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DOI: 10.3791/54241-v
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화학 요법으로 항생제에 이르기까지 약물을 포함 nephrotoxins에서 발생하는 신장 손상은, 그 발병 기전 불완전하게 이해 남아 복잡한 질환이 발생할 수 있습니다. 이 프로토콜은 제브라는 신장 보호 대책의 식별에 적용 할 수있는 이러한 조건의 질병 모델에 사용할 수있는 방법을 보여준다.
이 프로토콜의 전반적인 목표는 제브라피시를 사용하여 겐타마이신 또는 시스플라틴과 같은 신독소의 효과를 관찰하여 급성 신장 손상을 모델링하는 것입니다. 이 기술의 주요 장점은 제브라피시 모델을 통해 급성 신장 손상 후 세포 손상 및 재생을 실시간으로 이미징할 수 있다는 것입니다. 이 절차를 시작하려면 5인치 직선 절제 바늘 끝에 젤 로딩 팁을 부착하고 테이프 또는 슈퍼 접착제로 고정하여 마이크로 주입을 위해 배아를 배치하기 위한 배아 조작 도구를 준비합니다.
다음으로, 피펫 풀러를 사용하여 필라멘트가 있는 화염 광택 붕규산 유리를 당겨 미세한 테이퍼 마이크로 주입 바늘을 준비합니다. 그런 다음 면도날이나 가는 집게 가장자리를 사용하여 바늘 끝을 잘라 날카롭고 각진 주입 팁을 만듭니다. 그런 다음 바늘 끝을 보호하기 위해 페트리 접시의 모델링 점토 스트립에 바늘을 놓습니다.
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