siRNA를 매개 음소거로 마우스 난 모세포의 감수 스핀들 평가

이 절차의 전반적인 목표는 페린(perrin)과 같은 주요 MTOC 관련 단백질의 irna 매개 고갈 후 Cytes에서 myotic spindle 형성 및 조직을 평가하는 것입니다. 이 방법은 염색체 분리를 조절하는 메커니즘 및 모든 부위에서 이수성으로 이어지는 잠재적 중단과 같은 생식 생물학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 개별 cyte의 효율적인 transcript, knockdown 및 특이적 면역형광 분석을 수행할 수 있다는 것입니다.

이 절차는 또한 채취일 치료제 48시간 전에 거의 모든 표적 단백질을 연구하도록 조정할 수 있습니다: 난모세포 채취에 사용된 암컷 마우스는 표준 관행에 따라 난소를 채취한 후 복강내 주입된 5개의 국제 단위의 PMSG로 난모세포 채취에 사용되었습니다. BSA와 mil reone이 보충된 예열 평형 MEM 배지 접시로 옮기고 해부 현미경으로 세포를 분리할 준비를 합니다. 27 게이지 바늘을 사용하여 난소를 배양 접시 바닥에 고정하여 적운 세포 복합체 또는 COC를 방출하고 두 번째 바늘을 사용하여 난모 세포 흡인 또는 표준 구강 피펫팅 방법을 사용하여 전방 여포를 뚫습니다.