Name: 쥐에이 dimethylnitrosamine 유도 된 간 섬유화 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-17T14:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 27 s
Description: 배우세요 쥐에서 DMN으로 간 섬유화를 유도하고 조직학적 검사로 평가하는 방법을. 이 모델은 항섬유화제 효능 테스트와 간 질환 진행 연구에 활용됩니다.

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저자는 싱가포르 교육부의 보조금 번호 MOE2010-IF-1-025의 자금 지원을 인정합니다.

모든 동물 실험은 응용 과학의 학교, 테마섹 폴리 테크닉의 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다. DMN 1. 준비 <ol><li> 피펫 (200) DMN의 μL (1 ㎍ / ㎖ 원액)와 주입을위한 10 ㎎ / ㎖의 DMN 용액을 제조 PBS의 19.8 ml를 추가합니다. 참고 : DMN은 발암입니다. 동물의 주사를 DMN을 준비하고 수행하는 흄 후드를 사용합니다. </li></ol> DMN 2. 복강 내 주사 <ol><li> 200g - 150의 평균 무게 남성의 Wistar 쥐를 사용합니다. 실험의 시작 7 일 전 - 4 쥐를 적응. </li><li> 12 시간 빛과 12 시간 어두운 사이클, 22 ± 1 ℃의 실온에서 쥐를 유지한다. 쥐 Chow 및 임의 량의 물을 제공한다. </li><li> 매일 음식과 물 섭취량을 측정합니다. 체중 주간을 측정합니다. </li><li> 10 mg / kg 체중의 투여 량에 기초하여 각각의 래트에 대해 DMN의 양을 계산한다. 25 게이지 바늘 t으로 1 ML의 주사기를 사용하여오 주사기에 DMN 솔루션의 계산 된 볼륨을 그립니다. </li><li> 복강 내 주사 (21)의 쥐를 억제. </li><li> 쥐가 제대로 억제로, 복부의 오른쪽 아래 사분면에 바늘을 소개 복부 공간에 바늘의 정확한 위치를 확인하고 천천히 DMN 솔루션을 주입 (아무것도 흡입 될 수 없습니다) 주사기의 플런저에 다시 그립니다. </li><li> DMN의 용량이 투여되면, 천천히 바늘을 인출하고 샤프 함으로 처리. </li><li> 4 주간 일주일에 3 일 연속 DMN의 복강 내 주사를 수행합니다. 매일 같은 시간에 주사 투여. 주사 매주의 시작에서의 체중에 기초하여 용량을 다시 계산한다. </li><li> 생화학 적 매개 변수를 측정하기 위해 꼬리 정맥 주에서 혈액을 수집 : 알라닌 아미노 전이 효소 (ALT)와 아스 파르 테이트 아미노 전이 효소 (AST) 22. </li><li> 상업 수의사를 사용하여 측정 혈청 ALT 및 AST테스트 화학 분석기. </li></ol> 3. 총 검사 및 간 수확 <ol><li> 100 mg / kg 체중의 용량으로 복강 내 펜토 바르 비탈의 주사에 의해 래트를 안락사. 심장 박동의 부족을 확인하여 죽음을 확인합니다. </li><li> 사후 부검을 준비하고 복부 위쪽으로 향하게 지느러미 드러 누움의 해부 보드에 파킨슨 병 등. (23) 장소 죽은 쥐에 의해 설명 된대로 동물의 상태를 평가합니다. </li><li> 소독 및 70 % 에탄올로 피부를 적셔. </li><li> 가위를 사용하여 피부를 턱 항문에서 ventrum의 전체 길이를 절개하고, 피부를 반영한​​다. 가위로 복부 내장을 노출, 칼 모양의 연골에 항문에서 복벽을 절개. </li><li> 어떤 이상이 있는지 확인하기 위해 현장에서 복부 장기를 검사합니다. 색상, 크기 변화, 장기의 위치 및 복강 내의 액체의 존재를 참고. 검사기관의 일관성과 어떤 냄새의 존재를 확인합니다. </li><li> 가위와 집게를 사용하여, 그것의 인대 및 첨부 파일의 전체 간 무료 해부. <ol><li> 이 진동판에 부착 된 hilus에서 시작 및 첨부 파일의 모든 간 로브를 무료로 작동합니다. 조심스럽게 모든 인대, 혈관을 잘라. </li></ol></li><li> 배양 접시에 간 이동 및 간 무게. </li><li> 5mm 간 로브의 두께 섹션 - 메스를 사용하여, 2를 잘라. 일관성을 위해, 항상 같은 간 로브에서 샘플을 채취. 고정을 위해 오른쪽 측면 로브에서 두께에 쐐기를 10 % 포르말린에 lobe.Immediately 장소의 가장자리에서 약 24 1cm를 약 5 mm 직경을 가지고. 포르말린 볼륨 조직 1:10 이상인 것을 확인. </li><li> 다른 연구에 필요한 경우 수확은 바로이 시점에서 간 로브 (액체 질소를 사용하여) 부분을 고정. 일관성을 위해 같은 간 엽에서 (3.8), 샘플에 관해서. </li></ol><ol><li> 24 시간 이상 동안 10 % 완충 포르말린에서 간 샘플을 고정한다. </li><li> 고정 후, 간을 잘라 카세트에 배치하고 자동화 된 조직 프로세서의 바구니에로드. </li><li> 10 % 포르말린을 포함하는 제 1 스테이션에 카세트와 바구니를 놓습니다. 확인 카세트가 완전히 침수된다. 사이클이 시작될 때까지 그들은 최대 12 시간 동안이 방에서, 남아있을 수있다. </li><li> (50 %, 70 %, 90 %, 100 % (2 국), 크실렌 (2 연)과 유동 파라핀의 농도의 에탄올 : 다음 방법을 포함하는 연속 스테이션을 통해 1 시간마다 카세트 회전 티슈 프로세서 프로그램 2 연). </li><li> 매립 역 왁스 욕에 간 샘플을 옮긴다. 매립 기계는 적어도 한 시간 빠른 켜져 있는지 확인합니다. </li><li> 사용하여 미리 예열 집게는 (65 ° C)에서, w에서 각 카세트를 제거매립 기계의 따뜻한 판 (65 ° C) 상에 도끼 목욕 및 장소. 스테인레스 강 기재 금형 내로 유동 파라핀의 충분한 양을 조제 전체의 절반까지 (65 ° C로 미리 예열). 금형에 카세트에서 간 부분을 전송합니다. 시험편의 절단면에 배치되어 있도록 상기 몰드의 바닥 평면 (현미경으로 검사한다). </li><li> 액체 파라핀 완전히 금형을 채우기 위에 빈 카세트를 장착하고 적어도 30 분 동안 냉각 매립 기계의 4 ° C를 판에 금형을 배치합니다. </li><li> 왁스가 냉각 및 응고 것을 확인하고, 몰드에서 파라핀 블록을 제거합니다. 블록은 쉽게 튀어과 스틱 또는 균열 안된다. 이 경우, 블록을 용융이 단계를 반복합니다. 이 응고 후 파라핀 블록을 절단 할 수있다. 블록은 수년 동안 실온에서 저장 될 수있다. </li><li> 왁스 층까지 10 μm의 두께로 마이크로톰 및 구역에 파라핀 블록을 배치내장 된 간 조직이 표시 될 때까지 충분히 제거된다. </li><li> 5 μm의 두께로 잘라 마이크로톰의 설정을 변경합니다. 집게를 사용하여, 모서리를 잡고 잘 절단 부분을 집어 조심스럽게 40 ℃에서 수조에서 섹션 로트. </li><li> 부드럽게 부동 섹션에서 깨끗한 유리 슬라이드를 배치하고 유리 슬라이드의 표면에 올립니다. 하룻밤 37 ° C에서 따뜻한 슬라이드에 슬라이드를 놓습니다. </li></ol> 5. 메이슨 트리 크롬 염색 <ol><li> 다음과 같이 얼룩을 적용하기 전에, 상기 왁스를 제거하고 조직을 재수 슬라이드 치료 : <ol><li> 5 분 동안 크실렌의 섹션을 담가. 배를 반복합니다. </li><li> 3 분 동안 100 % 에탄올 섹션을 담가. 1 배를 반복합니다. </li><li> 90 %, 80 % 및 70 % : 1 분 에탄올의 다음과 같은 솔루션의 각 섹션을 담가. </li></ol></li><li> 슬라이드에 기존의 에탄올을 제거하기 위해 수돗물에서 슬라이드를 씻어. </li><li> 핵을 염색하는 10 분 동안 철 헤 마톡 실린 슬라이드를 담가. </li><li> 슬라이드에서 여분의 얼룩을 제거하기 위해 물에 슬라이드를 씻어. </li><li> 세포질을 염색하는 데 2​​ 분 동안 Biebrich 스칼렛 - 산 푹신에서 슬라이드를 담가. </li><li> 물 슬라이드를 씻어. </li><li> 아닐린 블루의 흡수를 촉진하기 위해 10 분 동안 포스 / 몰리브덴 산 용액에 슬라이드를 놓습니다. 사용의 2 라운드 경기 인 텅스텐 / 몰리브덴 산 용액을 변경합니다. </li><li> 콜라겐 섬유를 염색하는 10 분 동안 아닐린 블루 솔루션에 슬라이드를 놓습니다. </li><li> 물을 초과 얼룩을 씻어 차별화 슬라이드의 색이 더 섬세하고 투명 렌더링하는 자리를 차지할 수 있도록 1 분 동안 1 % 아세트산 용액에 슬라이드를 배치합니다. </li><li> 물 슬라이드를 씻어 조직 섹션을 탈수로 진행합니다. 다음과 같이 탈수 단계는 다음과 같습니다 </li><li> 다음 conce에, 10 초 때마다 연속적으로 슬라이드를 빠져에탄올 ntrations : 70 %, 80 %, 95 % 및 100 %. </li><li> 100 % 에탄올에 30 초간 담가 슬라이드. 1 배를 반복합니다. </li><li> 5 분마다 제거하는 에탄올 자일 렌의 3 국을 통해 슬라이드를 씻어. </li><li> 설치 미디어 (예를 들어, DPX의 mountant)와 시편 위에 유리 커버 슬립을 마운트하고 건조 할 수 있습니다. 주 : DPX는 빨리 건조 얼룩을 보존하고 조직 절편 보호 합성수지이다. </li></ol> 간의 메이슨의 Trichome 스테인드 섹션 6. 섬유증 점수 <ol><li> 수의학 병리학이 25 개의 점수 섬유증에 따라 섬유화의 정도를 평가합니다. 섬유화 점수가 맹검 방식으로 독립적으로 두 개 또는 세 개의 병리학 자에 의해 수행되는 경우가 최적 일 것이다. 이러한 시나리오에서는 득점의 차이점을 제압 토론 및 그룹의 검토 후 최종 점수를 얻을 수 있습니다. </li></ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> 점수 </td><td> 기술 </td></tr><tr><td> 0 </td><td> 어떤 섬유증 없습니다 </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 또는 짧은 섬유 성 격막이없는 일부 포털 지역의 섬유 확장, </td></tr><tr><td> 이 </td><td> 또는 짧은 섬유 성 격막이없는 대부분의 포털 영역의 섬유 확장, </td></tr><tr><td> 삼 </td><td> 대부분의 포털 영역의 섬유 확장, 포털에 가끔 포털 (PP) 브리징 </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 중앙 (PC에 표시 브리징 ((PP를 포털에 포털)뿐만 아니라 포털과 포털 지역의 섬유 확장) </td></tr><tr><td> (5) </td><td> 가끔 결절 (불완전 간경변)와 (PP 및 / 또는 PC)를 브리징 표시 </td></tr><tr><td> 6 </td><td> 간경변, 가능성 또는 확정 </td></tr></tbody></table> 표 1 : 섬유증은 메이슨의 Trichome 스테인드 간 섹션 (25) 읽기에 사용 점수.

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</ol>

저자는 더 경쟁 재정적 이해 관계가 없음을 선언합니다.

우리는 간 섬유화 동물 모델을 만들기 위해, 간 섬유증의 정도를 평가하는 방법을 설명 하였다. DMN의 정확한 용량을 제공하고 주간 복강 내 주사의 일정을 준수하는 것이 중요합니다. 실험이 진행되는 동안, 래트 체중 및 DMN 주사의 매주의 시작시에 용량을 다시 계산하는 것이 중요하다. DMN은 독성과 연기 캐비닛에서 처리 될 필요가 명심하십시오. 우리는뿐만 아니라 연기 캐비닛에 복강 주사를 수행합니다. 반복 주사의 필요성으로 주입 억제 및 정확한 기술은 내장에 오염 물질의 도입 및 손상을 방지하는 것이 중요하다. 우리는 거의 복강 내 주사에서 사망률이 없습니다. 쥐 실험 기간 동안 하루에 2 배 모니터링해야합니다. DMN 주입의 마지막 주 동안, 동물들은 죽어가는 징후를 더 자주 밀접하게 관찰해야한다. 이 요정 인간 손상이 가장 심한 및 영향을받는 쥐가 inappetent 할 때 OD는 체중과 조건을 잃게됩니다. 25 - 어떠한 의학적 개입이 없으면 쥐의 40 %가이 기간 ...

DMN은 강력한 간 특정 독소이다. 래트의 간 부상을 야기하기 위해 대사 조직 분포 및 능력 매기 1로보고하고, 아폽토시스에 의한 간세포 손상과 세포 사멸의 메카니즘은 프리 차드 및 버틀러 (2)에 의해 설명되었다. 이 화합물의 간헐적 투여 개와 쥐 3,4에서 간 섬유증을 유발하는 것으로보고되었다. 메커니즘과 간 섬유증의 형태 학적 변화는 광범위하게이 모델을 사용하여 조사되었다. 래트를 사용하는 초기 연구에서, DMN 3 주간의 치료 지방증 5없이 micronodular 간경변 뒤에 중심 소엽 출혈성 괴사를 일으켰다. 그것은 초기 섬유화에 그를 줬습니다 형성 콜라겐 더 크로스 타입 I (6)보다 더 눈에 띄는되는 유형 III와 연결했다. 다른 원인에 대해 공통적으로, DMN 유발 섬유증 변화는 쿠퍼 ​​세포에서의 증가와 관련되었다; 내가 상주 간 대 식세포n은 사인 곡선. 이 세포는 근육 섬유 모세포로 변신하고 섬유증 7의 기본 문제가 세포 외 기질의 과도한 양을 생산하고 있습니다. 세포 신호 전달의 측면에서, 나카무라 등. TGF-β는 간 섬유증 (8)의 진행에 중요한 역할을한다는 것을 입증 하였다. 그들은 특히 TGF-β 신호를 억제하기 위해, 절단 II 형 TGF-β 수용체를 발현하는 아데노 바이러스를 사용했다. 대조군에 비해 이들 쥐의 간 섬유증은 눈부시게 DMN 처리 동안 중단 하였다. 다른 연구는 TGF-β의 억제가 간 섬유증 개발 9,10의 완화로 연결 것으로 확인되었습니다. 이 모델은 또한 항 섬유증 치료 11 약물 표적으로 사용할 수있는 다른 섬유증 마커 단백질을 식별하기위한 글로벌 유전자 프로파일 링 연구에서 사용 하였다. 기타 화학 물질을 포함 티오 아세트 아미드 (TAA)와 C를 간 섬유화를 유도하는 데 사용ARBON 테트라 클로라이드 (사염화탄소). TAA는 쥐에서 이상 마우스 (12)에서 처음 사용되었다. 이 모델의 장점은 다음과 같습니다 : 화학 물질 관리의 용이성을 물, 특성 micronodular 간경변 및 생화학 적 변화 모델의 재현성을 마시는. 단점은 다음을 포함한다 : 간 섬유증 3 개월 장기간 개발 및 간 섬유증의 유도 분자 메카니즘에 대한 이해의 부족. 사염화탄소에 관해서는, 그것의 사용은 다음과 같은 이유로 거절했다 : 그것은 인간의 간 질환을 모방하지 않습니다, 오존층에 해로운 영향이 동물에게 고통과 고통의 원인, 인간에게 매우 독성 및 취급에 제공되는 추가주의 사항 및 필요합니다 처분 13, 14. 간경변에 대한 실험 모델로 (수술 적 치료에 의해) 장기간 담관 폐쇄가 먼저 Kountouras 등. (15)에 의해보고되었다. 이 방법은 인간과 동물에 독성이있다. However 개발하는 간 섬유증에 필요한 시간은 변한다. 마르케스 등. (16) 30 보고서의 검토, 간 섬유증 개발하는 것이 수술 후 4 주 7 일간 갔다 것으로 나타났습니다. 설명 병리학 적 변화는 인간의 만성 담즙 성 섬유증의 사람들을 모방하고 모델이 분야에 관심있는 연구자에 대한 더 적합 할 것이다. 요약하면 4 주 동안 쥐에 DMN의 일정한 용량의 간헐적 투여은 인간의 질병을 모방 간 섬유증을 생산하고 있습니다. 투여 된 쥐 간 손상 및 실질 섬유화 4,17의 진보적 인 발전을 보여줍니다. 질병의 진행 정도와 특정 시점에서 혈액 샘플 또는 동물의 희생을 통해 감시 할 수 있으며, 그 효과는 18 재현성이다. 따라서이 모델은 광범위 간 섬유화 및 간경변의 메커니즘을 연구뿐만 아니라 잠재적 인 항 섬유증 제제 10,19,20 스크리닝하기 위해 사용되어왔다.

<table><tbody><tr><td>디메틸 니트로사민</td><td>Wako</td><td>147-03781</td><td></td></tr><tr><td>포르말린</td><td>시노팜 화학 물질</td><td>F63257009</td><td></td></tr><tr><td>에탄올</td><td>시그마</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>크실렌</td><td>피셔</td><td>1330-20-7</td><td></td></tr><tr><td>Masson 트리 홈 염색</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>아닐린 블루</td><td>전자 현미경 과학#</td><td>42755</td><td></td></tr><tr><td>Acid Fuschin</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>RT42685</td><td></td></tr><tr><td>Scarlet Red</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>#26905</td><td></td></tr><tr><td>포스포텅스텐 산 수화물</td><td>ALFA AESAR</td><td>ALFA40116.4</td><td></td></tr><tr><td>포스포몰리브딕산 수화물</td><td>시그마 SG</td><td>221856-25G</td><td></td></tr><tr><td>Weigert's Iron Hematoxilyn</td><td>Merck</td><td>1.15973.0002</td><td></td></tr><tr><td>DPX 마운팅 미디엄</td><td>Merck</td><td>HX066873</td><td></td></tr><tr><td>티슈 프로세서</td><td>Leica</td><td>Leica TP 1020</td><td></td></tr><tr><td>임베딩 머신</td><td>Sakura</td><td>&nbsp; Sakura Tissue Tek TEC5 임베딩 시스템</td><td></td></tr><tr><td>Microtome</td><td>Leica Leica</td><td>RM 2235</td><td></td></tr><tr><td>수의사 검사 분석기</td><td>Idexx</td><td>수의사 검사 8008</td><td></td></tr></tbody></table>

쥐에이 dimethylnitrosamine 유도 된 간 섬유화 모델

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

세 개의 주에서 6 수컷 위 스타 래트 간 섬유화 동물 모델을 제조 하였다. 이 과정은 일주일에 세 가지 일 연속 복강 주어진 10 ㎎ / ㎏이 dimethylnitrosamine (DMN)의 투여 4 주 필요합니다. DMN이 알려진 hepatoxin과 발암 물질로 복강 주사는 흄 후드에서 수행 하였다. 이 모델은 몇 가지 장점이 있습니다. 첫째, 간 변경은 순차적으로 또는 관심의 특정 단계에서 공부하실 수 있습니다. 둘째, 간 질환의 단계 혈청와 ALT 및 아스 파르 테이트 아미노 트랜스퍼 라 아제 (AST) 효소의 측정에 의해 모니터링 될 수있다. 셋째, 다른 단계에서 간 손상의 정도는 메이슨의 Trichome 염색 간 조직의 조직 학적 검사 한 후, 지정된 시점에서 동물을 희생하여 확인할 수있다. DMN 투여 4 주 후, 전형적인 섬유화 점수는 5 Ishak 규모 6이다. 이 모델은 일관되게 재생 될 수있다널리 전위 항 섬유증 제제의 효능을 평가하기 위해 사용된다.

DMN 처리 된 쥐들은 체중을 잃고 주름 장식 헤어 코트 덜 활발한된다. DMN 처리 된 쥐의 평균 체중에 상당한 손실이; 제 2 검출 후의 DMN 처리 주,이 차이는 DMN 처리 (도 1a) 후 3 주와 4를 통해 유지된다. 쥐가 연속 주간 DMN을받을 때, 간 손상은 작아됩니다. 간 지수; 이는 최종 체중의 간 중량의 비율이 DMN 처리 된 쥐들 (도 1b)에 대한 낮았다이다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/54208/54208fig1.jpg" /> 그림 1 : A) DMN의 바디 무게는 쥐를 처리 하였다. 데이터는 SD ± (- 8 N = 6) 수단으로 표시됩니다. * P &lt;정상 대조군 b) 간 인덱스에 비해 0.05.; DMN의 최종 체중...

쥐에서 간 섬유증의 동물 모델을 제작하는 방법을 설명하고, 간의 조직학적 검사를 통해 섬유화의 정도를 평가합니다. 이 모델은 간 질환의 발병을 연구하고 잠재적인 항섬유화제의 효능을 테스트하는 데 사용할 수 있습니다.

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

이 절차의 전반적인 목표는 잠재적인 항섬유화제의 효능을 평가하는 데 사용할 수 있는 간섬유화 동물 모델을 제작하는 것입니다. 이 동물 모델은 간 내 섬유화의 본질과 발달 과정, 그리고 항섬유화제가 섬유화 과정을 어떻게 감소시키는지에 관한 핵심적인 질문들에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 또한, 이 모델은 초기부터 후기 단계의 섬유화까지 인간 간 질환의 복잡한 생리학적 과정을 모사하므로, 질병의 어느 관심 시점에서든 연구가 가능합니다.이 방법을 처음 사용하는 연구자는 den-glis-nov 동물 모델 구축에 최소 5주가 소요되므로 작업 흐름을 계획해야 합니다. 간을 적출한 후, 병리학자가 특수 염색된 절편을 검토할 수 있을 때까지 처리 과정에 1~2주가 더 소요됩니다. DMN은 스톡 용액에서 PBS를 사용하여 10 mg/mL로 희석해야 합니다.해당 물질은 발암물질이므로, 이 희석 과정을 수행할 때는 반드시 흄 후드 내에서 작업하십시오. 실험을 위해 150~200g 사이의 수컷 Wistar 쥐를 선택합니다. 쥐를 일반적인 기후 조건의 사육 시설에서 최소 4일 동안 적응시킵니다.사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 제공하고 일일 섭취량을 측정합니다. 매주 쥐의 체중을 측정하고 혈액 샘플을 채취합니다. DMN 처리를 위해 흄 후드에서 10 mg/kg 용량을 준비하여 주사합니다.25 gauge 바늘을 사용하여 복부의 우하복부에 복강 내 주사합니다. 쥐에게 3일 연속으로 주사하고, 이 과정을 4주 동안 매주 반복합니다. 항상 동일한 3일 동안 주사하며, 중요한 점은 4주 동안 매주 DMN 용량을 조절하는 것입니다.마지막 주입 4~5일 후에 DMN 처리된 동물을 안락사시킵니다. 해부판 위에서 복부 피부를 70% ethanol로 소독하고 적십니다. 그런 다음 가위를 사용하여 항문부터 턱까지 피부를 절개하고 양옆으로 젖힙니다.다음으로, 항문에서 검상연골까지 복벽을 절개하여 복강 내 내장을 노출시킵니다. 색상, 크기, 위치의 부적절함이나 복막강 내 액체 유무와 같은 장기의 이상 여부를 확인하십시오. 또한 장기의 경도를 촉진하여 확인하고 이상한 냄새가 나는지 기록하십시오.다음으로 간을 분리합니다. 간문과 횡격막 부착 지점에서 시작하여 간 주변을 따라 작업하며, 주변 인대와 혈관으로부터 간을 분리합니다. 그 후, 간을 접시에 옮기고 무게를 기록합니다.이제 메스를 사용하여 간엽 하나에서 절편 제작을 위해 엽 내부로 1~2cm 정도 들어

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

담즙 흐름의 중단은 형태학적 변화의 특징적인 시간 의존적 순서와 함께 심각한 염증성 담즙 유발성 간 손상을 초래합니다. 여기에서는 21일에서 28일 후에 강한 섬유화 반응을 유도할 수 있는 마우스의 총담관 수술 결찰에 대한 프로토콜을 제시합니다.

마우스의 담관 결찰 : 폐쇄성 담즙에 의한 염증성 간 손상과 섬유화의 유도

과도한 세포외 기질 단백질의 침착으로 인한 지속적인 섬유화는 간경변증을 유발합니다. 알코올 남용은 심각한 간 질환의 주요 원인 중 하나입니다. 우리는 알코올로 인한 부상 시 간세포 재생을 촉진하는 메커니즘과 전략을 연구하기 위해 에탄올 유도 제브라피시 섬유성 간 모델을 구축했습니다.

Zebrafish의에서 에탄올에 의한 섬유 성 간 모델의 개발은 전구 세포 매개 간세포의 재생을 연구하는

여기는 콜린 결핍 및 ethionine 보충 (CDE) 다이어트의 먹이로 쥐에 만성 간 상해를 유발 하는 일반적인 방법에 설명 합니다. 상태 모니터링, 간 관류, 절연 및 보존 설명합니다. 6 주 시간 코스 간 부상, pathohistology, 섬유 증, 염증, 간 조상 세포 응답에 대 한 알릴 수 있다.

Murine 콜린 불충분 한, Ethionine 보충 (CDE) 다이어트 만성 간 상해의 모델

우리 비-침략 적 multimodal 접근 bleomycin의 이중 intratracheal 주입에 의해 유도 된 마우스 폐 섬유 증 모델의 경도 평가 대 한 마이크로-CT와 형광 분자 단층에 따라 이미지를 설명 합니다.

Multimodal 접근을 이미징 Bleomycin 유도 폐 섬유 증 생쥐에서의 경도 평가 대 한 마이크로-CT와 형광 분자 단층에 따라

현재 연구에서 개발된 급성 간 부전 동물 모델은 잠재적인 치료법의 연구를 위한 실행 가능한 대안을 제시합니다. 현재 모델은 물리적 및 약물 유발 간 손상의 결합 된 효과를 채택하고 새로운 치료의 잠재력을 연구하기에 적합한 시간 창을 제공합니다.

70% 부분 간 절제술과 아세트아미노펜을 결합하여 급성 간 기능 부전의 쥐 모델 생성

이 프로토콜은 마우스에서 가능한 정밀 절단 간 조각의 생산을위한 간단하고 신뢰할 수있는 방법을 제공합니다. ex vivo 조직 샘플은 여러 날 동안 실험실 조직 배양 조건 하에서 유지될 수 있으며, 간 병리학을 검사하는 유연한 모델을 제공합니다.

뮤린 정밀 절단 간 슬라이스 간 생물학의 Ex Vivo 모델로

우리는 담도 폐쇄증(BA)에 대한 바이러스 유발 간 섬유증 기계론적 연구에 적합한 동물 모델과 향후 BA 치료를 위한 플랫폼을 제공하는 만성 간 섬유증의 마우스 모델을 확립했습니다.

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본 연구에서는 블레오마이신을 기도에 주입하여 폐섬유증(PF-PH) 랫트 모델과 관련된 폐동맥 고혈압을 유발하는 방법을 소개합니다. 또한 이 동물 모델을 검증하기 위한 단계별 접근 방식을 제공합니다.

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대사 기능 장애, 간 유전자 발현 변화 및 진행성 섬유증 3기로 진행되는 섬유증을 포함하여 인간 MASLD와 유사한 간 조직병리학적 변화를 동반한 대사 기능 장애 관련 지방성 간 질환(MASLD)의 마우스 모델. 이 모델은 MASLD 병태생리학 연구 및 새로운 치료법의 전임상 연구에 사용할 수 있습니다.

섬유증을 동반한 대사성 기능 장애 관련 지방성 간 질환의 마우스 모델

고유 한 쥐의 간 문부 클램프 모델은 허혈 - 재관류 손상을 완화의 약물 분자의 영향을 연구하기 위해 개발되었다. 이 모델은 직접 간 전송을 허용, 포털 정맥의 지점을 통해 허혈성 간 세그먼트 포털 공급의 직접 삽관이 포함되어 있습니다.

쥐 간 문부 클램프 모델을 사용하여 직접 분절 인트라 간 납품 방법

배우세요 쥐에서 DMN으로 간 섬유화를 유도하고 조직학적 검사로 평가하는 방법을. 이 모델은 항섬유화제 효능 테스트와 간 질환 진행 연구에 활용됩니다.

쥐에이 dimethylnitrosamine 유도 된 간 섬유화 모델

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