급성 심근 경색의 돼지 모델의 주요 결과 평가

이 방법론의 전반적인 목표는 급성 심근 경색의 돼지 모델에서 새로운 치료법을 평가하기 위한 신뢰할 수 있고 재현 가능한 결과 측정을 획득하는 것입니다. 이 방법은 융합 손상의 스키마에 대한 치료 개입의 효과 및 급성 심근 경색의 모델링과 같은 심혈관 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이러한 기술의 주요 장점은 허혈, 재관류 손상 및 심장 리모델링에 대한 정확하고 임상적으로 관련성 있는 평가를 할 수 있다는 것입니다.

이 방법을 통해 심근 허혈 재관류 손상에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 또한 심장 기능 평가와 관련된 다른 연구에도 적용할 수 있습니다. 현재 프로토콜은 급성 심근 경색 이전 또는 후에 1차 결과 측정값을 얻을 수 있습니다.

경색은 왼쪽 전방 하행 동맥의 75분 초광도 풍선 폐색을 사용하여 이루어지며, 이는 인용된 비디오에 자세히 설명되어 있습니다. 이 비디오는 3차원 경식도 심장초음파를 수행하는 방법과 기준선, 단기 및 장기 후속 측정을 위한 부피 루프 측정의 압력을 보여줍니다. 이 동영상은 또한 경색의 크기와 종결 후 착색 위험이 있는 영역을 측정하는 방법을 보여줍니다.

텍스트 프로토콜에 설명된 대로 마취로 돼지를 준비하고 EKG 리드를 사용하여 동물을 심장초음파기계에 연결합니다. 이제 에코 프로브를 준비합니다. 팁에 초음파 젤을 바르고 유연하게 잠금을 해제하십시오.

휴대용 조작편을 사용하여 이미징 각도를 90도로 조정합니다. 돼지를 오른쪽 옆으로 눕힌 상태에서 입을 벌리고 프로브를 조심스럽게 식도에 삽입합니다. 너무 많은 압력을 가하지 않도록 주의하고, Zenker의 게실과 유사한 정상적인 해부학적 인두 주머니를 피하십시오.

그런 다음 프로브를 50-60cm 삽입하고 끝에서 측정한 다음 천천히 회전하고 머리를 왼쪽 전후 위치로 구부려 심장을 시각화합니다. 심장의 모든 벽이 명확하게 보이는지 확인하십시오. 필요한 경우 에코 프로브 팁을 잠궈 이미지 획득을 안정화합니다.

디스플레이에서 3D Full Volume 옵션을 전환하여 좌심실의 수직 이미지를 생성합니다. 그런 다음 FV Opt Volume을 선택하여 획득되는 섹터 폭을 최대화합니다. 이제 환기를 일시 중지하고 Acquire를 눌러 전체 볼륨 측정값을 얻습니다.

완전한 측정을 얻은 후 기계 환기 장치를 켜십시오. 에코 획득 후 프로브의 잠금을 해제하고 동물에서 천천히 제거합니다. 그런 다음 수술에서 회복될 때까지 돼지를 모니터링합니다.

준비 과정에서 카테터의 감지 팁을 0.9% 식염수에 최소 20분 동안 담가둡니다. 돼지의 수술을 준비한 후 킬로그램당 100 국제 단위의 헤파린을 주입하고 경동맥에 8F 도입부 덮개를 놓고 경정맥 헛간에 9F 덮개를 놓습니다. 다음으로, 9F 칼집이라고 생각한 Swan Ganz 카테터를 삽입하고 카테터 끝에 풍선을 팽창시킨 다음 작은 폐동맥에 쐐기를 박습니다.

폐의 말초에 적절하게 배치되면 풍선의 공기를 빼고 Swan Ganz 카테터를 외부 심출력 장치에 연결합니다. 연결 시 view 외부 심출력 장치의 심출력 메뉴. 동물의 체중을 시스템에 입력하고 BMI가 22.5가 되도록 길이를 계산합니다.

20ml 주사기에 실내 온도 0.9% 식염수를 넣고 가장 근접한 debouchment로 lumin에 연결된 주입 포트에 부착하여 진행합니다. 인공호흡기를 끄고 심장 박동이 다섯 번 떨어질 때까지 기다립니다. 먼저 Manual을 누른 다음 출력 장치에서 Start를 누릅니다.

그런 다음 5ml의 식염수를 빠르게 주입하여 심박출량을 측정합니다. 15초 이내에 장치 측정값이 표시됩니다. 그런 다음 환기를 켭니다.

이 절차를 세 번 반복하고 평균 스트로크 볼륨을 계산합니다. 주입 사이에 호기말 이산화탄소가 기존 값으로 돌아갈 때까지 1-2분 정도 기다립니다. 이제 Swan Ganz 카테터를 제거하고 경정맥의 9F 덮개를 통해 8F Fogarty 카테터를 삽입하고 하대정맥에 배치합니다.

팁이 0.9% 식염수로 유지되는 동안 코스 및 미세 버튼을 사용하여 PV 루프 카테터의 압력 신호를 가능한 한 0에 가깝게 보정합니다. 그런 다음 측정된 스트로크 볼륨을 시스템에 입력합니다. 다음 단계는 경동맥의 8F 초를 통해 PV 루프 카테터를 전진시키고 형광투시법을 사용하는 동안 팁을 좌심실로 전진시키고 중앙에 배치하는 것입니다.

이제 압력 신호에 대해 원시 컨덕턴스 신호를 플로팅하여 직사각형 루프를 만들어야 합니다. 이 그래프를 사용하여 적절하게 배치된 가장 큰 세그먼트를 선택합니다. 그런 다음 기계적 환기를 일시 중지하고 압력 볼륨 루프 모듈에서 enter를 눌러 컨덕턴스를 볼륨으로 변환하는 기준선 스캔을 수행합니다.

모듈에 심박수, 수축기 및 이완기 전도도가 표시되면 호흡을 다시 켭니다. 진행하기 전에 측정된 심박수는 EKG 또는 압력에서 파생된 심박수와 같아야 합니다. 부정맥이 있어서는 안 되며, 수축기 및 이완기 전도도를 적절하게 감지해야 합니다.

기준선 데이터가 적절하다고 판단되면 Enter 키를 눌러 수락하고 PV 루프 모듈에 표시된 심박수와 수축기 및 이완기 전도도를 기록합니다. 그런 다음, 압력 신호에 대해 볼륨 신호를 플로팅합니다. 루프는 여전히 직사각형이어야 합니다.

이제 인공호흡을 일시 중지하고 10-12회 연속 심장 박동을 기록하여 기준선 압력량을 확보합니다. 그런 다음 환기 장치를 다시 켜고 호기말 이산화탄소 농도가 기존 값으로 되돌아가도록 합니다. 다음으로, 형광 투시 지침에 따라 Fogarty 카테터를 팽창시켜 예압을 줄입니다.

그런 다음 이전과 같이 인공호흡 없이 10-12회 연속 박동을 녹음합니다. 수축기 혈압은 수은 60mm 이상으로 유지되어야 하며 부정맥이 측정을 방해할 수 없습니다. 데이터를 수집한 후 Fogarty 카테터의 공기를 빼고 인공호흡기를 켠 다음 호기말 이산화탄소가 기존 수준으로 돌아갈 때까지 기다립니다.

이제 Fogarty 및 PV 루프 카테터를 제거하면서 동맥압을 계속 기록하여 압력 드리프트를 수정합니다. 마지막으로, 다른 동물에게 돌려주기 전에 동물이 회복될 때까지 모니터링하십시오. 동물의 수술을 준비한 후 목에 대한 외과적 탐색을 사용하여 양쪽 경동맥에 접근합니다.

그런 다음 각 경동맥에 7F 및 8F 도입부 덮개를 삽입합니다. 이제 헤파린을 킬로그램당 100단위로 투여합니다. 흉골 절개술을 시행하려면 쇄골상 노치 바로 아래에서 xiphoid process 바로 아래 지점까지 30-40cm의 중간 절개를 만듭니다.

그런 다음 linea alba를 통해 흉골로 내려갑니다. 투열 요법을 사용하여 xipoid를 조심스럽게 분리하고 Klinkenberg 가위를 사용하여 후방 흉골과 심낭을 분리합니다. 퉁명스럽게 분리를 계속하고 두개골처럼 움직입니다.

심장 손상을 방지하기 위해 가위 끝이 흉골 쪽으로 위쪽을 향하도록 하십시오. 망치와 Lebsche 칼을 사용하여 흉골 절개술을 수행합니다. 골수 출혈은 골수에 골수 왁스를 문지르면 최소화할 수 있습니다.

견인기로 흉부를 엽니다. 이제 수술 용 가위를 사용하여 심낭을 엽니 다. 표준 Y 카테터를 안내 카테터에 연결합니다.

그런 다음 10cm 연장된 3방향 탭을 양쪽 Y 커넥터에 연결합니다. 그런 다음 덮개 중 하나를 통해 왼쪽 주요 관상 동맥의 골에 안내 카테터 중 하나를 배치합니다. 다음으로, 좌측 전방 하행 동맥에 삽입된 가이드 와이어를 사용하여 좌측 주요 관상동맥 카테터를 통해 관상동맥 확장 카테터를 전진시키고, 심근경색 유도 시 관상동맥 폐색이 수행된 위치에 풍선을 배치합니다.

아직 팽창시키지 마십시오. 다른 칼집을 사용하여 오른쪽 관상 동맥의 골에 다른 안내 카테터를 배치하여 계속합니다. 이제 관상동맥 조영술을 시행합니다.

형광투시법에서 조영제를 주입합니다. 먼저, 전후를 바라보며 좌측 주관상동맥에 가이딩 카테터가 올바르게 배치되었는지 확인합니다. 그런 다음 오른쪽 관상 동맥을 시각화합니다.

조영제 주입은 풍선을 관상 동맥 동맥으로 더 밀어 넣을 수 있습니다. 필요한 경우 위치를 변경합니다. 그런 다음 갓 만든 2% Evans Blue 염료가 든 주사기를 3방향 탭에 부착합니다.

다음으로, 관상동맥 조영술을 사용하여 풍선을 팽창시키고 관상동맥의 일부를 완전히 막았는지 확인합니다. 오클루전은 매우 중요합니다. 풍선이 부풀어 오르는 동안 두 안내 카테터를 통해 염료를 초당 5밀리리터로 주입합니다.

심장은 혈류가 차단된 좌심실 부분을 제외하고는 파랗게 변해서는 안 됩니다. 심장이 자발적으로 심실세동으로 전환되지 않는 경우, 염료 주입 후 심장의 경색되지 않은 부분에 9볼트 배터리를 5회 터치합니다. 그런 다음 케이블 정맥을 절개하여 압력을 해제하고 흡입을 사용하여 혈액을 배출합니다.

이제 풍선의 공기를 빼십시오. 양쪽 안내 카테터와 함께 수축시킵니다. 그런 다음 주변의 막을 절개하고 큰 혈관을 가로 절단하여 심장을 추출합니다.

모든 혈액을 씻어내고 바깥쪽과 안쪽 모두 0.9%의 식염수로 염색하십시오. 그런 다음 좌심실을 조심스럽게 절개합니다. 그런 다음 심방 심실 홈과 평행한 평면에서 정점에서 기저부까지 5개의 동일한 10mm 두께의 단면을 만듭니다.

보정을 위해 이미지의 자를 사용하여 주변광 조건에서 5개 슬라이스의 양면을 모두 촬영합니다. 그런 다음 TTC로 슬라이스를 염색하고 다시 사진을 찍습니다. 3D 경식도 심장 초음파는 전반적인 심장 기능을 평가하는 데 사용되었습니다.

급성 심근경색 1주일 후, 10마리의 동물 결과를 바탕으로 건강한 기준치와 비교했을 때 전반적인 심장 기능이 악화되었습니다. 이것은 전중격 벽의 수축 감소에 의해 설명되었습니다. 압력 볼륨 루프도 사용되어 전반적인 심장 기능을 평가하고 고유한 심근 근육 특성을 계산했습니다.

전자의 결과 측정은 쉽게 계산되었으며 오른쪽 하단 모서리에 EDV가 포함되고 왼쪽 상단 모서리에 ESV가 포함됩니다. 이러한 값은 좌심실 기하학에 대한 중요한 정보를 제공합니다. 이러한 측정으로부터, 좌심실 펌프 기능의 중요한 척도인 좌심실 거부 반응률(left ventricular rejection fraction)이 몇 가지 다른 매개변수와 함께 계산되었습니다.

내재적 심장 성능의 경우, 수축기 말기 및 이완기 말기 압력 부피 관계와 같은 PV 루프에서 다양한 측정이 파생되었습니다. 심근경색 후 말단 수축기 체압 관계 기울기가 감소할 수 있으며, 이는 수축성이 감소했음을 나타냅니다. 궁극적으로, 염색은 위험 부위의 원격 심근과 경색된 심근을 식별하는 데 사용되었습니다.

좌심실의 약 22%가 위험 지역을 구성했으며, 대부분이 경색으로 인한 것이었습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 3D 경식도 심초음파, 압력 볼륨 루프 데이터 수집 및 염색 위험 영역에 대한 경색 크기를 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 일단 숙달되면 경식도 심장 초음파는 20분 안에 수행할 수 있습니다.

30분 안에 압력 볼륨 루프 데이터 수집. ᆞ 경색의 크기와 면적이 60 분에 착색의 위험이 있습니다. PV 루프와 경색 크기 부위 염색 위험을 시도하는 동안 부정맥을 유발하지 않도록 주의하는 것이 중요합니다.

이 비디오에 표시된 기술은 심혈관 질환 분야의 연구자들이 대형 동물 모델에서 허혈 및 재관류 손상을 탐구하는 데 도움이 될 수 있습니다.