Name: 전위도의 동시 녹화 및 마취 된 흰쥐의 비주얼 사건 관련 전위 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 30 s
Description: 배우세요 마취된 흰쥐에서 전위도와 시각 유발 전위를 동시에 측정하는 방법을 통해 시각 경로의 기능을 평가하는 기술입니다. 이 방법은 노화와 질병이 시각 경로에 미치는 영향을 연구하는 데 활용됩니다.

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이 프로젝트를 위한 자금은 National Health and Medical Research Council (NHMRC) 1046203 (BVB, AJV) 및 Melbourne Neuroscience Institute Fellowship (CTN)에서 제공했습니다.

<ol><li>Nguyen, C. T. O., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+electroretinography%3A+methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Rodent electroretinography: methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Prog Retin Eye Res. 27, 1-44 (2008).</li>
<li>Tsai, T. I., Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+acute+intraocular+pressure+challenge+on+rat+retinal+and+cortical+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of acute intraocular pressure challenge on rat retinal and cortical function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55, 1067-1077 (2014).</li>
<li>Cowey, A., Franzini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+retinal+origin+of+uncrossed+optic+nerve+fibres+in+rats+and+their+role+in+visual+discrimination%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The retinal origin of uncrossed optic nerve fibres in rats and their role in visual discrimination.</a> Exp Brain Res. 35, 443-455 (1979).</li>
<li>Weinstein, G. W., Odom, J. V., Cavender, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visually+evoked+potentials+and+electroretinography+in+neurologic+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Clin%22%5BJournal%5D)">Visually evoked potentials and electroretinography in neurologic evaluation.</a> Neurol Clin. 9, 225-242 (1991).</li>
<li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+evoked+potentials+standard+%282004%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Visual evoked potentials standard (2004).</a> Doc Ophthalmol. 108, 115-123 (2004).</li>
<li>Ridder, W. H., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Causes+of+cataract+development+in+anesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Causes of cataract development in anesthetized mice.</a> Exp Eye Res. 75, 365-370 (2002).</li>
<li>Nixon, P. J., Bui, B. V., Armitage, J. A., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contribution+of+cone+responses+to+rat+electroretinograms%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Experiment+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The contribution of cone responses to rat electroretinograms.</a> Clin Experiment Ophthalmol. 29, 193-196 (2001).</li>
<li>Bui, B. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+the+electroretinogram+to+understand+how+intraocular+pressure+elevation+affects+the+rat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Using the electroretinogram to understand how intraocular pressure elevation affects the rat retina.</a> J Ophthalmol. 2013, 262467(2013).</li>
<li>Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+measure+of+the+electrical+activity+of+human+rod+photoreceptors+using+electroretinography%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A quantitative measure of the electrical activity of human rod photoreceptors using electroretinography.</a> Vis Neurosci. 5, 379-387 (1990).</li>
<li>Birch, D. G., Hood, D. C., Locke, K. G., Hoffman, D. R., Tzekov, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+electroretinogram+measures+of+phototransduction+in+cone+and+rod+photoreceptors+-+Normal+aging%2C+progression+with+disease%2C+and+test-retest+variability%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Quantitative electroretinogram measures of phototransduction in cone and rod photoreceptors - Normal aging, progression with disease, and test-retest variability.</a> Arch Ophthalmol. 120, 1045-1051 (2002).</li>
<li>Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+receptoral+responses+in+pigmented+and+albino+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Development of receptoral responses in pigmented and albino guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Doc Ophthalmol. 99, 151-170 (1999).</li>
<li>Robson, J. G., Saszik, S. M., Ahmed, J., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rod+and+cone+contributions+to+the+a-wave+of+the+electroretinogram+of+the+macaque%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rod and cone contributions to the a-wave of the electroretinogram of the macaque.</a> J Physiol. 547, 509-530 (2003).</li>
<li>Severns, M. L., Johnson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+care+and+fitting+of+Naka-Rushton+functions+to+electroretinographic+intensity-response+data%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The care and fitting of Naka-Rushton functions to electroretinographic intensity-response data.</a> Doc Ophthalmol. 85, 135-150 (1993).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+of+electroretinogram+amplitude+growth+during+light+adaptation+in+pigmented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Origin of electroretinogram amplitude growth during light adaptation in pigmented rats.</a> Vis Neurosci. 23, 155-167 (2006).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> J Physiol. 555, 153-173 (2004).</li>
<li>Tremblay, F., Laroche, R. G., Debecker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Electroretinographic+Diagnosis+of+the+Incomplete+Form+of+Congenital+Stationary+Night+Blindness%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">The Electroretinographic Diagnosis of the Incomplete Form of Congenital Stationary Night Blindness.</a> Vision Res. 35, 2383-2393 (1995).</li>
<li>Bayer, A. U., Keller, O. N., Ferrari, F., Maag, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+glaucoma+with+neurodegenerative+diseases+with+apoptotic+cell+death%3A+Alzheimer%27s+disease+and+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Association of glaucoma with neurodegenerative diseases with apoptotic cell death: Alzheimer's disease and Parkinson's disease.</a> Am J Ophthalmol. 133, 135-137 (2002).</li>
<li>Wostyn, P., Audenaert, K., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+abnormal+high+trans-lamina+cribrosa+pressure+difference%3A+A+missing+link+between+Alzheimer%27s+disease+and+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Neurology+and+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">An abnormal high trans-lamina cribrosa pressure difference: A missing link between Alzheimer's disease and glaucoma.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 110, 753-754 (2008).</li>
<li>Yucel, Y. H., Zhang, Q. A., Weinreb, R. N., Kaufman, P. L., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+retinal+ganglion+cell+loss+on+magno-%2C+parvo-%2C+koniocellular+pathways+in+the+lateral+geniculate+nucleus+and+visual+cortex+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of retinal ganglion cell loss on magno-, parvo-, koniocellular pathways in the lateral geniculate nucleus and visual cortex in glaucoma.</a> Prog Retin Eye Res. 22, 465-481 (2003).</li>
<li>Gupta, N., Yucel, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+changes+can+we+expect+in+the+brain+of+glaucoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Survey+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">What changes can we expect in the brain of glaucoma patients.</a> Survey of Ophthalmology. 52, 122-126 (2007).</li>
<li>Kong, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+aging+and+diet+restriction+on+retinal+function+during+and+after+acute+intraocular+pressure+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Impact of aging and diet restriction on retinal function during and after acute intraocular pressure injury.</a> Neurobiol Aging. 33, 1115-1125 (2012).</li>
<li>Bui, B. V., Sinclair, A. J., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electroretinograms+of+albino+and+pigmented+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Aust+N+Z+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Electroretinograms of albino and pigmented guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Aust N Z J Ophthalmol. 26, Suppl 1 98-100 (1998).</li>
<li>Jobling, A. I., Wan, R., Gentle, A., Bui, B. V., McBrien, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+and+choroidal+TGF-beta+in+the+tree+shrew+model+of+myopia%3A+isoform+expression%2C+activation+and+effects+on+function%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal and choroidal TGF-beta in the tree shrew model of myopia: isoform expression, activation and effects on function.</a> Exp Eye Res. 88, 458-466 (2009).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+the+dark-adapted+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Dissecting the dark-adapted electroretinogram.</a> Doc Ophthalmol. 95, 187-215 (1998).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Prog Retin Eye Res. 39, 1-22 (2014).</li>
<li>Hudnell, H. K., Boyes, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparability+of+rat+and+human+visual-evoked+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The comparability of rat and human visual-evoked potentials.</a> Neurosci Biobehav Rev. 15, 159-164 (1991).</li>
<li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conscious+wireless+electroretinogram+and+visual+evoked+potentials+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Conscious wireless electroretinogram and visual evoked potentials in rats.</a> PLoS One. 8, e74172(2013).</li>
<li>Hetzler, B. E., Berger, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ketamine-Induced+Modification+of+Photic+Evoked-Potentials+in+the+Superior+Colliculus+of+Hooded+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Ketamine-Induced Modification of Photic Evoked-Potentials in the Superior Colliculus of Hooded Rats.</a> Neuropharmacology. 23, 473-476 (1984).</li>
</ol>

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르와 VEP는 각각 망막 및 피질에서 시각 기능의 객관적 측정합니다. 동시 기록의 장점은 전체 시각적 경로의보다 포괄적 인보기가 수득된다는 점이다. 특히, 자신의 동시 평가에서 보완적인 정보는 예를 들어, 시신경 병증 차 뇌 위축 (19)와 공존 할 수 ERG 아직 뚜렷한 VEP 18 발현 중복과 장애에 대한 (시각 경로에 부상의 사이트의 명확한 묘사를 제공 할 수있다, 20, 또는 VEP 손실) 시각 통로 (21, 22)의 여러 위치에서 부상의 증상으로 혼동 할 수있는 경우. 동시에 ERG 및 VEP을 측정함으로써 망막 피질 응답 간의 게인의 지표도 유도 될 수있다. 이것은 미묘한 병리학 적 변화를 검출하기에 유용한 도구를 제공 할 수있다. 현재의 프로토콜은 일반적으로 사용되는 실험실 쥐에 ERG와 VEP 측정이 가능하지만, 쉽게 광고 할 수있다다른 포유 동물 종의 23 ~ 25에 apted. 설치류에서 ERG와...

전위도 (ERG) 및 시각 유발 전위 (VEP)의 측정은 시각 경로의 무결성의 유용한 정량적 평가를 제공합니다. VEP이 같은 빛 이벤트 다음 차 시각 피질에 망막에서 시각 경로의 해당 기능 무결성을 측정하면서 ERG는 빛 자극에 망막의 전기 반응을 측정한다. 이 원고는 일반적으로 사용되는 실험실 모델 쥐의 기록 및 ERG와 VEP 응답의 분석을위한 프로토콜을 설명합니다. 르 빛의 플래시에 망막의 총 전기 반응을 정량화하여 키 망막 세포 클래스의 숫자의 기능 무결성의 인덱스를 제공합니다. 이온 플럭스의 조율 된 일련의 광 개시에 의해 시작 오프셋, 눈의 외부 표면에 배치 된 전극을 사용하여 측정 할 수있는 전압 검출 가능한 변화를 생성한다. 얻어진 파형은 자체의 조합을 나타내는진폭, 타이밍 및 주파수의 다른 잘 정의 된 컴포넌트 RIES. 연구의 실질적인 몸체는 이러한 성분이 비교적 많은 척추 동물 망막 통해 상기 구성 요소가 서로로부터 분리 될 수 있다는 것을 잘 보존되어 있는지 보여 주었다. 적절하게 자극 (플래시 자극, 배경, interstimulus 간격) 조건을 선택하고 분석하는 복합 파형의 특정 기능을 선택하여 하나의 망막 세포 1,2의 특정 그룹의 측정 값을 반환 확신 할 수 있습니다. 이러한 특성은 유틸리티 따라서 망막 기능의 비 침습적 척도로서 ERG의 광범위한 애플리케이션을 기초. 이 원고는 (긍정적를 ERG을 측정하고 망막의 주요 세포 종류, 즉 광 수용체합니다 (PIII 구성 요소), 양극성 세포 (개인 식별 구성 요소) 및 망막 신경절 세포의 일부에 대한 정보를 반환하는 데 그 특징을 분석하는 방법론에 초점을 맞추고 암순응 임계 응답 또는 pSTR). 3의 영역 V1에 시신경, 시신경 기관, 시상 (측면 geniculate 핵, LGN) 및 광섬유 방사선을 통해 직렬 통신. 설치류에서, 다수 - 각 눈 decussate 4에서 시신경 섬유 (90-95 %)과는 반대측의 중간 뇌에 분포. 르 달리 5 따라서 시각적 통로가 VEP 파형에 영향을 미칠 수있는 어느 곳 따라 변경 특정 세포 종류에 VEP의 다른 구성 요소를 돌리는 아직 가능하지 않다. 그럼에도 불구하고, VEP 시각적 성능 및 시각적 경로 무결성 유용한 비 - 침습적 측정은이다. VEP는 ERG와 함께 사용될 때, 시각 시스템 (즉, 망막 / 시각 경로)의보다 완전한 평가를 제공 할 수있다. ERG 및 VEP 녹화는 애플리에 따라 단독으로 또는 조합하여 실시 할 수있다양이온. 이 문서에서 설명하는 방법은 망막과 대뇌 피질의 시각 유발 양쪽 눈에서 전기 생리학 및 마취 쥐의 두 반구의 동시 평가를 할 수 있습니다. 이것은 더 포괄적으로 망막 기능의 변화가 시각 유발 대뇌 피질의 기능에 미칠 수있는 망막 기능과 상류 효과를 평가하는 유용한 방법입니다.

<table><tbody><tr><td>악어 클립</td><td>일반 브랜드</td><td>HM3022</td><td>스테인레스 스틸 VEP 나사 전극을 케이블에 연결하기 위한 26mm 클립</td></tr><tr><td>생체 증폭기</td><td>ADInstruments</td><td>ML 135</td><td>ERG 및 VEP 신호 증폭용</td></tr><tr><td>카르복시메틸셀룰로오스 나트륨 1.0%</td><td>Allergan</td><td>CAS 0009000-11-7</td><td>활성 ERG 전극의 신호 품질 향상을 위한 점성 유체</td></tr><tr><td>Carprofen 0.5%</td><td>Pfizer Animal Health Group</td><td>CAS 53716-49-7</td><td>소유명 : Rimadyl 주사 가능 (50 mg / ml). 수술 후 진통제의 경우 생리 식염수 클로르헥사딘 0.5%에 0.5%(5mg/ml)로 희석</td></tr> <tr><td></td><td>Orion Laboratories</td><td>27411, 80085</td><td>수술 기구 소독용</td></tr><tr><td>순환수 수조</td><td>Lauda-K&ouml; nigshoffen</td><td>MGW Lauda</td><td>수술 및 전기 생리학적 기록 중 마취된 동물의 체온을 유지하기 위해</td></tr><tr><td>Dental amalgam</td><td>DeguDent GmbH</td><td>64020024</td><td>전극-두개골 어셈블리를 감싸서 더 견고하게 만들기 위해</td></tr><tr><td>Dental burr</td><td>Storz Instruments, Bausch and Lomb</td><td>#E0824A</td><td>VEP 나사를 삽입하기 위해 각 반구의 두개골에 작은 구멍을 만들기 위한 ~ 0.7 mm 직경의 소형 드릴</td></tr><tr><td></td><td>드릴 Bosch</td><td>Dremel 300 시리즈</td> 전극 리드 잔디 텔레팩터를 <td>트레패닝하기 위한 자동 드릴</td></tr><tr><td></td><td>&nbsp;</td><td>F-E2-30</td><td>은선 전극을 증폭기</td></tr><tr><td>패러데이 케이지</td>에 연결하기 위한 백금 케이블 <td>맞춤형</td><td></td> 어두운 <td>적응을 유지하기 위해 내광을 보장합니다. 신호 대 잡음비를 개선하기 위해 Ganzfeld 설정을 둘러쌉</td></tr>니다 <tr><td>거즈 면봉</td><td>Multigate Medical Products Pty Ltd</td><td>57-100B</td><td>수술 중 절개 부위 및 노출된 두개골 표면을 건조시키기 위해</td></tr><tr><td>Ganzfeld 통합 구</td><td>Photometric Solutions International</td><td></td><td>맞춤형 광 자극기: 직경 36mm, 조리개 크기 13cm</td></tr><tr><td>벨크로</td><td>VELCRO Australia Pty Ltd</td><td>벨크로 브랜드 재사용 가능 </td><td>전극과 동물을 기록 플랫폼</td></tr><tr><td>Isoflurane 99.9%</td><td>Abbott Australasia Pty Ltd</td><td>CAS 26675-46-7</td><td>독점 이름: Isoflo(TM) 흡입 마취제에 고정하기 위해 후크 앤 루프 패스너를 감습니다. VEP 전극 임플란트 수술용 산소 가스와 혼합된 제약 등급 흡입 마취제</td></tr><tr><td>케타민&nbsp;</td><td>Troy Laboratories</td><td>Ilium Ketamil</td><td>독점 이름 : Ketamil Injection, 브랜드 : Ilium. 전기 생리학적 기록을 위한 제약 등급 마취제</td></tr><tr><td>Luxeon LED</td>, <td>Phillips Lighting Co.</td><td></td><td>광 자극용: 2개의 5W LED 및 1개의 1W LED용.</td></tr><tr><td>Micromanipulator</td><td>Harvard Apparatus</td><td>BS4 50-2625</td><td>녹음 중에 ERG 활성 전극을 유지합니다.</td></tr><tr><td>바늘 전극</td><td>잔디 텔레팩터&nbsp;</td><td>F-E2-30</td>은 <td>ERG와 VEP</td></tr><tr><td>페닐에프린 2.5% 최소</td>의 접지 전극으로 꼬리에 피하로 삽입;<td>Bausch and Lomb</td><td>CAS 61-76-7</td>은 <td>ERG 기록을 위한 최대 확장을 달성하기 위해 Tropicamide를 주입했습니다</td></tr>. <tr><td>Povidone 요오드 10%</td><td>Sanofi-Aventis</td><td>CAS 25655-41-8</td><td>소유명: Betadine, 수술을 위해 면도한 피부를 준비하기 위한 방부제 10%, 500 ml</td></tr><tr><td>Powerlab 데이터 수집 시스템</td><td>ADInstruments</td><td>ML 785</td><td>는 LED</td></tr><tr><td>Proxymetacaine 0.5%</td><td>Alcon Laboratories& 주의;</td><td>CAS 5875-06-9</td><td>ERG 기록 중 각막 마취용</td></tr><tr><td>식염수 Gelflex</td><td></td><td></td><td>Non-injectable, 전기 도금은선 전극용</td></tr><tr><td>범위 소프트웨어</td><td>ADInstruments</td><td>버전 3.7.6</td><td>Powerlab 시스템을 통해 자극을 동시에 트리거하고 데이터 수집</td></tr><tr><td>은(가는 원형 와이어)</td><td>A& E 금속</td><td>0.3 mm</td><td>활성 및 비활성 ERG 전극을 만드는 데 사용되며, 비활성 VEP 전극</td></tr><tr><td>스테인리스 스트릴 나사&nbsp;</td><td>MicroFasterners</td><td></td><td>0.7mm 샤프트 직경, 3mm 길이 1차 시각 피질 위에 이식하고 활성 VEP 전극 역할을 합니다</td></tr><tr><td>입체 프레임</td><td>David Kopf</td><td>모델 900</td><td>Paxinos & 왓슨의 2007년 쥐 뇌 아틀라스 좌표</td></tr><tr><td>수술용 블레이드</td><td>Swann-Morton Ltd.</td><td>0206</td><td>VEP 전극을 이식하기 위해 주요 시각 피질에 오버레이된 피부 영역을 절개하기 위해</td></tr><tr><td>Suture</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd</td><td></td><td>3-0 실크 꼰 봉합사 비흡수성, VEP 전극 이식 수술 중 피부 수축</td></tr><tr><td>Tobramycine 눈 연고 0.3%</td><td>Alcon Laboratories&nbsp;</td><td>CAS 32986-56-4</td><td>독점 이름 : Tobrex. 수술 후 피부 상처 주위에 적용되는 예방적 항생제 연고</td></tr><tr><td>Tropicamide 0.5%</td><td>Alcon Laboratories&nbsp;</td><td>CAS 1508-75-4</td><td>독점 이름 : 0.5 % Mydriacyl 점안액, ERG 기록을위한 mydriasis를 달성하기 위해 주입</td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Troy Laboratories</td><td>Ilium Xylazil-100</td><td>전기 생리학 기록을위한 제약 등급 마취제</td></tr><tr><td>피펫 팁</td><td>Eppendorf Pty Ltd</td><td>0030 073.169</td><td>Eppendorf epTIPS 100 - 5,000 ml, 맞춤형 전극</td></tr><tr><td>Microsoft Office Excel</td><td>Microsoft</td><td>데이터 분석을 위한 버전 2010</td><td>스프레드시트 소프트웨어</td></tr><tr><td>Lethabarb Euthanazia Injection</td><td>Virbac (Australia) Pty Ltd</td><td>LETHA450</td><td>신속한 안락사를 위한 325 mg/ml 펜토바르비탈 나트륨</td></tr></tbody></table>

전위도의 동시 녹화 및 마취 된 흰쥐의 비주얼 사건 관련 전위

Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

망막전도(ERG)와 시각 유발 전위(VEP)는 일반적으로 시각 경로의 무결성을 평가하는 데 사용됩니다. ERG는 빛 자극에 대한 망막의 전기적 반응을 측정하는 반면, VEP는 동일한 빛 사건 이후 망막에서 1차 시각 피질까지의 시각 경로의 해당 기능적 무결성을 측정합니다. ERG 파형은 다양한 망막 신경 세포 및 신경교세포 부류의 반응을 반영하는 구성 요소로 나눌 수 있습니다. VEP 파형의 초기 구성 요소는 시신경과 고등 피질 중심의 무결성을 나타냅니다. 이러한 녹음은 응용 프로그램에 따라 단독으로 또는 함께 수행할 수 있습니다. 이 논문에 설명된 방법론을 통해 양쪽 눈과 양쪽 반구에서 망막 및 피질 시각 유발 전기생리학을 동시에 평가할 수 있습니다. 이는 망막 기능과 망막 기능의 변화가 시각 유발 피질 기능에 미칠 수 있는 상위 효과를 보다 종합적으로 평가하는 데 유용한 방법입니다.

르 A-파 (&gt; -1.38 로그 cd.sm -2), B-파도 (&gt; - 4.99 로그 cd.sm -2) STRs (&lt;- 4.99 로그 cd.sm -2)와 VEPs (&gt; - 0.52 cd.sm를 기록 -2)를 동시에 (그림 1 및 기록 하였다 3). 아주 희미한 깜박에서 긍정적 STR (pSTR)는 110 밀리 초 플래시 후 약 보지하고, 약 220 밀리 초에서 제외 STR (nSTR) (도 1 및도 2). 큰 B 파장을 가진 ERG 그 PII 응답을 분석 할 수있는 적당한 플래시의 개시 후 50 내지 100 밀리 초 사이의 피크 (도 1 및도 2). 이 자극 에너지에서, 피크 전에 네거티브 파장은 무시할 수있다. 밝게 빛나는 에너지에 부정적인 편향은 파...

이 프로토콜은 마취된 쥐에서 망막전도와 시각적 유발 전위를 동시에 측정하는 것을 설명합니다.

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the ...

이 실험 절차의 전반적인 목표는 쥐에서 망막전위도와 시각유발전위를 동시에 측정하는 것입니다. 이 방법은 노화나 질병의 영향이 시각 경로의 특정 구성 요소에 영향을 미치는지 여부와 같이, 시각 신경과학 분야의 핵심 질문들에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.이 기법의 주요 장점은 망막 기능과 그것이 시각 유발 피질 기능에 미치는 상위 영향에 대해 종합적인 평가가 가능하다는 것입니다. 이 절차를 시작하려면, 70 millimeter 길이의 은선을 자르고 쥐의 눈을 둘러쌀 수 있도록 직경 8 millimeter의 루프를 만들어 맞춤 제작된 ERG 비활성 전극을 미리 제작하십시오. 1 millimeter 파이프 헤드 팁 위에서 모양을 잡아 균일한 원형을 만들고 루프의 크기를 조정하십시오.링이 너무 작으면 관절 내 압력을 의도치 않게 높일 수 있고, 너무 크면 신호의 변동성을 증가시킬 수 있으므로 이는 매우 중요합니다. 다음으로, 70 mm 길이의 은선을 자른 후 쥐의 앞니에 걸 수 있도록 지름 8 mm의 타원형으로 성형하여 맞춤형 VEP 불활성 전극을 미리 제작합니다.그런 다음, 30 mm 길이의 은선을 자르고 지름 약 1~2 mm의 작은 루프를 만들어 맞춤형 ERG 활성 전극을 사전 제작하며, 이 루프는 각막 마모를 최소화하면서 쥐의 각막에 부드럽게 접촉시키는 데 사용됩니다. 그 후, 노출된 내부 전선에 은선을 꼬아 전극을 전극 리드선에 단단히 부착합니다. 광전 효과로 인한 아티팩트를 줄이기 위해 노출된 여분의 금속 부위를 마스킹 테이프로 절연합니다.ERG 활성 전극의 경우, 전극을 마이크로 조작기로 더 쉽게 잡을 수 있도록 마스킹 테이프를 여러 겹 겹쳐 더 두껍고 단단하게 감쌀 수 있습니다. 각 ERG 비활성 전극의 마스킹 테이프 위에는 소형 벨크로 패치를 부착하여 설치된 설치류 넥 스트랩에 안정적으로 고정되도록 합니다. 그런 다음, 각 VEP 활성 전극의 전극 리드 내부 전선에 악어 클립을 부착합니다.기록 직전에 신호 전도성을 높이기 위해 은선의 노출된 표면에 염화물을 전기 도금합니다. 이를 위해 음극을 배터리의 마이너스 단자에 연결하고 반대쪽 끝을 식염수에 담급니다. 이어서, 양극선의 은색 팁을 일반 식염수에 담그고 이 전극선의 반대쪽 끝을 9V 배터리의 플러스 단자에 연결합니다.20초 후에 연결을 끊으면 전극 와이어의 은색 팁이 흰색으로 고르게 코팅되어 있어야 합니다. 모든 은 ERG 및 VEP 전극에 대해 염화 과정을 반복하십시오. 이 과정에서 마취된 동물의 제모된 부위를 10% 포비돈 요오드로 3회 소독합니다.메스로 머리의 중앙선을 따라 시상 절개를 가하고, 두개골을 노출시키기 위해 직경 20밀리미터의 진피 조직을 원형으로 절제합니다. 다음으로 거즈를 사용하여 긁어내고 건조시켜 하부의 골막을 제거함으로써 관상 및 시상 두개봉합을 노출시킵니다. 양쪽 뇌반구의 두개골에 두 개의 구멍을 뚫습니다.견고한 고정을 위해 스테인리스 스틸 나사를 미리 만들어 둔 두 개의 구멍에 1mm 깊이까지 돌려 박습니다. 그런 다음, 거즈로 두개골을 건조시키고 두 개의 봉합사로 피부를 견인하여 치과용 아말감 처리를 위한 수술 부위를 준비합니다. 이어서, 노출된 두개골 위에 치과용 아말감을 도포하여 나사 전극을 고정하고, 기록을 위해 나사의 약 1.5mm가 노출되도록 합니다.그 후, 견인 봉합사를 제거합니다. 암소시(scotopic) 기록의 경우, 모든 과정은 암실에서 수행됩니다. 여기서는 설명을 돕기 위해 전극 배치를 일반 실내 조명 아래에서 진행하였습니다.동물을 12시간 동안 암적응시킨 후 케타민과 자일라진으로 마취하였습니다. 동공 확장 및 국소 마취 후, 비활성 VEP 전극을 하악 절치 주변에 고정합니다. 그 다음, 패러데이 케이지 내에 위치한 Ganzfeld bowl 앞의 ERG 플랫폼 위에 동물을 배치합니다.벨크로 스트랩을 목덜미 주변에 단단하게 jedoch 너무 조이지 않게 감아 동물을 플랫폼에 고정합니다. 다음으로, 눈의 적도 부위 주변에 공막 링을 비침습적으로 둘러 ERG 비활성 전극을 배치합니다. 각막 주변부에서 약 3m 뒤에 위치시킵니다.전극을 뒷목 주변의 후크 앤 루프 패스너 스트립에 부착하여 고정합니다. 반대편 눈에 대해서도 동일한 절차를 반복합니다. 이제 얼리게이터 클립을 두개골에 미리 식립된 스테인리스 스틸 나사에 연결하여 VEP 활성 전극을 고정합니다.ERG 활성 전극을 배치하기 전, 신호 품질을 개선하기 위해 전극에 1% carboxymethylcellulose sodium을 소량 떨어뜨립니다. 맞춤 제작된 정위 고정 암(stereotaxic arm)에 부착된 마이크로 조작기를 사용하여 ERG 활성 전극이 각막 중심 표면에 살짝 닿도록 배치합니다. 과량의 액체를 닦아내어 carboxymethylcellulose sodium이 공막이 아닌 각막에만 접촉하도록 합니다.그 다음, 스테인리스강 접지 바늘 전극을 꼬리 피하에 2~5mm 정도 삽입하십시오. 플랫폼을 Ganzfeld 볼에 가깝게 밀어 동물의 눈이 볼의 개구부와 일치하도록 하여 양측 망막에 균일한 조명이 가능하도록 하십시오. 이어서, 외부 소음을 줄이기 위해 패러데이 케이지를 닫으십시오.위의 프로토콜을 사용하여, 가장 어두운 플래시가 하단에, 가장 밝은 플래시가 상단에 위치하도록 다양한 자극에 대한 ERG 파형 스택을 기록할 수 있습니다. 매우 낮은 광도에서는 암소시 역치 반응을 기록할 수 있습니다. 자극의 밝기가 증가함에 따라 파형은 B파가 지배적으로 나타나게 되며, 이후 가장 밝은 자극에서 음성 방향의 A파가 나타납니다.간상체 광수용기 기능은 P3를 사용하여 A파를 모델링함으로써 분석할 수 있습니다. 이 그림은 자극 에너지가 증가함에 따라 P2 진폭이 증가함을 보여줍니다. 간상체 양극세포 기능은 Naka-Rushton 함수를 사용하여 간상체 P2의 강도 반응 이론을 모델링함으로써 분석할 수 있습니다.망막 신경절 세포 기능은 낮은 광에너지에서 분석하며, pSTR 피크 진폭과 타이밍을 통해 정량화합니다. 원추형 양극세포 기능은 쌍섬광 패러다임으로 유도하며, 원추형 P2 피크 진폭과 타이밍으로 정량화합니다. VEP의 진폭 분석은 피크-트러프(peak-trough) 및 트러프-피크(trough-peak) 진폭으로 측정하며, 이를 통해 이러한 반응의 타이밍을 확인합니다.자극 에너지가 증가함에 따라 VEP 파형의 진폭이 증가합니다. 이 기술에 숙달되면 전극 준비, 전극 부착 및 암적응 시간을 제외하고 약 30분에서 45분 이내에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 수행할 때, 특히 전극을 얼마나 정확하게 배치하는지와 암적응을 위해 충분한 시간을 할애하는지에 주의하는 것이 중요합니다.이 절차를 마친 후, 특정 질문에 답하기 위해 질병 수정 또는 치료와 같은 다른 절차를 수행할 수 있습니다. 이 영상을 시청한 후에는 전극을 준비하고 배치하는 방법뿐만 아니라 ERG 및 VEP 파형을 기록하고 분석하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다.

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연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 비디오는 망막 건강과 시력 경로 무결성을 연구하기 위한 쥐 모델의 준비를 보여줍니다. 시각적 유발 전위 및 전기 망막검사 참조 및 활성 전극을 쥐에 연결한 다음, 고르게 망막 조명을 위해 플랫폼을 Ganzfeld 그릇 앞의 쥐와 정렬하고 외부 간섭을 피하기 위해 패러데이 케이지를 닫습니다.

전기생리학 설정을 사용하여 시각적 경로 무결성을 평가하기 위한 RAT 모델 준비

이 비디오는 빛 자극에 대한 반응으로 뇌의 시각 피질에서 나오는 전기 신호를 기록하는 미리 이식된 두개골 전극으로 어둡게 적응하고 마취된 쥐에서 시각적 유발 전위 또는 VEP를 측정하는 과정을 보여줍니다.

쥐 모델의 두개골 전극을 통한 시각적 유발 전위 기록

이 비디오는 마취된 쥐에서 공동 국소 뇌파검사(EEG)와 국소 자기장 전위(LFP)를 동시에 기록하는 절차를 보여줍니다. 이 과정에는 쥐를 준비하고 수염 패드에 자극 전극을 부착하는 것이 포함됩니다. 표면 EEG 측정을 위해 EEG 거미 전극을 쥐의 두개골에 놓습니다. 동시에 다채널 미세전극은 두개골의 버 구멍을 통해 특정 뇌 영역에 삽입되어 국소화된 뇌 영역의 신경 활동을 기록합니다.

마취된 쥐의 동시 뇌파 및 국소 자기장 전위 기록(Concurrent Electroencephalographic and Local Field Potential Recordings in an Anesthetized Rat

이 비디오는 의식이 있는 쥐의 망막전도(ERG)와 시각 유발 전위(VEP)를 기록하는 방법을 보여줍니다. 외과적으로 전극을 이식한 쥐는 먼저 어둠에 적응한다. 확장 점안액을 적용한 후, 동물을 구속기에 넣고 Ganzfeld 그릇에 넣습니다. 그런 다음 ERG 및 VEP 신호가 기록됩니다.

쥐의 망막전도 및 시각 유발 잠재력 기록

이 비디오는 어둡게 적응된 마취된 마우스 망막 색소 상피(RPE)에 직접 결합 망막 전위전도(DC-ERG)를 기록하는 방법을 보여줍니다. 확장 점안액을 적용한 후, 동물을 기록 장치에 넣고 염 완충액으로 채워진 모세관 전극을 각막에 놓습니다. 기준선을 설정한 후 DC-ERG가 기록됩니다.

쥐의 망막 색소 상피에 대한 직접 결합 망막 전기도 기록

망막전위도(ERG)는 빛에 반응하여 망막에서 생성되는 전위입니다. 이 논문은 어둡게 적응한 쥐에서 ERG를 사용하여 망막 기능을 평가하는 방법과 신경 보호 중재(현재의 경우 원격 허혈 전조건)를 평가하는 데 ERG를 사용할 수 있는 방법을 설명합니다.

쥐 망막 및 원격 사지 허혈 양상의 보호 효과에 기능을 평가하기 위해 전위도를 사용하여

국소 탈수초화는 리솔레시틴 미세주입을 사용하여 시신경에서 유도됩니다. 시각 유발 전위는 생체 내에서 시각 경로를 따라 신호 전도를 검사하기 위해 시각 피질에 이식된 두개골 전극을 통해 기록됩니다. 이 프로토콜은 전극 이식 및 시신경 미세 주입의 기초가 되는 수술 절차를 자세히 설명합니다.

실험 시신경의 탈수 초화의 쥐 모델에서 시각 유발 전위 기록

우리는 녹음이 마취 교란없이 실시하고 있습니다 인간의 조건에 더 유사하다 눈 (전위도) 및 의식 쥐의 뇌 (시각 잠재적 유발)에서 시각 전기 생리 신호를 측정하는 수술 주입 및 녹음 과정을 보여줍니다.

의식 쥐에 주입 및 무선 막전위의 기록 및 Visual 사건 관련 전위

이 프로토콜의 공동 화 된 electroencephalography (뇌 파)와 멀티-층 류 지역 필드는 마 취 쥐에 잠재적인 동시 녹음에 대 한 간단한 방법을 설명합니다. EEG 신호의 무시할 수 왜곡을 생산 하는 microelectrode의 삽입에 대 한 두개골에 드릴 버 구멍 표시 됩니다.

공동 화 된 Electroencephalography 및 설치류에서 로컬 필드 가능성의 동시 녹음

국제 표준을 준수하고 망막 어두운 적응을 유지하는 것은 상속 된 망막 질환의 진단 및 관리에서 유효한 전야 전소 전기 전세 음법 반응을 얻는 데 중요합니다. 수술실 환경에서 시트또는 전신 마취 하에 유아와 어린이를 위한 전야 전세 전세전전도를 얻기 위해 휴대용 암실을 사용하는 실용적인 프로토콜이 제공됩니다.

최적의 어두운 적응 및 국제 표준을 달성하기 위해 마취 하에 유아와 어린이를위한 전기 전도소 기록

이 프로토콜의 목표는 아급성 안구 고혈압을 유발하는 변연 혈관 신경총의 360° 열 소작을 기반으로 하는 녹내장 신경 퇴행의 새로운 모델을 특성화하는 것입니다.

설치류의 외과적으로 유도된 녹내장에 대한 Limbal Vascular Plexus의 전체 원형 소작

배우세요 마취된 흰쥐에서 전위도와 시각 유발 전위를 동시에 측정하는 방법을 통해 시각 경로의 기능을 평가하는 기술입니다. 이 방법은 노화와 질병이 시각 경로에 미치는 영향을 연구하는 데 활용됩니다.

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