Name: TAPE : 외과 응용 프로그램에 대한 식물의 유비쿼터스 화합물에서 영감을 생분해 성 지혈 접착제 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 40 s
Description: 배우세요 생분해성 지혈 접착제 TAPE를 제조하는 방법을 탐구하세요. 탄닌산과 폴리에틸렌글리콜을 이용해 수분 저항성이 뛰어난 외과용 접착제를 만드는 간단하고 확장 가능한 프로토콜입니다.

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본 연구는 한국연구재단: 중견과학자 지원금(2014002855)과 산업통상자원부: 세계 최고의 재료개발 프로그램의 지원을 받았다. 이 연구는 KAIST 나노센추리 연구소(KINC)의 자연영감기술센터(CNiT)의 지원도 받고 있습니다.

모든 동물 관리 및 실험은 KAIST (한국 과학 기술원)에서 제공하는 윤리적 프로토콜 IRB (임상 시험 심사위원회)에 따라 수행된다. 1. TAPE 형성 <ol><li> 트랜스 용액의 제조 마그네틱 스터에 4 mL의 크기의 유리 병을 놓고, 교반 막대 증류수 1 ㎖를 추가한다. 바이알에 탄닌산 1 g을 넣고, 이상에서 1 시간 동안 200 rpm에서 온화하게 교반하여 물에 녹인다. TA에 완전히 용해 될 때, 혼합물은 갈색 투명해진다. </li><li> 백색 슬러리를 만들기 위해 몇 초 동안 볼 텍싱하여 이들을 혼합하여 증류수 1 ㎖ 다음에 PEG 분말 1g (4 아암 10 kDa의, 리니어, 4.6 kDa의)을 첨가하여 PEG 용액을 제조 하였다. 10 분 동안 60 ° C의 배양기에서 슬러리를 유지한다. 흰색 하나는 완전히 명확해질 때까지. 참고 : 10 kDa의 분자량을 갖는 PEG의 융점이 약 55 인- 60 ℃, 및 4 kDa의 하나는 53 - 58 °의 C. 1g에 물까지의 PEG의 고농도 / ㎖의 투명한 용액으로 얻어 질 수 있도록 용융 된 PEG는 수혼 화성된다. 맑은 PEG 용액을 고온에서 형성되면, 용액을 계속 냉각 한 후, 실온에서 안정하다. </li><li> PEG의 329 μl를 추가 (4 아암 10 kDa의) 용액 4.6 kDa의 갖는 선형 PEG의 경우 1.1 단계에서 얻어진 TA 용액 (1.2 671 μL를 위해 PEG 용액 311 μL를 추가 단계에서 제조 한 마이크로 원심 분리기 튜브에서 TA 용액) 689 μL. 조심스럽게 균일를 혼합 좁은 주걱 두 점성과 꿀 같은 솔루션을 혼합. 주의 : 두 솔루션은 매우 점성, 그래서 과학자가 느리지 만 충분히 끌어와 마이크로 피펫으로 솔루션을 전송해야합니다. </li><li> 고정 된 앵글 로터를 구비 한 원심 분리기에서 3 분 동안 12,300 × g으로 1.3로 공정에서 제조 한 혼합물을 스핀. </li><li> 조심스럽게 렘마이크로 피펫을 사용하여 가능한 한 상등액만큼 비켜하고 침착 한 생성물을 수집 :이 완전히 형성 TAPE이다. . TAPE 형성 한 후, 냉장고에서 보관 - 몇 주까지 NOTE (4 8 °의 C) : 테이프 감마선 또는 외과 적 용도로 사용하기 전에, 전자 빔 처리에 의해 살균 될 수있다. </li></ol> 테이프의 접착 강도의 측정 (2) <ol><li> 피부 조직의 모든 지방을 제거한 후, 생검 펀치로 절단하여 6mm 직경의 돼지의 피부 조직의 두 개를 준비한다. 주 : 돼지 피부 조직이 건강한 돼지 측면 피부에서 얻어진 것으로, 한국 대전에 위치한 지역 고기 시장에서 구입했다. </li><li> 각 조직의 외 측면에 상업 시아 노 아크릴 레이트 접착제를 적용하고, 금속 막대에 조직을 연결합니다. 참고 : 금속로드가 보조 핸들이 그래서를 티슈 사용직접 기계에 의해 사로 잡혔다하지 않았습니다. 따라서, 인장 기의 구성을 다음과 같은 다른 물질로 대체 될 수있다. </li><li> 티슈의 한쪽 - TAPE 방울을 적용 (6 mg의 테이프의 드롭은 약 3 임). 이어서,도 2a에 도시 한 바와 같이 이들이 부착되도록 균일 그 내측에있는 두 개의 다른 조직 사이의 조직을 사용하여 테이프를 확산. </li><li> 그 후, 수동으로 균일하게 혼합하고, 각 조직 테이프 사이의 계면을 극대화 수회 부착 조직의 양쪽 분리. </li><li> UTM을로,로드의주의 그립 각면. 접착 강도는 테이프 부착 개의 조직을 분리하는 데 필요한 힘에 의해 결정된다. 첫째, 1 분 20 N의 힘을 적용합니다. 이어서, 기계로, 1mm / min의 속도로 반대 방향으로 각로드를 당긴다. 때까지 조직을 완전히 분리된다. 주 : 데이터는 힘 - 거리로 주어질 것이다 (FD) 곡선 움직임 검출각로드. </li><li> 즉, 시편 표면적에 의해 단계 250에서 달성 된 FD 곡선에 도시 된 최대 힘 (KN)을 분할하여 테이프의 접착 강도를 계산 3.14 × (0.003 m) 2. </li><li> 물의 존재 하에서 접착 강도를 모니터링하기 위해, 두 조직 사이의 분리 영역 상에 20 μL의 물을 추가하고, 즉시 첨부. 기계로 다시 분리 테스트를 수행합니다. </li></ol> 3. 체외 저하 테스트 <ol><li> 마이크로 원심 분리 튜브의 캡 (d = 8 mm)를 잘라내, 및 W의 C로 정의 캡을 단다. </li><li> TAPE 150 mg을 가진 캡을 입력하고 0 W 총 초기 무게로 설정을 다시 모두 함께 무게. 주의 : 모자 TAPE를 너무 많이 넣지 마십시오. 이 단계 3.4에서 배양 동안 교반 처리에 의해 생성 된 PBS 완충액의 흐름에 대한 물리적 장벽을 될 수있는 테이프의 높이가 상기 캡의 상단보다 낮아야한다. </li><li&gt; 세포 배양 용 플라스크에 테이프를 포함하는 캡을 넣어 (75cm 2) 및 PBS 완충액 50 mL로 (1X, pH 7.4의) 세포 배양 플라스크에 뚜껑 테이프가 완전히 같이, PBS 완충액에 침지되도록 추가 도 3a에 도시 한 (N = 5). </li><li> 부드럽게 교반 (50 RPM)와 생리 학적 조건과 유사한 37 ℃에서 오비탈 진탕 배양기 단계 3.3에서 제조 된 세포 배양 플라스크를 인큐베이션. 주의 : 50 rpm으로 교반 상태를 유지합니다. 높은 RPM은 TAPE의 붕괴가 발생할 수 있습니다. </li><li> 각 시점에서, 세포 배양 플라스크에서 테이프로 뚜껑을 한 후, 질소 가스를 불어 건조한다. 남은 테이프를 포함하는 캡을 단다. W t의 각 시점에서의 무게를 설정한다. 다시 신선한 PBS를 교체하고, 각 시점에서 W (T)를 측정 한 후이를 다시 흔들. </li><li> 상대적인 잔류 중량 (%)은 다음 식을 계산한다. 상대 남은 중량 (%) = (W의 t </suB&gt; - W의 C) / (W 0 - W C) × 100 % </li></ol> TAPE 4. 지혈 능력 주 : 모든 동물 실험은 보건 복지부 한국 정부가 제공하는 가이드 라인과 윤리 프로토콜에 따라 수행되어야한다. <ol><li> REF (24)에 기재된 바와 같이 생체 내 지혈 능력을 평가하기 위해, 마우스를 출혈 간 모델을 검토. </li><li> (그룹 당 n = 5) tiletamine-zolazepam (33.333 ㎎ / ㎏)과 자일 라진 (7.773 ㎎ / ㎏)의 복강 내 주사와 - 십오 마우스 (남성 35g, 정상 ICR 마우스 6 주, 30) 마취. 적절한 마취를 확인하려면, 동물의 발을 부드럽게 꼬집어 어떤 운동이 동물이 수술을하기에 충분히 마취 있음을 나타냅니다 등, 발을 인출하는 등의 움직임을 관찰한다. </li><li> 동물의 눈의 건조를 방지하려면 아래에 충분히 동안 눈에 수의사 연고를 적용하려면esthesia. 중간 선 복부 절개를 통해 간을 노출하고 출혈을 유도하기 위해 18 G 바늘로 간을 찌르. </li><li> 멸균 거즈로 흐르는 혈액을 제거하고 출혈 사이트에 즉시 TAPE 또는 피브린 접착제 (양성 대조군) 100 ㎕를 넣어. 참고 : 더 이상 봉합으로 인해 상처 조직에 대한 고도의 혈액에 강한 접착 특성에 TAPE를 적용한 후 필요하지 않습니다. 음성 대조군의 경우, 치료는 출혈의 사이트에서 발생하지 않는다. </li><li> 각각의 경우, 파손 부위로부터 혈액을 수집 간 아래 공지 질량 여과지 넣어. 새로운 일 4 회 매 30 초 (즉., 2 분)으로 용지를 교체합니다. </li><li> 매 30 초마다 수집 된 여과지에 흡수 된 혈액의 질량을 측정한다. 동물 실험 후, CO 2 질식의 안락사를 통해 쥐를 희생. </li></ol>

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우리는 식물 유래 폴리 페놀 화합물, TA의 방수 분자 상호 작용에 의해 영감을 지혈 접착제라는 TAPE의 완전히 새로운 클래스를 개발했다. TA 크게 인해 산화 방지제, 항균 항 돌연변이 및 항암 특성으로 주목을 받고 대표 가수 분해성 탄닌이다. 그것은 더 화학 합성 과정없이 다음, 원심 분리하여 두 수용액의 단지 한 단계 혼합 같이 테이프를 제조하는 과정은 매우 간단하고 확장 가능하며 환경 친화적이다. 두 성분의 혼합 프로토콜은 피브린 접착제와 같은 종래의 제품에 사용 된 조직 접착제를 형성하는 가장 전형적이고 간단한 방법이다. 그것은 바로 조직 (3)에 적용하기 전에, 피브리노겐 및 트롬빈을 혼합하여 형성된다. 그러나, 다단계 화학적 합성하는 경우에 O 접착제 성분을 제조하기 위해 필요한(F) 시아 노 아크릴 레이트 접착제 및 합성 폴리머 계 접착제. 또한, 독성이 강한 화학 물질은 종종 화학적으로 ...

과거 10 년의 노력으로 인해 수술 적 치료시 사용과 낮은 조직 침입에 자신의 편의에 생분해 성 / 흡수성 접착제와 상처를 닫 현재 수술 봉합 및 스테이플을 교체되었습니다. 시판 조직 접착제는 네 가지 유형으로 분류된다 : (1) 시아 노 아크릴 레이트 유도체 (1) (2) 2,3- 트롬빈에 의해 중합체를 피브린, 피브리노겐으로부터 효소 적 전환에 의해 형성된 피브린 접착제를, (3) 등의 화학적 또는 물리적으로 같은 단백질 계 재료 가교 알부민 및 / 또는 젤라틴 4.5, (4) 합성 폴리머 계 것 6. 그들은 많은 임상 용도에 사용되어 왔지만, 모두 접착제는 자신 고유의 단점들이 널리 사용 장애물이 될 수있는 단점이있다. 시아 노 아크릴 레이트 계 접착제는 조직에 대한 높은 접착 강도를 보여 주지만, 이들 독성 부산물 등의 분해 동안 형성 및 시아 노 포름 종종 부호 원인염증 반응 (7)의 ificant도. 젤라틴 기반의 접착제 8 소, 닭, 돼지, 물고기를 포함하여 피브린 접착제과 동물에 대한 인간의 혈장 : 피브린 접착제 및 알부민 또는 젤라틴 기반 물질은 동물의 소스에서 바이러스와 같은 감염 구성 요소의 전송에 대한 안전 문제가 있습니다. 약간의 합성수지 계 접착제 연방 의약품 안전청 (FDA)에 의해 승인되었지만, 합성 중합체로 만들어진 대부분의 접착제는 제조 공정 단계를 최소화하고 생체 적합성 (9)을 달성하는데 어려움을 계속한다. 가장 중요한 것은, 모든 접착제는 물티슈 10 가난한 기계 및 접착 강도 고통. 최근 해양 홍합 11-13, 도마뱀 붙이 (14), 홍합 15 도마뱀, 그리고 endoparasitic 웜 (16)에 의해 영감을 생체 모방 조직 접착제는 그들의 조정 가능한 기계적으로 현재 의료 접착제에 관한 유망한 대안을 신흥되었습니다생체 적합성과 접착 특성. 그들은 상용 제품 (17)되기 전에 그러나, 오늘날까지 여전히 해결해야 할 문제가 있습니다. 여기서는, 식물 유래 접착 분자, 탄닌산 (TA), 및 생체 불활성 중합체 폴리 (에틸렌 글리콜) (PEG)의 분자간 수소 결합에 의해 제조 TAPE라는 의료용 접착제 완전히 새로운 유형을보고 그 이름에서 알 수 있듯이. TA는 보편적으로 식물의 2 차 대사 중에 발견 대표 가수 분해성 탄닌이다. 또한, 항 돌연변이 및 항암 성질 인하여 항산화에 많은 주목을 받고 있으며, 폴리 (N의 이소 프로필 아크릴 아미드) (PNIPAM) 및 폴리 (N만큼 중합체와 초분자 상호 작용에 참여하는 것으로 나타났다 - 비닐 피 롤리 돈) (PVPON), 계층별로 레이어 (LBL) 영화 18 ~ 20 약물 방출 마이크로 캡슐 21 ~ 23을 형성한다. 본 연구에서는 TA 효율적인 역할을 할 수 있음을 발견방수 접착제 관능기 테이프, 의료 접착제를 형성한다. TA 간단한 혼합하여, 비 오염 중합체 PEG를 갖는 초분자 접착제하게 2.5 배 상업적 피브린 접착제에 비하여 증가 된 접착 강도를,이 밀착성에도 물의 존재 하에서, 착탈의 최대 20주기 동안 유지시켰다 . 그 지혈 능력은 생체 내에서 간 출혈 모델을 테스트하고 몇 초 내에 출혈을 멈추게하는 좋은 지혈 능력을 보여 주었다. TAPE 바이오 영감 접근 방식과 현재 문제의 단점을 해결에 새로운 통찰력을 공개 할 수있는 최초의 식물 유래 접착제로서 관련 분야에서의 중요한 의미를 갖습니다. 우리는 또한 간단한 제조 방법에있어서, 확장 성, 가변 생분해 속도 등의 뮤코 접착제, 약물 방출 패치, 상처 치료 드레싱 등과 같은 의약 다양한 용도 TAPE의 광범위한 사용을 기대할뿐만 아니라 높은 습기에 강한 ADHES이온 특성.

<table><tbody><tr><td>탄닌산</td><td>Sigma-aldrich</td><td>403040</td><td></td></tr><tr><td>Poly(ethylene oxide), 4-arm, hydroxy terminated</td><td>Aldrich</td><td>565709</td><td>Averge Mn ~ 10,000</td></tr><tr><td>Poly(ethylene glycol)</td><td>Aldrich</td><td>373001</td><td>Average Mn 4,600</td></tr><tr><td>Biopsy punch</td><td>Miltex</td><td>33-36</td><td>Diameter = 6 mm</td></tr><tr><td>Aron Alpha</td><td>Toagosei Co., Ltd.</td><td></td><td>인스턴트 접착제</td></tr><tr><td>만능 재료 시험기 (UTM)</td><td>Instron</td><td>5583</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 원심 분리기 튜브</td><td>SPL 생명 과학</td><td>60015</td><td>1.5 ml</td></tr><tr><td>페트리 접시</td><td>SPL 생명 과학</td><td>10090</td><td>90 x 15 mm</td></tr><tr><td>인산 나트륨 일염기</td><td>성 시그마</td><td>S5011</td><td>1x PBS 성분</td></tr><tr><td>인산 나트륨 이염기성</td><td>시그마</td><td>S5136</td><td>1x PBS 성분</td></tr><tr><td>염화나트륨</td><td>Duchefa biochemie</td><td>S0520.5000</td><td>1x PBS 성분</td></tr><tr><td>인큐베이팅 쉐이커</td><td>Lab companion</td><td>SIF6000R</td><td></td></tr><tr><td>ICR 마우스</td><td>Orient bio</td><td>Normal ICR 마우스</td><td>6 주, 30 - 35 g, 수컷</td></tr><tr><td>Tiletamine-zolazepam (Zoletil 50)</td><td>Virbac</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zylazine (Rompun)Bayer</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PrecisionGlideTM 바늘 (18 G)</td><td>BD</td><td>302032</td><td>18 G</td></tr><tr><td>여과지</td><td>Whatman</td><td>1001 125</td><td>직경 = 125 mm</td></tr><tr><td>파라 필름</td><td>Bemis Flexible Pakaging</td><td>PM996</td><td></td></tr></tbody></table>

tape : 외과 응용 프로그램에 대한 식물의 유비쿼터스 화합물에서 영감을 생분해 성 지혈 접착제

TAPE: A Biodegradable Hemostatic Glue Inspired by a Ubiquitous Compound in Plants for Surgical Application

이 동영상은 상업 조직 접착제보다 효과적인 지혈 능력과 큰 방수 접착 강도가 생분해 성 수술 용 접착제를 제조하기위한 간단한 프로토콜을 설명합니다. 의료 접착제로 인해 최소한의 침입과 사용에서의 편리 성을 봉합하고 스테이플에 대한 잠재적 인 대안 도구로 큰 관심을 받고있다. 생체 기반 물질의 경우와 같은 피브린 접착제 및 시아 노 아크릴 레이트 계 재료 등의 시판 사람들은 대부분들은 유기 분자 나 복잡한 단백질 정제 방법의 화학 합성의 일련의 요구를 포함한 조직 접착제를 개발하기위한 몇 가지 프로토콜이 있지만 (즉, 피브린 접착제). 또한, 외과 용 접착제의 개발이 생분해 성을 유지하기 때문에 인체의 습윤 환경에서 양호한 성능을 달성하는데 어려움이 여전히 도전하면서 높은 접착 성을 나타내는. 우리는을 준비하는 새로운 방법을 설명식물 유래 습식 강한 접착 분자의 물리적 혼합 한 후, 형성 물 혼화 초분자 집합체의 중량을 기반으로 분리하여, TAPE라고도 의료 접착제, T는 CID (TA), 및 잘 알려진 annic 생체 고분자, 폴리 (에틸렌) 글리콜 (PEG). 우리의 접근 방법으로, TAPE는 물의 존재 상용 피브린 접착제보다 2.5 배 높은 접착 강도를 나타낸다. 또한, TAPE는 생리 학적 조건에서 생분해 성 및 조직의 출혈에 대하여 강력한 지혈 접착제로서 사용될 수있다. 우리는 뮤코 접착 중합체, 약물 저장소 등과 같은 의료 설정 및 약물 전달 다양한 애플리케이션에서 테이프의 광범위한 사용을 예상한다.

1 부피비 (도 1A) TAPE는 TA (1 ㎍ / ml의 증류수)과 2 PEG (1 ㎍ / ml의 증류수)을 포함하는 두 수용액의 혼합물을 원심 분리 한 후 정착 초분자 집합체이다. 혼합 비율이 높은 접착 강도를 달성하는 데 중요한 요소이다 테이프 2로 형성하는 경우 : 1의 혼합비, TA, 25 단위의 수산기 (-OH)의 20 개는 최대 높은 분자간 수소 결합 형성의 결과로, PEG의 각 에테르 기 (-O-)와 상호 작용 접착 특성. -OH의 나머지 5 단위 TA (도 1B)에 인접하는 카르보닐기 (C = O)와 분자 내 수소 결합에 의해 소비 될 것 같다. 컴포넌트 중 하나는이 초과되었을 때 : 1 부피비, 접착 강도가 현저하게 감소 하였다 (25). 수소 결합은 조직에 중요한 분자 수준의 상호 작용 될 것입니다. 제어인터페이스와 결합을위한 TA 및 PEG 사이의 ...

우리는 효과적인 지혈 기능을 갖는 의료용 생분해 성 접착제를 제조하는 가장 간단한 프로토콜을 설명한다. 테이프 탄닌산 혼합 한 물 - 비혼 화성 초분자 집합체 인 상업용 피브린 접착제에 비해 2.5 배 더 내수성 접착 성을 수득하는 유비쿼터스 화합물은 식물에서 발견 한 폴리 (에틸렌) 글리콜.

TAPE : 외과 응용 프로그램에 대한 식물의 유비쿼터스 화합물에서 영감을 생분해 성 지혈 접착제

This video describes the simplest protocol for preparing biodegradable surgical glue that has an effective hemostatic ability and greater water-resistant ...

이 프로토콜의 전반적인 목표는 식물에 널리 존재하는 화합물에서 영감을 받아 수술용으로 적용 가능한 생분해성 지혈 접착제를 개발하는 것입니다. 이 방법은 생체 모방 기술의 내수성 접착 메커니즘을 이해하는 데 도움이 되며, 이는 의생명 분야의 조직 접착제 및 밀봉제 등에 적용될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 TAPE 제작 과정이 매우 간단하고 확장 가능하며 환경 친화적이라는 점입니다.먼저, 마그네틱 교반기 위에서 4 mL 유리 바이알에 탄닌산 용액을 준비합니다. 증류수 1 mL와 탄닌산 1 g을 넣고 200 rpm으로 교반합니다. 1시간 후, 탄닌산이 완전히 용해되어 갈색 용액이 됩니다.다음으로, 1 g의 PEG 분말에 1 mL의 증류수를 가하고 볼텍스하여 흰색 슬러리 상태로 만듭니다. 이 슬러리를 60 °C에서 10분 동안 유지합니다. 그러면 용액이 완전히 투명해져야 합니다.그 다음, 상온으로 되돌립니다. 이어서 마이크로원심분리 튜브에 PEG 용액 329 µL와 탄닌산(Tannic Acid) 용액 671 µL를 혼합합니다. 두 용액 모두 점도가 매우 높으므로 분주 시 천천히 취하십시오.좁은 스패튤라를 사용하여 용액들을 꿀과 같은 혼합물이 되도록 부드럽게 섞어줍니다. 고정각 로터(fixed angle rotor)를 사용하여 12,300 g에서 3분 동안 혼합물을 원심분리합니다. 그런 다음, 완전히 형성된 TAPE를 남기고 가능한 한 많은 상층액을 조심스럽게 피펫으로 제거합니다.TAPE를 4~8°C에서 수 주 동안 보관하십시오. TAPE의 접착 강도를 측정하려면 돼지 피부 생검 펀치로 테스트 조직을 준비하십시오. 모든 지방을 제거한 후, 지름 6mm의 테스트 조직 두 개를 준비하십시오.각 조직의 바깥쪽에 상용 시아노아크릴레이트 접착제를 바르고, 시험기로 잡을 막대나 유사한 물체를 부착합니다. 다음으로, 조직의 한쪽에 TAPE를 한 방울 떨어뜨리고 두 조직의 내면 사이에 균일하게 펴 발라 부착시킵니다. 그 후, 조직을 여러 번 붙였다 떼어내어 접합면을 완전히 덮는 균질한 혼합물을 만듭니다.다음으로, 시험 장치에 막대를 부착합니다. 20 Newtons의 힘을 1분 동안 가하는 것부터 시작하십시오. 그 다음, 조직이 완전히 분리될 때까지 분당 1 millimeter의 속도로 막대를 벌려 당깁니다.데이터는 힘-거리 곡선으로 제공됩니다. 물이 있는 상태에서 접착 강도를 테스트하려면, 두 조직 사이의 분리된 영역에 20 µL의 물을 추가하고 즉시 TAPE로 젖은 표면을 접착하십시오. 다른 변경 사항 없이 이전과 동일하게 테스트를 반복하십시오.먼저, 마이크로원심분리 튜브의 캡을 지름 8mm 크기로 잘라 무게를 잽니다. 다음으로, 캡에 TAPE 150mg을 채우고 전체 무게를 측정합니다. 이때 차단벽 역할을 해야 하므로 캡의 가장자리 위로 넘치게 채우지 마십시오.75 square centimeter 세포 배양 플라스크에 PBS 버퍼 50 milliliters를 넣습니다. 로딩 캡을 플라스크에 넣고 캡이 잠기게 합니다. 50 rpm 이하로 설정된 궤도 셰이커 위에서 37 degrees Celsius로 플라스크를 배양합니다.원하는 시점에 캡을 분리하고 질소 가스로 건조합니다. 그다음 캡의 무게를 측정합니다. 이어서 플라스크의 PBS를 교체하고 다음 측정 시점까지 부드럽게 흔들어주며 배양을 계속합니다.측정값을 바탕으로 상대적 잔존 중량을 계산하십시오. 발가락 꼬집기 테스트를 통해 마취 상태를 확인한 6주령 수컷 생쥐를 준비하십시오. 수술을 시작하기 전 반드시 눈에 동물용 연고를 도포하십시오.이제 복부 정중선 절개를 통해 간을 노출시키고, 간 아래에 질량을 알고 있는 여과지를 배치하여 간을 고정합니다. 다음으로, 18-gauge 바늘로 간을 찔러 출혈을 유도합니다. 멸균 거즈로 혈액을 흡수하는 동안, 절개 부위에 TAPE 100 µL를 즉시 도포합니다.양성 대조군에는 cyanoacrylate 또는 유사한 접착제를 사용하고, 음성 대조군에는 아무런 조치를 취하지 않습니다. 추가적인 봉합은 필요하지 않습니다. 접착제를 도포한 후, 손상 부위에서 흘러나오는 혈액을 거름종이에 수집합니다.2분 동안 30초마다 거름종이를 교체하십시오. 4장의 거름종이에 흡수된 혈액의 질량을 측정하십시오. 동물은 안락사시켜야 합니다.TA와 PEG의 여러 비율을 테스트하였으며, TAPE를 제조하기 위한 최적의 조합은 2:1의 부피 비율이었습니다. 이러한 TAPE를 직경 6mm의 돼지 피부 두 장 사이에 도포한 후, 설명된 바와 같이 인장 시험기로 테스트하였습니다. 두 장의 돼지 피부를 분리하는 데 필요한 힘은 초기에 200 kPa로 측정되었으며, 반복적인 사이클을 통해 250 kPa까지 증가하였습니다.부착 및 탈착 사이클마다 피부 샘플을 적신 결과, 결합 인장 강도는 초기에 90 kilopascals로 떨어졌으며 20회 사이클 후에는 50 kilopascals로 감소했습니다. TAPE의 내구성은 생리적 광조건 하에서 흔들어주며 PBS에 희석된 소량의 부피로 테스트되었습니다. 2:1 비율의 포뮬레이션을 사용했을 때 21일 동안 질량이 유지되었습니다.이러한 조건 하에서 TAPE의 1:1 비율 제형은 13일 동안만 유지되었습니다. 다음으로, 체내(in vivo) 지혈 테스트를 수행하였습니다. TAPE로 밀봉한 간을 상용 피브린 글루와 비교하였습니다.TAPE로 밀봉한 간은 피브린 글루(fibrin glue)로 밀봉한 간보다 출혈이 현저히 적었습니다. 숙련되면, 적절하게 수행했을 때 TAPE 조제는 5분 이내에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도할 때, Tannic Acid와 PEG 사이의 최적화된 비율을 유지하는 것이 중요하며, 이는 TAPE의 접착력에 상당한 영향을 미칠 수 있습니다.이 기술의 개발 이후, 생체 인식 분야의 연구자들은 내수성 접착 재료 개발의 현재 문제들을 해결하기 위해 자연에서 영감을 얻은 방법을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다. 이 방법은 지혈 재료에 대한 통찰력을 제공할 뿐만 아니라, 상처 치유를 위한 조직 밀봉제 및 약물 전달을 위한 이식형 패치와 같은 다른 시스템에도 적용될 수 있습니다.

tape-biodegradable-hemostatic-glue-inspired-ubiquitous-compound

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

우리 그룹은 심장 혈관 시스템의 생리 타악기의 스트레스가 implantable 작은 직경 혈관 이식을 다시 생성하기 위해 일일 생물 반응기 문화 시스템을 개발했습니다.

타악기 생물 반응기를 사용하여 생물 공학 기반 혈관의 이식

소설의 제조, FDA 승인 재료의 유연한 박막 수술 접착제, 키토산, 녹색을 indocyanine이 설명되어 있습니다. 저전력 적외선 레이저로 간단한 인증 과정을 통해 collagenous 조직이 접착제의 결합이 입증되어 있습니다.

키토산 기반, 레이저 활성화 박막 외과 접착제, &#39;SurgiLux&#39;: 준비 및 데모

봉합은 일반적으로 수술 절차 동안 조직을 복구 할 필요합니다. 그들은 침략하고 조직에 손상을 줄 수 있으므로 그러나, 그 응용 프로그램은 문제가 될 수 있습니다. 소설 조직 접착제의 제조 및 응용 방법이 여기에보고됩니다. 이 접착제 필름은 레이저 활성화되고 봉합의 사용을 필요로하지 않습니다.

제조 및 레이저 조직 복구에 장미 벵골 - 키토산 영화의 응용

이 프로토콜은 하이드로겔 시스템과 피브린 기반 접착제를 사용하여 심근 경색의 줄기 세포 치료를 위한 불량한 세포 생착의 한계를 완화하는 것을 목표로 합니다. 이 접근법을 사용하면 경색 후 세포와 조직의 접촉을 유지할 수 있어 손상 부위에서 유익한 제제의 치료 잠재력을 높일 수 있습니다.

하이드로 겔은 구축 및 쥐 심근 경색 모델에서 치료를 제공하기 위해 접착제 접근을 섬유소 기반.

세포 접착성은 생체 재료 연구 및 조직 공학의 많은 접근 방식에서 핵심입니다. 펩타이드를 함유한 중요한 고분자 PTFE의 표면 개질을 위해 습식 화학을 사용하여 단계별 기술을 제시합니다.

향상된 세포 접착 폴리 테트라 플루오로 에틸렌에 젖은 화학 및 펩티드 고정화

우리는 심근 세포, 내피 세포, 평활근 세포 및 패치 - 매개 사이토 카인 배달 세포 주입을 조합함으로써 이식 된 세포의 생착을 향상 배송 방법으로 인간 유도 만능 줄기 세포를 구별하기위한 세 가지 신규하고보다 효율적인 프로토콜을 제안한다.

다 능성 줄기 세포는 심근 수리를위한 심장 세포를 유도

여기에서는 N- 부틸 시아 노 아크릴 레이트와 메타 크릴 옥시 설폴란 (NBCA + MS)으로 구성된 원래의 경화 및 색전술 시아 노 아크릴 레이트 기반 접착제를 사용하여 심각한 병리학 적 역류의 영향을받는 대 복재 정맥 (GSV) 및 소 복재 정맥 (SSV)을 치료하는 프로토콜을 제시합니다.

N- 부틸 시아 노 아크릴 레이트와 메타 크릴 옥시 설폴란을 기반으로 한 공중 접착제를 사용한 크고 작은 복재 정맥의 폐색

피브린 하이드로겔과 함께 기계적으로 분리된 기질 혈관 분획(SVF)은 조직 공학 및/또는 상처 치유 목적을 포함한 다양한 적응증에 대해 생존 가능한 지방 유래 기질 세포를 위한 쉽고 효율적인 운반체를 제공합니다. 여기에서는 중개 연구 및 임상 응용을 위한 기계적 SVF(mSVF)-피브린 하이드로겔 구조체의 준비를 제시합니다.

기계적으로 분리된 Stromal Vascular Fraction과 Fibrin Hydrogel의 조합: 처리 프로토콜

본 연구는 쥐 동맥에서 효과적인 지혈 방법을 개발하는 것을 목표로 합니다.

마우스 동맥 내 지혈을 위한 간단하고 효과적인 절차

이 프로토콜은 콜라겐 스펀지와 점액 접착 붕대를 부착하여 구개 기증 부위를 보호하는 포괄적인 방법을 상세히 설명합니다. 이후 상처 치유를 촉진하기 위해 현탁 봉합사로 안정화합니다.

구강 점액 접착 붕대를 이용해 구개 연부 조직 기증 부위를 보호하는 간소화된 프로토콜

배우세요 생분해성 지혈 접착제 TAPE를 제조하는 방법을 탐구하세요. 탄닌산과 폴리에틸렌글리콜을 이용해 수분 저항성이 뛰어난 외과용 접착제를 만드는 간단하고 확장 가능한 프로토콜입니다.

TAPE : 외과 응용 프로그램에 대한 식물의 유비쿼터스 화합물에서 영감을 생분해 성 지혈 접착제

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