포지단백질 및 트리글리세라이드와 같은 지질 대사 성분을 연구하기 위한 신뢰할 수 있는 공급원을 제공합니다. 이 모델은 생리학적으로 유의미한 시스템 내에서 지질 운송 및 염증 매개체의 정량적 분석을 가능하게 함으로써, 초기 발견 단계에서의 기전적 리스크 제거(de-risking)를 지원합니다. 또한 약물 대사 및 면역 조절 경로의 전임상 평가를 위한 중개 연구의 연속성을 제공합니다.
이 방법은 하위 분석을 위해 생물학적으로 유의미한 림프액을 제공함으로써 초기 표적 가설 검증과 전임상 기전 검증을 연결하며, 이를 통해 발굴 워크플로우에 통합됩니다.