Name: 휴대용 FRET 분석과 고감도 및 고속 형광 검출 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 27 s
Description: 배우세요 휴대용 FRET 분석기를 활용한 음료 내 당류 정량화 방법을. 고감도 형광 바이오센서로 맥아당과 자당을 검출하여 식품 과학 연구에 활용할 수 있습니다.

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이 연구는 글로벌 프론티어 사업 (2011-0031944)과 KRIBB 연구 이니셔티브 프로그램의 지능형 합성 생물학 센터에서 보조금에 의해 지원되었다.

바이오 센서 1. 준비 <ol><li> 이전에 확립 된 프로토콜 2에 따라 CFP-MBP-YFP-을 His6 - 플라스미드 pET21a (+)를 구축합니다. </li><li> 대장균 DE3 균주의 단일 콜로니로 루리아 국물 (LB) 5 ㎖를 접종하고 진탕 16 시간 동안 37 ° C에서 품어. </li><li> 전송 100 ㎖ LB를 함유하는 600 나노 미터 (OD 600)에서의 광학 밀도가 0.5 (약 3 시간)에 도달 할 때까지 진탕 배양기에서 37 ℃에서 부화 500 mL의 플라스크에 O / N 배양 1 ㎖. </li><li> 4 ℃에서 20 분 동안 1000 × g에서 원심 분리하여 50ml의 원뿔형 튜브에 세포를 수확. </li><li> 4 ℃에서 20 분 동안 1,000 × g에서 50 ml의 얼음처럼 차가운 증류수 (DW) 및 원심 각 튜브에 신속하게 펠렛을 재현 탁. </li><li> 부드럽게 용액 (electrocompetent 세포)까지 소용돌이에 의해 10 % (v / v) 글리세롤과 빙냉 DW 50 μL에 펠렛을 재현 탁 것은 OD에 도달 (600) </suB&gt; (100). </li><li> 일렉트로 장치와 electroporate에 빙냉 전기 천공 큐벳에 CFP-MBP-YFP-을 His6 - 플라스미드 pET21a (+) 10 ng의 (AN OD 100 (600)에서 세포의 50 μL) electrocompetent 세포의 혼합물을 놓고 혼합물 (18 kV로 / ㎝, 25 μF). </li><li> 신속 완만 15 mL의 둥근 바닥 튜브에 진탕하면서 1 시간 동안 37 ℃에서 회복 하였다 부드럽게 세포를 큐벳에 1 mL의 SOC 배지를 추가하고 재현 탁. </li><li> 100 μg의 / ㎖의 앰피 실린을 함유하는 LB 플레이트 상에 세포를 확산하고 12 시간 동안 37 ℃에서 배양한다. </li><li> 루프를 사용하여 단일 콜로니를 분리 및 LB는 12 시간 동안 진탕 기에서 37 ℃에서 100 ㎍ / ml 암피실린 10ml에 콜로니를 접종. </li><li> 100 ㎍ / ml 암피실린 LB 500 ml의 종자 배양 5 mL를 첨가하고 37 ° C 진탕 배양기에서 배양 물을 배양한다. </li><li> 0.5 mM의 이소 프로필 β-D-티오 갈 락토 시드 (IPTG) 때 OD 600에 도달 추가0.5 24 시간 동안 37 ° C 진탕 배양기에서 문화를 품어. </li><li> 원심 분리기 20 분 (4 ° C를) 조심스럽게 뜨는을 제거하기위한 4,500 × g에서 세포. </li><li> 5 mL의 결합 완충액 (20 mM 트리스 - 염산, 산도 8.0, 1 ㎜ PMSF, 0.5 mM의 EDTA, 1 mM의 DTT)의 펠렛을 재현 탁. </li><li> 각각의 냉각 10 초 버스트 다음, 200 ~ 300 W에서 여섯 10 초 버스트 얼음에 세포를 초음파 처리. </li><li> 10,000 ×에서 해물을 원심 분리기 4 ° C에서 30 분 동안 g는 세포 파편 펠렛합니다. 새 컬렉션 튜브에 뜨는 (가용성 단백질)을 전송합니다. </li><li> 나 Ni-NTA 친 화성 컬럼 (5 ㎖의 부피) 상에 FRET 센서 단백질의 친 화성 정화, 부하 클리어 세포 용 해물의 4 ml의를 달성하고 빠른 단백질 액체 크로마토 그래피 (FPLC) (18)를 사용하여 크로마토 그래피 분석을 수행 할 수 있습니다. </li><li> 세척 완충액 다섯 컬럼 부피로 한번 씻어 열 I (50 mM의 포스페이트 완충액, 300 mM 염화나트륨, 10 mM의 이미 다졸, pH를 7.0). </li><li> 세척 완충액 II 다섯 컬럼 부피 (50 mM의 포스페이트 완충액, 300 mM 염화나트륨, 20 mM의 이미 다졸, pH를 7.0)으로 세척하는 단계를 반복한다. </li><li> 용출 완충액의 다섯 컬럼 부피 (50 mM의 포스페이트 완충액, 300 mM 염화나트륨 500 mM의 이미 다졸, pH를 7.0)와 센서 단백질을 용출시켰다. </li><li> 집중 용출 샘플을 탈염, 3,000 × g에서 10 분 동안 샘플을 원심 분리기의 최대 20 ㎖에 집중 (10,000 MW의 막 크기)를 입력합니다. 0.8 % 인산 완충 식염수 (PBS)로 집중 리필. 첫 번째 샘플의 20 ml의 집중을 충전 한 후 PBS로 채우는 두 번이 단계를 반복합니다. </li><li> 농축 및 탈 소금에 절인 센서 단백질 복구 및 -80 ° C에서 보관합니다. </li></ol> 프렛 분석기를 사용하여 당도 2. 측정 참고 : FRET 분석기 건설의 세부 사항은 이전 작품 7에 설명 하였다. <ol><li> 0.8 % 0.2 PBS를 함유하는 검출 솔루션을 준비센서 단백질 μM. </li><li> 프렛 분석기를 켭니다. 최적의 온도를 보정하기 위해 2 초 동안 &quot;UP&quot;버튼을 누릅니다. 은 &quot;UP&quot;과 &quot;DOWN&quot;버튼을 사용하여 53 ° C로 온도를 설정하고 &quot;SET&quot;버튼을 누릅니다. </li><li> 교정, 언론과 2 초 동안 동시에 &quot;UP&quot;과 &quot;DOWN&quot;버튼을 길게하십시오. LED가 패널에 &quot;CALIB&quot;하고는 &quot;SET&quot;버튼을 눌러 확인합니다. </li><li> 만 PBS는 분석기의 큐벳 홀더에 버퍼 및 &quot;SET&quot;버튼을 누르면이 포함 된 12.5 × 12.5 × 45mm (길이 × 폭 × 높이) 직육면체 용기 (큐벳)를 놓습니다. </li><li> 하나는 설탕 (맥아당 / 크로스)없이 오직 탐지 솔루션 (2.1 참조) 함유 큐벳을 교체하고베이스 라인을 교정하기 위해 &quot;SET&quot;버튼을 누릅니다. </li><li> 10 mM의 설탕 검출 솔루션을 포함하는 하나 큐벳을 교체하고 &quot;SET&quot;를 눌러단추. </li><li> 음료 샘플의 당 함량을 결정하기 위해 1 분 동안 16,000 × g에서 1.5 ml의 마이크로 원심 분리기 튜브에 1 ㎖의 음료 샘플을 넣어. 주 : FRET 센서 계 형광 측정 총량에 포함되는 샘플의 때문에 1 % (v / v)로 시료의 특별한 전처리를 필요로하지 않는 장점을 갖는다. 그러나, 우리는 형광 측정 (예를 들면, 세포, 불용성 입자, 지질, 지방, 또는 자기 형광과 자료를) 영향을 줄 수있는 물질을 제거하는 것이 좋습니다. 강산, 강염기, 제 (세정제)를 청소하거나, 유화제 (유화제)이 고농도로 존재하고 FRET 생물학적 센서의 특성에 영향을 미칠 수있는 경우 또한, 그 유기 용매 또는를 사용하여 제거되어야 중화제. 우유 지방, 유화제가 스낵 냉동로부터 제거되는 경우, 예를 들어, 샘플은 30 분, 액체 betwee 16,000 × g에서 미세 원심 분리 튜브에서 원심 분리N 바닥 침전물과 우유 지방의 상층을 추출한다. 헥산의 동일한 양을 30 분 지질을 제거하기 위해 15,000 × g에서 원심 분리 후 첨가한다. </li><li> 1 ML의 주사기로 상층 액을 제거하고 주사기 필터 (기공 크기 0.2 μm의)를 통해 필터링합니다. </li><li> 부드럽게 0.9 ml의 PBS와 소용돌이를 포함하는 1.5 ml의 microcentrifuge 관에서 음료 샘플 필터링 0.1 ml에 놓습니다. 참고 : 제대로 음료 샘플을 희석하는 것이 중요합니다. 당 농도가 상기 장치의 동적 범위에 속하는 것이라고이 경우, 1000 배 희석을 수행 하였다. 우리는 음료의 라벨의 당도를 참조하여, 사전에 목표 당 농도를 추정 바랍니다. </li><li> 검출 용액 0.495 mL를 함유하는 큐벳 (1 % v / v)로 희석 된 음료 시료 5 μL를 추가한다. </li><li> 프렛 분석기의 큐벳 홀더에 큐벳을 놓고 53 ° C에 시료 용액을 예열. </li><li> 설탕 함량을 측정 할 수있는 &quot;SET&quot;버튼을 누릅니다. 535분의 488 내지 7,8의 비율을 판독하여 온도 제어하는 펠티에 소자를 구비 한 다중 레벨 플레이트 판독기 또는 형광 분광 광도계를 이용하여 FRET 측정을 평가하는 것이 가능합니다. 크로스 탐지를 들어, CSY-LH 센서 2 2.12 1.1의 단계를 따릅니다. </li></ol>

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</ol>

저자는 공개 아무것도 없어.

이 프로토콜은 FRET 센서 최적 온도 주문품 FRET 분석 장치 (7)를 이용하여 음료 샘플 당 농도의 신속하고 효율적인 정량화를 허용한다. 이 분석기는 최근에 개발 된 저렴한 405 나노 밴드 광원 및 실리콘 포토 다이오드와 두 개의 광 검출기로 자외선이-LED 설계되었습니다. 이 장치는보다 비용 효율적인 다른 비교 fluorometers보다. FRET 센서를위한 최적의 온도 범위에서 두 개의 발광 파장 대역 (530 nm 내지 480 ㎚)의 비율을 측정 할 때 특히 상기 장치는 높은 검출 감도를 나타냈다. 검출 각종 당류의 감도 및 강도는 형광 분광 장치 (7)보다 우수 하였다. 이 프로토콜의 주요 목표는 맞춤형 FRET 분석과 FRET 기반 센서의 넓은 적용 성을 지원하는 것입니다. 분석기는 간접적으로 FRET 센서를 통해 당도를 측정하는 동안, 난t는 장치가 널리 확장 유전자 조작 리간드 특이성 모듈 설계 센서 농도에 독립적 인...

포스터 공명 에너지 전달 (FRET)을 널리 당, 칼슘 이온, 아미노산 1-4와 같은 작은 분자를 검출하는 바이오 센서로서 사용되어왔다. FRET 바이오 센서는 형광 단백질, 시안 형광 단백질 (CFP들), 및 주변 세포질 결합 단백질 (PBPs)의 양단에 융합 노란색 형광 단백질 (YFPs)를 포함한다. 당류는 이후 PBPs 양쪽 끝에 두 형광 단백질의 거리 및 전이 쌍극자의 방향을 변경하는 센서의 구조 변화를 일으키는 FRET 센서의 중앙에 위치 PBPs 바인딩. 이러한 변화는 EYFP (530 ㎚) 및 ECFP (480 ㎚)의 발광 파장의 비율을 측정함으로써, 당 함량의 정량 분석을 가능하게한다. 높은 민감도, 특이도, 실시간 모니터링 능력 및 FRET 바이오 센서의 빠른 응답 시간으로 인해, 이러한 센서는 크게, 환경 산업, 의료 분야 5에 사용된다. 또한, ratiom이 센서의 농도를 용이하게 제어 및 배경 형광이 항상 존재할 수없는 복잡한 생물학적 시료의 성분을 측정하기 위해 사용될 수있다 FRET 바이오 센서를 사용하여 측정 etric 중요한 실용적인 장점을 갖는다. 양적 시각화를위한 FRET 기반 센서의 이러한 장점에도 불구하고, 형광 단백질에 불완전 도메인 모션 전송 작은 구조적 변화는 본질적으로 약한 신호 강도를 생산하고 있습니다. 이 약한 신호는 시험 관내 또는 생체 내 분석 6 FRET 기반 센서의 적용을 제한합니다. 따라서, 대부분의 바이오 센서가 고가 민감한 장비를 사용해야 FRET. 이전에는, 기존 형광 분석기 (7)의 것과 유사한 기능을 저렴하고 휴대용 FRET 분석을 개발 하였다. 이 장치 저렴 405 nm의 대역 자외선 발광 다이오드 (LED)에서는 제의 여기를 야기하는 광원으로서 사용 된즉 형광 신호 고가 램프 또는 레이저를 교체. 광자의 검출 시스템은 효율적으로 실리콘 광 다이오드 두 광 검출기 상으로 발산 형광 신호를 집중한다. 55 ° C를 크게 비율 계량 FRET 신호 (8)을 확대 할 수 - 더 최근의 연구에서 우리는 50에서 검출 온도의 최적화는 것을 보여 주었다. 이 온도 별 신호 향상은 맞춤형 FRET 분석과 함께 신속한 고감도 일반적인 진단 애플리케이션 FRET 센서의 사용을 가능하게한다. 이 프로토콜에서는 시판 음료의 당 함량을 정량함으로써 FRET 최적 온도 조건 하에서 분석 FRET의 일반적인 적용 가능성을 보여 주었다. 이 프로토콜은 FRET 장치 동작의 세부 사항뿐만 아니라 센서 샘플 준비에 대한 간략한 설명을 제공한다. 우리는이 보고서는 휴대용의 잠재적 인 응용 프로그램을 촉진 것으로 예상소규모 실험실 환경 분석기 FRET 기반 바이오 센서와 저가의 현장 진단 장치의 추가 개발을위한 기반을 제공한다.

<table><tbody><tr><td>LB</td><td>BD</td> <td># 244620</td><td></td></tr><tr><td>이소 프로필 &베타; -D-thiogalactoside (IPTG)</td> <td>Sigma</td><td>I6758</td><td></td></tr><tr><td>Ampicillin</td><td>Sigma</td><td>A9518</td><td></td></tr><tr><td>Tri-HCl</td><td>Bioneer</td><td>C-9006-1</td><td></td></tr><tr><td>PMSF</td><td>Sigma</td><td>78830</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Bioneer</td><td>C-9007</td><td></td></tr><tr><td>DTT</td><td>Sigma</td><td>D0632</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Junsei</td><td>19015-0350</td><td></td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td><td>Gibco</td><td>70011-044</td><td>0.8% NaCl, 0.02% KCl, 0.0144% Na2HPO4, 0.024% KH2OP4, pH 7.4</td></tr><tr><td>SOC</td><td></td><td></td><td>2% 트립톤, 0.5% 효모 추출물, 10mM NaCl, 2.5 mM KCl, 10 mM MGCl2, 20 mM 포도</td></tr>당 <tr><td>자원 Q</td><td>Amersham Biosciences</td><td>17-1177-01</td><td>6 &times; 30 mm 음이온 교환 크로마토그래피 컬럼&nbsp;</td></tr><tr><td>HisTrap HP1</td><td>Amersham Biosciences</td><td>29-0510-21</td><td></td></tr><tr><td>석영 큐벳</td><td>시그마</td><td>Z802875</td><td></td></tr><tr><td>AK&Auml; KTAFPLC</td><td>Amersham Biosciences</td><td>18-1900-26</td><td>빠른 단백질 액체 크로마토그래피 (FPLC)</td></tr> <tr><td>Cary Eclipse</td><td>VarianInc</td><td></td><td>형광 분광 광도계</td></tr><tr><td>VICTOR&nbsp; &nbsp;</td><td>PerkinElmer</td><td>2030-0050</td><td>a multilabel plate reader</td></tr><tr><td>E. coli JM109 (DE3)</td><td>Promega</td><td></td><td>Electrocompetent cells</td></tr><tr><td>A (음료)</td><td>Korea Yakult Co. (한국)</td><td>Birak</td><td>Fermented drinks</td></tr><tr><td>B (음료)</td><td>롯데식품(한국)</td><td>Epro</td><td>Soft drink</td></tr><tr><td>C (음료)</td><td>롯데식품(한국)</td><td>Getoray</td><td>스포츠 드링크</td></tr></tbody></table>

휴대용 fret 분석과 고감도 및 고속 형광 검출

Highly Sensitive and Rapid Fluorescence Detection with a Portable FRET Analyzer

포스터 공명 에너지 전달이 최근 개선 (FRET) 센서는 이온 및 아미노산을 포함하여 다양한 작은 분자를 검출하기 위해 사용을 사용할 수있다. 그러나, FRET 센서의 본래 약한 신호 세기는 다양한 분야에의 응용을 방지하고 비싼 고성능의 사용이 필요하게 fluorometers 중요한 과제이다. 이전에, 우리는 특히 높은 검출 감도를 달성하기 위해 두 개의 발광 파장 대역 (530 및 480 ㎚)의 비율을 측정 할 수있는 경제적 인 고성능 FRET 분석 내장. 55 °의 C - 더 최근에는 세균의 세포질 단백질과 결합 FRET 센서 (50)의 임계 온도 범위에서 최대 감도 리간드를 검출하는 것이 발견되었다. 이 보고서는 온도 별 FRET 센서 우리 FRET 휴대용 분석기를 사용하여 시판 음료 샘플 당 함량을 평가하기위한 프로토콜을 설명한다. 우리의 결과는 추가 예열 것으로 나타났다프렛 센서의 과정은 상당히 당도의보다 정확한 측정을 가능하게하려면 FRET 비율 신호를 증가시킨다. 주문품 FRET 분석과 센서 성공적 상용 음료의 세 종류의 당 함량을 정량하기 위해 적용 하였다. 우리는 하이 엔드 장비는 가능하지 않은 장치의 추가적인 소형화 및 성능 향상이 환경에서 휴대용 분석기의 사용을 용이하게 할 것으로 예상된다.

프렛 분석기를 사용 당도의 정량 분석을 수행하기 위해, 관찰 된 FRET 비율에서 표적 당 농도를 추정 피팅 곡선을 구축 할 필요가있다. R은 480 nm에서 CFP의 발광 강도의 비율을 정의 YFP의 발광 강도가 530 나노 미터 (식. 1)에서 생성하자. <img alt="식 (1)" src="/files/ftp_upload/54144/54144equation1.jpg" /> (53 ° C에서 CMY-BII)를 FRET 바이오 센서의 용량 - 반응 곡선은 다른 당 농도에서 FRET 비율 (R)를 관찰함으로써 생성 될 수있다. 다음 곡선은 다음 S 형상의 S 자형 곡선으로 표현 될 수있다 : <p class="jo...

이 프로토콜은 주문품 휴대용 FRET 분석기를 사용하여 포스터 공명 에너지 전달 (FRET) 센서 데이터의 신속한 고감도 정량 설명한다. 장치는 당도 실용적이고 효율적인 평가를 가능하게 검출 감도를 최대화하는 임계 온도 범위 내에서 말토오스를 검출하기 위해 사용 하였다.

휴대용 FRET 분석과 고감도 및 고속 형광 검출

Recent improvements in F&#246;rster resonance energy transfer (FRET) sensors have enabled their use to detect various small molecules including ions and ...

본 프로토콜의 전반적인 목적은 시판 음료의 당 함량을 정량화함으로써 최적 조건 하에서 FRET 분석기의 일반적인 적용 가능성을 입증하는 것입니다. 이 방법은 당과 같은 소분자의 감지 및 모니터링 분야의 핵심적인 질문들에 대한 답을 찾는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 고가의 고성능 형광 광도계 없이도 소분자에 반응하는 신선한 신호를 효율적으로 모니터링할 수 있다는 점입니다.본 실험 절차는 저희 실험실의 Han 박사님이 시연하겠습니다. 먼저, 말토스 또는 수크로스 특이적 시안 및 옐로우 형광 바이오센서 플라스미드를 준비하십시오. 그런 다음 5 mL의 Luria broth에 DE3 E.Coli 단일 콜로니를 접종하고, 진탕 배양기에서 37 °C로 16시간 동안 배양하십시오.다음으로, 배양액 1 mL를 100 mL의 LB가 들어 있는 플라스크에 넣습니다. 600 nm에서의 광학 밀도가 약 0.5가 될 때까지 37 °C의 진탕 배양기에서 플라스크를 배양합니다. 배양액을 4 °C에서 20분 동안 원심 분리합니다. 펠렛을 얼음처럼 차가운 증류수 50 mL에 빠르게 재현탁시킨 후, 다시 20분 동안 원심 분리합니다.펠릿을 10 volume % 글리세롤과 얼음처럼 차가운 증류수 혼합액 50 µL에 재현탁합니다. 600 nm에서의 광학 밀도가 100에 도달할 때까지 혼합물을 부드럽게 흔들어 섞습니다. 얼음처럼 차가운 전기천공 큐벳에 혼합물과 10 ng의 CMY 플라스미드를 함께 넣습니다.혼합물을 전기천공합니다. 큐벳에서 1 mL의 SOC 배지로 세포를 재현탁한 후, 15 mL 라운드 바텀 튜브로 옮깁니다. 37 °C에서 1시간 동안 부드럽게 흔들어 세포를 회복시킵니다.100 µg/mL ampicillin이 포함된 LB agar 플레이트에 세포를 도말합니다. 세포를 37 °C에서 12시간 동안 배양합니다. 루프를 사용하여 단일 콜로니를 100 µg/mL ampicillin이 포함된 10 mL LB 배지로 옮깁니다.종균 배양액을 만들기 위해 혼합물을 37°C에서 12시간 동안 진탕 배양합니다. 종균 배양액 5 mL를 ampicillin이 포함된 LB 배지 500 mL에 옮기고, 진탕 배양기에서 37°C로 세포를 배양합니다. 600 nm에서의 흡광도(optical density)가 0.5에 도달하면, IPTG를 첨가하여 최종 농도가 0.5 mM이 되도록 합니다.배양액을 24시간 동안 배양한 후, 세포를 20분 동

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Research

연구

JoVE Journal

Biochemistry

생화학

그들은 kHz에서 속도 저렴 picoliter, 자기들에게만 혈관을 생성할 수 있기 때문에 비말 기반 microfluidic 플랫폼은 높은 처리량 실험을위한 유망한 후보자 있습니다. 빠르고, 민감하고 고해상도 형광 spectroscopic 방법과의 통합을 통해 이러한 시스템 내에서 발생하는 정보의 다량은 효율적으로 추출 무력화하고 이용하실 수 있습니다.

microfluidic 비말 플랫폼 형광 검출 방법

우리는 복합 폴리머 polydiacetylene (PDA)와 형광 분자의 감지 용 PDA liposomes의 표면에 부착 사이에 초조해 보여줍니다. PDA liposomes은 프로브로 사용되는 분자에 대한 자신의 표면에 수용체 분자가 포함되어 있습니다. 리간드 - 수용체 상호 작용이 감지 메커니즘의 기초 형광와 PDA 사이의 걱정 효율성의 변화에​​ 연결되어 있습니다.

형광 공명 에너지 전송과 리간드 - 수용체 상호 작용의 실시간 모니터링

포스터 공명 에너지 전달은 (걱정) 현미경 기자 등 다양한 바이오 센서를 사용하여 라이브 세포에서 이벤트를 신호의 실시간 모니터링을위한 강력한 기술이다. 여기 어떻게 사용자 정의 epifluorescence를 구축하는 것은 상업적으로 이용 가능한 구성 요소와 방법을 실험을 안달을 위해 사용하는 방법에서 영상 시스템을 초조해 설명합니다.

Unimolecular 바이오 센서를 사용하여 라이브 세포에서 이벤트를 신호의 실시간 모니터링을위한 현미경을 안달

단백질 응집체 또는 단백질 요법 씨앗의 세포 간 이동은 신경 퇴행성 질환에서 병리학의 진행의 기초가 될 수 있습니다. 여기에서는 재조합 또는 생물학적 샘플에서 시딩 활성을 특이적이고 민감하게 검출할 수 있는 새로운 FRET 유세포 분석 분석에 대해 설명합니다.

FRET 유동 세포 계측법과 Proteopathic의 시드 활동의 민감한 검출

액적 미세유체역학에서 다색 형광 검출은 일반적으로 부피가 크고 복잡한 에피 형광 현미경 기반 검출 시스템을 포함합니다. 여기에서는 단일 광검출기에서 수집한 다색 데이터를 시간적으로 인코딩하기 위해 광섬유 어레이를 사용하는 소형 모듈식 다색 검출 체계에 대해 설명합니다.

물방울 미세 유체에 대한 여러 가지 빛깔의 형광 검출 광학 섬유를 사용하여

광열 각광 산란(PT-AS) 센서는 나노리터 규모의 혈액 샘플에 대해 빠르고 화학 물질이 없는 헤모글로빈 분석을 가능하게 합니다. 여기에서는 PT-AS 설정에 대한 세부 정보와 혈액 내 헤모글로빈 농도에 대한 측정 프로토콜이 제공됩니다. 빈혈 샘플에 대한 대표적인 결과도 제시됩니다.

광열 각도 광산란와 신속하고 화학 무료 헤모글로빈 분석

우리는 포스터 공명 에너지 전달 (FRET)을 기초 판독하여 단백질 상호 작용을 분석 자동화 형광 수명 이미징 (FLIM)을 이용하는 오픈 소스 고 함량 분석 (HCA) 기기를 제시한다. 이 openFLIM-HCA 기기에 대한 데이터 수집은 소프트웨어 μManager 작성 및 데이터 분석 FLIMfit에 착수에 의해 제어된다.

자동 형광 수명 이미징 현미경을 활용하여 오픈 소스 높은 콘텐츠 분석

시간-분해된 Förster 공명 에너지 전달 세포 기반 분석 프로토콜은 384-웰 포맷의 세포 용해물에서 내인성 인산화 신호 변환기 및 전사 활성화제(STAT) 1/3/4/5/6 단백질의 단순하고, 특이적이며, 민감하고, 강력한 정량화를 위해 기술된다.

인간 세포에서 내인성 인산화 STAT 단백질의 측정을 위한 시간 분해된 Förster 공명 에너지 전달 분석

이 문서는 와이드필드 형광 현미경 검사를 사용하여 모바일, 단일 분자 Förster 공명 에너지 전송 (smFRET) 기반 프로브의 현면 분석을위한 방법을 제시한다. 새로 개발된 소프트웨어 툴킷을 사용하면 정확한 FRET 효율과 분자 위치를 포함한 움직이는 프로브의 smFRET 시간 추적을 시간의 함수로 판단할 수 있습니다.

모바일 단일 분자 FRET 프로브의 자동화된 2차원 스파티오 측량 분석

이 프로토콜은 화합물과 단백질 분자 간의 결합을 검출하는 고유한 방법을 설명하며, 단백질 샘플 손실을 최소화하고 데이터 정확도가 높다는 이점을 제공합니다.

Differential Scanning Fluorescence를 통한 CD40 단백질-Umbelliferone 상호작용 검출

이 작업은 환경 샘플, 생물학적 샘플, 식품 및 음료에서 Fe, Cr, As 및 F를 검출하는 E-Eye-Enable POCT 장치를 설계하고 개발하기 위한 프로토콜에 대해 논의했습니다. 거의 2000개의 샘플이 테스트되었으며 결과는 황금 표준 기술과 일치합니다.

환경, 생물학 및 식품 샘플에서 Fe, Cr, F 및 As의 현장 정량화를 위한 TD-DFT 유도 고급 E-Eye 감지 기술

배우세요 휴대용 FRET 분석기를 활용한 음료 내 당류 정량화 방법을. 고감도 형광 바이오센서로 맥아당과 자당을 검출하여 식품 과학 연구에 활용할 수 있습니다.

휴대용 FRET 분석과 고감도 및 고속 형광 검출

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