2016년 7월 8일
이 프로토콜의 목표는 외부 에너지 없이 정적 자기장을 적용하여 식물의 초기 성장 속도의 가속을 보여주는 것입니다.
이 절차의 전반적인 목표는 정적 자기장을 사용하여 식물의 성장 속도를 촉진하는 것입니다. 이 방법은 식품 생산 기술을 다루는 농업 및 영양 의학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 에너지나 비료를 사용하지 않는다는 것입니다.
우선, 배양은 발사미나 또는 정원 발삼 씨앗을 직경 100mm의 페트리 접시에 담긴 셀룰로오스 타월에 올려 봉선화합니다. 그런 다음 수건과 씨앗을 삼중 증류수에 담그십시오. 실내 실험실 온도가 섭씨 18도에서 25도, 습도 범위가 65도에서 75%인지 측정하고 확인합니다.씨앗과 자석 사이에 2-4mm의 거리를 두고 정원 발삼 접시 아래에 1, 750 플러스 또는 마이너스 350 가우스의 자석 3개를 놓습니다.
다음으로, 씨앗이 담긴 두 번째 접시 아래에 세 개의 자석을 놓은 후, 북쪽이 위쪽을 향하도록 위쪽을 향하게 하여 아래쪽 자석을 위해 두 개의 자석을 쌓습니다. 그런 다음 두 개의 자석을 정원 발삼 배양 접시 바닥에 함께 놓습니다. 식물 성장의 타임랩스 이미지를 생성하려면 텍스트 프로토콜에 따라 식물을 촬영하도록 디지털 카메라를 설정한 후 캐나다 쿼터, 미국 페니, 센티미터 눈금자와 같은 크기 마커를 시야 측면에 배치합니다.
그런 다음 7-10일 동안 700-900장의 사진을 수집합니다. 영화 제작 소프트웨어를 사용하여 이미지로 타임랩스 영화를 만든 후 텍스트 프로토콜에 따라 영화를 실행하여 확인합니다. 이 비디오의 앞부분에서 설명한 것처럼 셀룰로오스 타월에 씨앗을 도금한 후 100mm 플레이트 바닥에 북극이 위를 향하도록 두 개의 자석을 놓고 48시간 동안 배양합니다.
식물을 염색하려면 전체 impatiens SPP 이중 꽃 식물을 4 % 파라 포름 알데히드와 0, 1 몰 빠른 공급 버퍼에 놓고 15 분 동안 식물을 고정합니다. 식물 샘플을 차단 버퍼로 옮기고 2시간 동안 배양합니다. 그런 다음 봉선화 샘플을 PDS에 15분 동안 담가 세척합니다.
세척 후 항알파-튜불린 1차 항체를 추가하고 섭씨 4도에서 하룻밤 동안 배양합니다. 다음 날, 10분 동안 검체를 PBS로 옮깁니다. 그런 다음 식물을 FITC가 결합된 항 마우스 IgG에 넣고 섭씨 25도의 어둠 속에서 2시간 동안 배양합니다.
배양 후 24웰 플레이트의 웰에 PBS에 샘플을 담그고 전체 샘플에 커버 슬립을 놓습니다. 그런 다음 형광 현미경을 사용하여 난류 방향을 관찰합니다. 이 그림은 어두운 성장 조건에서 정원 발삼 식물이 정적 자기장에 노출되었을 때 성장 속도가 미미하게 증가했음을 보여줍니다.
그러나 자기장은 식물이 빛 아래에서 자랄 때 증가된 성장 속도와 관련이 있었습니다. 셋째 날에는 자석에 노출된 식물과 대조군 사이의 높이 차이가 통계적으로 유의미했습니다. 그리고 그 차이는 7일째까지 계속되었다.
이러한 형광 이미지는 대조군 식물과 비교하여 자석이 있는 곳에서 자라는 식물에서 분산되거나 얇은 구조로 발달한 난류를 보여줍니다. 이 기술을 숙달하면 제대로 수행하면 72시간 안에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 자석의 강도를 제어하는 것을 기억하는 것이 중요합니다.
이 절차에 따라, 다른 모델에 적용, 유기체는 분야에서 성장 증진의 유전적 기초와 같은 추가 질문에 답하기 위해 수행될 수 있습니다. 개발 후 이 기술은 영양 의학 분야의 연구자들이 영양 풍부 및 식물 성장의 핵심 조절 요인을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 자석을 사용하여 식물의 초기 성장을 향상시키는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.
자석과 직접 접촉하여 작업하는 것은 매우 위험할 수 있으며 습도와 같은 조건은 철의 부패를 유발할 수 있으므로 이 절차를 수행하는 동안 항상 고려해야 한다는 것을 잊지 마십시오.
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본 프로토콜은 외부 에너지 사용 없이 정자기장이 식물의 초기 성장 속도를 어떻게 가속화할 수 있는지를 보여줍니다. 이는 농업 관행에 상당한 영향을 미칠 수 있는 방법을 강조합니다.
정자기장 적용은 지속 가능한 농업 및 영양 의학 R&D와 관련된 초기 식물 성장을 조절하는 비화학적 접근 방식을 제공합니다. 이 방법은 비료나 외부 에너지 입력 없이 성장 동역학을 제어하여 조절함으로써 식물 생리학의 표적 검증을 지원합니다. 이는 작물 개발 파이프라인에서 환경 자극을 평가하기 위한 기전적 리스크 감소 도구를 제공합니다.
이 방법은 성장 속도가 경로 또는 표적 조절의 표현형 판독값으로 활용되는 초기 발굴 워크플로에 적합합니다.