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DOI: 10.3791/53483-v
Georg J. Furtmüller*1, Byoungchol Oh*1, Johanna Grahammer*2, Cheng-Hung Lin3, Robert Sucher4, Madeline L. Fryer1, Giorgio Raimondi1, W.P. Andrew Lee1, Gerald Brandacher1
1Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Laboratory,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Visceral, Transplant and Thoracic Surgery,Innsbruck Medical University, 3Center for Vascularized Composite Allotransplantation, Department of Plastic and Reconstructive Surgery,Chang Gung Memorial Hospital and School of Medicine, 4Department of General, Visceral and Transplant Surgery,Charite Berlin
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
슈퍼 미세 혈관 문합을위한 비 봉합 커프 기술을 적용 마우스에서 소성을 뒷다리 이식이 새로운 모델은, 혈관 복합 동종 이식 (VCA)에 관한 생체 역학적 면역 학적 연구를위한 강력한 도구를 제공합니다.
이 교육용 비디오의 전반적인 목표는 초미세 혈관 문합을 위한 비봉합 커프 기술을 사용하여 정교소 뒷다리 이식의 쥐 모델을 소개하는 것입니다. 동물 모델은 인간 질병의 이해와 치료에 가장 중요하며 지난 20년 동안 재건 이식이 임상적 현실이 될 수 있는 길을 열었습니다. 이 특정 모델은 혈관화된 복합 동종이식편에 특이적인 동종면역 반응의 생리학적 경로와 관련된 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.
이 기술의 주요 장점은 비 봉합 커프 기술이 복잡성을 크게 줄이고이 초 미세 혈관 절차의 성공률을 높인다는 것입니다. 발가락 꼬집기로 적절한 진정 수준을 확인한 후 기증 동물의 뒷다리와 사타구니를 면도합니다. 다음으로 10% 포비돈 요오드로 피부를 소독하고 쥐를 해부 현미경 아래에 놓습니다.
가위를 사용하여 허벅지 중간 부위에 근위부의 사타구니 피부 절개로 기증자 사지 채취를 시작합니다. 뒷다리를 신체의 나머지 부분과 구분하기 위해 절개 부위를 상황에 따라 연결합니다. 대퇴 동맥, 정맥 및 신경을 식별하고 해부합니다.
그런 다음 집게와 마이크로 가위를 사용하여 세 가지 구조를 분리합니다. 노터치 기술을 사용하여 혈관 벽에 대한 미세 외상을 방지하는 것은 절차의 성공을 보장하는 데 필수적입니다. 혈관 척추경을 절개한 후에는 마이크로가위를 사용하여 서혜부 인대에서 혈관을 분할합니다.
대략 허벅지 중간에서 개별 복부 및 등쪽 근육 그룹의 분열을 계속하여 이식편을 기증자 동물에서 분리합니다. 그런 다음 대퇴골 샤프트의 중간에서 대퇴골 절단을 횡단합니다. 33 게이지 바늘이 장착된 주사기를 사용하여 적출한 팔다리를 섭씨 4도의 헤파린 식염수 2ml로 씻어냅니다.
그런 다음 대퇴 정맥과 동맥에 개별 폴리이미드 커프를 놓습니다. 그리고 이식편을 젖은 면 거즈에 넣어 섭씨 4도의 페트리 접시에 넣고 삽입될 때까지 보관하십시오. 폴리이미드 커프에 페시스를 장착하는 것은 절차의 가장 중요한 단계입니다.
잘못된 표기는 혈류를 손상시킬 수 있고 부적절한 tish pressmon은 일부 항생제 조직을 노출시켜 혈전증 형성 가능성을 높일 수 있습니다. 수혜자의 뒷다리를 제거하려면 따뜻한 식염수 0.3ML를 복강내로 주사합니다. 뒷다리 주위를 둘레로 절개하고 방금 시연한 대로 대퇴 동맥, 정맥 및 신경을 식별하고 해부합니다.
혈관 척추경이 절개되면 대퇴 혈관을 서혜부 인대에 고정합니다. 그리고 표재성 상복부 동맥에서 원위부로 혈관을 절단합니다. 대략 허벅지 중간에서 개별 복부 및 등쪽 근육 그룹을 계속 나누어 수용 동물로부터 원래 뒷다리를 분리합니다.
그런 다음 대퇴골 샤프트의 중간에 있는 대퇴골을 횡단합니다. 그런 다음 20게이지 척추 바늘을 골수내 막대로 사용하고 수혜자의 대퇴골과 이식편을 원래 뒷다리 위치에 정렬합니다. 기증자와 수혜자의 대퇴골을 연결합니다.
흡수성 봉합사 재료를 사용하여 복부 및 등쪽 근육 그룹을 접합하십시오. 이러한 정렬을 정확하고 신속하게 수행하면 골강에서 장시간 출혈하는 것을 방지할 수 있습니다. 대퇴 혈관을 연결하려면 혈관의 수취인 쪽을 폴리이미드 커프 위로 당깁니다.
그리고 10-0 나일론 봉합사를 사용하여 원주 넥타이로 수혜 혈관을 커프에 고정합니다. 용기가 안정되면 클램프를 해제합니다. 그리고 커프가 잘못 회전하지 않았는지 육안으로 확인합니다.
육안으로 항상성을 확인하고 전기 소작기를 사용하여 출혈의 원인을 멈춥니다. 그런 다음 흡수되지 않는 나일론 봉합사로 피부를 닫습니다. 그리고 동물이 완전히 회복될 때까지 동물을 모니터링하십시오.
이 비봉합 커프 기술을 사용하여 마우스 모델에서 혈관 복합 동종 이식을 수행하면 우수하고 장기적인 이식 및 동물 생존을 용이하게 할 수 있습니다. 또한, 이 기술은 이미지에 의해 문서화된 바와 같이 점진적인 동종이식 거부 및 혈관화된 복합 동종 이식 모델의 재현 가능한 결과를 얻기 위한 신뢰할 수 있는 방법을 나타냅니다. 실제로, 거부 반응을 겪은 동물에서 얻은 조직에 대한 조직학적 분석은 이 쥐 모델에서 동종이식 거부 반응의 재현 가능한 역학을 더욱 강조합니다.
이 기술을 숙달하면 제대로 수행하면 90분에서 120분 안에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 조직 취급에 최대한의 주의를 기울이고 모든 종류의 출혈을 피하는 것이 중요합니다. 개발 후, 이 기술은 재건 이식 분야의 연구자들에게 길을 열어줄 수 있습니다.
혈관화된 복합 동종이식의 동종이식과 관련된 기본적인 기계론적 질문을 탐구합니다. 이 비디오를 시청한 후에는 마우스에서 정소성 뒷다리 이식의 모든 중요한 단계를 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.
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