Name: 망막 질환의 평가에 대한 정량적 안저 자기 형광 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 22 s
Description: 학습하세요 정량적 안저 자기 형광(qAF)을 이용해 망막 색소 상피의 리포푸신 수준을 정량 평가하는 방법을. 이 기술은 연령 관련 황반변성(AMD) 연구와 망막 세포 생물학 연구에 활용됩니다.

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우리는 우리의 협력자, 프랑소와 Delori, 토마스 버크, 그리고 토비아스 Duncker에게 감사의 말씀을 전합니다. 연구 지원 : NIH / NEI R01 EY015520 (RTS, JPG), 연구에서 무제한 자금은 실명 (RTB)을 방지한다.

윤리 정책 :이 연구에 등록 된 모든 환자가 의학의 뉴욕 대학에서 승인 된 기관 검토위원회의 감독에 따라 그렇게했다. 1. 환자 선택 및 이미지를위한 초기 준비 참고 : 다음과 같은 자료가 필요 : 0.5 % tropicamide 안과 솔루션, 2.5 %의 페닐에 안과 솔루션, cSLO는 스펙트럼 영역 빛 간섭 단층 촬영 (SD-OCT) 및 내부 형광 참조 갖추고 있습니다. <ol><li> 촬영에 앞서, 적절 제조업체의 지침에 따라 데이터 수집에 대한 cSLO을 설정합니다. </li><li> cSLO의 내부 형광 참조를 탑재합니다. 참고 : 제조 업체에서 구입 한 바와 같이 내부 형광 참조, 금속 링에 보관하고, 카메라 렌즈 바로 뒤에 배치됩니다. 다른 제조사 cSLO 사용하는 경우에서 설명되는 것과 다른 구성이있을 수있다이 프로토콜. <ol><li> 상기 cSLO에 참조를 삽입 제거하는 렌즈를 트위스트하기 위해 기계의 금속 링의 나사 및 참조를 포함하는 새로운 금속 링으로 대체. 참고 : 레이저 파워 검출기 감도 / 이득의 변동에 대한 보정을 허용하는 내부 형광 참조하면, QAF 기술에 중요하다. </li></ol></li><li> 이미징 모집 환자가 일상적인 동공 확대 검사를 받아야하고 과거 안구 역사와 안구 결과로 나타낼 수있다 기저 질환에 대한 배경 정보를 얻을 수 있습니다. </li><li> 0.5 % tropicamide와 2.5 %의 페닐와 학생들을 팽창. 중요한 단계 : 최소 6 mm로 학생들을 팽창. 참고 :이 빛의 중단 통과를 위해 필수, 따라서 안저의 최적의 시각화 및 측정을위한 것입니다. </li><li> 촬영에 앞서, 턱 턱받침에 쉬고, cSLO에서 제대로 환자를 놓고 이마는 forehea에 배치D 휴식 및 측면 canthi 제대로 지표로 정렬됩니다. </li></ol> 안구 안저 2. 기준 이미징 <ol><li> 첫째, 이미지 거친 초점을 황반 위에 카메라를 중앙 집중화하고 얻기 위해 근적외선 반사율 (IR) 등 (820 nm의 파장)와 안저. <ol><li> 환자가 올​​바른 위치로, IR 촬상 모드 조작부 하드웨어 설정을 전환 위치 안저 카메라의 전체 초점이, 화상을 수동까지 </li><li> 기저 질환의 황반을 평가하는 IR 영상과 함께 스펙트럼 영역 빛 간섭 단층 촬영 (SD-OCT를) 사용하는 제어 패널에 &quot;IR 간섭 단층&quot;의 설정을 조정합니다. </li><li> 영상 창에 존재하는 가이드가 안저의 IR 이미지에 OCT를 방향을 올바르게 사용합니다. 최적 SD 간섭 단층 품질을 달성 OCT의 화상이 촬상 화면의 상단 1/3이되도록 카메라를 배치. 적어도 하나의 수평 라인 SC 획득중심와 통한 전체 이미지 필드에 걸친. </li></ol></li></ol> 3. QAF 이미징 설정 <ol><li> &quot;고속&quot;이미지 수집을 사용합니다. 참고 :이 설정으로 인해 환자의 운동과 홍채 또는 눈꺼풀에 의한 빛의 결과 차단에 신호 손실의 위험을 감소 빠른 이미지 수집, 수 있습니다. </li><li> 프레임 &quot;9의 의미&quot;를 사용합니다. 참고 :이 설정은 이후에 할 수있다 (9) 이미지 프레임의 고속 연속 촬영이 가능 (아래 참조) 소음과 유물을 줄이기 위해 &quot;평균&quot;. </li><li> &quot;30 X 30도&quot;필드를 사용합니다. 참고 :이 이미지 수집 중에 캡처 된 망막 영역의 정도를 의미한다. </li><li> 이것은 처음에 경고 할 수 촬상에 앞서, 청색광에 대해 환자에게 경고. </li><li> AF 모드를 켜고 화면이 최대한입니다 안저 AF (측면과 이미지의 모서리의 최소 어둡게)으로 &quot;충전&quot;하도록 카메라 축을 맞 춥니 다. <ol><li> 환자 h를하는 경우밝은 푸른 빛을 견뎌 AVE 어려움은 더 멀리 눈에서 카메라로 촬영을 시작하고 안저 전체보기가 될 때까지 환자를 향해 천천히 카메라를 가져. 중요한 단계 : 빛이 가려져 있습니다에 들어가거나 눈에서 종료하는 경우, 신호가 발생합니다 감소했다. 지역화 감소 상측 또는 모서리 등의 비대칭 어둡게 보이는 것이다. 안구 운동은 혼자 빛 통행을 방해 할 때 신호의 일반화 된 손실을 볼 수있다. </li></ol></li><li> AF 신호 분야에 걸쳐 최고 수준이되도록 카메라를 맞 춥니 다. 그러나 그들은 거의 상관 관계, 최대 신호보다는 선명한 이미지를 목표로하고 있습니다. 수동으로 또는 검안경 조이스틱으로 카메라의 위치를​​ 변경하는 cSLO를 이동하여 카메라의 초점을 조정합니다. </li><li> 안저 AF 쉽게 볼 수 있도록 감도 / 게인을 조정하지만, 과잉 포화 마십시오. 화상 취득 동안에, 내부 기준 중 하나에 보이는 컬러 픽셀 (상단에 위치한이미지) 또는 안저 신호의 포화 오버 따라서 손실을 나타냅니다. </li></ol> 4. 이미지 인식 참고 : 중요한 단계를 : 이미지 수집의 목표는 세션 내에서 이미지 사이의 변화에​​ 대한 제어 세션 당 2 고품질 9 프레임 이미지 스택을 얻을 수 있어야한다. 환자와 카메라 위치를 변경 한 후 변화에 대한 두 번째 평가하기 위해 두 이미지의 세션 제어를 얻을 수 있습니다. 모든 이미지는 궁극적으로 내부 기준 (아래에서 설명)로 조정됩니다. <ol><li> 단 관능 망막 9 로돕신에 의해 광의 흡수를 최소화하기 위해 &quot;표백&quot;(AF 광에 망막의 전체 노출)의 적어도 20 초 후에 화상을 취득. <ol><li> 카메라 정렬, 초점과 감도를 최적화하기 위해이 기간을 사용합니다. </li></ol></li><li> 신선한 눈물 막이 신호 품질을 향상 각 이미지 수집하기 전에 깜박 주제를 가지고있다. </li><li> 인수의 평면에서 눈꺼풀을 피하십시오. 참고 : 더 어려운 환자를위한 수동으로 개방 눈꺼풀에 도움이 될 수 있습니다. 저자는 조수가이 작업을 수행하는 것이 좋습니다. </li><li> 그 빛이 감소 신호의 결과로 홍채에 의해 방해되지 않도록하기 위해 각 이미지 수집하기 전에 정렬을 최적화합니다. 참고 : 적어도 약간의 움직임이 매우 일반적입니다, 저자는 각각의 이미지 수집하기 전에 필요한 미세 구조 조정을 권장합니다. 안내 및 이미징이 감소 운동을하는 데 도움이 동안 환자를 격려. 운전자주의 산만을 최소화하기 위해 저자는 또한 &quot;취득 버튼&quot;으로 기계의 발 페달을 사용하는 것이 좋습니다. </li><li> 신호 대 잡음비를 증가시키기 위해 9 프레임 스택의 &quot;평균&quot;을 계산함으로써 사후 화상 처리를 수행한다. 평균을 산출하기위한 옵션을 선택하여 cSLO 소프트웨어를 이용하여 스택의 평균을 계산한다. 참고 : 일부 프레임이 최적의 품질을하지 스택이있을 수 있습니다 (즉, 국소 또는 전신시 감소했다최적의 프레임 gnal 상대), 따라서주의 깊게 각 스택을 검사하고 평균의 계산 전에 최적 프레임의 선택을 취소합니다. 주 : 허용 가능한 신호대 잡음비와 평균 이미지는 3 개 이상의 프레임들에서 처리 될 수있다. 측면과 각 이미지의 모서리가 cSLO 자체 내에서 제한으로 인해 중앙 20도보다 낮은 신호를하는 것이 정상입니다. <ol><li> 소프트웨어는 운영자가 회색 수준을 정상화할지 여부를 묻는 메시지가 표시되면 &quot;아니오&quot;를 선택 0과 255 사이 (즉, 히스토그램 스트레칭). 이 분석을 위해 변경되지 않은 그레이 레벨을 유지합니다. </li></ol></li></ol> 5. 이미지 분석 <ol><li> 이전 QAF 기술에서 개발 된 이미지 분석 소프트웨어를 이용하여 설명한 바와 같이 AF 이미지 분석 (IGOR을 9). 이 소프트웨어 프로그램을 사용하여 표준 이미지 분석에 대한 간단한 설명이 아래에 포함된다. <ol><li> 에서 내 보낸 IGOR에 QAF 프로그램과 (.BMP 형식으로) 가져 오기 이미지를로드픽셀 종횡비 768 X 768 (기본 출력 매개 변수)와 cSLO 소프트웨어. </li><li> 드롭 다운 메뉴에서 이미지를 선택하고 분석을 시작합니다. </li><li> &quot;십자선&quot;는 중심와하고 &quot;브래킷&quot;광학 디스크 (이 지표는 ROI를 확장하고 배치하는 데 사용됩니다) 접촉을 위에 놓일 수 있도록 이미지 보정 표시 위치를 조정합니다. 올바른 위치하는 경우, 사용 소프트웨어는 중심와 주변 원주 로아 (참조 그림 1, 2)로 이미지를 채울하라는 메시지가 표시됩니다. </li><li> 내부 형광 기준에 존재하는 수준으로 각 이미지의 전체적인 계조를 보정하는 IGOR에서 옵션을 선택합니다. 주의 :이 단계는 각 화상의 전자 제로 레벨과 각 기기의 내부 기준 보정 계수뿐만 아니라, 나이, 굴절 각막 곡률 포함한 환자 - 관련 인자를 포함하여 시스템 - 관련 인자의 교정을 허용한다. 주 : 분석 소프트웨어 후 고정 R 표시생성 된 이미지와 QAF 값에 egions 각 지역 내에서 설명된다. QAF 값은 자동으로 별도의 창에서 스프레드 시트 형식으로 입력됩니다. &quot; </li><li> 명령 프롬프트 내의 옵션을 선택하여 QAF &quot;열 맵&quot;을 생성한다. 모든 이미지 및 데이터는 적절한 옵션을 선택하여 엑셀 스프레드 시트에 IGOR 소프트웨어에서 내보낼 수 있습니다. </li></ol></li></ol>

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</ol>

STA: 공개 없음, JPG: 공개 없음, RTS: 컨설턴트, Ocata Therapeutics.

이상 RPE에 리포 푸신 분포가 증가 또는 감소 여부, 망막 질환의 민감한 마커이고, 일반적으로 관능 망막 기능의 상실과 관련된다. 여기, 우리는 망막 색소 상피 리포 푸신의 평가를 위해 QAF의 응용 프로그램을 설명합니다. 내부 형광 기준의 설립은 우리의 표준화 된 이미징 기술과 함께 가변 레이저 파워 검출기 감도 9 수정하기는 AF 수준의 신뢰성있는 정량 수 있습니다. 그것은이 방법은 약물이나 유전자 치료 등의 치료 개입의 효능을 평가 결국 진단 및 망막 질환의 모니터링에 도움, 것 우리의 목표입니다. QAF도 위험에 처한 이러한 AMD와 같은 조건에 대한 개인의 층화에 도움이된다. 우리는 망막 병리 (13)의 해석을위한 참조 도구로서 사용될 QAF 데이터의 큰 정상치를 생성했으며, 또한 몇몇 질병 STA에 QAF 설명 하였다스타 르가 르트 병 (10), 황소의 눈의 황반 병증 (12) 베스트 ...

망막 색소 상피 (RPE)는 다수의 공정 1 내지 감각 망막의 기능을 지원한다. 연령 관련 황반 변성 (AMD)은 선진국에서의 치료가 실명의 가장 중요한 원인이며, 안료의 손실 함수 위축의 손실을 포함 RPE의 변화에​​ 의해 특징된다. AMD와 정상적인 노화에있어서, RPE는 리포 푸신 입자라고 포식 감광체 단편을 함유 형광 리소좀 유래 세포 소기관을 축적한다. RPE에 리포 푸신의 축적은 산화 적 장애를 표시 한 것으로 생각 하였지만, 최근의 연구는 RPE 형태 높은 리포 푸신 농도 2 세 눈 정상적인 유지 보여준다. AMD 및 AMD의 진행을위한 그러나, 리포 푸신 분포의 비정상적인 패턴, 리포 푸신의 특정 손실, 문서화 마커, 조직 학적 및 임상 3,4 모두 결함이 사전 처리RPE의 리포 푸신의 노래는 특정 상속 망막 변성에서 발생하는 것으로 나타났다. 스타 르가 르트 병 (STGD)을 앓고있는 환자는 결국 AMD 5에서 보이는 것과 유사한 시력 상실을 개발하고, 젊은 나이에 RPE에 리포 푸신 축적. 이러한 연구 결과는 리포 푸신 축적 자체가 독성 및 RPE 장애 6, 7을 구동 할 수 있다고 제안했다. 그러나 시간이 지남에 STGD와 주제의 자세한 영상 연구는 그 초점 리포 푸신 축적 8 후속 RPE 손실에지도 확인하지 않았다. 리포 푸신 이상이 망막 변성에 대한 마커가 있지만 따라서, 리포 푸신의 직접적인 독성에 대한 역할은 검증되지 않은 남아있다. RPE는 망막의 가장 후방 전지 층이지만, 안저에서의 형광 신호의 대부분을 생성한다. RPE 유래의 생성 및 형광도 (AF)의 검출이 가능 VI 공 초점 스캐닝 레이저 검안경 (cSLO)를 사용하여 수행 될 수있다안저 AF의 공간 분포의 sualization. 특정 망막 변성은 이러한 조건의 진단 및 모니터링 독특한 안저 AF의 패턴 및 AF 이미징 보조를 보여줍니다. 표준 AF 촬영이 임상 적으로 중요하지만, 양적 AF (QAF)는 RPE의 건강을 평가하는 중요한 수단이되고있다. 우리 등을 확실하게 특정 망막 위치 9에서 QAF 레벨을 결정할 수있는 표준화 방법을 개발 하였다. QAF 잠재적 인 진단에 응용 프로그램 및 망막 조건의 모니터링을 가지고 있으며, 또한 예후 및 위험 계층화의 유틸리티를 가질 수있다. 또한 QAF의 진단 능력은 특정 망막 질환 10-12에 대해 기술하고있다. 여기, 우리는 건강하고 병에 걸린 눈의 평가에서의 응용 프로그램의 시각적 데모와 함께 우리의 기술을 수행하기위한 단계별 세부 정보를 제공합니다.

<table><tbody><tr><td>Spectralis HRA + OCT</td><td>하이델베르크 엔지니어링</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.5% 트로피카미드 점안액</td><td></td><td></td><td>모든 브랜드 사용 가능</td></tr><tr><td>2.5% 페닐에프린 점안액</td><td></td><td></td><td>모든 브랜드 사용 가능</td></tr><tr><td>내부 형광등 참조</td><td>Heidelberg Engineering</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IGOR Pro 소프트웨어</td><td>WaveMetrics</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

망막 질환의 평가에 대한 정량적 안저 자기 형광

Quantitative Fundus Autofluorescence for the Evaluation of Retinal Diseases

망막 색소 상피(retinal pigment epithelium, RPE)는 위에 있는 감각 망막과 나란히 배치되어 있으며 시각 시스템의 기능을 지원합니다. RPE가 수행하는 작업 중에는 식세포작용(phagocytosis)과 리소좀 유래 소기관을 통한 외부 광수용체 분절 처리가 있습니다. 저장되어 리포푸신 과립이라고 하는 이러한 분해 산물은 부분적으로 비스레티노이드로 구성되어 있으며, 이는 컨포칼 스캐닝 레이저 검안경(cSLO)을 통해 안저 자가형광으로 임상적으로 검출될 수 있는 광범위한 형광 흡수 및 방출 스펙트럼을 가지고 있습니다. 리포푸신 축적은 노화 증가와 관련이 있지만 망막의 후천성 및 유전성 퇴행성 질환 모두에서 다양한 패턴으로 발견됩니다. 따라서 망막의 축적 패턴을 연구하고 이러한 패턴을 위에 있는 감각 망막의 변화와 연관시키는 것은 망막 질환의 병태생리와 진행을 이해하는 데 필수적입니다. 여기에서는 건강한 눈과 병든 눈 모두에서 RPE 리포푸신 수치를 정량화하기 위해 cSLO를 사용하는 우리 연구실과 다른 연구실에서 사용하는 기술에 대해 설명합니다.

이 기술은 모두 13 건강 상태 및 질병 10-12 QAF을 연구하기 위해 사용되었다. 건강한 눈 (그림 1)에서 RPE에서 방출 AF는 안저 (그림 1A)에 걸쳐 비교적 균일하게 분포되어있다. 감소 강도로 인해 황반 색소에 의해 빛의 차단에 중심 황반 지역에서 볼, 그리고 측면과 이미지의 모서리 인해 눈과 카메라의 광학에있다. 선박은 어두워 잘 획득 된 영상에서 선명한 초점이되어야한다.도 1b는도 1a에서 QAF 수준의 해당 열 맵 표현을 보여줍니다. 따뜻한 색상이 더 높은 강도의 영역에 해당하는 동안 쿨러 색상은 낮은 강도의 영역에 해당합니다. 최대 강도는 일반적으로 (도 1b에 나타낸) 제 8 획 동심 링에서 볼 수있다. 이 지역은 또한 영상 관...

망막 색소 상피(RPE)는 리포푸신으로 축적된 시각 주기 부산물을 재생하여 감각 망막을 지원합니다. 이러한 제품은 자가 형광성이며 in vivo에서 정성적으로 이미지화할 수 있습니다. 여기에서는 컨포칼 스캐닝 레이저 검안경을 사용하여 RPE 리포푸신을 정량적으로 이미지화하는 방법을 설명합니다.

The retinal pigment epithelium (RPE) is juxtaposed to the overlying sensory retina, and supports the function of the visual system. Among the tasks ...

정량적 자가형광(qAF)의 전반적인 목적은 건강한 눈과 질환이 있는 눈 모두에서 망막의 지지 세포인 망막 색소 상피(RPE) 내 리포푸신(lipofuscin)의 전반적인 수준을 평가하는 것입니다. 이 기술은 망막 색소 상피의 건강 상태가 연령 관련 황반변성(AMD)의 진행과 어떻게 상호작용하는지와 같은 망막 세포 생물학의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 안저의 리포푸신 자가형광 절대 수준을 결정할 수 있다는 것이며, 따라서 환자 간, 환자의 영상 촬영 세션 간, 그리고 대규모 연구 집단 내에서 정량적이고 재현 가능한 추적 관찰이 가능하다는 점입니다.영상 촬영 전, 제조사의 지침에 따라 데이터 획득을 위한 공초점 주사 레이저 검안경(confocal scanning laser opthamoscopy, CSLO)을 적절히 설정하십시오. 제조사에서 구매한 내부 형광 기준물을 장착하려면, 렌즈를 돌려 분리한 후 기기의 금속 링을 풀고 기준물이 포함된 새 금속 링으로 교체하십시오. 빛의 끊김 없는 통과를 위해 동공이 최소 6mm까지 확장되어야 합니다.0.5% tropicamide와 2.5% phenylephrine을 사용하여 환자의 동공을 최소 6mm까지 확장하십시오. 이는 안저를 관찰하고 측정하기 위해 빛이 끊김 없이 통과하도록 하는 데 필수적입니다. 환자를 CSLO에 적절히 배치하여 턱을 턱받침에 올리고, 이마를 이마 받침대에 밀착시키며, 외안각이 표시선과 정확히 일치하도록 조절하십시오. 기준 영상을 획득하려면, 먼저 근적외선 반사(IR 광선)로 안저를 촬영하여 카메라를 황반 중앙에 맞추고 대략적인 초점을 잡으십시오.환자를 적절한 위치에 배치한 후, 제어 패널의 하드웨어 설정을 IR 영상 모드로 전환하고, 안저가 완전히 초점에 들어올 때까지 카메라의 위치를 수동으로 조절하여 영상을 촬영하십시오. 제어 패널의 설정을 IROCT로 조정하며, 이는 IR 영상과 병행하여 스펙트럼 영역 광간섭 단층촬영(SDOCT)을 사용하여 황반의 기저 질환 여부를 평가하는 방식입니다. 영상 창에 표시된 가이드를 사용하여 OCT를 안저의 IR 영상에 맞게 정확하게 정렬하십시오.최적의 SDOCT 품질을 얻으려면, OCT 이미지가 촬영 창의 상단 3분의 1 지점에 위치하도록 카메라를 배치하십시오. 황반 중심와를 통과하며 전체 촬영 영역을 가로지르는 수평 라인 스캔을 최소 한 번 이상 수행하십시오. qAF 촬영을 설정하려면 고속 이미지 획득 방식을 사용하여, 환자의 움직임으로 인한 신호 손실이나 홍채 및 눈꺼풀에 의한 빛 차단 위험을 줄이십시오.노이즈와 아티팩트를 줄이기 위해 9개의 이미지 프레임을 빠르게 순차적으로 캡처하여 평균을 내는 Mean of 9 frames 기능을 사용하십시오. 이미지 획득 시 캡처되는 망막 영역의 각도를 의미하는 30 x 30도 시야를 선택하십시오. 환자에게 청색광에 대해 안내한 후, AF 모드를 켜고 이미지의 측면과 모서리의 어두운 부분이 최소화되어 화면이 안저 AF로 최대한 채워지도록 카메라 축을 맞추십시오.환자가 밝은 청색광을 견디기 어려워하는 경우, 카메라를 눈에서 더 멀리 떨어뜨려 촬영을 시작하고, 안저가 완전히 보일 때까지 카메라를 환자 쪽으로 천천히 이동시키십시오. 수동으로 또는 안저카메라 조이스틱을 사용하여 CSLO를 이동시켜 카메라 정렬을 조정함으로써, 가장 선명한 이미지를 얻는 것보다 전체 시야에서 AF 신호가 최고 수준이 되도록 카메라 위치를 재설정하십시오. 이미지 획득 중에 내부 기준 이미지나 안저 이미지에서 유색 픽셀이 보이면 과포화 상태임을 나타내며, 이는 곧 신호 손실을 의미합니다.영상 촬영 중 감각 망막의 rhodopsin에 의한 빛 흡수를 최소화하기 위해, 망막을 AF 광원에 최소 20초 동안 완전히 노출시키십시오. 이 시간 동안 카메라 정렬, 초점 및 감도를 최적화하십시오. 신선한 눈물막이 신호 품질을 향상시키므로, 각 영상 획득 전에 피험자가 눈을 깜빡이게 하십시오.획득 평면에서 눈꺼풀을 피하고 이미지를 촬영하십시오. 데이터 분석을 위해 이미지 세션당 최소 두 장의 고품질 이미지를 생성하는 것이 중요합니다. 신호 대 잡음비를 높이기 위해 CSLO 소프트웨어를 사용하여 9개 프레임 스택의 평균을 계산함으로써 후처리 과정을 수행하십시오.텍스트 프로토콜에 따라 이미지 분석을 수행하십시오. 여기에서 보는 바와 같이, 건강한 눈의 경우 RPE에서 방출되는 AF는 안저 전체에 걸쳐 비교적 균일하게 분포되어 있습니다. 황반 색소에 의한 빛의 차단으로 인해 중심 황반 영역에서 강도가 감소하며, 눈과 카메라의 광학적 특성으로 인해 주변부와 모서리 부분에서도 강도가 감소하는 것이 관찰됩니다.혈관은 어둡게 나타나야 하며 초점이 명확해야 합니다. 이 그림은 해당 그림의 qAF 수준을 히트맵 형태로 나타낸 것입니다. 차가운 색상은 AF 강도가 낮은 영역에 해당하며, 따뜻한 색상은 AF 강도가 높은 영역에 해당합니다.최대 강도는 일반적으로 두 번째 동심 8분할 링에서 관찰되며, 이 영역의 평균 강도가 대부분의 데이터 분석에 사용됩니다. 여기에는 AMD 환자 안구의 대표적인 분석 결과가 제시되어 있으며, AMD의 진행 단계인 지리적 위축이 나타나 있습니다. 이러한 형태의 AMD는 RPE 소실로 인한 국소 부위를 유발하며, 이는 AF의 현저한 감소 또는 소실로 입증되며 점진적인 중심 시력 상실을 초래합니다.이 절차를 시도할 때는 데이터 품질을 극대화하기 위해 후보 환자를 신중하게 선정하고 재현성 있게 고품질 이미지를 얻는 것이 중요합니다. 이 절차를 사용하면 망막 건강에 대한 종단적 추적 관찰이 가능하여 망막 변성의 진행 정도를 결정할 수 있습니다. 이 기술은 개발 이후 안과 분야의 연구자들이 망막 변성을 추적하고 분석할 수 있는 길을 열어주었습니다.이 영상을 시청하신 후, 망막 변성 환자를 평가하기 위해 정량적 자가형광 분석법을 사용하는 방법에 대해 충분히 이해하셨기를 바랍니다. 시청해 주셔서 감사하며, 귀하의 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

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편리한 도구로 안저 사진은 역학 연구에서 심혈관 질환의 위험 요인에 대한 미세 혈관 응답을 연구하기 위해

망막 뇌와 눈에 띄는 유사성을 공유 하 고 따라서 비 접촉 맥 관 구조와 뇌의 신경 구조를 공부 하는 독특한 창을 나타냅니다. 이 프로토콜에는 망막 이미징 기술을 사용 하 여 치 매를 공부 하는 방법을 설명 합니다. 이 방법은 잠재적으로 치 매 진단 및 위험 평가에 도움이 됩니다.

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격리 된 검사 시각적 으로 환자에서 초기 단계 오픈 앵글 녹내장 평가 잠재력

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쥐 모델에서의 망막 병리생리학적 평가

마우스 모델은 망막 색소 상피(RPE)의 생물학을 조사하는 데 유용한 도구가 될 수 있습니다. 마우스가 일련의 RPE 병리를 개발할 수 있다는 것이 확인되었습니다. 여기에서는 빛, 투과 전자 및 공초점 현미경을 사용하여 마우스의 RPE 병리를 설명하고 정량화하는 표현형 프로토콜을 설명합니다.

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안저 자가형광의 연령 관련 황반변성 병변 특이적 변이를 정량적으로 결정하기 위한 워크플로우

실험실 분석은 연령 관련 황반변성(AMD)의 종방향 광간섭 단층촬영(OCT) 기반 다중 모드 영상의 예후 가치를 활용할 수 있습니다. AMD가 있거나 없는 인간 기증자의 눈은 조직 절편 전에 OCT, 색상, 근적외선 반사율 스캐닝 레이저 검안경 및 자가형광을 사용하여 이미지화됩니다.

Ex Vivo (생체 외 ) 연령 관련 황반변성 연구를 위한 인간 기증자 눈의 OCT 기반 다중 모드 이미징

파킨슨 병을 일으키는 유전자에 변이를 가지고 환자의 섬유 아세포가 쉽게 접근 할 수를...

파킨슨 병 분야에서 Mitochondrial Phenotypes을 모니터링하기위한 기본 인간 섬유 아세포의 사용

여기에서는 금속 망막 점착 및 망막 보철물에 직접 인접한 안구 조직을 시각화하기 위한 조직학적 기술에 대해 설명합니다.

현지화 된 조직 병리학 적 분석을위한 망막 보철물로 이식 된 가공 눈을위한 기술 : 파트 망막 끌어 올릴 2 망막 임플란트

학습하세요 정량적 안저 자기 형광(qAF)을 이용해 망막 색소 상피의 리포푸신 수준을 정량 평가하는 방법을. 이 기술은 연령 관련 황반변성(AMD) 연구와 망막 세포 생물학 연구에 활용됩니다.

망막 질환의 평가에 대한 정량적 안저 자기 형광

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