Name: VacuSIP, 개선 INEX 방법에 대한 현장에서 미립자의 측정 및 용존 화합물은 액티브 서스펜션 피더에 의해 처리 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-08-03T11:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 57 s
Description: 학습하세요 VacuSIP 방법을 통해 저서성 여과섭식동물이 흡입하고 배출하는 물에서 미립자와 용존 화합물을 정량화하는 기술을. 이 방법은 자연 조건에서 오염 없이 정확한 수질 샘플링을 가능하게 합니다.

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우리는 현장에서 자신의 도움을 MANEL 리바 감사합니다. 우리는 우리의 연구 및 샘플링 권한 그들의 지원을위한 &quot;파크 천연 델 Montgrì, 레 레스 메디아 나는 엘 Baix 테르&quot;에 감사하고 있습니다. 수중 매니퓰레이터는 Ayelet Dadon-Pilosof에 의해 설계된 씨 Pilosof에 의해 제작 하였다. 이 작품은 스페인 정부 프로젝트 CSI-산호 [RC 및 MR에 허가 번호 CGL2013-43106-R]에 의해 TM에 &quot;Ministerio 드 EDUCACION, Cultura y를 Deporte (MECD)&quot;에서 FPU의 교제에 의해 지원되었다. 이 G. 야헬에 카탈로니아 정부 [허가 번호 2014SGR1029]와 ISF 부여 13분의 1,280 및 BSF 보조금 2,012,089에 의해 자금 해양 생지 화학의 기여와 글로벌 변화 연구 그룹입니다.

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준비 단계 DOM 및 영양 분석을 위해 수집 튜브 수집 용기 용해 마이크로 성분과 상호 작용할 수 있고, 샘플러 벽 성장 30-34, DOM 영양 컬렉션 상이한 바이알 테스트 한 세균에 대한 기판 일 수 있기 때문이다. 샘플 신속 (30) 냉동하지 않는 경우 유리 병은 최대 두 배 실리카의 초기 농도를 증가시킬 수 있기 때문에 붕 규산염은 실리카 정량화 33, 35 사용하지 않는 것이 좋습니다. 우리의 결과는 미리 청소 EPA 유리 병을 사용하면 특히 암모늄을위한, DOC, DON, 무기 영양소에 대한 낮은 농도의 공백을 초래 것을 보여줍니다. DOC 여과 및 저장 <p class="jo...

저서 서스펜션 피더는 해양 생태계 (1)의 기능에 중요한 역할을한다. 물 2,3 대량 필터링함으로써, 그들은 제거하고 미립자 (플랑크톤과 암설) 및 (내부 및 참조) 용해 화합물 (1)을 배설 및 저서 - 원양 커플 링 4,5 영양 순환 6,7의 중요한 에이전트입니다. 정확하게 미립자 및 용해 화합물을 제거하고 (예 : 스폰지, 해초 강, 다모류 및 이매패 류 등) 저서 서스펜션 피더에 의해 배설을 측정하는 그들의 생리, 대사, 및 공급 생태를 이해하는 것이 필수적입니다. 함께 속도 측정을 펌핑하여, 또한 이러한 유기체 수질뿐 아니라 생태계 규모 과정에서 자신의 생태 영향에 의해 매개되는 영양소 플럭스의 정량화 할 수있다. 제거 및 생산 입자의 속도와 용해 닷컴을 측정하는 적절한 방법을 선택서스펜션 필터 피더에 의해 파운드는 먹이 활동 (8)에 관한 신뢰할 수있는 데이터를 얻기 위해 매우 중요하다. Riisgård 등 부적절한 방법 바이어스 결과가 지적한 바와 같이, 실험 조건을 왜곡 섭취와 특정 물질의 배설의 잘못된 추정을 생산,이 미생물에 의해 처리 된 영양 플럭스의 잘못된 정량화 될 수 있습니다. 두 가지 가장 자주 사용되는 방법은 배양 (간접 기술) 또는 주위의 동시 수집 및 호기 물 (직접 기술)를 포함하는 필터 피더의 입자 용해 영양 플럭스를 측정합니다. 배양 방법은 배양 물에 미립자의 농도로 용해 영양소의 변화율을 측정하고, 적절한 제어 8에 비해, 생산 제거 속도를 추정에 기초한다. 그러나, 배양 챔버에서 생물을 둘러싸는 자사의 feedin을 변경할 수 있습니다g 인해 및 / 또는 식품 농도, 또는 때문에 배설 배양 물 7,9의 화합물 (참고 문헌 내부)의 축적 산소의 감소로 인해 자연스러운 흐름 정권의 변화에 행동을 펌핑. 협착 및 변형 물 공급의 효과에 더하여, 배양 기술이 중요한 바이어스 재 여과 효과 (예 10 참조)로부터 유래한다. 이 방법론의 문제 중 일부가 배양 용기 (11)의 오른쪽 체적 형상을 사용하거나 반응계 12 재순환 벨자 시스템의 도입으로 극복되었지만,이 기술은 종종 분리 및 생산 속도를 과소. 이러한 용존 유기 질소 (DON)과 탄소 (DOC) 또는 무기 영양소로 용해 화합물의 신진 대사를 정량화, 배양 기술 (13)에 의해 발생하는 편견에 특히 발생하기 쉬운 것으로 입증되었습니다. 60 년대 후반과 70 년대 초반, 헨리 Reiswig에서9,14,15 별도로 현장에서 미생물에 의해 흡입과 호기 물을 샘플링하여, 거대한 카리브해 스폰지에 의해 입자 제거를 정량화하기 위해 직접 기술의 응용 프로그램을 개척했다. 작은 현탁액 공급기에보다 어려운 조건 중 Reiswig의 기술을 적용하는 어려움으로 인해,이 분야에 대한 연구의 대부분은 주로 간접 배양 기법을 이용한 16 (시험 관내) 실험실로 제한 하였다. 야헬와 동료들은 작은 규모의 환경에서 작업 할 현장 기술에 Reiswig의 직접적인을 튼튼. 그들의 방법은 INEX (16)라고, 방해받지 생물에 의해 (예) (에서) 흡입과 호기 물을 동시에 수중 샘플링을 기반으로합니다. 샘플 쌍 (INEX) 사이의 물질 (예를 들면, 박테리아)의 다양한 농도는 동물에 의한 물질의 보존 (또는 제조)의 측정치를 제공한다. INEX 기술은 개방형 튜브를 고용하고수동적으로 수집 튜브로 주변의 물을 대체 연구 유기체의 펌핑 활동에 의해 생성 된 excurrent 제트에 의존한다. 야헬 및 동료가 성공적으로 15 개 이상의 서로 다른 서스펜션의 연구에이 기술을 적용하고 있지만 분류군을 피더 (예를 들어, 17), 메소드가 일부 excurrent 오리피스의 소문자 크기에 의해, 필요한 연습과 경험의 높은 수준에 의해 제한되고,로 바다의 조건. 이러한 장애를 극복하기 위해, 우리는 예약 튜브를 통해 상기 샘플링 된 물 흡입 조절 (외경 &lt;1.6 mm)에 기초하여 대안적인 기술을 발전시켰다. 우리의 목표는 저서 서스펜션 피더의 excurrent 구멍으로 깨끗하고 아주 특정 지점에서 현장 물 샘플링 제어 허용 단순하고 안정적이며 저렴한 장치를 만드는 것이 었습니다. 효과적이기 위해서는, 상기 방법은 주위의 유동 체제 영향 또는 B를 수정하지 않도록 비 간섭이어야연구 된 생물의 ehavior. 여기에 제시된 장치 VacuSIP 불린다. 그것은 야헬 동부 등에 의해 개발 된 SIP 시스템의 단순화이다. 깊은 바다에서 ROV 기반 포인트 샘플링 (2007) 18. VacuSIP은 원래 SIP보다 훨씬 저렴하고는 스쿠버 기반 작업에 적용되고있다. 이 시스템은 실험실 설정에 대한 라이트와 스티븐스 (1978) 19 Møhlenberg 및 Riisgård (1978) (20)에 의해 제공되고 시험 원칙에 따라 설계되었습니다. VacuSIP 시스템 저서 현탁액 공급기의 대사 반응계의 연구를 위해 설계되었지만, 또한 실험 연구에 이용 될 수 있고, 제어 깨끗 포인트 소스 물 샘플 목적지가 요구된다. 현장 filtrations 또는 장기간 (최소 시간)에 걸쳐 통합이 필요한 경우 시스템이 특히 유용합니다. VacuSIP 2011 년 이후 야헬 실험실에서 성공적으로 사용하고, 또한이되었습니다카리브해와 지중해 스폰지 종 (21)에 의해 매개 영양 플럭스의 두 최근 연구에 사용 된 (Morganti 등. 제출). VacuSIP이 적용되는 특정 샘플러 장기간 샘플링 기간, 현장 조건의 사용은, 수집, 필터링하고 민감한 분석을위한 샘플을 저장하기위한 표준 프로토콜 해양 다소 차이를 수반한다. VacuSIP 시스템 또는 수집 후에 세균 활성에 의해 샘플링 물의 변형의 위험에 의한 오염의 위험을 줄이기 위해, 반응계 여과 및 저장 과정에서 각종 시험. 다른 여과 장치, 수집 용기 및 저장 절차 용존 무기 (PO 4 3-, NO X - NH 4 +, 그런가 4)의 분석에 가장 적합한 기술을 달성하기 위해 조사하고, 유기 (DOC + DON)를 화합물 및 초 플랑크톤 (&lt;1081; m) 및 입자상 유기 (POC + PON) 샘플링. 또, 특히 현장 조건 하에서, 오염의 위험을 최소화하기 위해, 처리 공정 수를 최소한으로 감소시켰다. 상기 방법은 제시되는 영상 포맷은 재현성을 용이하고 효율적으로하는 기술을 적용하는데 필요한 시간을 단축하도록 배향된다. 시스템 개요 2mm 작게 exhalant 오리피스와 서스펜션 피더에서 현장 펌핑 물 샘플, 각 시편의 펌핑 활동은 첫째 옆에 흡입 구멍 (들)과 excurrent 개구 (16)로부터의 흐름을 관찰에 형광 염색 해수를 여과 해제하여 가시화 (18 2B 그림도 참조). 연구 표본 (된 유입 및 excurrent)에 의해 흡입과 호기 물은 동시에 맞춤형 조작에 설치된 분 튜브의 한 쌍의 사용으로 또는 &quot;아칸소의 두에 샘플링거꾸로 유연한 휴대용 삼각대의 MS &quot;(그림 1 및 보충 비디오 1). 연구 유기체에 의해 흡입 물은 조심스럽게 내부 또는 연구 유기체의 흡입 구멍 근처에 하나 관의 기단부의 위치에 의해 수집된다. 동일한를 튜브는 다음 excurrent 구멍 안쪽에 위치한다.이 작업은 퇴적물 재 부유하여 예를 들어, 연락처 또는 동물의 방해를 피하기 위해 잘 관리해야합니다. 샘플링을 시작하려면, 다이버가 부착 된 주사기 바늘로 수집 용기에 격벽을 관통 샘플링 튜브를 통해 용기에 샘플링 된 물을 강제로 외부 수압 있도록 각각의 튜브의 말단부. 흡입 나란히 바이알에서 생성 된 진공에 의해 외부의 물과 배기 샘플 컨테이너의 압력 차에 의해 개시 . 호기의 물을 깨끗한 수집을 보장하고 AMBI의 실수로 흡입을 방지하기 위해엔트 물 (16)은 물 샘플링 레이트는 excurrent 유량보다 현저하게 낮은 비율 (&lt;10 %)로 유지 될 필요가있다. 흡입 속도는 상기 튜브의 길이와 내경 (ID)에 의해 제어된다. 작은 내경도 무시할 죽은 볼륨 (&lt;튜브의 미터 당 200 μL)을 보장한다. 장기간 (시간 분)에 걸쳐 샘플링이 가능 관심의 대부분 물질의 고유 patchiness를 통합 할 수 있습니다. 샘플을 적절하게 실험실로 운송뿐만 아니라 장시간 수중 샘플링 세션에서 유지되는 것을 보장하기 위해 현장 여과에 민감한 분석하는 것이 좋습니다. 샘플링 용기, 여과 어셈블리 및 튜브의 선택은 연구 생물 및 특정 연구 문제에 의해 결정된다. 아래에서 설명하는 프로토콜은 전체 신진 대사 프로필 (개요는 그림 2 참조) 관심이 있다고 가정합니다. 그러나, 프로토콜의 모듈 특성은 F 허용또는 쉽게 수정은 단순 또는 매우 다른 샘플링 방식을 수용한다. 전체 대사 프로파일 샘플링 프로토콜은 다음 단계를 포함한다 : (1) 유동 가시화하는 단계; (2) 샘플링 초 플랑크톤의 먹이 (플랑크톤 &lt;10 μm의); (3) (인라인 필터를 사용하여) 무기 영양소의 흡수와 배설을 샘플링; (4) 샘플링 유기 흡수와 배설을 용해 (인라인 필터를 사용) (5) 미립자 공급 및 배설 (인라인 필터를 사용) (6) 2 단계를 반복합니다 (품질 검사 등 매우 플랑크톤 먹이); (7) 시각화 흐름. 논리적으로 가능한, 그 대사 프로파일 측정 속도 펌프와 결합되는 것이되는 경우 (예를 들면, 염료 프론트 속도에있어서, 16)뿐만 아니라, 호흡 측정과. 이러한 측정은 최고의 샘플링 세션의 시작과 끝에서 수행된다. 호흡 측정, 수중 optodes 또는 마이크로 전극이 바람직하다.

<table><tbody><tr><td>GorillaPod, 오리지널</td><td>Joby</td><td>GP000001</td><td>유연한 휴대용 삼각대&nbsp;</td></tr><tr><td>플랜지리스 페룰</td><td>IDEX 건강 및 과학&nbsp;</td><td>P-200X</td><td>1/16" 블루/pk</td></tr><tr><td>남성 너트</td><td>IDEX 건강 & 과학</td><td>P-205X&nbsp;</td><td>1/16" 그린/10&nbsp; PK</td></tr><tr><td>여성에서 여성으로 Luer</td><td>IDEX 건강 & 과학&nbsp;</td><td>P-658</td><td></td></tr><tr><td>암-수 Luer</td><td>IDEX 건강 & 과학&nbsp;</td><td>P-655</td><td></td></tr><tr><td>Peek 튜빙 (254&nbsp; &마이크로; m ID)</td><td>IDEX 건강 및 과학&nbsp;</td><td>1531</td><td>1/16" 외경 x 0.01&nbsp; ID x 5&nbsp; 피트 길이. 대체 ID를 사용할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>2액형 수지 에폭시</td><td>IVEGOR</td><td>9257</td><td>사용 전에 2액형 수지를 잘 혼합</td></tr>하십시오<tr><td>(TOC) EPA 바이알</td><td>Cole -Parmer</td><td>03756-20</td><td>40ml 유리 바이알. Thomas Scientific에서 제조했습니다(참조 번호 9711F09).</td></tr><tr><td>HDPE 바이알</td><td>Wheaton</td><td>986701 (E78620)</td> <td>20ml 고밀도 폴리에틸렌 바이알</td></tr><tr><td>Vacuette Z 첨가제 없음</td><td>Greiner bio-one</td><td>455001</td><td>제조업체에 의한 사전 진공&nbsp;</td></tr><tr><td>셉텀 샘플 병</td><td>토마스 사이언티픽</td><td>1755C01</td><td>250 ml 유리병&nbsp;</td></tr><tr>HDPE 바이알용 <td>Septum Cap 1</td><td>Wheaton</td><td>W240844SP (E7865R)</td><td>22-400&nbsp;</td></tr><tr><td>Septum Cap 2</td><td>Wheaton</td><td>W240846 (1078-5553)</td> <td>24-400 유리병 및 병용. 또한 Thermo Scientific National에서 제조합니다(ref. 03-377-42).</td></tr><tr><td>인라인 스테인레스 스틸 Swinney 필터 홀더</td><td>Pall</td><td>516-9067</td><td>직경 13 mm</td></tr><tr><td>PTFE 씰 워셔</td><td>Pall&nbsp;</td><td>516-8064</td><td>스테인리스 스틸 필터 홀더용</td></tr><tr><td>링 TCLP 유리 필터</td><td>Pall&nbsp;</td><td>516-9126</td><td>바인더가 없는 유리 섬유 필터, 13&nbsp; 직경의 mm, 기공 크기 0.7&nbsp; &마이크로; m</td></tr><tr><td>폴리카보네이트 필터 홀더</td><td>Cole -Parmer</td><td>17295</td><td>13 mm 직경의</td></tr><tr><td>Isopore 멤브레인 필터</td><td>Millipore</td><td>GTTP01300</td><td>13&nbsp; 직경의 mm, 기공 크기 0.2&nbsp; &마이크로; m</td></tr><tr><td>Contrad 70 솔루션&nbsp;</td><td>Decon Labs</td><td>1002</td><td>음이온 및 비이온 계면활성제 용액의 고용해성 기본 혼합물&nbsp;</td></tr><tr><td>멸균 주사기 필터</td><td>VWR International Eurolab S.L.</td><td>514-0061P</td><td>25&nbsp; 직경의 mm, 기공 크기 0.2&nbsp; &마이크로; m</td></tr><tr><td>플루오레세인</td><td>시그마-알드리치</td><td>(구 참조28802) 46955-100G</td><td>100&nbsp; g</td></tr><tr><td>Holdex, 일회용, 멸균</td><td>Greiner bio-one</td><td>450263</td><td>멸균, 일회용 튜브 홀더, Vacuette 멸균 바늘용 오프센터 루어가 있는</td></tr><tr><td></td><td>IcoGammaPlus</td><td>5160</td><td>0.7&nbsp; mm x 30&nbsp; mm</td></tr><tr><td>Cryovials Nalgene</td><td>Nalgene</td><td>V5007(Cat. No.5000-0020)</td><td>2&nbsp; ml</td></tr><tr><td>크라이오박스 카톤&nbsp;</td><td>루비라보르</td><td>M-600</td><td>145x145x55&nbsp; mm p/마이크로튜브 1.5&nbsp; ml</td></tr><tr><td>Orthophosphoric Acid</td><td>Sigma</td><td>79617 또는 대안적으로 초순수 염산을 사용, 최종 콘서테이션 0.1%</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>Sigma</td><td>P6148</td><td>500&nbsp; g</td></tr><tr><td>글루타알데히드</td><td>Merck</td><td>8,206,031,000</td><td>25%, 1 L</td></tr><tr><td>핸드 진공 펌프&nbsp;</td><td>B&uuml; 알클&nbsp;</td><td>5620-2181 또는 표준 실험실 진공 펌프</td><td></td>를 사용하십시오</tr></tbody></table>.

vacusip, 개선 inex 방법에 대한<em&gt; 현장에서</em&gt; 미립자의 측정 및 용존 화합물은 액티브 서스펜션 피더에 의해 처리

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

저서 서스펜션 피더는 해양 생태계의 기능에 필수적인 역할을 합니다. 많은 양의 물을 여과하고, 플랑크톤과 찌꺼기를 제거하고, 미립자 및 용해된 화합물을 배설함으로써 저서-원양 결합을 위한 중요한 매개체 역할을 합니다. 현탁 피더(예: 스폰지, 아시디안, 다모류, 이매패류)에 의해 제거 및 배설되는 화합물을 정확하게 측정하는 것은 이들의 생리학, 신진대사 및 섭식 생태학에 매우 중요하며, 이러한 유기체에 의해 매개되는 영양 플럭스의 생태학적 관련성을 결정하는 데 필수적입니다. 그러나 현탁액 공급기가 자연에서 미립자 및 용존 화합물을 처리하는 속도의 평가는 현재 사용 가능한 방법론의 한계에 의해 제한됩니다. 우리의 목표는 저서 서스펜션 피더의 현류 조리개와 같은 특정 지점에서 깨끗하고 제어된 물 샘플링을 현장에서 수행할 수 있는 간단하고 신뢰할 수 있으며 방해가 되지 않는 방법을 개발하는 것이었습니다. 우리의 방법은 맞춤형 매니퓰레이터 장치에 설치되고 샘플링된 유기체의 호기 구멍 내부에 조심스럽게 배치된 미세한 튜브를 사용하여 연구된 유기체의 흡입 및 내쉬는 물을 동시에 샘플링할 수 있습니다. 각 튜브의 말단 끝에 부착된 주사기 바늘로 수집 용기의 격막을 뚫으면 외부 압력이 샘플링된 물을 샘플링 튜브를 통해 용기로 천천히 밀어 넣을 수 있습니다. 느리고 제어된 샘플링 속도를 통해 물에 내재된 고르지 못한 부분을 통합하는 동시에 오염 없는 샘플링을 보장할 수 있습니다. 당사는 다양한 미립자 및 용존 화합물의 분석을 위한 가장 적합한 여과 장치, 수집 용기 및 저장 절차에 대한 권장 사항을 제공합니다. VacuSIP 시스템은 자연 조건에서 방해받지 않는 현탁 피더 대사를 정량화할 수 있는 신뢰할 수 있는 방법을 제공하며, 저렴하고 배우기 쉽고 다양한 생태계에서 필터 피더의 생리학 및 기능적 역할을 평가하기 위해 적용할 수 있습니다.

해수 수집 방법의 최적화 컬렉터 튜브 및 청소 절차의 선택 VacuSIP 호환 수집 용기 샘플링 주사기 바늘 관통에 의해 개시 될 수있는 격벽을 가져야한다. 그들은 높은 수중 압력 (수심 작업 일반적인 스쿠버에서 2-3 바)를 견딜 수 있어야하며 진공을 유지해야한다. 대부분 (전부는 아니지만 브랜드) 휘발성 유기물의 분석을 위해 EPA의 승인을 유리 병의 이러한 기준을 충족. DOC와 DON 분석을 위해 승인 된 사전 청소 유리 병도 사용할 수 있습니다. 수집 및 분석 영양 및 청소 절차를 최적화하는 이러한 병의 적합성을 테스트하기 위해, 높은 품질의 증류수가 산 청소 폴리 ...

우리는 깨끗하고 정확한 물 샘플링을 위한 간단하고 비침습적이며 신뢰할 수 있는 방법인 VacuSIP를 소개합니다. 이 시스템은 미립자 및 용해된 화합물의 제거 및 배설을 깨끗하게 측정하기 위해 저서 현탁액 공급기가 현장에서 흡입 및 내쉬는 물을 동시에 수집하기 위해 개발 및 평가되었습니다.

VacuSIP, 개선 INEX 방법에 대한<em&gt; 현장에서</em&gt; 미립자의 측정 및 용존 화합물은 액티브 서스펜션 피더에 의해 처리

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and ...

이 방법의 전체적인 목표는 자연 조건에서 저서 현탁물 섭식자가 흡입하고 배출한 물의 수집기를 세척하여, 이들이 제거하고 배설한 입자성 및 용존 화합물을 정량화하는 것입니다. 용존 유기물 및 암모니아 분석을 위한 수집 용기를 준비할 때는 세척된 새 EPA vial을 사용하십시오. 다른 영양소를 샘플링할 때는 EPA glass vial을 사용하십시오.규산염 분석에는 HDPE 바이알을 사용하십시오. 바이알과 캡을 고품질 2중 증류수로 헹굽니다. 그다음 천공된 실리콘 격막을 새것으로 교체하고, 바이알과 캡을 10% 염산에 최소 3일 동안 담가둔 후 고품질 2중 증류수로 3회 헹굽니다.영양액 사용을 위해 유리 바이알을 추가로 준비하려면, 450 °C에서 4시간 동안 가열한 후 가마 내에서 식힙니다. 그 후 캡을 닫고 바이알을 알루미늄 호일로 감쌉니다. 다음으로 0.2 µm 필터링한 계면활성제를 DDW와 혼합하여 5% 용액을 준비합니다.이제 연소된 바인더 프리 유리 섬유 필터를 세척된 인라인 스테인리스 스틸 swinnex 필터 홀더 내부에 넣으십시오. 그런 다음 산 세척된 시린지를 사용하여 필터링된 계면활성제 용액 100 milliliters를 전체 어셈블리에 통과시킵니다. 고품질 2중 증류수 100 milliliters를 사용하여 어셈블리를 깨끗하게 헹구십시오.필터 어셈블리를 실리카 샘플링용으로 사용하는 경우, 폴리카보네이트 필터로 준비하고 5% 염산을 30 milliliters 통과시킨 후, 고순도 이중 증류수 30 milliliters를 통과시킵니다. PEEK 튜빙을 사용하여 수중 작업용 시스템을 조립하십시오. 필요한 길이를 준비하려면 날카로운 칼이나 PEEK 커터를 사용하십시오.각 튜브에 시린지 바늘이 연결된 수형 루어 커넥터를 장착하십시오. 파란색 무플랜지 페룰의 평평한 면이 튜브 끝단과 일치하는지 확인한 후, 녹색 너트를 손으로 조이십시오. 그런 다음 절연 테이프를 사용하여 PEEK 튜브를 삼각대 암에 고정하여 맞춤형 조작기를 제작하십시오.다음으로, 캡이 씌워진 일회용 주사바늘을 수형 루어 커넥터(male luer connectors)에 연결합니다. 샘플링 장비에 명확하게 라벨을 부착하고, 흡입 및 배출 샘플링 구성 요소를 구분하기 위해 흡입측은 파란색 테이프로, 배출측은 노란색 테이프로 색상 코드를 표시합니다. 마찬가지로, 순차적으로 번호가 매겨진 용기 쌍을 더 쉽게 식별할 수 있도록 샘플링 용기에도 색상 코드를 표시합니다.이제 다이빙 전 샘플링 용기 내부를 비워주십시오. 가급적 성능이 좋은 진공 펌프를 사용하는 것이 좋습니다. 표준 동결건조기(Lyophilizer) 또한 고진공을 제공하므로 적절히 사용할 수 있습니다. 마지막으로 다이빙에 필요한 모든 샘플링 용기를 순서대로 배치하십시오.모든 샘플링 단계를 미리 계획하고 그에 맞춰 준비물을 챙기십시오. 먼저, 흡입구 근처에 여과된 형광 염료를 방출하여 표본이 펌핑 중인지 확인하고, 염료가 배출구 쪽으로 나오는지 확인하십시오. 다음으로 VacuSIP 장치를 설치하고 장치가 안정적으로 고정되었는지 확인하십시오.그 다음 흡입 샘플링 튜브를 흡입구 내부에 또는 매우 가까이 배치하되, 흡입 튜브가 다른 배출구 근처에 있지 않도록 주의하십시오. 이어서 배출 샘플링 튜브를 배출 사이펀 방향으로 조심스럽게 향하게 한 뒤, 사이펀 안으로 1~5 mm 정도 매우 부드럽게 삽입합니다. 샘플링 대상 생물과 접촉하거나 이를 방해하지 않도록 각별히 주의하십시오.그 후 샘플링 어셈블리를 작업하기 적절한 가까운 거리에 고정합니다. 맞춤형 매니퓰레이터를 사용하는 경우, 흡입관과 배출관의 위치 선정 시에도 동일한 주의를 기울이십시오. 초미세 플랑크톤 샘플링에는 필터가 필요하지 않습니다.울트라-플랑크톤을 채집하려면 바늘을 사용하여 흡입 및 배출 진공 튜브의 격막을 뚫으십시오. 물이 떨어지는지 확인하고 각 튜브에서 2~6 mL의 물을 수집하십시오. 규산염의 경우, 바늘과 튜브의 증류단에 있는 루어 수컷 커넥터 사이에 폴리카보네이트 막이 장착된 인라인 스테인리스 폴리카보네이트 필터 홀더를 설치하십시오.그런 다음 준비된 HDPE 바이알의 중격 캡을 뚫어 샘플링을 시작합니다. 용존 유기물 및 무기물을 샘플링하려면 바이알 세 쌍을 준비하십시오. 하나는 질산염 및 인산염용, 하나는 암모니아용, 그리고 세 번째 쌍은 용존 유기물용입니다.용존 유기물 또는 영양분을 채취하려면 폴리카보네이트 필터 어셈블리를 사전 소성된 유리 필터가 포함된 세척 완료된 인라인 스테인리스 스틸 필터 홀더로 교체하십시오. 그런 다음 EPA 유리 바이알의 셉텀 캡을 뚫어 채취를 시작합니다. 용존 무기물은 제조사에서 세척한 새 EPA 유리 바이알 또는 기술된 프로토콜에 따라 세척하여 재사용하는 EPA 바이알에 수집되었습니다.재사용된 바이알에서는 더 높은 암모니아 농도가 보고되었으나, 다른 값들은 유사했습니다. 순수를 여과하여 용해된 유기 및 무기 영양소를 테스트함으로써 스테인리스 스틸 필터 홀더와 폴리카보네이트 인라인 Swinnex 필터 홀더를 비교했습니다. 각 홀더에 폴리카보네이트 막과 사전 연소된 유리 섬유 필터를 사용하여 테스트했습니다.스테인리스 스틸 필터 홀더와 소성된 유리 섬유 필터의 조합이 가장 효과적이었습니다. 시료의 품질을 테스트하기 위해 유세포 분석기로 세포 수를 측정하였습니다. 흡기-호기 시료 쌍이 적절하게 수집되었을 때, 호기수 내의 대부분의 세포가 제거되었습니다.반대로, 부적절한 수집 방법으로는 동일한 결과를 얻지 못했습니다. VacuSIP를 적절하게 사용했을 때, 분석된 대부분의 화합물에서 제거 또는 배출 패턴이 분명하게 나타났습니다. 본 연구에서 관찰된 측정값은 지중해 해면에서 얻은 것입니다.

vacusip-an-improved-inex-method-for-situ-measurement-particulate

Research

연구

JoVE Journal

Environment

환경

이 프로토콜은 원위치 동물 생성 흐름에의 부량 위해 설계 자체에 포함된 수중 velocimetry 장치 (SCUVA)를 사용하는 방법에 대한 지침을 제공합니다. 또한,이 프로토콜은 현장 조건으로 인한 문제를 해결하고, 운영 모션, 동물의 예측 위치, 그리고 SCUVA의 방향을 포함하고 있습니다.

양적 측정 현장에서</em독립적인 수중 Velocimetry 장치 (SCUVA)을 사용하여> 흐름

이 작업에서는 SMPS와 ICPMS 시스템의 결합을 설정하는 여러 단계와이를 사용하는 방법을 설명하는 실용적인 가이드가 제공됩니다. 세 가지 설명 예제가 제공됩니다.

스캐닝 모빌리티 사이 저 및 유도 결합 플라스마 질량 분석기 (SMPS-ICPMS)의 결합에 관한 실용 가이드

우리는 제자리에 액체 스캐닝 전자 현미경 검사 법에 의해 실시간 이미징 및 이온된 수 boehmite 입자의 원소 조성 분석에 대 한 절차를 제시.

제자리에서 액체 SEM을 사용 하 여 물에 Boehmite 입자의 특성

쌍 각 조개 연체 동물의 여과 및 수 유 동작 척도를 biodeposition 메서드를 사용 하 여에 대 한 흐름을 통해 장치 선상 사용에 대 한 수정 되었습니다. 내장 장치 주위 2 차원 짐 벌 테이블 해외 조개 양식 사이트에서 쌍 각 조개 여과 변수의 정확한 정량화 함으로써 보트 모션에서 장치를 분리 합니다.

디자인 및 쌍 각 조개 서 스 펜 션 바다에서 먹이 측정 기구 사용

여기, 선물이 휴대용 셀룰러 졸 노출을 수행 하 고 세포질 응답을 측정 하는 프로토콜. 메서드 사용 셀, vivo에서 생리학을 흉내 낸 공기 액체 인터페이스에서 성장 합니다. 구리 나노 입자에 어로 졸에 세포질 응답 반응성 산소 종 생성 및 세포 독성 젖 산 효소 방출으로를 통해 산화 긴장으로 관찰 되었다.

새로운 휴대용 체 외에 노출 카세트 졸 샘플링에 대 한

이 프로토콜은 진공 보조 흡착제 추출 방법을 사용하여 생물학적 샘플에서 휘발성 유기 화합물을 추출하는 방법, Entech 샘플 준비 레일을 사용한 질량 분광법과 결합 된 가스 크로마토그래피 및 데이터 분석을 설명합니다. 또한 생물학적 샘플 및 안정한 동위원소 프로빙의 배양을 기술한다.

진공 보조 흡착제 추출을 통해 인간 관련 샘플에서 활발히 생산된 미생물 휘발성 유기 화합물 포획

OCTOPUS라는 별명을 가진 다중 하위 단계 교환으로 구현된 펜던트 드롭 표면 필름 균형은 원래 벌크 용액과 시뮬레이션된 위장관액의 순차적 하위 단계 교환을 통해 소화 상태를 모방할 수 있습니다. 시뮬레이션된 체외 소화는 소화된 계면층의 계면 장력을 현장에서 기록하여 모니터링됩니다.

시험관 내 시뮬레이션된 위장관액의 다중 하위 단계 교환 을 통한 단일 액적의 에멀젼 소화

분석 기술로서 나노 미터 규모의 전기 비활성 입자를 계산하고 특성화하는 데 점점 더 중요한 접근 방식 인 나노 충격 전기 화학은 초 미세 전극 사용으로 인해 발생하는 이질적인 전류 분포로 인해 정밀도가 떨어집니다. 여기에 요약된 것은 이러한 측정의 정밀도를 향상시키는 "전기 촉매 중단"이라고 하는 일반화된 접근 방식입니다.

개별 전기 비활성 입자의 정확한 전기화학적 크기 조정

세포외 소포체는 생물의학 응용 분야에 엄청난 가능성을 가지고 있지만, 현재의 분리 방법은 시간이 많이 걸리고 임상적으로 사용하기에는 비실용적입니다. 이 연구에서는 최소한의 단계로 연속적으로 많은 양의 생체 유체에서 세포외 소포체를 직접 분리할 수 있는 미세유체 장치를 제시합니다.

분기된 A4F 미세유체 장치를 사용한 대용량 시료에서 세포외 소포의 단일 단계 분리

이러한 미국의 랍스터 어업으로 악용 갑각류 어업에 어업에 의한 변화는 잠재적 짝짓기 성공의 감소로 이어지는, 생식 역학에 영향을 미칠 수 있습니다. 이 연구의 목표는 생리 학적으로 또는 기능적으로 성숙 될 수 있습니다 여성의 바다 가재의 짝짓기 성공을 판명하기위한 비 침습적 방법을 개발하는 것이 었습니다.

에 대한 비 침습적 방법<em&gt; 현장에서</em&gt; 여성 미국의 바닷가에 연결 성공 (의 결정<em&gt; Homarus의 americanus</em&gt;)

학습하세요 VacuSIP 방법을 통해 저서성 여과섭식동물이 흡입하고 배출하는 물에서 미립자와 용존 화합물을 정량화하는 기술을. 이 방법은 자연 조건에서 오염 없이 정확한 수질 샘플링을 가능하게 합니다.

VacuSIP, 개선 INEX 방법에 대한

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