Name: 에 수용성 화합물로 SCA1 마우스 치료가 아닌 것은 - 특히 미토콘드리아 기능 향상 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 47 s
Description: 학습하세요 SCA1 마우스에서 수용성 미토콘드리아 활성제의 치료 효과를 평가하는 행동 및 조직학적 분석 방법을. 이 기법은 소뇌 퇴행성 질환 연구에 활용됩니다.

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형질전환 마우스를 아낌없이 선물해 주신 미네소타 대학의 Harry Orr 박사님께 감사드립니다. 또한 이전 실험을 수행한 Skidmore College 졸업생인 Monica Villegas, Porter Hall, Mitchell Spring, Nicholas Toker, Jenny Zhang, Chloe Larson 및 Cheyanne Slocum에게도 감사드립니다. 또한 이러한 방법의 개발에 자금을 지원해 주신 Skidmore College에 감사드립니다.

<ol><li>Stucki, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+impairments+contribute+to+Spinocerebellar+ataxia+type+1+progression+and+can+be+ameliorated+by+the+mitochondria-targeted+antioxidant+MitoQ%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial impairments contribute to Spinocerebellar ataxia type 1 progression and can be ameliorated by the mitochondria-targeted antioxidant MitoQ.</a> Free Radic Biol Med. 97, 427-440 (2016).</li>
<li>Breuer, M. E., Willems, P. H., Russel, F. G., Koopman, W. J., Smeitink, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+mitochondrial+dysfunctions+in+the+brain%2C+from+mice+to+men%5BTitle%5D)+AND+%22J+Inherit+Metab+Dis%22%5BJournal%5D)">Modeling mitochondrial dysfunctions in the brain, from mice to men.</a> J Inherit Metab Dis. 35 (2), 193-210 (2012).</li>
<li>Breuer, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+mitochondrial+OXPHOS+dysfunction+in+the+development+of+neurologic+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">The role of mitochondrial OXPHOS dysfunction in the development of neurologic diseases.</a> Neurobiol Dis. , (2012).</li>
<li>Hroudová, J., Singh, N., Fizar, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dysfunctions+in+neurodegenerative+diseases%2C+relevance+to+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Res+Int%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dysfunctions in neurodegenerative diseases, relevance to Alzheimer's disease.</a> Biomed Res Int. 2014, 175062(2014).</li>
<li>Burright, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SCA1+transgenic+mice%2C+a+model+for+neurodegeneration+caused+by+an+expanded+CAG+trinucleotide+repeat%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">SCA1 transgenic mice, a model for neurodegeneration caused by an expanded CAG trinucleotide repeat.</a> Cell. 82 (6), 937-948 (1995).</li>
<li>Clark, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purkinje+cell+expression+of+a+mutant+allele+of+SCA1+in+transgenic+mice+leads+to+disparate+effects+on+motor+behaviors%2C+followed+by+a+progressive+cerebellar+dysfunction+and+histological+alterations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Purkinje cell expression of a mutant allele of SCA1 in transgenic mice leads to disparate effects on motor behaviors, followed by a progressive cerebellar dysfunction and histological alterations.</a> J Neurosci. 17 (19), 7385-7395 (1997).</li>
<li>Kuznetsov, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+mitochondrial+function+in+situ+in+permeabilized+muscle+fibers%2C+tissues+and+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Analysis of mitochondrial function in situ in permeabilized muscle fibers, tissues and cells.</a> Nat Protoc. 3 (6), 965-976 (2008).</li>
<li>Deng-Bryant, Y., Singh, I. N., Carrico, K. M., Hall, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effects+of+tempol%2C+a+catalytic+scavenger+of+peroxynitrite-derived+free+radicals%2C+in+a+mouse+traumatic+brain+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effects of tempol, a catalytic scavenger of peroxynitrite-derived free radicals, in a mouse traumatic brain injury model.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 28 (6), 1114-1126 (2008).</li>
<li>Vaishnav, R. A., Singh, I. N., Miller, D. M., Hall, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+peroxidation-derived+reactive+aldehydes+directly+and+differentially+impair+spinal+cord+and+brain+mitochondrial+function%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Lipid peroxidation-derived reactive aldehydes directly and differentially impair spinal cord and brain mitochondrial function.</a> J Neurotrauma. 27 (7), 1311-1320 (2010).</li>
<li>Matthews, R. T., Yang, L., Browne, S., Baik, M., Beal, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coenzyme+Q10+administration+increases+brain+mitochondrial+concentrations+and+exerts+neuroprotective+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Coenzyme Q10 administration increases brain mitochondrial concentrations and exerts neuroprotective effects.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95 (15), 8892-8897 (1998).</li>
<li>Ferrante, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effects+of+creatine+in+a+transgenic+mouse+model+of+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effects of creatine in a transgenic mouse model of Huntington's disease.</a> J Neurosci. 20 (12), 4389-4397 (2000).</li>
<li>Ferrante, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+effects+of+coenzyme+Q10+and+remacemide+in+transgenic+mouse+models+of+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Therapeutic effects of coenzyme Q10 and remacemide in transgenic mouse models of Huntington's disease.</a> J Neurosci. 22 (5), 1592-1599 (2002).</li>
<li>Hersch, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creatine+in+Huntington+disease+is+safe%2C+tolerable%2C+bioavailable+in+brain+and+reduces+serum+8OH2%27dG%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Creatine in Huntington disease is safe, tolerable, bioavailable in brain and reduces serum 8OH2'dG.</a> Neurology. 66 (2), 250-252 (2006).</li>
<li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combination+therapy+with+coenzyme+Q10+and+creatine+produces+additive+neuroprotective+effects+in+models+of+Parkinson%27s+and+Huntington%27s+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Combination therapy with coenzyme Q10 and creatine produces additive neuroprotective effects in models of Parkinson's and Huntington's diseases.</a> J Neurochem. 109 (5), 1427-1439 (2009).</li>
<li>Yang, X., Dai, G., Li, G., Yang, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coenzyme+Q10+reduces+beta-amyloid+plaque+in+an+APP%2FPS1+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Coenzyme Q10 reduces beta-amyloid plaque in an APP/PS1 transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> J Mol Neurosci. 41 (1), 110-113 (2010).</li>
<li>Sandhir, R., Mehrotra, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quercetin+supplementation+is+effective+in+improving+mitochondrial+dysfunctions+induced+by+3-nitropropionic+acid%2C+implications+in+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Quercetin supplementation is effective in improving mitochondrial dysfunctions induced by 3-nitropropionic acid, implications in Huntington's disease.</a> Biochim Biophys Acta. 1832 (3), 421-430 (2013).</li>
<li>Ergonul, P. G., Nergiz, C. <a target="_blank" href="http://www.agriculturejournals.cz/publicFiles/31627.pdf">Determination of organic acids in olive fruit by HPLC.</a> 'Czech Food Sci. 28 (3), 202-205 (2010).</li>
<li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+quantiative+measurement+of+motor+inco-ordination+in+naive+mice+using+an+acelerating+rotarod%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The quantiative measurement of motor inco-ordination in naive mice using an acelerating rotarod.</a> J Pharm Pharmacol. 20 (4), 302-304 (1968).</li>
<li>Luong, T. N., Carlisle, H. J., Southwell, A., Patterson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+motor+balance+and+coordination+in+mice+using+the+balance+beam%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assessment of motor balance and coordination in mice using the balance beam.</a> J Vis Exp. (49), (2011).</li>
<li>Servadio, A., Koshy, B., Armstrong, D., Antalffy, B., Orr, H. T., Zoghbi, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+analysis+of+the+ataxin-1+protein+in+tissues+from+normal+and+spinocerebellar+ataxia+type+1+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Expression analysis of the ataxin-1 protein in tissues from normal and spinocerebellar ataxia type 1 individuals.</a> Nat Genet. 10 (1), 94-98 (1995).</li>
<li>Klement, I. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ataxin-1+nuclear+localization+and+aggregation%2C+role+in+polyglutamine-induced+disease+in+SCA1+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Ataxin-1 nuclear localization and aggregation, role in polyglutamine-induced disease in SCA1 transgenic mice.</a> Cell. 95 (1), 41-53 (1998).</li>
<li>Serra, H. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+profiling+links+SCA1+pathophysiology+to+glutamate+signaling+in+Purkinje+cells+of+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Gene profiling links SCA1 pathophysiology to glutamate signaling in Purkinje cells of transgenic mice.</a> Hum Mol Genet. 13 (20), 2535-2543 (2004).</li>
<li>Carter, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+progressive+motor+deficits+in+mice+transgenic+for+the+human+Huntington%27s+disease+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Characterization of progressive motor deficits in mice transgenic for the human Huntington's disease mutation.</a> J Neurosci. 19 (8), 3248-3257 (1999).</li>
<li>Anjomani Virmouni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+GAA-repeat-expansion-based+mouse+model+of+Friedreich%27s+ataxia%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">A novel GAA-repeat-expansion-based mouse model of Friedreich's ataxia.</a> Dis Model Mech. 8 (3), 225-235 (2015).</li>
</ol>

저자는 공개 아무것도 없어.

설명 된 바와 같이 이러한 방법을 사용하는 경우, 이들은 검출 및 소뇌 신경 퇴행성 질환의 마우스 모델에서 산화 적 인산화 매개 미토콘드리아 기능 부전을 경감 할 수있다. 결합 된 생화학 적 및 행동 분석은 소뇌 신경 퇴행성 질환의 병리에 미토콘드리아 기여의 정도를 결정하기위한 다각적 인 방법입니다. 신진 대사를 자극하고 미토콘드리아 기능을 강화하기 위해 숙신산과 쥐를 치료함으로써, 우리는 소뇌 행동 적자와 소뇌 변성의 구조를 표시 할 수 있습니다. 여기서 제시된 방법론은 소뇌 신경 퇴행성 질환의 치료에 잠재적 인 수용성 대사 표적 다양한 화합물을 시험하는데 사용될 수있다. 숙신산은 케이지 식수를 통해 간단한 배달을 허용하고 보충 식품 펠렛의 작성을 필요로하지 않습니다 0.75 ㎎ / ㎖의 물에 쉽게 용해된다. 다른 수용성화합물은 용이 프로토콜로 대체 될 수있다. 수용성없는 대사 표적 화합물을 사용하는 경우, 우리의 방법은 용이하게 보충 식품 펠릿 <sup class="xre...

미토콘드리아의 전자 전달계를 이용하여 산화 적 인산화 (OXPHOS)를 통해 생성 된 미토콘드리아 ATP의 대부분과, 아데노신 삼인산 (ATP), 세포 에너지의 필수 조효소의 주요 생산자이다. 뇌는 높은 신진 대사 요구와 신경 활동에 전력을 공급하기위한 산화 적 인산화에 대한 의존도를 부여, 미토콘드리아 기능 장애에 매우 민감하다. 그 결과, 미토콘드리아 장애는 노화 과정 트리거 (1) 및 다수의 신경 퇴행성 질환은 2, 3, 4의 병인에 연루되어있다. 따라서 미토콘드리아는 신경 퇴행에 대한 매력적인 치료 대상이되는 것을 다음과 같습니다. 이 프로토콜에서, 우리는 미토콘드리아의 연구를위한 모델 신경 퇴행성 질환과 같은 척수 소 뇌성 실조증 유형 1 (SCA1)의 사용을 채택리터 부전과 미토콘드리아 - 표적으로 한 치료의 개발. SCA1 다른 뇌 영역의 조롱박 소뇌의 뉴런과 뉴런의 진보적 인 변성을 트리거 ataxin-1 유전자 산물의 폴리 글루타민 (polyQ) 반복 확장 돌연변이에 의해 발생합니다. 조롱박 세포 특이 적 프로모터의 제어하에 polyQ 돌연변이 ataxin-1 유전자를 발현합니다 (SCA1 마우스로 지정) 여기서 사용 된 트랜스 제닉 마우스 선은 SCA1 5 조롱박 세포 성분의 표적 분석을 허용한다. SCA1 마우스는 점진적 조롱박 세포의 퇴화를 받아야하고 운동 실조증 보행 (6)을 개발한다. 미토콘드리아 복잡한 기능 장애 및 미토콘드리아 타겟 치료 효능은 분자 및 행동 분석의 배터리로 평가 될 수있다. 복잡한 미토콘드리아 장애는 소뇌 조직 안에서 변화된 산소 소비량을 검출 호흡 분석하여 생체 측정전자 전달계 기판 및 억제제 (7)의 존재. 호흡 분석은 이전에 투과성이 조직, 미토콘드리아 분리하고, 전체 조직 7, 8, 9로 사용되어왔다. 이들은 예컨대 투과 전자 현미경 또는 면역 형광 염색법과 같은 형태 학적 데이터 수집 방법과 달리 미토콘드리아 기능의 직접적인 평가를 허용한다. 전체 조직보다는 격리 미토콘드리아의 사용은 분리 과정 중에 발생할 수 7 건강한 미토콘드리아 바이어스 선택을 방지한다. 도시 된 바와 같이 프로토콜에 적응되면, 호흡 분석은 소뇌 신경 퇴행성 질환 상태에서 미토콘드리아 기능 장애를 검출하기위한 유용한 방법이다. 대사 비특이적 활성제 퇴행성 diseas의 형질 전환 마우스 모델에서 미토콘드리아 기능 부전을 추론하는데 사용될 수있다전자 및 새로운 치료법의 개발에 도움. 퀘르세틴 보효소 Q10과 크레아틴 모든 환자 및 신경 퇴행성 질환 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16의 동물 모델에서 신경 퇴행성 질환의 병리를 개선하는 것으로 나타났다. 여기에서 우리는 신진 대사를 자극하고 신경 퇴행성 질환에서 미토콘드리아의 기능을 높일 수있는 새로운 신진 대사 활성화, 숙신산을 제시한다. 활성제가 혈액 뇌 장벽을 가로 지르는 것을 보장하기 위해, HPLC 처리 된 마우스는 17 신경 조직에 배달을 검출하도록 사용 하였다. 숙신산과 같은 대사 표적 수용성 화합물의 치료 효과를 평가하기 위해, 행동 패러다임과 immunopathological 연구 전지가 사용될 수있다. 뒤소뇌 신경 퇴행성 질환, 풋 프린트 활주로 분석, 빔 분석 및 가속 회전로드 분석에서 발견 된 모터 조정 적자에 전자는 행동 병리학 6, 18, 19의 구조를 검색하는 데 사용됩니다. 이러한 조치는 소뇌 조직 6, 20, 21의 정의 소엽 내에서 분자 (조롱박 세포 돌기의 아버 길이로 정의) 층의 두께 및 조롱박 세포 소마 수를 평가하여 소뇌 cytoarchitecture의 immunopathological 평가로 보충된다. 여기에서 우리는 대사 대상으로 수용성 화합물 검출 및 미토콘드리아 기능 장애의 치료를위한 여러 신경 병리학 및 행동 방법을 제시한다. 우리는 SCA1의 트란에 미토콘드리아 기능 장애를 분석하는 미토콘드리아 호흡의 생체 분석을 사용sgenic 마우스입니다. 더욱이, 우리는 질병 증상과 병리 더 SCA1 질병 진행에서 미토콘드리아 기능 부전을 연루 수용성 미토콘드리아 부스터 숙신산 향상되어 있음을 보여준다.

<table><tbody><tr><td>아데노신 디 포스페이</td>트 <td>시그마 Aldrich</td><td>A2754</td><td>ADP</td></tr><tr><td>아스 코르 베이트</td><td>시그마 Aldrich</td><td>A7631</td><td></td></tr><tr><td>소 혈청 알부민</td><td>시그마 Aldrich</td><td>A2153</td><td>BSA</td></tr><tr><td>4 ', 6- 디아 미디노 -2- 페닐 린돌</td><td>시그마 Aldrich</td><td>D9542</td><td>DAPI</td></tr><tr><td>디지토닌</td><td>시그마 Aldrich</td><td>D141</td><td></td></tr><tr><td>디티 오 트레이톨</td><td>시그마 알드리치</td><td>D0632</td><td>DTT</td></tr><tr><td>당나귀 세럼</td><td>시그마 알드리치</td><td>D9663</td><td></td></tr><tr><td>글루타메이트</td><td>시그마 알드리치</td><td>1446600</td><td></td></tr><tr><td>말레이트</td><td>시그마 알드리치</td><td>6994</td><td></td></tr><tr><td>만니톨</td><td>시그마 알드리치</td><td>M4125</td><td></td></tr><tr><td>파라포름알데히드</td><td>시그마 알드리치</td><td>P6148</td><td></td></tr><tr><td>칼륨-락토바이오네이트</td><td>바이오 설탕</td><td>69313-67-3</td><td></td></tr><tr><td>로테논</td><td>시그마 알드리치</td><td>R8875</td><td></td></tr><tr><td>사포닌</td><td>시그마 알드리치</td><td>47036</td><td></td></tr><tr><td>숙신산</td><td>시그마 알드리치</td><td>S3674</td><td></td></tr><tr><td>N,N,N&prime;,N&prime; -Tetramethyl-p-phenylenediamine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T7394</td><td>TMPD</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9284</td><td></td></tr><tr><td>Urea</td><td>Sigma Aldrich</td><td>U0631</td><td></td></tr><tr><td>Vectashield 마운팅 매체</td>Vector <td>Labs</td><td>H-1000</td><td></td></tr><tr><td>Antibodies</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>11NQ 항체 (안티 아탁신-1 )</td><td></td><td></td><td>Servadio, et al. 1995, PMID: 7647801</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 anti-mouse secondary 항체</td><td>Life Technologies</td><td>A-11015</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 anti-rabbit secondary 항체</td><td>Life Technologies</td><td>A-11012</td><td></td></tr><tr><td>Calbindin 항체 (goat)</td><td>Santa Cruz</td><td>C-20</td><td></td></tr><tr><td>Animals</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>형질전환 마우스 제어</td><td>Harry Orr, Ph.D.</td><td>A02</td><td>Burright, et al. 1997, PMID: 9217978</td></tr><tr><td>SCA1 마우스</td><td>Harry Orr, Ph.D.</td><td>B05</td><td>Burright, et al. 1997, PMID: 9217978</td></tr><tr><td>야생형 마우스</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>001800</td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ESM-100L microtome</td><td>ERMA</td><td></td><td>Sledge microtome</td></tr><tr><td>Fluoview FV1200 Confocal Microscope</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glycerol-gelatin slides</td><td>FD Neuro Technologies</td><td>PO101</td><td></td></tr><tr><td>Hamilton 주사기</td><td>Sigma Aldrich</td><td>VCAT 80465</td><td></td></tr><tr><td>OXYT1 Oxytherm 전극 제어 장치</td><td>Hansatech Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>P.T.F.E. 종이</td><td>Cole-Parmer</td><td>UX-08277-15</td><td></td></tr><tr><td>Rotallion Rotarod</td><td>PPP& G</td><td></td><td>정보는 교신자에게 연락:</td></tr><tr><td>Ultimate 3000 HPLC</td><td>Dionex</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Software</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>National Institute of Health</td><td></td><td><a href="http://imagej.nih.gov/ij/">http://imagej.nih.gov/ij/</a></td></tr><tr><td>Cell counter plugin (for ImageJ)</td><td>National Institute of Health(국립보건원)</td><td></td><td><a href="http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/cell-counter.html">http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/cell-counter.html</a></td></tr><tr><td>3P& G Rota-Rod v3.3.3(로타로드 소프트웨어)</td><td>PPP& G</td><td></td><td>Phidget21.dll 정보는 교신저자에게 연락(</td></tr><tr><td>로타로드 소프트웨어에 필요)</td><td>DLL-Files.com</td><td></td><td><a href="https://www.dll-files.com/phidget21.dll.html">https://www.dll-files.com/phidget21.dll.html</a></td></tr></tbody></table>

에 수용성 화합물로 sca1 마우스 치료가 아닌 것은 - 특히 미토콘드리아 기능 향상

Treating SCA1 Mice with Water-Soluble Compounds to Non-Specifically Boost Mitochondrial Function

미토콘드리아 기능 장애는 노화 과정에서 여러 유전 척수 소 뇌성 운동 실조증과 소뇌의 진보적 인 변성에 의해 표시 다른 운동 장애를 포함한 신경 퇴행성 질환에 중요한 역할을한다. 이 프로토콜의 목적은 척수 소 뇌성 실조증 유형 1 (SCA1)에서 미토콘드리아 기능 부전을 평가하고, 병의 진행을 느리게하는 수용성 화합물 숙신산 통해 호흡 대사 약물 표적의 효능을 평가하는 것이다. 이 접근은 다른 소뇌 질환에 적용 할 수있다 수용성 요법 숙주에 적응 될 수있다. 미토콘드리아 호흡의 생체 분석을 감지하고 미토콘드리아 기능에서 질병 관련 변경 사항을 정량화하는 데 사용됩니다. 유전 적 증거 (게시되지 않은 데이터)와 SCA1 마우스 모델에서 미토콘드리아 기능 장애의 단백체 증거, 우리는 수용성 대사 부스터의 치료의 효능을 평가홈 케이지 마시는 물에 직접 화합물을 용해하여 uccinic 산. 혈액 뇌 장벽을 통과하는 약물의 능력은 고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC)를 사용하여 추론 될 수있다. 이들 화합물의 효능은 다음 가속 로타로드 (rotarod), 밸런스 빔 테스트 및 공간 분석 등 다양한 행동 패러다임을 사용하여 테스트 할 수있다. 소뇌 Cytoarchitectural 무결성 조롱박 세포핵 및 조롱박 수지상 세포 및 소마 검출 면역 분석법을 이용하여 평가할 수있다. 이러한 방법은 미토콘드리아 장애와 소뇌 신경 퇴행성 질환의 수용성 화합물 치료의 효능을 결정하기위한 견고한 기술이다.

숙신산과 소뇌 미토콘드리아의 약물 학적 타겟팅을 통해 우리는 소뇌 신경 퇴행성 질환 SCA1의 마우스 모델에서 미토콘드리아 기능 장애를 방지 할 수 있습니다. 숙신산 탈수소 효소, 숙신산,의 표준 전자 공여체 치료 (그림 1A) 다음과 같은 치료 및 신경 병리학 적 평가의 두 번째 주 동안 행동 평가의 시작과 함께, 한 달 동안 SCA1 마우스의 홈 케이지 마시는 물에 용해시켰다. 풋 프린트 분석 빔 분석 및 로타로드 (rotarod) 분석 가속에 의해 측정 숙신산 처리 22 SCA1 마우스의 성능을 향상시킨다. 검출 된 행동 개선 (그림 1B-D)를 학습 모터 조정 및 모터를 강화 나타냅니다. 행동의 성능의 구조는 세르의 보존...

척수뇌 운동실조증 1형(SCA1) 및 기타 소뇌 신경퇴행성 질환 치료를 위한 미토콘드리아 표적 수용성 화합물의 효능을 평가하기 위한 생화학적 및 행동 프로토콜을 제시합니다.

에 수용성 화합물로 SCA1 마우스 치료가 아닌 것은 - 특히 미토콘드리아 기능 향상

Mitochondrial dysfunction plays a significant role in the aging process and in neurodegenerative diseases including several hereditary spinocerebellar ...

이 실험의 전반적인 목표는 척추 소뇌 운동 실조증 1형 마우스에서 소뇌 행동 및 조직에 대한 수용성 미토콘드리아 활성제의 치료 효과를 관찰하고 정량화하는 것입니다. 이 방법은 척추 소뇌 운동 실조증 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다: 미토콘드리아 결핍이 질병 병리학에 기여하는지, 수용성 미토콘드리아 활성제에 의해 질병이 지연될 수 있는지. 이 기술의 주요 장점은 숙신산이 식수를 통해 뇌로 직접 전달될 수 있는 FDA 승인 저렴한 수용성 화합물이라는 것입니다.이 기술의 의미는 알츠하이머병과 헌팅턴병을 포함한 여러 신경퇴행성 질환에서 미토콘드리아 산화 인산화 복합체의 결핍이 발견되기 때문에 다른 신경퇴행성 질환의 치료로 확장될 수 있습니다. 일반적으로 이 방법을 처음 접하는 개인은 일관된 결과를 얻기 위해 조정해야 할 수 있는 행동 패러다임의 초기 설정에 어려움을 겪을 것입니다. 이 방법의 시각적 시연은 행동 단계가 서면 방법 섹션에서 재현하기 어려울 수 있지만 시각적 기록을 통해 쉽게 복제할 수 있기 때문에 유용합니다.이 절차를 시작하려면 활주로를 침구와 보상 음식이 늘어선 홈 박스를 향해 약간 위쪽 각도로 설정하십시오. 그런 다음 활주로에 흰 종이 한 장을 깔아줍니다. 마우스가 홈 박스에 5분 동안 적응할 때까지 기다립니다.다음으로 단일 주제를 선택하고 왼쪽과 오른쪽 뒷발을 각각 파란색과 빨간색 무독성 수성 페인트로 칠합니다. 그런 다음 피험자를 활주로 시작 부분에 놓고 홈 박스까지 걸어갈 수 있도록 합니다. 피험자가 홈 박스에 도착하면, 트랩 도어를 닫고 1분 동안 홈 박스 안에 머물게 한 후 각각의 홈 케이지로 돌아간다.그런 다음 활주로와 홈 박스를 30% 에탄올로 청소하고 다음 시험을 위해 침구, 보상 음식 및 활주로 종이를 교체하십시오. 동시에 실험 후 활주로 종이를 수집하고 시험을 검사하십시오. 성공적인 발자국 실험은 피험자가 뒤를 돌아보거나 멈추지 않고 금 상자를 향해 걸어가는 최소 5번의 순차적 발자국으로 정의됩니다.이제 6개의 서로 다른 빔이 있는 바 크로스 사양에 따라 빔 장치를 설정합니다. 빔의 한쪽 끝에는 보상 음식이 있는 어두운 가정 상자를 설정합니다. 빔에서 피험자를 훈련시키려면 빔 3으로 장치를 조립하십시오.홈 박스 맞은편에 있는 빔 끝에 피사체를 부드럽게 놓습니다. 그리고 그것이 들보를 가로질러 걸을 수 있게 하십시오. 성공적인 실행을 위해 각 피험자에게 2분 동안

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이 비디오에서는 마우스 피험자의 운동 협응 및 학습을 평가하기 위해 가속 회전 막대 또는 회전 막대 테스트를 수행합니다.

가속 회전 막대 분석 또는 로타로드 테스트: 마우스의 운동 협응 및 학습을 테스트하는 방법

미토콘드리아 기능 장애는 세포 노화의 특징이다. 이 논문은 노화 마우스 전정 감각 상피의 미토콘드리아 기능을 개선하기 위해 비 침습적 근적외선 (NIR) 치료를 사용합니다.

근적외선 (NIR) 빛은 마우스 전정 감각 상피 세포에서 미토콘드리아 기능의 마커의 발현을 증가

장 염증의 모델에서 murine 연구 중간 엽 줄기 세포 (MSC)의 작은 비율 (1 ~ 5%) 또는 정 맥 주입 intraperitoneally 집 염증이 콜론과1,2에 설명 했다. 이 연구는 MSCs의 초음파 유도 intracardiac 주사 소장을 증가 지역화 될 보여줍니다.

초음파 유도 Intracardiac 주입 실험 선 동적인 장 질병의 Murine 모델에 사용 하기 위해 내장을 추적 증가 인간 중간 엽 줄기 세포의

간세포에서 미토콘드리아 기능에 대한 환경 유기염소농약(OCP)의 영향을 이해하는 것은 대사 장애를 일으키는 OCP의 메커니즘을 탐구하는 데 중요합니다. 이 논문은 간 미토콘드리아 기능을 검출하는 방법에 대한 자세한 방법을 제시합니다.

유기체 살충제에 노출된 간세포에서 미토콘드리아 기능을 검출하기 위한 실험 프로토콜

이 프락토콜은 성상세포와 뉴런에서 생체 외 및 생체 내 미토콘드리아 Ca2+ 이미징을 위한 방법을 제공하는 것을 목표로 합니다.

유전자 인코딩 된 Ca2 + 지표 (GECIs)를 사용하여 성상 세포와 뉴런에서 이미징 미토콘드리아 Ca2 + 섭취

이 프로토콜은 사용자가 Seahorse 세포외 플럭스 분석을 사용하여 3D 암 세포주 유래 구상체에서 미토콘드리아 에너지 대사를 조사하는 데 도움이됩니다.

세포외 플럭스 분석을 이용한 단일 3D 미세조직 구상체의 미토콘드리아 에너지 대사 탐구

여기에서는 연구 동물이 최소한의 스트레스와 불편함으로 치료제를 쉽게 섭취하도록 장려하는 구강 배당의 대체 방법으로 마이크로피펫 유도 약물 투여(MDA)를 설명합니다.

설치류 모델에서 구강 배게이지에 대한 대체 방법으로 마이크로피펫 유도 약물 투여 사용

뇌 오가노이드는 미토콘드리아 뇌근병증, 유산산증 및 뇌졸중 유사 에피소드(MELAS) 연구를 위한 귀중한 모델 역할을 하며 근본적인 병태생리학에 대한 통찰력을 제공하고 약물 스크리닝을 위한 플랫폼을 제공합니다. 질병 유발 유전자의 다양한 수준의 이형질을 가진 세포주에서 유래한 오가노이드는 상당한 표현형 차이를 나타냅니다.

뇌 오가노이드를 사용한 미토콘드리아 질환 모델링: 미토콘드리아 뇌근병증, 유산산증 및 뇌졸중 유사 에피소드에 초점

미토콘드리아 염료 표지 말단 미토콘드리아의 국소 주입 시 생 체 내 공초점 현미경 검사. 이 방법은 건강한 근육을 가진 쥐와 병든 쥐의 골격근 조직에서 입증된 개념 증명을 활용하여 고해상도 미토콘드리아 시각화를 제공합니다.

마우스의 근육 및 말단 슈반 세포에서 미토콘드리아 형태의 현장 정량화 방법

내피 기능을 평가하기위한 비침 투 절차는 엔도 - PAT 2000을 사용하는 증명이다.

엔도 - PAT 2000 내피 Vasodilator 기능을 평가

학습하세요 SCA1 마우스에서 수용성 미토콘드리아 활성제의 치료 효과를 평가하는 행동 및 조직학적 분석 방법을. 이 기법은 소뇌 퇴행성 질환 연구에 활용됩니다.

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