Name: 돼지 모델에서 이소성 신장자가 이식 : 단계별 프로토콜 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-02-21T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 47 s
Description: 학습하세요 돼지 모델에서 이소성 신장 자가이식 수술 기법을 통해 신장 이식물 기능을 향상시키는 방법을. HTK 용액 보존과 혈관 문합술을 포함한 단계별 프로토콜이 연구자들에게 신장 보존 기술 연구의 기초 자료를 제공합니다.

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모든 동물은 인간주의와 우리가 동물 관리에 캐나다 의회의 정책과 지침에 따라 수행하는 모든 연구를 받았다. 모든 절차는 대학 건강 네트워크 기관 동물 관리위원회에 의해 승인 된 동물 사용 프로토콜에 따라 수행 하였다. 참고 : 연구 프로토콜의 개략도를 그림 1에 제시되어있다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig1.jpg" /> 그림 1. 연구 프로토콜입니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 1. 동물 <ol><li> 이 프로토콜에 남성 요크셔 돼지 (30kg)를 사용합니다. </li></ol> 2. 신장 이식 검색 <ol><li> 수술 전 절차 <ol><li> 하우스 남성 Yorkshir최소 1 주일 동안 연구 기관에서 전자 피그들을 순응. 스트렙토 SUIS 및 살모넬라 감염의 위험을 감소시키기 위해 3 일, 예컨대 세프 티오 푸르와 같은 3 세대 세 팔로 스포린의 근육 내 주사를 사용한다. 흡입을 방지하기 위해 마취 유도 전 6 시간 이상 동안 돼지 빠르게. </li><li> 케타민 (20 ㎎ / ㎏), 아트로핀 (0.04 ㎎ / ㎏)과 미다 졸람 (0.3 ㎎ / ㎏)의 근육 내 주사하여 돼지의 마취를 시작합니다. 이어서, 수술실 (OR)에 하우징 동물 시설에서 전송. </li><li> 또는 테이블에 앙와위에서 돼지를 놓습니다. 돼지가 자발적으로 이소 플루 란의 5 % 산소의 2 L를 흡입 할 수 있습니다. 후두경으로 성대를 노출하고 삽관에 의한기도 수축을 방지하기 위해 2 % 리도카인 국소 용액을 스프레이. 6.5 mm 튜브 삽관 후, 공기의 3-5 ml의와 커프를 차단합니다. 참고 : Capnometry 올바른하여 위치 될을 확인기관 튜브의 N. </li><li> 2.5 %로 이소 플루 란 가스를 줄입니다. 14 ~ 16 호흡 / 분, 10 ~ 15 ㎖ / kg 체중의 호흡량에 인공 호흡기를 설정합니다. 밀접하게 돼지를 모니터링합니다. 심박수와 산소 포화도는 펄스 oxymetry에 의해 기록된다. 감소 심장 박동에 의한 적절한 마취을 확인하고 돼지 운동의 혈액 (100 mmHg로 수축기 값 이하) 압력뿐만 아니라 부재 (근육 이완제없이 사용) (150 비트 / 분 이하). </li><li> 무균 조건에서 9.5 천을 소개 Seldinger 기술 (27)를 사용하여 내 경정맥에 단일 루멘 영구 카테터. 간단히, 혈관에 구멍에 바늘을 사용합니다. 가이드 와이어를 도입 한 후, 혈관 카테터와 와이어를 교체 한 다음 필 멀리 도입기와 바늘을 교체합니다. 3-0 실크 또는 비 흡수성 모노 필라멘트 봉합사를 사용하여 피부에 카테터를 고정. <ol><li> 메트로니다졸 500 ㎎, 세파 졸린 1 g을 20 mg의 판토 프라 졸을 관리. 광고장관 5 % 덱 스트로스 (D5W)과 정맥 수술을 통해 시간 당 1 ml의 펜타닐 시트 레이트와 락 테이트 링거액 200 ㎖. 마취 동안 건조를 방지하기 위해 눈에 수의학 안과 연고를 적용합니다. </li></ol></li></ol></li><li> 수술 절차 <ol><li> 멸균 소독 및 수술 분야의 적용 범위에 따라, 길이 25 cm의 중간 선 절개를 수행합니다. 트랙터를 삽입합니다. 수건으로 크고 작은 창자를 덮고 오른쪽 신장에 최적의 액세스를 위해 왼쪽에 위치. </li><li> 요관과 소작를 사용하여 부착 조직으로부터 오른쪽 신장 자체를 무료로 제공됩니다. </li><li> 하대 정맥과 대동맥에서 기원까지 소작을 사용하여 오른쪽 신장 정맥과 동맥을 해부 각각 무료입니다. 동맥 혈관 경련을 방지하기 위해, 파파 베린의 30-65 mg을 투여가 고려되어야한다. </li><li> 전체 신장 해부, 넥타이 (실크, 3-0) 후와 원심 요관를 잘라. 위해 준비 할얼음의 개 그릇 및 멸균 기관 가방. </li><li> 첫째, 가까운 대동맥과 두 번째 신장 동맥 클램프 혈관 클램프를 사용하여 대정맥에 가까운 신장 정맥 클램프. 다음으로, 신장 이식을 절제하고 즉시 신장 동맥 정맥과 신장 동맥을 cannulate. 혈액을 플러시 얼음처럼 차가운 히스티딘 트립토판 - 케 토글 루타 레이트 (HTK) 용액 500 ml를 사용합니다. 이식까지 얼음에 신장을 저장합니다. </li><li> 현장에서, 합자 (실크, 2-0) 및 실행 봉합사 (prolene의, 6-0)으로 신장 정맥으로 남아있는 신장 동맥을 닫습니다. </li><li> 출혈에 대한 해부 영역을 확인 후, 실행 봉합 (monofil, 1)과 3-0 실크 또는 비 흡수성 모노 필라멘트 봉합사로 피부와 복부 벽을 닫습니다 .. </li></ol></li><li> 수술 후 절차 <ol><li> 원치 않는 조작을 방지하기 위해 돼지의 뒷면에 봉합 (실크, 3-0)와 터널을 함께 정맥 카테터 피하을 수정합니다. 쉬운 돼지를 배치 한 후,이야uture (실크, 3-0) 피부에 단단히 카테터. </li><li> 인공 호흡기에서 돼지를 유아하고 발관 후 그 주택 지역에 복구 할 수 있습니다. 볼륨 확장을위한 정맥 링거 락 테이트를 관리하고 진통제 0.3 mg을 부 프레 노르 핀을 관리 할 수​​ 있습니다. 이 흉골 드러 누움을 유지하기 위해 충분한 의식을 회복 할 때까지 무인 동물을 두지 마십시오. </li></ol></li></ol> 3. 신장 이식 이식 <ol><li> 수술 전 절차 <ol><li> 50 ~ 100 밀리그램 / hr의 속도로 프로포폴의 연속 주입 하였다 프로포폴의 정맥 내 주사 (1-2 ㎎ / ㎏ 체중)을 사용하여 돼지를 마취. 단계 2.1.3과 2.1.4에 설명 된대로 돼지를 다시 삽관 3-4 %로 이소 플루 란 가스를 설정합니다. </li><li> 수술 중에 세파 졸린 1 g 및 판토 프라 졸 IV의 20 mg의 투여 2.1.4에 기재된 것과 같은 마취 프로토콜을 사용한다. </li><li> 멸균 소독 후, 기관 옆에 4cm의 상처를합니다. TI를 해부하다경동맥을 노출 ssue. 오버 홀트 포셉과 동맥 주위에 실크 넥타이 (2-0)를 전달합니다. 수술 내내 연속적 동맥압을 측정하기 위해 플라스틱 카테터를 도입 Seldinger 기법을 사용한다. 대안 적으로, 비 침습적 혈압 측정 기술이 이용 될 수있다. </li></ol></li><li> 수술 절차 <ol><li> 살균 소독 후에, 피부 및 근막 봉합 스티치 절단하여 복강을 다시 복강을 노출 수술 권취 재 도입 및 infrarenal 선박에 더 접근 할 수 있도록 좌측 장 재배치. </li><li> 보존 신장 이식은 엔드 - 투 측 infrarenal 대정맥과 대동맥에 이식. 따라서, 픽업과 소작을 사용하여 장골 분기 위 5-8cm 이상 대정 맥과 대동맥을 해부하다. 가능하면, 림프 혈관을 방해하지 않는다; 가능하지 않을 경우, 5-0 prolene의 봉합로 닫습니다. </li><li> 해부를 완료 한 후, fo를 확인출혈 R 및 선박에서 남은 조직을 제거합니다. Satinsky 클램프와 대정 맥과 대동맥의 완전한 체결이 가능 있는지 확인하십시오. </li><li> 다음에, 반대측 (왼쪽)의 신장을 절제. 이렇게하려면 오른쪽에있는 장 위치; 요관, 신장 자체, 신장 정맥, 그리고 접착 조직에서 신장 동맥을 해부하다. 요관과 혈관을 묶어과 신장을 절제. 출혈이 있는지 확인합니다. </li><li> infrarenal 대동맥과 대정맥을 노출 왼쪽에있는 장 위치를​​ 조정합니다. 헤파린 (100 IU / kg 체중)을 주입하고, 적어도 2 분 동안 기다린다. </li><li> 정맥 문합 : <ol><li> 완전히 대정맥을 클램프 (11)의 블레이드를 사용하여, 신장 혈관의 개구부의 크기와 일치하는 슬릿 절개를하기 Satinsky 클램프를 사용한다. POTT 위는 상기 슬릿을 연장 할 수있다. </li><li> 멸균 얼음을 함유하는 직물에 신장을 배치 한 후, 얼음에서 분리하고, 수술 부위로 위치. 사용이 더블 무장 6-0뇌와 꼬리 코너 스티치를 수행 할 봉합을 prolene의. </li><li> 신장에 근접 상단 모서리를 넥타이 다시 벽을 시작으로 6-0 prolene의를 사용하여 실행 봉합을 수행합니다. 2/3를 완료 한 후, 전면에 봉합사를 완료 타이 타 단부를 사용한다. 두개골 바늘을 묶는 후, 꼬리 모서리에 바늘 넥타이. </li><li> 신장 정맥에 불독 클램프를 놓고 Satinsky 클램프를 엽니 다. 출혈의 문합을 확인합니다. </li></ol></li><li> 동맥 문합 : <ol><li> 완전히 대동맥을 고정하는 Satinsky 다시 클램프 사용합니다. 신장 동맥의 개통과 일치, 슬릿 절개를 만들기 위해 11 블레이드를 사용합니다. 깨끗한 구멍을 확보하기 위해 4.0 mm 라운드 펀치를 사용합니다. </li><li> 수신자 측에서 시작, 동맥 문합을 수행하는 하나의 6-0 prolene의 봉합사를 사용합니다. 동맥 내피 세포가 박리를 방지하기 위해 각 봉합에 포함되어 있는지 확인합니다. 한편, norepinephr 10 ML의 연속 물방울을 시작합니다오프라인 (16 밀리그램 / 250 ml)에 링거 락 테이트 500ml에 희석하고, 100 mmHg의 상기 수축기 혈압을 유지하는 적정한다. </li><li> 동맥 문합 완료 전에 베라파밀, 동맥 내 주사 및 연축 않도록 용기의 외부로 국소 베린 관리. </li><li> 신장 동맥에 불독 클램프를 놓고 Satinksy 클램프를 엽니 다. 출혈의 문합을 확인합니다. </li><li> 천 신장을 푸는과 얼음을 제거합니다. 동맥 불독 클램프 다음 먼저 정맥 불독 클램프를 엽니 다. 재관류 후, 소변 생산이 즉시 시작해야합니다. </li><li> 이식 이식을위한 유리한 위치를 확보하고 균일 한 재관류를 유지하기 위해 헝겊을 사용하십시오. </li></ol></li><li> 요관 문합 : <ol><li> 이식에서 요관 0.5 cm의 길이 길이에 걸쳐받는 사람을 열 POTT 가위를 사용합니다. </li><li> 이 6.0 폴리 에스테르, 폴리 (P-옥사 논)를 사용하면 좌우 URE에 대한 봉합teral 문합. 다음 전면 벽 뒤에 먼저 연속적으로 다시 벽, 실행, 각면에 모서리 스티치를 수행합니다. </li><li> 출혈을 검사 한 후, 천을 제거하고 위치에 고정하기 위해 신장 주위에 작은 창자의 일부를 래핑합니다. 두 monofil 1 봉합과 복벽을 닫습니다. 3-0 실크 또는 비 흡수성 모노 필라멘트 봉합사로 피부를 닫습니다. </li><li> 돼지가 발생하기 쉬운 위치에 배치 될 때까지 조심스럽게 노르 에피네프린 주입을 적정에 의해 연속적으로 100 mmHg로 위의 수축기 혈압을 유지한다. </li></ol></li></ol></li><li> 수술 후 절차 <ol><li> 위에서 언급 한 바와 같이 복부 폐쇄 후, 돼지 가열 패드와 열 순환 담요를 사용하여 따뜻하게 유지한다. , 동맥 줄을 제거 6-0 prolene의의 스티치와 동맥에 구멍 구멍을 닫고 절개 사이트를 닫습니다. </li><li> , 발생하기 쉬운 위치에 돼지를 돌려 노르 에피네프린 드립을 중지하고 인공 호흡기에서 돼지를 유아. 알저 돼지는 주거 지역에 복구 절차에서의 원활한 복구를 보장하기 위해 긴밀히을 모니터링 할 수 있습니다. 혈액 가스 샘플을 이식 경정맥 카테터를 통해 각각의 시간을 가져 가라. 대체 볼륨에 링거 락 테이트를 제공하고 진통제 0.3 mg을 부 프레 노르 핀을 관리 할 수​​ 있습니다. </li><li> 자발적으로 마실 수있을 때까지 발관 후, 밀접하게 돼지를 모니터링 할 수 있습니다. 이 흉골 드러 누움을 유지하기 위해 충분한 의식을 회복 할 때까지 무인 동물을 두지 마십시오. 완전히 회복 될 때까지 다른 동물의 회사에 수술을 한 동물을 반환하지 않습니다. </li></ol></li></ol> 4. 수술후 후속 <ol><li> 필요한 경우 최소한 2 일 수술 후 이상 0.3 mg을 부 프레 노르 핀 정맥마다 8 시간을 관리 할 수​​ 있습니다. 정기적으로 수술시 항생제의 단일 예방 복용량을 관리 할 수​​ 있습니다. 감염의 징후의 경우, 하루에 한 번 하루 메트로니다졸 IV에 따라 두 번까지 세파 졸린 1g 정맥을 관리임상 적 개선이 발생합니다. 돼지 충분한 물을 마신다 때까지 링거 락 테이트를 관리 할 수​​ 있습니다. 1000 IU 헤파린은 응고를 방지하기 위해 카테터를 잠그는 데 사용될 수있다. </li><li> 돼지의 임상 상태와 신장 기능을 평가하기 위해 경정맥 카테터와 소변 샘플을 통해 정맥 혈액 샘플을 수집합니다. </li><li> 안락사를 들어, 프로포폴 정맥 (5 ~ 10 ㎖)와 돼지의 마취 유도 및 이소 플루 란 5 %를 유지한다. 전술 한 바와 같이 돼지 삽관. relaparatomy 및 신장 조직 샘플 수집 후, 40 mval의 KCl의 정맥 주사에​​ 의해 심장 마비를 유도한다. </li></ol>

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돼지 신장 이식의 모델로 인해 수술 측면, 생리학, 생화학, 면역학 (14)의 유사성에 인간 이식 분야를 촉진 할 수있는 독특한 기회를 제공합니다. 실험적 연구의 목적에 따라,자가 이식의 신장 동종 이식 모델은 모델에 비해 여러 가지 장점을 갖는다. 여러 그룹이 동종 이식 (28) 후 좋은 신장 이식 기능을보고 있지만, 돼지에서 면역 억제, 특히 신장 이식에 도전한다. 수술 전 혈액 샘플은 돼지 백혈구 항원 (SLA)에 대한 호환성을 보장 가능하지만 비용이 14 비실용적하는 분석한다. 수술 후, 같은 타 크롤리 무스와 사이클로스포린과 같은 제안 면역 억제제 (칼시 뉴린 억제제, CNI)은 경구 투여하거나 정맥 28. 돼지는 일반적으로 구강 MEDICA 제비 거부로 경구 투여가 불가능하다기. 또한, 장 장애물은 면역 억제 약물 및 치료 약물 수준의 유지 보수의 충분한 흡수를 미연에 방지 할 수 있습니다. 활성 동물 CNI의 정맥의 연속 주입은 기술적으로 요구하고있다. 정맥 내 일시 투여 독성의 원인이 높은 피크 값에 연결됩니다. 따라서, 새로운 보존 기술 조사,자가 이식 신장의 모델은 몇 가지 장점을 갖는다. 위의 증명 allotransplantated 신장 이식, 크레아티닌 및 BUN의 지연 증가 피크의 대표적인 결과에서 조직 학적 평가에 의해 입증되었다 거부를 나타냅니다. 자가 이식의 돼지 모델은 이전에 새로운 보존 방법 14,18,29을 조사하는데 사용되었다. 그러나, 심장 박동 시나리오에서 autotransplanted 돼지의보고 수술 후 혈청 크레아티닌 및 BUN 값은 상당히 실험 시스템 22,30에 따라 달라집니다 </sup&gt;. 우리가 여기서 제시 심장 박동 기증자 프로토콜은 2.8 밀리그램 / DL (± 0.7) 및 (7.4 ±) 25.3 밀리그램 / DL의 BUN 피크의 낮은 수술 후 혈청 크레아티닌 피크가 발생합니다. 이러한 결과는 Hanto와 동료 28 Snoeijs 및 동료 (31)가 제시 한 낮은 피크 값과 비교할 수 있습니다. 돼지자가 이식 모델에서 신장 이식 후 성공적인 결과를 보장하기 위해, 우리는 특정 합병증의 비율을 최소화 몇 가지 주요 기술 요소를 확인했다. 위스콘신 (UW) 용액 대학에 비해 트립토판, 히스티딘 - 케 토글 루타 레이트 용액 (HTK)의 사용으로 인해 칼륨 하부 콘텐츠 연축의 위험을 감소시킨다. 상기 재관류 시점 연축의 위험을 줄이기 위해, 베라파밀은 신장 동맥에 주입 될 수 있고, 파파 베린을 검색하는 동안 및 재관류 후 국소 투여 될 수있다. 또한, 노르 에피네프린의 연속 물방울 유지 적정100 mmHg의 상기 수축기 혈압 균질 재관류을 보장한다. 이는 돼지가 쉬운 위치까지이 적어도 혈압을 유지하는데 유용하다. 또한, 이식 이식 위치는 새롭게 문합 혈관의 꼬임을 방지하는 것이 중요하다. 따라서, 종래 광범위한 기계 조작을 방지하기 위해 이식 문합을 봉제 반대측 좌측 신장을 절제하는 것이 도움이된다. 이식 이식 주위에 소장을, 요관 문합술을 마무리 포장 후 복부 벽의 폐쇄 후 위치를 확보. 이러한 소장의 꼬​​임으로 인한 장폐색 등의 합병증은 거의 관찰되지 않지만 장폐색, 장 천공, 사망을 포함한 심각한 합병증으로 이어질 수 있습니다. 전반적으로, 정확한 수술 기법, 세심한 마취 및 후속 좋은 임상 결과 및 이식 기능을 확인하는 동안 가까운 모니터링. 동맥과 정맥 문합은 PERFO 할 수있다다른 기술들을 사용하여 rmed. 이식의 소성을 배치는 신장 동맥과 정맥의 엔드 - 투 - 엔드 문합이 가능합니다. 이소성 이식하는 경우, 이식편은 장골 용기에, 엔드 - 투 - 엔드 문합 대 측성 신 포사에 위치하거나 직접 원위 대동맥 수있다. 문합으로 이식 이소성 - 대동맥과 혈전증 및 32 연축의 위험을 줄일 수있는 카바 직접 엔드 - 투 - 사이드 기술이 모델에서 바람직하다. 초기 정맥 분기점와 해부학 적 변화는 두 개의 정맥 문합 봉제의 필요로 이어질 수 있습니다. 동맥 또는 정맥이 상대적으로 짧은 경우, 이식편 혈관의 길이를 얻기 위해 180도 돌릴 수있다. 요관 좌우 문합은 협착 또는 소변 누출을 복잡하게하지 않고 좋은 실험 결과를 얻을 수 있습니다. 일반적으로 신장 이식의 돼지 모델은 다른 동물 모델에 비해 이점을 제공한다. D로위의 escribed는 특정 유사성은 돼지 및 임상 실습에 새로운 기술의 상대적으로 빠른 변환을 할 수 있습니다 인간의 설정 사이에 존재한다. 이식 기술은 설치류 모델에 비해 기술적으로 용이하다. 또한, 정맥 카테터의 배치에 의해, 말초 혈액 쉽게 수집 할 수 있으며, 추가 조사를 위해 처리된다. 소변의 컬렉션은 신장 손상과 기능의 추가 평가를 할 수 있습니다. 뇨 샘플을 수집하기 위해, 경피적 카테터 방광에 삽입 될 수있다. 돼지에 의해 조작을 방지하기 위해, 선단 동물 후면 피하 터널링한다. 소변 수집을위한 다른 옵션은 장시간 수집 기간 소변 크레아티닌 청소율 추가적인 바이오 마커의 농도를 추정 할 수있는 신진 대사 케이지의 사용이다. 초음파 검사, CT 스캔 및 MRI 영상이 가능하다. 순환 죽음 프로토콜 후 기부 따뜻한 적용하여 모방 할 수있다허혈 검색하기 전에. 또한, 돼지 공격적인 행동을 제한하는 경우 거세 비교적 취급이 용이하다. 단점 동물 구입, 주택, 수술 등의 의료 장비 및 인력의 높은 비용을 포함한다. 이러한 요인은 각 연구 그룹 동물의 다수를 포함하는 가능하지 않을 것을 의미한다. 또한, 설치류 모델에 비해 참조 제한된 수의 돼지 규범 생물학적 데이터의 문학에서 사용할 수 있습니다. 이러한 신규의 보존 방법으로서 개발 된 새로운 기술의 평가를위한 대안으로서, 다른 그룹 (33, 34)는 신장 이식의 대안으로 정상 체온 생체 재관류 설명 하였다. 이 방법을 수행하기 쉽고 저렴하다. 그러나, 표준화 신장 이식 이식 임상 연습에 더 유사한 모델을 제공하고 장기간 후속 허용한다. 보다 현실적인 그래프트 평가위한 따라서 역할, 표준. 결론적으로, 이소성 신장자가 이식의 돼지 모델은 신장 이식 결과의 개선을위한 혁신적인 새로운 접근 방식을 조사하는 임상 중요한 시나리오를 제공합니다. 특히,이 프로토콜은 신장자가 이식 모델의 성공적인 설립을 용이하게 중요한 기술 정보를 제공하고 임상 시험에 대한 새로운 연구 결과의 빠른 변환을 할 수 있습니다.

>jove_content<신장 이식은 투석 1-3에 비해 이환율 및 사망률이 낮기 때문에 말기 신장 질환 환자에게 선택되는 치료법입니다. 신장 이식 후 환자 결과가 크게 개선되었음에도 불구하고 이식편 부족은 여전히 전 세계적으로 심각한 문제를 제기하고 있습니다. 신장 이식을 기다리는 환자의 수는 이용 가능한 장기의 수를 훨씬 초과합니다 4-6. 이식에 사용할 수 있는 신장의 수를 늘리고 환자의 대기 시간을 줄이려면 더 많은 신장 이식편이 필요합니다. 
일반적으로 뇌사 후 기증(DBD)으로 인한 표준 기준 기증자(SCD) 및 확장 기준 기증자(ECD) 신장 이식편과 생체 기증자(LDKT)에서 회수된 신장이 사용됩니다. 1990년대 이후 순환사(DCD) 후 기증 시나리오에서 회수된 신장 이식편의 수가 증가하여 기증자 풀이 더욱 확장되었습니다 7,8. 그러나 DCD 및 ECD 신장 이식편은 이식 후 수용 가능한 결과를 보이지만 기증자 연령, 온열 및 저온 허혈 시간, 사용된 보존 기술 9-11과 같은 다양한 요인에 따라 결과가 감소합니다. 따라서 한계 신장 이식을 받은 환자의 결과를 개선하고 기증자 풀을 더욱 늘리기 위해서는 추가 연구가 필요합니다.
신장 이식의 돼지 모델은 잘 확립되어 있으며 가장자리 신장 이식 결과의 개선을 위한 혁신적인 접근 방식을 조사하기 위한 임상적으로 중요한 시나리오를 제공합니다. 단엽인 설치류 및 개의 신장과 달리, 돼지와 인간의 신장은 다소엽이며 특히 동맥, 정맥 및 소변 수집 시스템과 관련하여 해부학적으로 유사합니다 12,13. 또한, 돼지와 인간의 신장은 허혈 재관류 손상(IRI)의 병태생리학, 생화학, 면역학적 매개변수에서 유사성을 입증했다 14. 따라서, 돼지 신장 이식은 가장자리 신장 이식을 위한 새로운 장기 보존 방법을 조사하고15-17, 인간 IRI를 모델링하고18, 면역학적 경로와 동종이식 내성을 연구하고19, 외과 훈련을 제공하고20-22, 새로운 약물 요법을 시험하고23, 새로운 의료 기기를 구현하고, 이종이식에서 새로운 면역학적 메커니즘을 연구하는 데 매우 적합하다24-26.
신장 돼지와 인간 이식 환경은 완전히 유사하지 않습니다. 이 기사는 신장 자가이식 모델의 성공적인 확립을 촉진하는 데 필요한 중요한 기술적 세부 사항에 중점을 둡니다. 종에 적응한 수술 전후 하우징, 면밀한 모니터링을 통한 마취 투여 및 일치하는 수술 기술이 프로토콜에 설명되어 있으며 비디오에서 시연됩니다. 반대쪽 천연 신장의 절제는 이식된 신장의 기능을 평가할 수 있는 기회를 제공합니다. 정맥 및 요로 카테터의 배치와 대사 케이지의 사용은 보다 심층적인 평가를 가능하게 합니다. IRI의 대체 이식편 보존 방법 및 기전을 조사하기 위한 연구의 경우, 자가이식 모델은 면역억제제의 거부 반응 및 사용과 관련된 합병증과 혼란스러운 편견을 피하기 때문에 동종이식 모델보다 우수합니다.

<table><tbody><tr><td>Anesthesia 장비</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia Machine, Optimax</td><td>Moduflex 마취 장비</td><td>SN5180</td><td></td></tr><tr><td>주입 펌프 3,000</td><td>SIMS Graseby LTD.</td><td></td><td></td>SN300050447</tr><tr><td>주입 펌프 라인</td><td>스미스 메디컬 ASD Inc.</td><td>21-0442-25</td><td></td></tr><tr><td>영구 카테터 정맥 주사(9.5 Fr)</td><td>Cook Medical Company</td><td>G01865</td><td></td></tr><tr><td>이소플루란 증기 19.1</td><td>Draeger Medical Canada Inc.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Mallinckrodt, 기관 튜브, 6.5mm</td><td>Covidien Canada</td><td>86449</td><td></td></tr><tr><td>온도 요법 패드</td><td>Gaymar Industries Inc</td><td>TP26E</td><td></td></tr><tr><td>인공호흡기, AV 800</td><td>DRE 의료 장비</td><td>40800AVV</td><td></td></tr><tr><td>따뜻한 터치, 환자 온난화 시스템</td><td>Nellcor/ Covidien Canada</td><td>5015300A</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>카탈로그 번호</td><td>코멘트</strong</td></tr><tr><td>>Surgical Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Abdominal Retractor</td><td>Medite GmbH</td><td>07-0001-00</td><td></td></tr><tr><td>대동맥/정맥 펀치 4.0mm, 원형</td><td>Scanlan International Inc.</td><td>1001-602</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey, 외상성 주변 장치, 클램프</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB463R</td><td></td></tr><tr><td>드 Bakey-Beck, 외상성 대정맥 Cava, 클램프</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB519R</td><td></td></tr><tr><td>드 베이키, 외상성 미니 불독, 스트레이트</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB422R</td><td></td></tr><tr><td>드 베이키, 외상성 미니 불독, 곡선</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB423R</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey, 외상성 협착 클램프, 각진</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB453R</td><td></td></tr><tr><td>해부 블레이드 #11</td><td>Feather Safety Razor Co.</td><td>089165B</td><td></td></tr><tr><td>커넥터(1/4")와 남성 루어 잠금 장치</td><td>Sorin Group Inc.</td><td>AB1452</td><td></td></tr><tr><td>간 관리 세트(플러시 라인)</td><td>CardioMed Supplies Inc</td><td>17175</td><td></td></tr><tr><td>Maxon, 1</td><td>Covidien Canada</td><td>606173</td><td></td></tr><tr><td>Med-Rx 흡입 연결 튜브</td><td>Benlan Inc.</td><td>70-8120</td><td></td></tr><tr><td>오르간 백</td><td>CardioMed Supplies Inc</td><td>2990</td><td></td></tr><tr><td>Potts &ndash; 드 마텔, 가위</td><td>Aesculap Inc.</td><td>BC648R</td><td></td></tr><tr><td>신장 동맥 캐뉼라, 1.6"</td><td>Sorin Group Inc.</td><td>VC-11000</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk, 2-0</td><td>Covidien Canada</td><td>S405</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk, 3-0</td><td>Covidien Canada</td><td>S404</td><td></td></tr><tr><td>Satinsky, Suprahepatic Cava Clamp</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB605R</td><td></td></tr><tr><td>흡입 팁</td><td>Tyco Healthcare Group LP</td><td>8888501023</td><td></td></tr><tr><td>Surgipro II, 6-0</td><td>Covidien Canada</td><td>VP733X</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab, Cautery Pencil</td><td>Covidien Canada</td><td>E2515H</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab, Force Tx</td><td>Valleylab Inc.</td><td></td><td></td>216151480</tr><tr><td>Valleylab, 환자 반환 전극</td><td>Covidien Canada</td><td>E7507</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>카탈로그 번호</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Medication</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Atropine Sulfate 15 mg/30 ml</td><td>서까래 8 제품</td><td>238481</td><td></td></tr><tr><td>부프레노르핀 0.3 mg/ml</td><td>RB 제약 LDT</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>세프티오퍼 3 mg/ml</td><td>화이자 캐나다 Inc.</td><td>11103</td><td></td></tr><tr><td>Cefazolin 1g</td><td>캐나다 제약 파트너 Inc.</td><td></td><td></td>2237138</tr><tr><td>펜타닐 구연산염 0.25 mg/5 ml</td><td>산도즈 캐나다 Inc.</td><td></td><td></td>2240434</tr><tr><td>헤파린 10,000 iU/10 ml</td><td>산도즈 캐나다 Inc.</td><td>10750</td><td></td></tr><tr><td>히스티딘-트립토판-케토글루타레이트(HTK) 용액</td><td>메타팜</td><td>CU001LBG</td><td></td></tr><tr><td>이소플루란 99.9%, 250ml</td><td>캐나다 제약 파트너</td><td></td><td></td>2231929</tr><tr><td>케타민 하이드로클로라이드&nbsp; 5,000 mg/50 ml</td><td>Bimeda-MTC Animal Health Inc.</td><td></td><td></td>612316</tr><tr><td>젖산 링거' S + 5% 포도 당 1L</td><td>Baxter Corporation</td><td>JB1064</td><td></td></tr><tr><td>젖 산 링거 s 1 L</td><td>박스터 코퍼레이션</td><td>JB2324</td><td></td></tr><tr><td>메트로니다졸 500 mg/100 ml</td><td>박스터 코퍼레이션</td><td>870420</td><td></td></tr><tr><td>미다졸람 50 mg/10 ml</td><td>캐나다 제약 파트너</td><td></td><td></td>2242905</tr><tr><td>노르에피네프린 16 mg/250 ml 포도당 5%</td><td>Baxter Corporation</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>판토프라졸 40 mg</td><td>Sandoz Canada Inc.</td><td></td><td></td>2306727</tr><tr><td>파파베린 65 mg/2 ml</td><td>산도즈 캐나다 주식회사</td><td>9881</td><td></td></tr><tr><td>프로포폴 1,000mg/100ml</td><td>파마사이언</td>스<td></td><td></td>2244379</tr><tr><td>식염수 0.9%, 1L</td><td>Baxter Corporation</td><td>60208</td><td></td></tr><tr><td>Solu-Medrol 500mg</td><td>Pfizer Canada Inc.</td><td></td><td></td>2367963</tr><tr><td>베라파밀</td><td>산도즈 캐나다 Inc.</td><td></td><td></td>2166739</tr><tr><td>자일로카인 기관내 10mg/50ml</td><td>아스트라제네카</td><td>2003767</td><td></td></tr></tbody></table>

돼지 모델에서 이소성 신장자가 이식 : 단계별 프로토콜

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

신장 이식은 말기 신장 질환을 앓고 있는 환자에게 선택되는 치료법입니다. 투석과 비교할 때 더 나은 기대 수명과 더 높은 삶의 질을 제공합니다. 지난 수십 년 동안 신장 이식 후 환자의 예후가 크게 개선되었지만, 이용 가능한 장기의 부족 현상이 증가함에 따라 전 세계적으로 심각한 문제가 발생하고 있습니다. 기증자 풀을 확대하기 위해, 확장 기준 기증자(ECD)로부터 회수된 또는 순환기 사망 후 기증(DCD)된 변연 신장 이식편이 이제 이식에 허용됩니다. 이러한 한계 이식편의 수술 후 결과를 더욱 개선하기 위해 연구는 대체 보존 기술, 면역 조절, 유전자 전달 및 줄기 세포 투여와 같은 새로운 치료 접근법에 초점을 맞춰야 합니다.
동물 모델에 대한 실험 연구는 새로 개발된 기술이 임상 실습으로 전환되기 전의 마지막 단계입니다. 돼지 신장 이식은 인간 이식의 훌륭한 모델이며 새로운 접근 방식을 조사할 수 있습니다. 돼지 모델의 가장 큰 장점은 인체와 해부학적, 생리학적으로 유사하여 새로운 발견을 임상 시험으로 신속하게 전환할 수 있다는 것입니다. 이 논문은 자가이식 모델을 위한 단계별 수술 프로토콜을 제공하고 실험적 성공을 보장하기 위한 핵심 요소를 강조합니다. 적절한 수술 전후 주거, 세심한 마취 및 일관된 수술 기법은 수술 후 유리한 결과를 가져옵니다. 반대쪽 천연 신장의 절제는 이식 후 이식 기능을 평가할 수 있는 기회를 제공합니다. 정맥 및 요로 카테터의 배치와 대사 케이지의 사용은 보다 상세한 평가를 가능하게 합니다. 대체 이식편 보존 기술에 대한 장기간의 추적 연구 및 조사의 경우, 자가이식 모델은 거부 반응 및 면역억제 약물로 인한 혼란스러운 편향을 피하기 때문에 동종이이식 모델보다 우수합니다.

이하, 신장자가 이식 실험 결과 (N = 4) 증명되어있다. 초기 그래프트 회수 후에, 돼지는 하우징 영역에서 회수. 한편, 신장 이식 7 시간 35 분 (± 18 분)의 평균 시간을 얼음에 보관 하였다. 마취를 반복 개복술의 reinduction 후, 반대측 신장은 절제 설명대로 냉 저장 이식은 heterotopically 이식되었다. 인공 호흡기에서 이유 후 돼지는 수술에서 회복 한 10 일 (그림 1 참조)에 가입 하였다. 데일리 (1-4 수술 후 하루, 포드) 또는 모든 두 번째 날 (6-10 포드) 혈액 샘플은 혈액 가스 분석을 수행하기 위해 수집; 신장 기능, 혈청 크레아티닌 및 혈중 요소 질소을 평가하기 위해 (BUN) 값을 추정 하였다. 비교를 위해, 하나 allotransplanted 신장 이식의 결과가 표시됩니다. 면역 억제를 들어,이 돼지는 사이클로스포린 100 mg을 경구 및 공동 수신autotransplant 프로토콜과 동일한 사용 수술 기법 ivbid 250 mg의 rtisone이었다; 더 따뜻한 허혈 시간은 적용되지 않았다. 모든 돼지는 추적 관찰 기간 동안 좋은 임상 상태에 있었다. 혈청 크레아티닌 및 BUN 값은 BUN 10.7 ± 4 (크레아 2.8 ± 0.7 밀리그램 / DL, BUN 25.3 ± 7 밀리그램 / DL을) 수술 후 첫날에 가장 높은 증가를 공개하고 포드 (10) (크레아 1.7 ± 0.4 밀리그램 / DL까지 감소 초기 기준 값에 가까운 밀리그램 / DL). allotransplanted 신장 이식은 높은 크레아티닌 및 BUN 값을 보여 좋은 초기 이식 기능 이후 인해 거부 가능성이 가장 높은자가 이식에 비해 (그림 2, 3). 산 - 염기 지혈 (그림 4)와 전해질 수준 (그림 5) 개입없이 안정적이었다. 조직 학적 검사 autotransplanted 신장 보존 tubulointerstitium (Figur을 보여 주었다예 6) 및 allotransplanted 신장 간질 염증 tubulitis 한 사구 체 신염 확산 (도 7). <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig2.jpg" /> 그림 2. 혈청 크레아티닌 값. 혈청 크레아티닌 기준 값 (평균 및 표준 편차) 및 (10) 수술 후. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig3.jpg" /> 그림 3. 혈청 BUN 값.베이스 라인에 대한 혈청 BUN 값 (평균 및 표준 편차) 10 일 수술 후. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 그림 4. 산 - 염기 지혈.베이스 라인을위한 산 - 염기 지혈 (평균 및 표준 편차) 10 일 수술 후. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig5.jpg" /> 그림 5. 전해질 수준. 전해질 수준 (평균 및 표준 편차)베이스 라인을 위해 10 일 수술 후. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <img alt="그림 6" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig6.jpg" /> 그림 6. 조직학 (H &amp;# 38;.. E), 100X 배율 십일 수술 후 autotransplanted 신장의 정상 tubulointerstitium <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig6large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <img alt="그림 7" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig7.jpg" /> 그림 7. 조직학 (H &amp; E), 100X 배율. 광범위한 간질 성 염증, tubulitis 및 사구 체 신염, 거부와 일치하는 10 일 수술 후 allotransplanted 신장에. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig7large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

돼지 장기 이식 모델은 장기 보존 메커니즘을 연구하는 데 중요한 플랫폼을 제공합니다. 이 논문은 변연 신장 이식편을 사용하여 이식 결과를 개선하기 위한 새로운 접근 방식을 조사할 수 있는 이종성 돼지 신장 자가이식 모델에 대해 설명합니다.

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

이 수술 절차의 전반적인 목표는 돼지 모델에서 이소성 신장 자가이식을 안정적으로 수행하여 우수한 신장 이식 기능을 제공하는 것입니다. 이 비디오와 함께 제공되는 원고는 돼지 모델에서 이종성 신장 자동차 운송을 수행하는 방법에 대한 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 비디오의 가장 큰 장점은 모든 중요한 주요 조치를 제공하고 이식 후 적절한 신장 이식 기능을 보장하기 위해 돼지와 임상 모델 간의 차이점을 강조한다는 것입니다.돼지를 마취하고 수술대에 올려놓은 후 후두경을 사용하여 성대를 노출시킵니다. 삽관으로 인한 경련을 방지하기 위해 2% 리도카인 용액을 화음에 분사합니다. 그런 다음 6.5mm 튜브로 돼지를 삽관하고 3-5ml의 공기로 커프를 막습니다.진행하기 전에 기화기를 조절하고 깊은 마취를 확인하십시오. 마취가 확인되면 Seldinger 기술을 사용하여 9.5 프렌치 단일 루멘 카테터를 경정맥에 삽입합니다. 여기에는 정맥에 구멍을 뚫고, 가이드와이어를 삽입하고, 바늘을 박리 유도기로 교체하고, 와이어를 카테터로 교체하는 것이 포함됩니다.다음으로 3-0 실크 봉합사를 사용하여 카테터를 고정합니다. 수술 내내 카테터를 사용하여 항생제와 진통제 칵테일을 투여합니다. 또한 돼지의 눈에 수의사 연고를 발라 건조함을 예방한다.멸균 소독 및 수술 부위 봉제 후 25cm 길이의 정중선 절개를 수행하고 견인기를 삽입합니다. 큰 장과 작은 장을 수건으로 덮고 오른쪽 신장에 최적으로 접근할 수 있도록 왼쪽에 놓습니다. 이제 소작기를 사용하여 요관과 오른쪽 신장 자체를 부착 조직으로부터 분리하십시오.다음으로, 소작기를 사용하여 오른쪽 신장 정맥과 동맥이 하대정맥과 대동맥에서 기원에서 벗어날 때까지 절개합니다. 동맥 혈관 경련을 피하려면 30-65mg의 파파바린을 투여하는 것이 도움이 될 수 있습니다. 신장 박리가 완료된 후 3-0 실크 봉합사로 요관을 묶고 요관을 원위부로 자릅니다.이때 얼음 한 그릇과 멸균 장기 주머니를 준비하십시오. 신장을 채취하려면 혈관 클램프를 사용하십시오. 먼저 신장 동맥을 대동맥 가까이에 고정합니다.둘째, 신장 정맥을 대정맥에 가깝게 고정합니다. 다음으로 신장 이식편을 절제하고 얼음에 놓습니다. 이제 즉시 신장 동맥 캐뉼라로 신장 동맥을 캐뉼러하십시오.500ml의 얼음처럼 차가운 HTK 용액을 사용하여 혈액을 씻어내고 이식할 때까지 얼음 위에 신장을 보관하십시오. 그 자리에서 실크 2-0 합자로 남아 있는 신장 동맥을 닫고 실행 프롤렌 6-0 봉합사로 신장 정맥을 닫습니다. 출혈을 치료한 후에는 복부와 피부를 닫는다.그런 다음 3-0 실크 봉합사로 정맥 카테터를 피하 고정하고 돼지의 등에 터널을 뚫어 원치 않는 조작을 방지합니다. 돼지를 엎드린 자세로 세운 후 카테터를 피부에 단단히 봉합합니다. 돼지 마취 및 수술 부위 멸균 소독 후 기관 옆을 4cm 절개하고 조직을 절개하여 경동맥을 노출시킵니다.Overholt 집게를 동맥 주위로 통과시켜 2-0 실크 봉합사를 배치합니다. 그런 다음 Seldinger 기법을 사용하여 플라스틱 카테터를 삽입하여 수술 내내 동맥압을 지속적으로 측정합니다. 그런 다음 이전과 같이 복강을 다시 엽니다.이제 보존된 신장 이식편을 하정맥과 대동맥에 끝에서 옆으로 이식합니다. 이를 위해 픽업과 소작을 사용하여 장골 분기점 위의 대정맥과 대동맥의 5-8cm를 절개합니다. 림프관을 피하십시오.필요에 따라 5-0 프롤렌 봉합사로 봉합합니다. 출혈이 있는지 확인하고 혈관에 남아 있는 조직을 제거합니다. 목표는 Satinsky 클램프를 배치하기에 충분한 용기를 노출시키는 것입니다.다음으로, 반대쪽 신장을 절제합니다. 먼저 장을 오른쪽에 위치시킵니다. 다음으로, 요관, 신장 자체, 신장 정맥 및 신장 동맥을 주변 조직에서 절개합니다.그런 다음 요관과 혈관을 묶습니다. 이제 신장을 절제하고 출혈을 확인합니다. 그런 다음 대동맥과 대정맥을 노출시키기 위해 장의 위치를 변경합니다.헤파린을 주사하고 최소 2분 동안 기다립니다. 신장 이식편을 가져 와서 멸균 얼음이 든 천으로 싸십시오. 정맥 문합부터 시작합니다.Satinsky 클램프를 사용하여 대정맥을 완전히 클램핑합니다. 그런 다음 11번 칼날로 신정맥 개구부와 같은 크기의 슬릿 절개를 만듭니다. 냄비 가위를 사용하여 필요에 따라 슬릿을 확장할 수 있습니다.두 개의 이중 팔 6-0 프롤렌 봉합사를 사용하여 두개골 및 꼬리 모서리 스티치를 수행했습니다. 이제 얼음에서 돼지의 신장을 꺼내 수술 구역에 놓습니다. 이식편에 두개골과 꼬리 모서리 스티치를 수행합니다.다음으로, 신장의 근사치를 구합니다. 상단 모서리를 묶고 뒷벽부터 시작하여 6-0 프롤렌을 사용하여 런닝 봉합을 수행합니다. 2/3 지점에서 넥타이의 다른 쪽 끝을 사용하여 앞쪽의 봉합사를 완성합니다.두개골 실밥을 묶은 후 꼬리 모서리에 실밥을 묶습니다. 이제 신장 정맥에 불독 클램프를 놓고 Satinsky 클램프를 열고 정맥 문합에 출혈이 있는지 확인합니다. Satinsky cl을 놓습니다.amp 대동맥에.그런 다음 신장 동맥의 개구부와 일치하는 슬릿을 절개합니다. 숫자 11 블레이드를 사용하십시오. 4mm 라운드 펀치를 사용하여 구멍을 비웁니다.다음으로, 수용자 측에서 시작하여 하나의 6-0 프롤렌 봉합사를 사용하여 문합을 수행합니다. 동맥 내피는 박리를 방지하기 위해 각 봉합사에 포함되어야 합니다. 한편, 10ml의 노르에피네프린을 500ml의 Ringer's lactate에 희석하여 연속적으로 시작하십시오.수축기 혈압을 수은 100밀리미터 이상으로 유지하기 위해 이것을 적정하십시오. 동맥 문합을 완료하기 전에 베라파밀을 동맥 내에 제공할 수 있습니다. 문합을 완료한 후 신장 동맥에 불독 클램프를 놓고 Satinsky 클램프를 열고 출혈을 확인합니다.이제 신장의 포장을 풀고 얼음을 제거합니다. 정맥 불독 클램프를 먼저 연 다음 동맥 불독 클램프를 엽니다. 균일한 재관류를 유지하기 위해 신장을 배치합니다.혈관 경련을 예방하기 위해 파파베린을 혈관에 국소적으로 투여하십시오. 재관류 후 소변 생성이 즉시 시작되어야 합니다. 이제 요관 문합을 수행했습니다.냄비 가위를 사용하여 세로 길이 0.5cm에 걸쳐 이식편의 요관을 여는 것으로 시작하십시오. 수혜자 요관에도 동일한 작업을 수행합니다. 그런 다음 좌우 요관 문합을 위해 두 개의 6-0 PDS 봉합사를 사용합니다.양쪽에 모서리 스티치를 수행한 다음 전면 벽을 연속적으로 봉합합니다. 문합을 돌려 뒤쪽 벽을 노출시키고 봉합을 계속하여 계속합니다. 문합이 끝나면 출혈 여부를 확인합니다.이제 두 개의 모노필 1개의 봉합사로 복벽을 닫습니다. 그런 다음 3-0 실크 봉합사로 피부를 닫습니다. 노르에피네프린을 조심스럽게 적정하여 돼지의 수축기 혈압을 100mm 이상의 수은으로 지속적으로 유지했습니다.이것은 절차에서 중요한 단계입니다. 돼지가 엎드린 자세가 될 때까지 수축기 혈압을 계속 모니터링하십시오. 4건의 신장 자동 이식이 시행되었습니다.초기 이식편 회수에서 이식편은 7.5시간 동안 얼음 위에 보관되었습니다. 인공호흡기에서 돼지의 젖을 뗀 후 수술에서 회복되어 10일 동안 추적 관찰했습니다. 혈액 샘플에서 혈청 크레아티닌과 혈액 요소 질소 값을 추정했습니다.측정된 값은 자가 이식 이식편에 대한 적절한 결과를 보여주었습니다. 동종 이식 이식편에서 증가된 혈청 크레아티닌 및 BUN 값은 이식 거부 반응을 나타냅니다. 산-염기 지혈 및 전해질 수준도 중재 없이 안정적이었습니다.조직학적 검사에서 자가이식된 신장에서 세뇨관이 보존된 것으로 나타난 반면, 동종이식된 신장에서는 미만성 간질성 염증, 세뇨관 및 사구체염이 나타났습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 돼지 모델에서 이소성 신장 자가수송을 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 신장 이식 후 양호한 신장 이식 기능을 보장하기 위해 인간 환경과 비교한 수술 기술의 주요 차이점이 입증되었습니다.

heterotopic-renal-autotransplantation-porcine-model-step-step

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

생쥐의 신장 이식은 성공을위한주의 이후 수술 진료와 치료를 필요로하는 기술적으로 도전적인 절차입니다.

Murine 신장 이식 절차

이 비디오는 요관 부분과 함께 신장 중 하나를 제거하는 수술인 신장 절제술을 보여줍니다. 신장을 오가는 혈관이 묶여 나뉩니다. 절제된 신장은 이식 절차에 사용할 수 있습니다.

돼지 모델의 신장 절제술: 이식을 위해 돼지 신장 이식편을 회수하는 수술 절차

이 비디오는 돼지 모델에서의 정소성 신장 자동 이식에 대해 설명합니다. 이 수술 절차는 동물의 신장 이식편을 원래의 해부학적 위치에 이식하는 것입니다. 이 모델은 인간의 말기 신장 질환에 대한 새로운 치료법을 조사하는 데 사용됩니다.

정소성 돼지 신장 이식: 돼지 모델에서 이식 신장을 이식하는 기술

동물 장기 생리학에 대한 연구는 실험적인 생체 외 관류 시스템을 수행하여 달성할 수 있습니다. 이전에 개발한 생체 외 간 관류 모델에 항상성 기관인 돼지 신장을 추가하는 것은 더 나은 생리학적 환경을 달성하기 위한 주요 단계가 될 수 있습니다.

자가 생체 외 관류 돼지 간-신장 실험 단계

여기에서, 우리는 새로운 심장 보호 전략을 조사하기 위하여 확고하게 확립되고 이용된 정형포피성 심혼 이식의 전임상 대형 동물 (돼지) 모형을 기술합니다.

정형외 심장 이식의 전 임상 돼지 모델

대형 동물 모델은 전임상 이식 연구에서 필수적인 역할을 합니다. 임상 설정과의 유사성으로 인해, 본 문서에 기재된 치열 신장 자동 이식의 돼지 모델은 장기 보존 기술 및 치료 내정간섭의 시험을 위한 우수한 생체 내 설정을 제공한다.

24시간 장기 보존 및 지속적인 원격 분석을 사용하여 돼지 모델에서 직소 신장 자동 이식

우리는 돼지 이종성 심장 이식 모델에서 전체 심장 동종이식편에 치료제를 전달하기 위한 규범발열 ex vivo sanguinous perfusion system을 활용하기 위한 프로토콜을 제시한다.

심장 동종이식편에 치료제를 전달하기 위한 돼지 이질성 심장 이식 프로토콜

여기에서는 후속 기계 관류 또는 이식을 위한 전임상 돼지 모델에서 신장 조달을 위한 수술 모델을 자세히 설명하는 프로토콜을 제시합니다.

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본 프로토콜은 동종이식편의 체외 관류를 활용하여 순환기 사망 후 기증 후 심장 이식의 고충실도 돼지 모델을 설명합니다.

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모든 연령 측정 gyrification (대뇌 피질의 접힘)는 초기 두뇌 개발에 창문을 나타냅니다. 따라서, 우리는 이전에 북반구 점 이상 수천명의 현지 gyrification를 측정하는 알고리즘을...

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학습하세요 돼지 모델에서 이소성 신장 자가이식 수술 기법을 통해 신장 이식물 기능을 향상시키는 방법을. HTK 용액 보존과 혈관 문합술을 포함한 단계별 프로토콜이 연구자들에게 신장 보존 기술 연구의 기초 자료를 제공합니다.

돼지 모델에서 이소성 신장자가 이식 : 단계별 프로토콜

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