의식 설치류에서 신장 기능의 경피 평가

이 절차의 전반적인 목표는 혈액 샘플이나 추가 실험 분석 없이 신장 기능을 경피적으로 측정하는 것입니다. 이 방법은 신장 손상 또는 특정 치료 개입이 신장 기능에 미치는 영향과 같은 신장학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기법의 주요 장점은 최소 침습적이라는 점과 후속 실험 조작 없이 측정 직후 결과를 분석할 수 있다는 것입니다.

이 기술은 여러 다른 종의 거의 모든 신장 상태를 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 또한 한 동물 내에서 순차적 측정을 수행하는 데 유용합니다. 절차를 시작하기 전에 발가락 꼬집기로 적절한 마취 수준을 확인하십시오.

그리고 전기 면도기를 사용하여 동물의 뒤쪽 하복부에서 3 x 6cm 크기의 털을 제거합니다. 제모 크림으로 남은 털을 제거하십시오. 2-3분 후, 크림이 약간의 배경 형광을 방출할 수 있으므로 벗겨진 피부를 철저히 씻으십시오.

다음으로, 신장 기능을 측정하기 위한 광학 장치를 양면 접착 패치의 한쪽 면에 놓습니다. 광학 부품을 투명 창 위에 배치하고 반대쪽을 보호 호일로 덮은 상태로 둡니다. 그런 다음 크기가 일치하는 양면 접착 패치를 배터리에 부착합니다.

장치를 수리하기 전에 동물의 무게를 측정하십시오. 그런 다음 양면 접착 패치의 너비보다 약 1cm 더 긴 관형 탄성 거즈 붕대 조각을 자릅니다. 그리고 동물의 머리 위로 붕대를 당깁니다.

다음으로, 동물을 누운 자세로 놓고 면도한 부분은 덮지 않습니다. 그리고 배터리 커넥터를 장치의 해당 포트에 꽂습니다. 배터리가 제대로 연결되면 장치가 깜박이기 시작합니다.

배터리에 부착된 패치의 다른 쪽에서 보호 호일을 제거합니다. 그리고 장치의 윗면에 배터리를 장착하십시오. 이제 작동 장치 패치에서 보호 덮개를 제거하고 올바르게 고정될 때까지 가장자리를 잡고 동물 뒷면의 면도한 부분에 패치를 놓습니다.

관형 탄성 거즈 붕대로 장치를 덮고 팔다리가 자유롭게 움직일 수 있도록 하면서 복부 위로 붕대를 완전히 늘리도록 주의하십시오. 측정 중 움직임 아티팩트를 방지하기 위해서는 올바른 고정이 중요하므로 측정을 시작하기 전에 장치가 제대로 부착되었는지 확인하십시오. 붕대가 제자리에 있으면 배터리의 전선을 덮도록 장치 위에 크기와 일치하는 접착 테이프 스트립을 적용합니다.

그리고 장치에 압력을 가하지 않고 1-3분 동안 배경 판독값을 측정합니다. FITC-sinistrin을 투여하기 위해 동물의 꼬리를 워밍업하여 꼬리 정맥을 확장한 후 IV에 적절한 양의 FITC-sinistrin 원액을 주입합니다. 다음으로, 물이나 철사 뚜껑이 없는 집 우리에 동물을 혼자 조심스럽게 놓습니다.

이동 아티팩트가 유입되지 않도록 주의합니다. 그런 다음 적절한 실험 기간 동안 광학 장치를 사용하여 FITC-sinistrin에서 방출되는 형광을 기록합니다. 녹음 기간이 끝나면 접착 테이프를 조심스럽게 제거한 다음 관형 붕대를 제거합니다.

그런 다음 양면 접착 패치를 피부에서 부드럽게 분리합니다. 그리고 동물을 일반 집 우리로 되돌려 놓습니다. 데이터를 읽으려면 장치에서 배터리를 분리하고 접착 패치를 제거하십시오.

그런 다음 마이크로 USB 케이블을 사용하여 광 레코더를 컴퓨터에 연결하고 적절한 소프트웨어로 데이터를 다운로드합니다. 마지막으로, 적절한 소프트웨어를 사용하여 소프트웨어 프로토콜에 따라 제거 역학 곡선을 생성합니다. 그리고 데이터가 포함된 점 CSV 파일을 엽니다.

신장 기능이 영향을 받으면 FITC-시니스트린 반감기가 증가합니다. 물질의 배설이 감소하고 곡선의 모양이 변하기 때문입니다. 일반적으로 측정된 곡선은 배경 수준으로 되돌아오지 않으며 곡선 아래 증가된 영역이 관찰됩니다.

동일한 동물에서, 부상 전후 측정은 감소된 배설로 인한 마커의 축적으로 인해 최대 형광 강도의 증가를 보여줍니다. 예를 들어, 신부전이 있는 경우 경피적으로 측정된 FITC-시니스틴 곡선은 신장 조직의 심각한 기능 손상으로 인해 안정적인 상태를 나타냅니다. 또한, 이 소형 장치는 다양한 건강 상태를 가진 여러 종류의 설치류에서 신장 기능을 성공적으로 측정하는 데 사용되었습니다.

신장 질환 및 노화로 인한 변화를 감지하기 위한 장치의 적합성과 감도를 강조합니다. 일단 마스터하면 50분 안에 실험을 완전히 설정할 수 있으며 한 명의 실험자가 시간당 최소 4마리의 동물을 평가할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 측정 기간 동안 급수 장치 및 돌출 구조를 제거하여 전자 장치를 보호하는 것을 기억하는 것이 중요합니다.