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DOI: 10.3791/53772-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
여기에서 우리는 깨어 있는 돼지, 휴식 시 및 등급이 매겨진 러닝머신 운동 중에 심폐 기능을 평가하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 만성 기구는 카디오데프레시브 마취제의 영향을 받지 않고 반복적인 혈류역학적 측정을 가능하게 합니다.
이 수술의 전반적인 목표는 심혈관 질환이 있거나 없는 기민한 동물의 심폐 스트레스 검사 중 혈역학적 측정을 할 수 있도록 동물을 만성적으로 계측하는 것입니다. 이 방법은 대사 증후군이 좌심실 기능에 미치는 영향 및 관류 therby가 박출률이 보존된 심부전 발병에 기여하는 방법과 같은 심혈관 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 두 가지 주요 장점은 깨어 있는 동물로부터 혈역학적 측정 및 혈액 샘플을 얻을 수 있으며, 이 기술은 휴식 시와 운동과 같은 심혈관 스트레스 중에 수행할 수 있다는 것입니다.
이 기술의 의미는 폐 고혈압의 조기 진단으로 확장될 수 있는데, 이는 폐 미세혈관 기능뿐만 아니라 우심실 기능 및 관류가 질병 도입 후 잘 정의된 단계에서 측정될 수 있기 때문입니다. 이 기술을 시각적으로 보여주는 것이 필수적입니다. 이 혈관의 혈관 경련으로 인해 관상 동맥 주위에 유동 프로브를 배치하는 방법을 배우기가 어렵습니다.
또한 대동맥 주위에 유동 프로브를 배치하는 것은 개흉술과 관련된 이 혈관의 위치로 인해 어렵습니다. 이 절차를 시연하는 것은 우리 실험실의 기술자인 Annemarie Verzijl이 맡을 것입니다. 동물의 수술을 준비한 후, 견갑골의 왼쪽 하향 각도로 꼬리 1cm를 시작으로 피부를 절개하고 왼쪽 겨드랑이까지 아래로 자릅니다.
절개 후 투열 요법을 사용하여 피부의 혈관을 소작합니다. 다음으로, 투열 요법의 절단 방식을 사용하여 세라투스 근육과 대흉근을 절단합니다. 근육층의 혈관을 소작하기 위해 투열 요법을 계속 사용하십시오.
이제 둔기 절개를 사용하여 4번째 왼쪽 늑간 공간의 늑간 근육을 조심스럽게 나눕니다. 모기 클램프를 사용하여 완료하십시오. 그런 다음 내장 및 두정엽 흉막으로 덮여 있는 왼쪽 폐의 늑골 표면을 노출시킵니다.
다음으로, 흉막의 두 층을 조심스럽게 뚫고 찢어 흉막강으로 들어갑니다. 흉부 견인기로 상처와 갈비뼈의 가장자리를 분리한 다음 조직을 강제로 밀어 분리하여 노출을 개선합니다. 심장과 큰 혈관을 드러내려면 왼쪽 폐를 꼬리 쪽으로 밀고 젖은 거즈로 제자리에 쐐기를 박습니다.
하행 흉부 대동맥을 둘러싼 약 2제곱센티미터의 결합 조직을 제거하기 위해 둔기 절개로 수술의 이 부분을 시작합니다. 다음으로, 비흡수성 USP 3-0 꼰 실크 봉합사를 사용하여 대동맥 벽에 3바늘 지갑 끈 봉합사를 놓습니다. 그런 다음 스테인리스 스틸 16게이지 바늘로 봉합사를 통해 대동맥 혈관 벽을 관통합니다.
바늘을 따라 액체로 채워진 카테터의 끝을 대동맥에 삽입합니다. 그런 다음 지갑 끈 봉합사를 단단히 당겨 묶습니다. 카테터를 고정하려면 링 위의 카테터 주위에 여분의 봉합사를 세 번 감고 묶은 다음 삽입 부위에 약 1cm의 두개골을 새로 꿰매십시오.
이제 액체로 채워진 카테터를 컴퓨터에 연결된 보정된 압력 변환기에 연결합니다. 따라서 후속 단계에서 평균 동맥압을 모니터링합니다. 다음으로, 횡격막 신경을 손상시키지 않고 십자형 절단으로 심낭을 엽니다.
절단 부분 아래에서 폐동맥을 식별하고 꼬리 방향으로 부드럽게 당겨 Farabeuf 견인기로 상행 대동맥과 대동맥궁을 노출시킵니다. 대동맥이 노출된 상태에서 Metzenbaum 가위를 사용하여 상행 대동맥과 폐동맥 사이의 결합 조직을 1cm 절개합니다. 이제 유량 프로브를 부착합니다.
먼저 봉합사 리드를 사용하여 용기 주위에 고무 밴드를 가져옵니다. 둘째, 유량 프로브 측정 장치를 고무 밴드에 부착합니다. 셋째, 플로우 프로브를 컴퓨터에 연결하고 넷째, 심출력 신호를 확인하여 프로브가 올바른 위치에 있는지 확인합니다.
다음 단계는 좌측 전방 하행 관상동맥의 근위부를 노출시키고 해부하는 것입니다. 먼저 집게로 조직을 들어 올립니다. 그런 다음 Metzenbaum 가위를 사용하여 조직을 작게 자릅니다.
그런 다음 면봉을 사용하여 동맥 조직을 조심스럽게 떼어냅니다. 그리고 관상 동맥이 완전히 절개되었는지 확인하기 위해 그 아래에 작고 직각의 모기 클램프를 통과시킵니다. 관상동맥의 혈관경련이 발생하면 10%의 리도칸을 분사하여 혈관을 이완시킵니다.
동일한 기술을 사용하여 폐동맥, 우심실, 좌심실 및 좌심방에 액체로 채워진 카테터를 배치합니다. 이제 모든 카테터가 컴퓨터에 연결되어야 합니다. 그런 다음 관상동맥 정맥 카테터에 연결된 봉합사를 사용하여 전심실 관상동맥 정맥과 평행하게 꿰매십시오.
스티치 후 관상 동맥 정맥 카테터의 20게이지 바늘로 정맥을 뚫고 카테터의 캐뉼라를 정맥 주사합니다. 그런 다음 기존 스티치로 카테터를 고정합니다. 바늘을 제거하고 연장선에 연결합니다.
이제 이전에 절개된 왼쪽 전방 하행 관상동맥 주위에 관상동맥 흐름 프로브를 놓습니다. 프로브를 배치한 상태에서 컴퓨터에서 관상동맥 흐름 신호를 확인하여 흐름 프로브가 올바르게 배치되었는지 확인합니다. 관상동맥 흐름 신호의 모양은 여기에 표시된 모양과 유사해야 합니다.
첫 번째 절개 부위와 평행하게 꼬리 약 8cm 지점에서 1.5cm 절개를 하여 이 수술 단계를 시작합니다. 그런 다음 크고 구부러진 모기 클램프를 사용하여 흉막강에서 6번째 늑간 공간을 통해 이 절개 부위까지 배액관을 피하로 유도합니다. 배수구를 흡입 장치에 연결하여 흉부에 남아 있는 액체를 제거합니다.
다음으로, 크고 구부러진 모기 클램프를 사용하여 3번째 왼쪽 늑간 공간과 갈비뼈 위의 근육을 통해 유량 프로브를 개별적으로 터널링합니다. 액체로 채워진 카테터를 3번째 또는 5번째 좌측 늑간 공간을 통해 터널을 뚫습니다. 먼저 액체로 채워진 카테터를 고정합니다.
그런 다음 3방향 스톱콕을 제거하여 피어싱 영역을 최소화합니다. 셋째, 늑간 근육을 뚫습니다. 이제 유량 프로브와 유체로 채워진 카테터를 비흡수성 USP 2-0 편조 실크로 고정합니다.
늑간 근육에 지갑 끈 봉합사를 사용하십시오. 이 봉합사는 또한 음의 흉곽 내 압력을 복원한 후 공기 누출을 방지합니다. 그런 다음 왼쪽으로 약 2cm, 척추와 평행하게 피부를 3개 절개합니다.
이 세 개의 절개 부위는 길이 3cm, 절개 부위 3cm 간격으로 만듭니다. 이제 좌측 광배근 아래의 투관침을 상부 절개 부위에서 뒤쪽 절개 부위까지 뚫습니다. 그런 다음 투관침을 사용하여 흐름 프로브와 유체 카테터를 뒤쪽으로 터널링합니다.
터널링이 완료되면 액체로 채워진 카테터에 스톱콕을 놓고 클램프를 제거합니다. 혈전과 기포를 제거하기 위해 약간의 혈액을 빼냅니다. 그런 다음 액체로 채워진 카테터를 밀리리터당 1, 000 단위의 헤파린으로 채우고 관상 동맥 정맥 카테터를 밀리리터당 5, 000 단위의 헤파린으로 채웁니다.
두 개의 분리된 위치에서 4번째 늑간 공간의 갈비뼈를 함께 당겨 흉부를 닫습니다. 비흡수성 USP 6 꼰 폴리에스터를 사용합니다. 그런 다음 러닝 스티치로 세라투스 근육과 가슴근 주요 근육을 닫습니다.
비흡수성 USP 2-0 꼰 실크를 사용하여 흐르는 피하 봉합사로 피부를 닫습니다. 그런 다음 카테터 사이의 등쪽 절개 부위를 봉합합니다. 먼저 매듭을 피부에 직접 묶어 절개 부위를 닫습니다.
그런 다음 피부에서 약 1cm 떨어진 곳에 다른 매듭으로 카테터를 봉합사에 고정합니다. 플로우 프로브 와이어가 봉합사에 의해 절단되지 않도록 폴리글락틴 봉합사로 플로우 프로브를 봉합합니다. 그런 다음 절개의 두개골 쪽에 압력을 가하면서 배액관을 조심스럽게 제거하여 흉강에 음압을 다시 원
래대로 만듭니다.이제 지갑 끈 봉합사로 절개 부위를 봉합하고 바셀린으로 상처를 봉합하여 수술을 마칩니다. 동물을 회복하는 방법과 트레드밀 실험을 수행하는 방법에 대한 텍스트 프로토콜을 따르십시오. 돼지를 시속 5km까지 움직이도록 운동시키면 심장 박출량이 두 배로 증가했습니다.
체내 산소 소비량이 3배로 증가하는 것이 관찰되었습니다. 이것은 헤모글로빈 농도의 증가와 체내 산소 추출의 증가와 함께 심박출량의 증가 때문이었습니다. 이것은 주로 뇌졸중 볼륨의 작은 증가와 함께 심박수의 증가에 의해 달성되었습니다.
뇌졸중 용적의 증가는 좌심실 수축성의 증가에 의해 촉진되었는데, 이는 좌심실 압력의 1차 도함수의 최대 증가와 함께 좌심실의 이완 속도 증가 및 좌심실의 충전 압력인 좌심방 압력의 증가에 의해 입증되었습니다. 전신 혈관 확장은 전신 혈관 전도도의 증가와 전신 혈관 저항의 감소에 의해 입증되었습니다. 이것은 심박출량의 증가를 거의 완전히 수용하여 평균 대동맥 압력이 약간만 증가
하도록 했습니다.몇 가지 다른 매개변수에 대한 추가 해석은 텍스트 프로토콜에 제공됩니다. 이 비디오를 시청한 후에는 후속 심혈관 실험에서 혈류역학적 측정을 수행하기 위해 동물을 만성적으로 계측하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.
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