Name: 마우스에 압력 볼륨 루프 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 15 s
Description: 학습하세요 마우스 심장 기능 평가를 위한 압력-볼륨 루프 측정법을 통해 심장 수축 기능을 상세히 분석하는 방법을 배우세요. 이 기술은 유전자 조작 마우스의 생리학적 특성을 연구하는 데 활용됩니다.

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<ol><li>Mozaffarian, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2015+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 131 (4), e29-e322 (2015).</li>
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<li>Meyers, T. A., Townsend, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+right+ventricular+fibrosis+and+reduction+in+biventricular+cardiac+reserve+in+the+dystrophin-deficient+mdx+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Early right ventricular fibrosis and reduction in biventricular cardiac reserve in the dystrophin-deficient mdx heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 308 (4), H303-H315 (2015).</li>
<li>Townsend, D., Yasuda, S., Li, S., Chamberlain, J. S., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergent+dilated+cardiomyopathy+caused+by+targeted+repair+of+dystrophic+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Emergent dilated cardiomyopathy caused by targeted repair of dystrophic skeletal muscle.</a> Mol Ther. 16 (5), 832-835 (2008).</li>
<li>Townsend, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+administration+of+micro-dystrophin+restores+cardiac+geometry+and+prevents+dobutamine-induced+cardiac+pump+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Systemic administration of micro-dystrophin restores cardiac geometry and prevents dobutamine-induced cardiac pump failure.</a> Mol Ther. 15 (6), 1086-1092 (2007).</li>
<li>Strakova, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dystrobrevin+increases+dystrophin%27s+binding+to+the+dystrophin-glycoprotein+complex+and+provides+protection+during+cardiac+stress%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Dystrobrevin increases dystrophin's binding to the dystrophin-glycoprotein complex and provides protection during cardiac stress.</a> J Mol Cell Cardiol. 76, 106-115 (2014).</li>
<li>Yasuda, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dystrophic+heart+failure+blocked+by+membrane+sealant+poloxamer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Dystrophic heart failure blocked by membrane sealant poloxamer.</a> Nature. 436 (7053), 1025-1029 (2005).</li>
<li>Townsend, D., Daly, M., Chamberlain, J. S., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+dystrophin+loss+and+genetic+reconstitution+establish+a+molecular+link+between+dystrophin+and+heart+performance+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Age-dependent dystrophin loss and genetic reconstitution establish a molecular link between dystrophin and heart performance during aging.</a> Mol Ther. 19 (10), 1821-1825 (2011).</li>
<li>Townsend, D., Yasuda, S., McNally, E., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+pathophysiological+mechanisms+of+cardiomyopathy+in+hearts+lacking+dystrophin+or+the+sarcoglycan+complex%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Distinct pathophysiological mechanisms of cardiomyopathy in hearts lacking dystrophin or the sarcoglycan complex.</a> FASEB J. 25 (9), 3106-3114 (2011).</li>
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<li>Palpant, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+disease+in+mucopolysaccharidosis+type+I+attributed+to+catecholaminergic+and+hemodynamic+deficiencies%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cardiac disease in mucopolysaccharidosis type I attributed to catecholaminergic and hemodynamic deficiencies.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 300 (1), H356-H365 (2011).</li>
<li>Townsend, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diastolic+dysfunction+precedes+hypoxia-induced+mortality+in+dystrophic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rep%22%5BJournal%5D)">Diastolic dysfunction precedes hypoxia-induced mortality in dystrophic mice.</a> Physiol Rep. 3 (8), e12513(2015).</li>
<li>Schmähl, D., Port, R., Wahrendorf, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dose-response+study+on+urethane+carcinogenesis+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">A dose-response study on urethane carcinogenesis in rats and mice.</a> Int J Cancer. 19 (1), 77-80 (1977).</li>
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<li>Reyes, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+contractility+with+sustained+afterload+in+the+intact+murine+heart%3A+blunting+of+length-dependent+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Enhancement of contractility with sustained afterload in the intact murine heart: blunting of length-dependent activation.</a> Circulation. 107 (23), 2962-2968 (2003).</li>
<li>Segers, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conductance+catheter-based+assessment+of+arterial+input+impedance%2C+arterial+function%2C+and+ventricular-vascular+interaction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Conductance catheter-based assessment of arterial input impedance, arterial function, and ventricular-vascular interaction in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 288 (3), H1157-H1164 (2005).</li>
<li>Townsend, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+administration+of+membrane+sealant+prevents+severe+cardiac+injury+and+ventricular+dilatation+in+dystrophic+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Chronic administration of membrane sealant prevents severe cardiac injury and ventricular dilatation in dystrophic dogs.</a> J Clin Invest. 120 (4), 1140-1150 (2010).</li>
<li>Sato, T., Shishido, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ESPVR+of+in+situ+rat+left+ventricle+shows+contractility-dependent+curvilinearity%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">ESPVR of in situ rat left ventricle shows contractility-dependent curvilinearity.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 274 (5 Pt 2), H1429-H1434 (1998).</li>
<li>Sunagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+coronary+arterial+pressure+on+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relation+of+isolated+canine+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of coronary arterial pressure on left ventricular end-systolic pressure-volume relation of isolated canine heart.</a> Circ Res. 50 (5), 727-734 (1982).</li>
<li>Cingolani, H. E., Pérez, N. G., Cingolani, O. H., Ennis, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Anrep+effect%3A+100+years+later%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">The Anrep effect: 100 years later.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 304 (2), H175-H182 (2013).</li>
<li>Baan, J., van der Velde, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+of+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relation+to+type+of+loading+intervention+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Sensitivity of left ventricular end-systolic pressure-volume relation to type of loading intervention in dogs.</a> Circ Res. 62 (6), 1247-1258 (1988).</li>
<li>Rankin, J. S., Olsen, C. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+airway+pressure+on+cardiac+function+in+intact+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The effects of airway pressure on cardiac function in intact dogs.</a> Circulation. 66 (1), 108-120 (1982).</li>
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이 과정에서 세 가지 중요한 단계가 있습니다 : 1) 기관 내 튜브와 적절한 환기, 경정맥 IV 카테터 2) 배치, 좌심실의 PV 카테터의 3) 적절한 배치의 배치. 적당한 호흡 속도를 결정하는 환기 기능 지원을 제공하는 중요한 부분이다. 의식 마우스는 일반적으로 빠른 얕은 호흡과 폐포 환기를 유지한다. 일반적으로 통풍이 마우스는 훨씬 더 큰 갯벌 볼륨을해야합니다. 따라서 느린 호흡이 필요합니다. 너무 작은 환기 호흡 산증 발생합니다 너무 많은 환기, 호흡 알칼리증에 심장 기능을 변경합니다 두 조건을 이끌 것으로 중요합니다. 호흡 속도를 최적화하는 간단한 방법은 마우스의 호흡 노력으로부터 신호를 받아 마취 된 마우스에서 호흡 노력을 제거 최저 호흡 속도를 사용하는 것이다. PV 루프의 중요한 기능분석은 심장 기능의 심각한 우울증 마취없이 충분한 수준을 유지할 수있다. 성공적 PV 루프 분석을 적용 할 수있는 많은 마취 체제가있다. 흡입 및 주 사용 마취제 : 이러한 두 가지 ...

심혈관 질환은 세계 1 걸쳐 사망률과 이환율의 중요한 원인이되고 있습니다. 심장 질환은 새로운 치료법 개발에 특히 어려운 과제를 제시한다. 유전학의 발전으로 심장 질환의 발달 잠재력 유전 참여자의 다수를 식별 할 수있는 가능성을 제공한다. 심장 혈관 시스템의 통합 성격이 유전 적 목표는 그대로 동​​물 모델에서 유효성을 검사해야합니다. 마우스의 유전 적 유연성 및 낮은 비용 하우징은 주어진 유전자의 생리적 역할 평가 선두로 가져왔다. 마우스의 작은 크기는 심장 기능의 평가에 대한 몇 가지 독특한 도전을 선물한다. 가 심장 기능에 관한 정보를 제공 할 수있는 몇몇 양상이 있지만 심실 압력 볼륨의 동시 측정 압력 볼륨 심실 기능 (PV) 루프 분석을 허용한다. PV는 모든 루프아우 심장 기능은 혈관의 연결의 독립 분석하는 단계; 특정 유전 요소의 기능적 역할을 결정하는 중요한 인자. 압력 볼륨 루프의 평가는 수년 동안 모두 실험 및 임상 적으로 사용 된 광범위한 문헌들은 이러한 데이터의 분석은 2,3- 관한 설정이 존재한다. 마우스에 PV 루프 기술의 적응은 쥐 심장 생리 4-6의 이해에 중요한 진전이었다. 카테터 기반 PV 루프 기술 몇 압력 변환기 심실 체적을 추정 컨덕턴스의 용도. 심실 체적은 카테터에 의해 생성 된 전계의 변화를 조사함으로써 결정된다. 실린더와 우심실은 높이가 카테터 및 반경의 전극 사이의 거리에 의해 정의되는 방식이 모델은 혈액을 통해 전기장의 전도로부터 계산심실 7-9. 카테터에 의해 측정 된 전도도 신호는 두 가지 구성 요소가 있습니다. 먼저 혈액을 통해 전도이다; 이것은 심실의 부피 변화 심실 체적을 결정하는 데 사용되는 기본 신호를 구성한다. 두 번째 구성 요소를 통해 상기 심실의 벽을 따라 전도의 결과. 이것은 병렬 컨덕턴스이라고 절대 심실 체적을 결정하기 위해 제거되어야한다. 연구 실험실에서 압력 볼륨 데이터의 수집 및 계산하고 병렬 전도를 제거하는 데 사용되는 방법이 상업적으로 이용 가능한 시스템은 그 6,10,11 사이의 주요 차이가 있습니다. 컨덕턴스 카테터 병렬 컨덕턴스의 계산 고장 성 식염수의 주입을 필요로한다. 벽의 전도도가 일정하게 유지하면서 주사 일시적, 심실의 혈액의 전도율을 변화시킨다. 이 자료로부터,은을 판정 할 수있다혈액에서 유래와 어떤 전도 신호의 구성 요소는 심실 벽에서 온다. 이 방법은 병렬 전도도가 심장주기 동안 변하지 않는 것으로 가정합니다. 어드미턴스 방법은 전체 볼륨 신호 심실 벽의 기여를 평가하는 전계의 위상 변화에 의존한다. 이 방법은 혈액과 최종 부피를 결정하는 심근의 도통 소정 상수 다양한 의존하지만 심장주기 동안 병렬 컨덕턴스의 연속적인 측정을한다. 이들 시스템은 모두 좌심실 용적의 양호한 추정치를 제공하고 그들 사이의 차이는 생리 학적으로 중요 할 가능성이 없다. 심실 다른 가정의 원통 모델 다른 양상만큼 정확하지 이러한 카테터 기반 접근법 렌더링하지만,이 데이터는 심장 기능의로드와 무관 측정 평가를위한 필수적인 비트 - 바이 - 비트 단위로 제공된다. 여기에 설명 된 절차 내 실험에 사용되며 이영양증 심근증 12-18의 기본적인 병태 생리 학적 메카니즘을 검사하는 많은 연구에 대한 데이터를 제공했다. 아래에 설명 된 절차는 PV 루프 데이터를 얻기 위해 사용될 수있는 두 가지 중 하나이다. 원칙의 많은 중 접근 방식에 적용 할 수 있지만,이 프로토콜은 오픈 가슴 혀끝의 접근 방식에 초점을 맞출 것이다; 폐쇄 상자 프로토콜은 다른 19,20 상술되었다. 절차가 구체적으로 설명 될 것이지만, 중요한 지배적 원칙은 심장 또는 폐 중 최소한의 손상으로 심장을 노출한다. 프로토콜 전반 비 생존 절차 있고 심장의 양호한 노광을 갖는 카테터의 적절한 배치를위한 매우 중요한 것을 기억하는 것이 중요하다.

<table><tbody><tr><td>Dumont 5/45 (2)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-33</td><td></td></tr><tr><td>Vessel Dilating Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>18153-11</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Micro Dissecting Spring Scissor</td><td>Roboz Instruments</td><td>RS-5668</td><td></td></tr><tr><td>Octogon Forceps - 톱니/곡선</td>형 <td>Fine Science Tools</td><td>11041-08</td><td></td></tr><tr><td>Octogon Forceps - 톱니/직선</td><td>세밀 과학 도구</td><td>11040-08</td><td></td></tr><tr><td>해부 가위 - 헤비 블레이드</td><td>미세 과학 도구</td><td>14082-09</td><td></td></tr><tr><td>Transpore 수술 테이프</td><td>3M</td><td>1527-1</td><td></td></tr><tr><td>3-0 실크 봉합사</td><td>정밀 과학 도구</td><td>18020-30</td><td></td></tr><tr><td>TOPO 인공 호흡기</td><td>Kent Scientific</td><td>TOPO</td><td></td></tr><tr><td>Martin ME 102 전기 수술 유닛</td><td>하버드 장치</td><td>PY2 72-2484</td><td></td></tr><tr><td>주사기 펌프</td><td>Lucca Technologies</td><td>GenieTouch</td><td></td></tr><tr><td>실체 현미경 붐 스탠드</td><td>포함 Nikon</td><td>SMZ-800N</td><td></td></tr><tr><td>열전대 온도계</td><td>Cole Parmer</td><td>EW-91100-40</td><td></td></tr><tr><td>T/펌프 온수 재순환기</td><td>Kent Scientific</td><td>TP-700</td><td></td></tr><tr><td>AD아날로그 압력 볼륨 시스템</td><td>천음속</td><td>ADV500</td><td></td></tr><tr><td>데이터 수집 및 분석</td><td>DSI</td><td>Ponemah ACQ-16</td><td></td></tr></tbody></table>

마우스에 압력 볼륨 루프 측정

Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse

원인과 심장 질환의 진행을 이해하는 것은 생물 의학 지역 사회에 상당한 도전을 선물한다. 마우스의 유전 적 유연성은 분자 수준에서 심장 기능을 탐구하는 큰 잠재력을 제공합니다. 마우스의 작은 크기는 상세한 심장 표현형을 수행하기에 관해서 몇 가지 과제를 제시한다. 소형화 기술의 다른 발전은 마우스에서 가능한 심장 평가의 많은 방법을 만들었습니다. 이들 중, 압력, 볼륨 데이터의 동시 수집은 다른 양상을 통해 사용할 수없는 심장 기능의 상세한 그림을 제공합니다. 여기서 압력 볼륨 루프의 데이터 수집을위한 상세한 과정을 설명한다. 측정 오류의 잠재적 인 소스를 기본 원리에 대한 설명이 포함되어있다. 그들이 얻는 고품질의 혈역학 적 측정에 중요한 둘 다 같이 마취 관리와 수술 방법이 아주 자세하게 설명되어 있습니다에스. 혈역학 프로토콜 개발 및 데이터 분석의 중요한 양태의 원리도 해결된다.

관례 적으로, 볼륨도 1과 Y 축의 X 축 및 압력에 도시된다. 구형 유사해야 부피 대 플로팅 압력으로 인한 압력 볼륨 루프, 즉 압력 isovolumic 변경 (나타내는 수직 에지, 승모판 및 대동맥 밸브 모두)가 폐쇄 될 때. 승모판과 상부 수평 부분을 통해 충전하는 대동맥 밸브를 통해 비우는 심실을 나타냅니다 심실 바닥의 수평 나타냅니다. 90의 건강한 야생형 마우스 왼쪽 심실 압력에 - 12,000 mmHg로 / 초 (정상 혈역학 적 매개 변수의 범위에 대해 표 1 참조) - 110 mmHg로 8000의 최대 DP / DT 예상된다. 표에 제공된 정상 범위는 야생형 C57BL / 10, C57BL / 6 마​​우스로부터 얻어진 값에 기초; 그러나 계통 (21) 사이에 유의 한 차이가 있음을 주목하는 것이 중요하다. 프로 시저 오여기 u​​tlined ...

이 원고는 마우스에서 압력 볼륨 데이터의 수집에 대한 상세한 프로토콜을 설명합니다.

Understanding the causes and progression of heart disease presents a significant challenge to the biomedical community. The genetic flexibility of the ...

마우스에서 압력-부피 루프를 측정하는 전체적인 목적은 심장 기능에 대한 상세한 평가를 얻는 것입니다. 이 방법은 특정 유전자 조작이 이루어진 마우스의 생리학적 특성을 규명하는 데 유용하며, 이를 통해 심장 기능에서 특정 단백질이 하는 역할에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 다른 방법론으로는 얻을 수 없는 수축 기능에 대한 상세한 평가를 제공한다는 점입니다.마우스의 수술 준비가 완료되면, 정중선 오른쪽 약 5mm에서 왼쪽 약 5mm까지 흉골 절흔(sternal notch) 부위에 절개를 하며 시작합니다. 첫 번째 절개선의 오른쪽 가장자리를 따라 하악골 끝단까지 약 2mm 정도 남기고 전방으로 연장하여 두 번째 절개를 실시합니다. 그런 다음 두 번째 절개의 전방 끝단에서 정중선 오른쪽 약 5mm 지점까지 세 번째 절개를 실시합니다.결과로 생긴 피부 플랩을 오른쪽으로 젖혀 하부 조직을 노출시킵니다. 다음으로, 해부 현미경 하에서 정중선의 귀밑샘과 턱밑샘을 둔성 박리하여 기관 상부를 덮고 있는 하부 근육층을 노출시킵니다. 그런 다음 우측과 좌측의 흉설골근을 둔성으로 분리합니다.기관이 보이면, 식도가 포함되지 않도록 주의하며 3-0 실크 봉합사 10 cm 조각을 인후 조직 아래로 통과시킵니다. 20 gauge 바늘을 사용하여 첫 번째 기관 고리 앞, 후두 바로 옆의 틈새에 넓게 절개합니다. 그 후 즉시 동물에게서 마취 마스크를 제거하고, 기관 내 튜브를 기관 속으로 조심스럽게 삽입합니다.튜브를 고정한 후, 처음 피부 절개선의 왼쪽 가장자리를 검상돌기까지 연장하고, 정중선을 가로질러 정중선 오른쪽으로 약 1.5cm까지 연장합니다. 다음으로, 둔성 박리를 사용하여 피부 플랩을 외측으로 견인하여 하부 근육층을 노출시킵니다. 그리고 혈관 확장 포셉을 사용하여 흉골의 외측면 근처에 있는 우측 대흉근의 부착부를 분리합니다.근육을 소작하고 절개합니다. 그런 다음 흉골 부착부를 따라 대흉근을 절개합니다. 그리고 같은 쪽의 광배근을 박리합니다.절단된 끝부분을 두측으로 견인하여 갈비뼈를 노출시킵니다. 그 다음, 날카로운 포셉을 사용하여 늑간근 층을 조심스럽게 박리하여 흉강으로 진입합니다. 흉막강이 열리면 둔단 혈관 확장기를 조심스럽게 삽입하고 부드럽게 위쪽으로 힘을 가해 흉벽을 들어 올립니다.이제 폐엽이 절단되지 않도록 주의하며 늑간근을 따라 외측으로 절개하고, 흉골과 평행하게 주행하는 내유동맥을 피하기 위해 정중선에서 외측으로 3~4mm 거리를 유지하며 절개선을 내측으로 확장합니다. 그다음 식염수에 적신 작은 면봉을 절개 부위를 통해 정중선 방향으로 삽입하고, 가볍게 위쪽으로 견인하여 흉벽을 하부 구조물로부터 들어 올립니다. 소작기를 사용하여 절개선의 내측 가장자리부터 시작해 좌측 정중선에서 외측으로 약 1cm 지점까지 흉벽을 조심스럽게 절개합니다.조직을 충분히 소작한 후, 가위를 사용하여 흉골을 조심스럽게 절개합니다. 심장의 심첨부가 명확하게 보여야 합니다. 그 다음, 둔성 박리를 통해 심낭을 제거하고 후대정맥을 확인합니다.경정맥 카테터를 삽입하려면, 10% albumin이 담긴 시린지에 30-gauge 바늘 카테터를 연결하고, 바늘의 사면(bevel)이 위를 향하도록 하여 경정맥 위에 놓습니다. 경정맥을 시각화하기 위해, 한 손으로는 포셉으로 바늘을 잡고 다른 한 손으로는 조직 포셉으로 침샘을 견인합니다. 경정맥 주변 조직에 부드럽게 견인력을 가하여 혈관벽에 텐션을 줍니다.그런 다음, 낮은 진입 각도를 유지하며 바늘을 정맥에 조심스럽게 삽입하고, 바늘 끝을 혈관 안으로 3~4mm 정도 전진시킵니다. 카테터가 적절한 위치에 자리 잡으면, 수술용 접착제를 사용하여 바늘을 하악선에 고정한 뒤 알부민 용액 주입을 시작합니다. 압력-부피 카테터를 배치하려면, 먼저 평형 상태의 식염수가 들어 있는 주사기와 압력-부피 카테터를 마우스 옆으로 옮기고, 카테터 팁을 심장과 거의 동일한 높이에 맞춘 후 압력 수치를 0으로 맞춥니다.다음으로, 식염수에 적신 작은 면봉을 사용하여 심장을 움직여 심첨부를 시각화하고, 25-gauge 바늘을 사용하여 심첨부 중심에 최대한 가깝게 자상을 냅니다. 바늘을 제거한 후, 빠르게 하지만 부드럽게 카테터를 절개 부위를 통해 삽입합니다. 그러면 심실의 압력-부피 루프를 측정할 수 있습니다.카테터 삽입 후, 마취제 투여량을 줄여 마취제로 인해 나타날 수 있는 심박 억제 효과를 확인하십시오. 시술 중 과도한 출혈이 있었던 경우, 주입하는 albumin의 양을 단순히 늘리면 됩니다. 관례적으로, 부피는 X축에, 압력은 y축에 표시합니다.압력을 부피에 대해 도식화하여 얻은 압력-부피 루프는 수직 가장자리가 압력의 등용적 변화를 나타내는 직사각형 모양과 유사해야 합니다. 아래쪽 수평면은 승모판을 통한 심실 충만을 나타내며, 위쪽 수평면은 대동맥판을 통한 심실 배출을 나타냅니다. 건강한 야생형 마우스의 경우, 좌심실 압력은 90에서 110 mmHg로 예상되며, 압력의 최대 미분율(maximal rate of a maximum derivative of pressure)은 8000에서 12000 mmHg/s입니다.또한, 압력-부피 데이터 분석을 복잡하게 만드는 가장 흔한 측정 아티팩트 중 하나는 카테터 포획(catheter entrapment)이며, 이는 수축기 말기에 압력이 급증하는 현상으로 나타납니다. 이는 유두근이나 심실 내의 다른 동적 구조가 압력 트랜스듀서를 직접 압박함으로써 발생할 가능성이 높습니다. 이 절차를 수행하는 동안에는 마취 깊이가 충분한지 확인하기 위해 마우스의 상태를 지속적으로 모니터링하는 것이 중요합니다. 이 기술을 숙달하면, 카테터 삽입 후 사용되는 프로토콜에 따라 약 1시간 이내에 완료할 수 있습니다.본 절차를 완료한 후, 실험 화합물을 주입하여 심장 기능에 미치는 영향을 평가할 수 있습니다. 이 영상을 시청하고 나면, 마우스의 좌심실에 압력-부피 카테터를 외과적으로 삽입하고 심장 분석을 위한 고품질의 압력-부피 루프를 얻는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

코다 8 채널 높은 처리량 비침습 혈압 시스템은 동시에 8 쥐 또는 쥐에 혈압을 측정합니다. 이 꼬리 즉석 시스템은 꼬리 혈액 볼륨을 결정하여 혈압을 측정하는 볼륨 압력 녹음 (VPR)를 사용합니다.

볼륨 압력 녹음, 꼬리 즉석 방법을 사용하여 마우스의 측정 혈압

태아 및 신생아 생쥐의 측정 왼쪽 심실 압력 (LV)이 설명되어 있습니다. 압력은 초음파지도하에 LV로 유체 가득한 변환기에 연결된 바늘을 삽입하여 측정됩니다. 케어는 실험 프로토콜 동안 정상적인 심장 기능을 유지하기 위해 이동해야합니다.

늦은 배아 및 신생아 쥐의 측정 왼쪽 심실 압력

호흡 생리학의 평가는 전통적으로 동물의 억제 또는 진정을 요구 기술에 의존하고있다. 무제한 전신 혈량 측정법은, 그러나, 동물 모델에서 호흡 생리의 정확하고 비 침습적 정량 분석​​을 제공합니다. 또한, 기술은 종 연구를 허용 마우스의 호흡 평가를 반복 할 수 있습니다.

무제한 전신 혈량 측정법을 사용하여 마우스의 호흡 기능을 측정

여기에서는 마우스의 폐압-부피 곡선을 간단하고 안정적으로 측정할 수 있는 프로토콜을 제시하며, 두 가지 일반적인 폐 병리학인 폐 섬유증과 폐기종에서 표현형 실질 변화를 감지할 수 있을 만큼 충분히 민감하다는 것을 보여줍니다. 이 지표는 병리학의 발달에 따른 폐의 구조적 변화를 정량화할 수 있는 수단을 제공합니다.

마우스 폐의 압력 볼륨 곡선의 측정

이 기사에서는 다양한 심박수에서 압력/부피 분석을 통해 쥐의 좌심실 기능을 측정하는 방법에 대해 설명합니다.

Bowditch 효과 조사 : 압력 볼륨 관계를 측정하기 위해 마우스의 심장 도관

심장 압력-부피 루프 분석은 온전한 심장의 심장 기능을 측정하는 가장 포괄적인 방법입니다. 컨덕턴스 카테터를 사용하여 심압 볼륨 루프를 수행하고 분석하는 기술을 설명합니다.

마우스에서 컨덕턴스 카테터를 사용하여 심장 압력 볼륨 루프 분석

여기에 제시된 프로토콜은 폐쇄형 흉부 카테터 삽입을 사용하여 동일한 동물의 우심실과 좌심실에서 압력-부피(PV) 루프를 생성하여 마우스의 뇌실 심장 기능을 평가하는 프로토콜입니다. 초점은 수술 및 데이터 수집의 기술적 측면에 있습니다.

생쥐의 폐쇄 흉부 카테터 삽입에 의한 심장 기능 및 압력-부피 루프의 양심실 평가

여기에서 우리는 마우스에 있는 본질적인 심장 기능 및 β 부전 예비를 결정하기 위하여 정맥 내 주입된 isoproterenol의 증가 복용량에서 심장 압력 볼륨 루프 분석을 기술합니다. 우리는 압력 볼륨 루프 측정을 위해 수정 된 오픈 가슴 접근 방식을 사용하며, 여기에는 양극 기만 압력이있는 환기가 포함됩니다.

압력 볼륨 루프 분석에 의해 결정된 β 부전 자극에 대한 심장 반응

우리는 양의 회장에서 '창자 고리'를 catheterizing위한 새로운 수술 방법을 설명합니다. 일단 동물이 수술에서 회복하고 항생제와 진통제를 통과해야 여러 치료는 카테터를 통해 루프에서 직접 입금하실 수 있습니다.

Ruminants에 창자 루프 Catheterization

난소암의 Orthotopic 동물 모델은 더 나은 인간의 질병을 복제하기 때문에 암 진행 및 치료 종양 반응의 우리의 이해를 향상시킬 수 있습니다. 마우스 모델 루시페라제 - 표현 난소 종양 세포의 intrabursal 주사를 받게됩니다. 치료는 경구 gavage를 통해 관리합니다. 종양 성장에 의해...

생체내 이미징 및 난소암의 Orthotopic 마우스 모델에서 치료 트리 트먼트

학습하세요 마우스 심장 기능 평가를 위한 압력-볼륨 루프 측정법을 통해 심장 수축 기능을 상세히 분석하는 방법을 배우세요. 이 기술은 유전자 조작 마우스의 생리학적 특성을 연구하는 데 활용됩니다.

마우스에 압력 볼륨 루프 측정

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