Name: 슐 리렌 사진의 사용과 주변 질량 분석의 시각화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 49 s
Description: 배우세요 슐리렌 사진술을 이용한 주변 이온화원의 기체 흐름 시각화 방법을 통해 질량분석 이온화 효율을 최적화하고 물리적 현상을 이해하는 기술을 익히세요.

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저자는 이 출판물의 편집과 서식을 제공하는 데 도움을 준 Caitlin Kowalewski에게 감사의 뜻을 전합니다.

1. 슐 리렌 사진 <ol><li> 테스트 지역의 설립 참고 : 시험 영역은 직접 거울 앞에 존재한다. <ol><li> 거울을지지하기에 충분히 큰 링 스탠드 클램프 구형 오목 면경 (직경 150mm, 초점 길이 1,500mm)을 조인다. 바닥에 수직으로 서 링에 미러 링 스탠드 클램프를 연결합니다. 현재의 연구는 3 피트 링 스탠드를 사용하지만, 임의의 높이로는, 소스보기 창에서 미러를 중심 수있을만큼 높이로 사용될 수있다. </li><li> 질량 분석기 소스의 측면에 링 스탠드와 거울을 배치합니다. 소스로서, 상기 미러에 평행 한면을하고, 같은 높이. </li><li> 그 중심이 질량 분석의 중심 소스 영역과 정렬되도록 미러를 배치. 악기의 일부 중복이 발생합니다. </li></ol></li><li> 컷오프, 카메라 및 광원 <ol><li> 절단 <ol><li> 삼각대의 상단에 금속판을 부착합니다. 플레이트는 면도날 광원을 모두 보유하는 플랫폼 역할을합니다. 면도날은 슐 리렌 사진에서 &quot;차단&quot;으로 알려진 역할을합니다. </li><li> 날카로운 에지가 수직이되도록 자석을 이용하여 금속판 면도날 첨부. </li><li> 거울, 3,000mm의 두 배 초점 거리에있는 거울에 맞춰 삼각대를 놓습니다. 미러로부터 반사 된 광의 경로에 직교하는 면도날 정렬. </li><li> 면도날의 날카로운 모서리가 약 거울의 중심과 정렬되도록 수동으로 삼각대의 높이를 조정합니다. 참고 : 미세 조정 후에 발생합니다. </li></ol></li><li> 카메라 <ol><li> 별도의 삼각대에 300mm의 망원 렌즈 디지털 카메라를 탑재합니다. </li><li> (전체 줌에서) 렌즈 뒤에 같은 평에 4cm 직접 그래서 카메라의 위치를면도날로 GHT. 이 때 렌즈 캡을 제거하지 마십시오. </li></ol></li><li> 옵션 모니터 <ol><li> 쉽게 실시간 슐 리렌 현상을 확인하기 위해 컴퓨터 모니터 또는 TV 카메라의 영상 출력을 연결한다. 참고 :이 추천하는 과정입니다. 이 절차를 사용하는 카메라의 종류에 따라 달라질 수있다. </li></ol></li><li> 핀홀 광원 <ol><li> 표지의 중심에 미세 구멍 (직경 약 0.6 mm)을 뚫는다 (이 경우에, 바이알을 캡 플래쉬 동일한 직경을 사용 하였다) 부착 될 수있는 / 광원에 녹화. 덮개가 완전히 손전등 렌즈를 커버하기에 충분한 직경을 가지고 있는지 확인하십시오. </li><li> 호일 테이프를 사용하여 손전등을 LED 200 루멘을 통해 커버를 부착합니다. 참고 : 손전등 따뜻한 얻을 것이다 고온 테이프를 권장합니다. </li></ol></li><li> 광원의 위치 <ol><li> 먼저 라를 사용SER 포인터 광원의 적절한 포지셔닝을 보장하기 위해 미러, 면도날, 그리고 카메라와 광원을 정렬한다. </li><li> 면도날 옆에 금속 접시에 레이저 포인터를 놓습니다. </li><li> 빔은 거울의 중심을 타격되도록 수동으로 레이저 포인터를 이동합니다. 빔의 약 절반이 차단되도록 상기 반사 된 빔이 면도날 직교 교차되도록 필요한 조정한다. </li><li> 수동 빔 정렬이 1.2.5.3으로 달성되지 않은 경우 면도날에 직접 레이저 포인터 빔을 목표로하는 거울의 위치를​​ 조정합니다. 주의! 레이저 포인터 또는 반사 된 광선을 직접 보지 마십시오. </li><li> 카메라에 렌즈 캡을 유지하면서 레이저 빔이 렌즈의 중앙에 있는지 확인. </li><li> 모든 것이 정렬하는 동안 적용 손전등 레이저 포인터를 교체합니다. 손전등은 레이저 포인터와 같은 방향에 있는지 확인하십시오. </li><li> 손전등을 켜고, 흰 종이를 사용하여, 컷오프에서 반사 된 빛을 관찰합니다. 빔이 컷오프에 작은 초점을 맞춘 자리가 있는지 확인합니다. </li><li> 컷오프와 반사 된 광선의 약 절반을 차단하기 위해 모든 수직 조정이 필요합니다. </li><li> 카메라의 렌즈 캡을 제거하고 거울에 초점을 맞 춥니 다. 주 : 카메라 / 렌즈는 수동 초점 모드를 사용하는 것이 좋습니다. </li></ol></li></ol></li></ol> 2. 예 시험 대상 : 질량 분석 이온화 소스 <ol><li> 수동 노즐의 단부와 질량 분석기의 입구 사이에 10mm의 거리를두고, 테스트 영역 내의 질량 스펙트럼 이온 소스를 정렬. </li><li> 수동 질소 소스를 통해 흐르도록 주변 소스 니들 밸브를 연다. </li><li> 질량 분석 장치를 제어하는​​ 데 사용되는 소프트웨어를 연다. 이 연구를 위해 사용 된 소프트웨어는 &quot;SQ 드라이버 &#39;이었다. Fi를 클릭합니다제작 : 다음 적절한 조정 파일을 선택 -open-. </li><li> 수동 조정이 개방되면 주변 소스에 모든 전압 및 온도를 적용합니다. 각 질량 분석기는이 단계에 대한 자신의 소프트웨어를해야합니다. 수동 조정이 개방되면 현재의 연구에서, 버튼 &quot;소스 전압이 꺼져&quot;하고 버튼 &quot;모든 가스 히터가 꺼져&quot;이 작업을 수행합니다. </li><li> 온도가 증가함에 따라 상기 디지털 카메라의 뷰 화면의 슐 리렌 장치와 상기 노즐로부터 방출되는 흐름의 외관을 관찰한다. 노즐의 끝에서 나오는 가스 스트림 ( &quot;결과&quot;절에 설명 참조) 준수하십시오. 가스 스트림은 카메라의 뒷면에서 볼 수 있으며, 혹은 LCD 모니터에 직접 볼 수있다. </li><li> 카메라에서 영상을 기록하거나, 가스 스트림의 사진을 찍는 중 하나에 의해 이미지를 수집 일단 원하는 이미지가 카메라에서 실시간으로 시각화된다. </li><li> 가 camer으로 컴퓨터에 수집 된 화상 (들)을 전송메모리 카드 또는 USB 연결하고 사용자가 선택한 소프트웨어로 이미지를 볼 수 있습니다. </li></ol> 수집 된 이미지에서 스프레이 절반 각도 3. 결정 <ol><li> 이미지보기 소프트웨어를 사용하여 수집 된 이미지를 열고 수집 된 이미지 (들)을 인쇄. </li><li> 자를 사용하여 흐름 방향으로 가스 흐름과 평행 한 중심 축선을 정의하는 인쇄 된 이미지 (들)의 선을 그린다. </li><li> 눈금자를 사용하여 인쇄 된 이미지 (들)에서 시각화 가스 스트림의 가장자리를 따라 선을 그립니다. 이는 비디오 포맷에 존재하는 반짝임에 기록 된 비디오에서 잘 시각화 될 수있다; 인쇄 된 이미지의 가장자리를 식별하는 데 도움이 사용합니다. 분무 반 화각의 범위를 획득하기 위해 상기 가스 흐름의 바깥 쪽 가장자리를 표시한다. </li><li> 중심 축 및 각도기를 사용하여 3.2으로 그린​​ 선 사이에 생성 된 각도를 측정한다. </li></ol>

<ol><li>Settles, G. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSettles%2C+GS+%22Schlieren+and+Shadowgraph+Techniques%3A+Visualization+Phenomena+in+Transparent+Media%22">Schlieren and Shadowgraph Techniques: Visualization Phenomena in Transparent Media</a>. , 1st, Springer-Verlag. Germany. (2001).</li>
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</ol>

이 기사에는 경쟁하는 재정적 이해관계가 없습니다.

이 프로토콜을 시도하기 전에 해결해야 할 몇 가지 고려 사항이 있습니다. 소스 및 미러 질량 분석기 주위 공간에 더하여, 충분한 개방 공간은 거울의 두 배의 초점 거리를 수용 할 수 있어야. 또한, 미러의 크기는 궁극적 연구중인 소스의 크기에 의해 결정된다. 미러가 너무 작 으면, 소스가 완전히 가시화되지 않는다. 이는 원본 커버가 슐 리렌 포토 이미징 기술을 구현하기 위해 제거되어야의 전부는 아니더라도 일부를 주목하는 것이 중요하다. 실제 설정에서 가장 중요한 단계는 슐 리렌 장치의 각 부분의 배향이다. 거울은 거울의 두 배 초점 거리에 정확히 배치해야합니다 바닥과 면도기 블레이드에 수직해야합니다. 이 거리에서, 반사 된 광은 미소 스폿으로서 집광된다. 면도날에 의해 차단되는 빛의 양이 또한있다mportant. 불량한 이미지가 생성되는 경우, 조정하는 제 1 발명은 면도기 면도날의 배치로 할 것이다. 면도날 카메라에 도달하는 빛을 충분히 차단하지 않는 경우에는 콘트라스트가 ...

질량 분석, 분자량 식별에 사용할 수있는 분석 도구는 현재까지 가장 강력한 분석 기술 중 하나가되고있다. 지난 10 년간 새로운 주변 이온화 소스의 모든 호스트는 질량 분석 검출을 위하여 이용 될 수있다. 이 논문에서 수집 한 데이터의 경우, 직접 시료 분석 (DSA) 소스가 이용되었다. 이러한 소스는 매우 다양한 있지만, 실제 이온화 프로세스의보다 상세한 기술은 그 목적 및 최적화의 연장이 필요하다. 이 실험의 목적은 슐 리렌 그래피이라는 기술을 사용하는 장치에서 질소 기류 가시화 통해 주변 소스에서 이온화 과정의 더 나은 이해를 얻을 수있다. 과학 연구는 종종 연구의 목적은 육안으로 투명 경우 어려운 관찰을 시작합니다. 슐 리렌 사진은 눈에 보이지 않는 수 있도록하는 기술이다투명 용지 (1) 내의 굴절률의 변화에 의존을 통해 볼 수있게합니다. 굴절률의 불균일성 시각화를 허용 빛의 왜곡을 야기한다. 슐 리렌 기법은 통상적으로 전기 영동 2-5 단백질 밴드를 시각화 탄도 모델링, 항공 우주 공학, 일반적인 가스 검출 및 모니터링 흐름을 포함한 특수 다양한 분야에 때때로 사용된다. 대부분의 주변 이온화 소스는 이온화를 촉진하기 위해 기류를 사용한다. 다양한 조건 그러나이 실험의 파라미터는 주위 실험실 공기와 상이한 굴절률 가스의 이용을 포함하며, 소스 옵션 존재할 수있다. 이 특정 연구는 뜨거운 질소를 사용합니다. 굴절률 단지 작은 차이는 주로 때문에, RT (6)에서의 가스 흐름 및 공기 순수한 질소 사이에 관찰되는 것을 주목해야한다적외선은 대부분 질소로 구성되어있다. 이러한 문제로 인해 가스가 관찰 할 굴절률 상당한 정도로 변화를 일으키는 기류 순수한 질소의 고온 이때 극복된다. 리얼 타임 (DART)에 대기압 잔광 (FAPA) 8-10, 및 직접 분석을 흐르는 이러한 탈착 대기 화학 이온화 (DAPCI) 7과 같은 다른 질량 분석 원은 11 이온화 소스는 슐 리렌 사진을 사용했다. 이 프로토콜의 목적은 기본 슐 리렌 사진 구성을 사용하여 주변의 이온화를 공부하는 방법에 대해 설명하는 것입니다. 이 기술은, 그러나, 가스 흐름을 포함하는 다른 분석 기법의 임의의 수에 적용 할 수있다.

<table><tbody><tr><td>손전등</td><td>EAGTAC</td><td>D25A Ti</td><td>또는 동급&nbsp;</td></tr><tr><td>구형 오목 거울</td><td>앵커 광학</td><td>27633</td><td></td></tr><tr><td>Rebel EOS T2i</td><td>Canon</td><td>4462B001</td><td>또는 동급&nbsp;</td></tr><tr><td>300mm 망원 렌즈</td><td>Canon</td><td>6473A003</td><td>또는 동급&nbsp;</td></tr><tr><td>직접 시료 분석(DSA) 이온화 소스</td><td>PerkinElmer</td><td>MZ300560</td><td>또는 이와 동등한 것&nbsp;</td></tr><tr>SQ 드라이버 소프트웨어 <td>PerkinElmer</td><td>N2910801</td> 또는 동급이 <td>있는 Sq 300 MS</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>링 스탠드</td><td>Fisher Scientific</td><td>11-474-207</td><td>또는 동급&nbsp;</td></tr><tr><td>레이저 포인터</td><td>Apollo</td><td>MP1200</td><td>또는 동급&nbsp;</td></tr><tr><td>면도날</td><td>Blue Hawk</td><td>34112</td><td>또는 동급&nbsp;</td></tr><tr><td>소형 드릴 비트 #73</td><td>CML 공급</td><td>503-273</td><td>또는 동급&nbsp;</td></tr><tr><td>각도기</td><td>스털링&nbsp;</td><td>582</td><td>또는 이에 상응하는 점수&nbsp;</td></tr><tr><td>호스 클램프</td><td>트라이던트</td><td>720-6000L</td><td>또는 동급&nbsp;</td></tr></tbody></table>

슐 리렌 사진의 사용과 주변 질량 분석의 시각화

Visualization of Ambient Mass Spectrometry with the Use of Schlieren Photography

이 원고는 슐 리렌 사진을 사용하여 질량 분석 주변 이온화 소스를 시각화하는 방법에 대해 설명합니다. 적절 질량 분석을 최적화하기 위하여, 특성화 및 소스의 물리적 원리를 이해하는 것이 필요하다. 대부분의 상용 주변 이온화 소스는 분석 물질의 이온화를 촉진하기 위해, 질소, 헬륨, 또는 대기 공기 제트를 이용한다. 결과적으로 슐 리렌 그래피 실시간으로 시각화 스트림과 주변 공기 사이의 굴절률의 차이를 이용하여 기체 스트림을 시각화 할 수있다. 기본 설정은 카메라, 거울, 손전등, 그리고 면도날이 필요합니다. 적절히 구성된 경우, 소스의 실시간 이미지는 반사를 보면서 관찰된다. 이는 소스 작용 기전에 대한 통찰력을 허용하고, 그 최적화 경로가 설명 될 수있다. 라이트는 달리 눈에 보이지 않는 상황에 흘려된다.

질량 분석기의 이온화 소스를 포함 슐 리렌 설정의 개략적 인 모든 슐 리렌 구성 요소가 제대로 정렬되어 그림 1.에서 찾아 볼 수있다, 시험 영역 내의 가스는 어둡고 밝은 영역을 대조로 볼 수있다. (2)이 대비 될 수있는 방법을 보여줍니다 그림 질량 스펙트럼 소스 변경되는 질소 제트류의 형상은 노즐 크기가 감소함에 따라 방법을 관찰하는데 사용. 소스 가스 유동의 전체, 자르지 슐 리렌 이미지는도 3에서 볼 수있다.이 이미지는 테스트의 방향은 미러에 대해 개체를 나타낸다. 도 3의 화상은 빛의 적정량은 약 50 %, 면도날에 의해 차단 될 때 예상되어야 하는지를 나타낸다. 컷오프는 너무 높은 (그...

이 논문은 schlieren 사진 및 질량 분석법을 사용하여 주변 이온화 소스의 기체 흐름을 시각화하기 위한 프로토콜을 제시합니다.

This manuscript outlines how to visualize mass spectrometry ambient ionization sources using schlieren photography. In order to properly optimize the mass ...

이 실험 절차의 전반적인 목표는 질량 분석법에 사용되는 주변 이온화원의 가스 흐름을 시각화하여 이온화원을 이해하고 최적화하는 것입니다. 이 방법은 이온화 효율과 소스 위치의 관계와 같이 주변 이온화 질량 분석 분야의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 주변 이온화원의 시각화된 가스 흐름을 이용하여 검출 기술과 관련된 물리적 현상을 더 잘 이해할 수 있다는 점입니다.이 방법은 주변 질량 분석법(ambient mass spectrometry)에 대한 통찰을 제공할 뿐만 아니라, 가스 흐름이 포함된 물리적 현상과 같은 다른 시스템에도 적용될 수 있습니다. 이에 대한 예로 항공 역학 분야를 들 수 있습니다. 일반적으로 이 방법에 익숙하지 않은 사용자는 처음에 카메라의 적절한 정렬을 위해 시스템을 수동으로 조정하는 방법을 파악하는 데 어려움을 겪을 수 있습니다.먼저, 거울을 지지하기에 충분한 크기의 링 스탠드 클램프에 구면 오목거울을 고정합니다. 거울이 장착된 링 스탠드 클램프를 바닥과 수직이 되도록 3피트 링 스탠드에 부착합니다. 링 스탠드와 거울을 질량 분석기 소스 옆에 배치합니다.거울 면이 광원과 평행하고 동일한 높이가 되도록 조정합니다. 그런 다음, 거울의 중심이 질량 분석기의 중심 광원 영역과 일치하도록 거울을 배치합니다. 이어서, 삼각대 상단에 금속판을 부착합니다.자석을 사용하여 면도날(컷오프라고 함)을 금속판에 부착하여 날카로운 모서리가 수직이 되도록 합니다. 거울의 초점 거리의 2배 되는 지점에 거울과 일직선이 되도록 삼각대를 배치합니다. 그런 다음, 거울에서 반사된 빛의 경로에 직교하도록 면도날을 정렬합니다.면도날의 날카로운 모서리가 거울의 중심과 대략 일치하도록 삼각대의 높이를 수동으로 조절하십시오. 그 다음, 300 millimeter 망원 렌즈가 장착된 디지털 카메라를 별도의 삼각대에 설치하십시오. 카메라 렌즈가 면도날의 바로 뒤 4 centimeters 지점에 위치하며 높이가 동일하도록 카메라를 배치하십시오.카메라의 비디오 출력을 컴퓨터 모니터에 연결하여 슐리렌 현상을 실시간으로 쉽게 관찰하십시오. 플래시라이트에 부착하기 위해 바이알 캡 중앙에 지름 약 0.6 mm의 작은 구멍을 뚫습니다. 고온용 포일 테이프를 사용하여 200 lumen LED 플래시라이트 위에 바이알 캡을 고정하십시오.모든 구성 요소의 정렬이 정확해야 실험이 성공적으로 진행됩니다. 적절한 위치

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Research

연구

JoVE Journal

Chemistry

화학

레이저 박리 전기 분무 이온화 (LAESI)는 질량 분광법에 대한 대기 압력 이온 소스입니다. 이미징 모드에서 중간 적외선 레이저 프로브 조직 섹션 또는 biofilm에 걸쳐 분자의 배포판. 이 기술은 원래 실험 조건 하에서 수행 다양한 bioanalytical 연구에 대한 새로운 접근법을 제공합니다.

LAESI 질량 분석법에 의해 생물 학적 조직 및 Biofilms의 대기 압력 분자 이미징

단일 세포 분석 레이저 박리 전기 분무 이온화 (LAESI) 질량 분광법에 대한 세포 샘플을 날카롭게 광섬유를 사용하여 대기압에서 식물과 동물 세포의 대량 분석법에 의해 수행됩니다.

대기압에서 질량 분석법에 의해 단일 ​​세포의 직접 분석

싱크로트론에서 조정할 진공 자외선의 photoionization 질량 분석기에 연결된 분자 빔 절연 가스 상태의 분자와 클러스터의 전자 구조를 탐색 할 수있는 편리한 도구를 제공합니다. DNA베이스 dimers의 양자 전송 메커니즘이 기법으로 elucidated했다.

조정할 수있는 진공 자외선 (VUV) 싱크로트론 방사선으로 분자 빔 질량 분광법

본 논문에서는 다양한 재료의 화학 물질의 물질 전달 매개 변수를 정량화하기위한 절차가 표시됩니다. 이 프로세스는 실시간으로, 고진공에서 질량 분석법에 의해 기록 된 방출 프로파일을 수증기 역 확산 기반의 분석 모델을 이용하는 것을 포함한다.

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여기에서는 MS 분석을 위한 소형 다기능 장치인 단일 프로브를 사용하여 조직의 주변 질량 분석 이미징(MSI)과 현장 라이브 단일 세포 MS(SCMS) 분석을 모두 수행하기 위한 프로토콜을 제시합니다.

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대기압에서 작동하는 질량 분석 이미징(MSI) 소스는 중적외선 레이저 탈착과 전기 분무 후 이온화를 결합하여 개발되었습니다. 외인성 얼음 매트릭스는 조직 관련 물질의 공명 탈착을 촉진하기 위해 에너지 흡수 매트릭스로 사용되었습니다. 이 원고는 전신 신생아 마우스의 IR-MALDSI MSI를 수행하기 위한 단계별 프로토콜을 제공합니다.

적외선 매트릭스 보조 레이저 탈착 전자 분무 이온화에 의한 전신 질량 분석 이미징 (IR-MALDESI)

명시야, 2차 고조파 생성(SHG) 이미징 방식과 함께 광대역 진동 합-주파수 생성(VSFG) 이미지를 얻기 위해 다중 모드의 빠른 초분광 이미징 프레임워크가 개발되었습니다. 적외선 주파수가 분자 진동과 공명하기 때문에 대칭 허용 샘플에 대한 미세한 구조 및 중경 형태 지식이 드러납니다.

라인 스캐닝 진동 합계-주파수 생성 현미경을 사용한 다중 모드 비선형 초분광 화학 이미징

이 프로토콜은 탈착 전기분무 이온화와 Orbitrap 질량분석기를 결합하여 고공간 해상도 대사체 분석을 위한 OVCAR-8 세포의 단일 세포 질량분석법 영상을 설명합니다.

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단백질의 입체 구조와 역학은 단백질 구조 및 기능 사이의 관계를 이해하기위한 열쇠이다. 고해상도 질량 분광법과 결합 수소 교환은 단백질의 형태 적 역학 연구뿐만 아니라 접촉 인터페이스 및 알로 스테 릭 효과를 포함하여 단백질 - 리간드와 단백질 - 단백질 상호 작용을 특성화하기 위해 다양한 방법이다.

수소 환율 질량 분석을 사용하여 단백질의 역학 분석

전기 분무 이온화 orbitrap 질량 분석법에 의한 수은(II)과 디시스테인닐 테트라펩타이드의 서로 다른 상대적 비율로 형성된 복합체의 특성화가 제시됩니다.

전자 분무 이온화 질량 분석에 의해 Dicysteinyl Tetrapeptides와 수은 (II)의 복합체 형성에 관한 연구

배우세요 슐리렌 사진술을 이용한 주변 이온화원의 기체 흐름 시각화 방법을 통해 질량분석 이온화 효율을 최적화하고 물리적 현상을 이해하는 기술을 익히세요.

슐 리렌 사진의 사용과 주변 질량 분석의 시각화

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