Imaging Cleared Embryonic and Postnatal Hearts at Single-cell Resolution

Wasay M. Shaikh Qureshi; Lianjie Miao; David Shieh; Jingjing Li; Yangyang Lu; Saiyang Hu; Margarida Barroso; Joseph Mazurkiewicz; Mingfu Wu

doi:10.3791/54303

JoVE Journal
Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Imaging Cleared Embryonic and Postnatal Hearts at Single-cell Resolution

영상은 단일 셀 해상도에서 배아 및 출생 후의 마음을 해제

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07:30 min

October 7, 2016

DOI: 10.3791/54303-v

Wasay M. Shaikh Qureshi¹, Lianjie Miao¹, David Shieh¹, Jingjing Li¹, Yangyang Lu¹, Saiyang Hu¹, Margarida Barroso¹, Joseph Mazurkiewicz², Mingfu Wu¹

¹Department of Molecular and Cellular Physiology,Albany Medical College, ²Department of Neuroscience and Experimental Therapeutics,Albany Medical College

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

우리는 온전한 배아 및 출생 후 심장 내부 깊숙한 곳에서 형광 단백질로 표지된 세포를 체적 측정으로 이미지화하는 프로토콜을 설명합니다. 전체 산 염색과 함께 조직 제거 방법을 사용하면 배아 또는 출생 후 심장 내부의 단일 형광 단백질 표지 세포를 명확하고 정확하게 이미지화할 수 있습니다.

이 절차의 전반적인 목표는 온전한 심장 내부 깊숙한 곳에서 형광 단백질로 표지된 세포를 체적 측정으로 이미지화하여 심장 발달 중 및 출생 후 심장에서 단일 세포 해상도에서 유전자 기능을 연구하는 것입니다. 이 방법은 유전자 기능 연구 및 심장 발달 및 애니미달 인공물 중 단일 세포 해상도에서 이미지를 돕는 것과 같은 심장 발달 중 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 방법의 가장 큰 장점은 온전한 배아 또는 심장에서 단일 세포 해상도로 유전자 및 단백질 기능에 대한 특수 시간 분석이라는 점에서 상대적으로 간단하고 저렴하며 프로현명하다는 것입니다.

우리는 이 시스템을 사용하여 쥐의 심장 발달을 연구하지만 근육, 뇌 및 폐와 같은 다른 장기 시스템과 다른 모델 유기체를 연구하는 데에도 사용할 수 있습니다. 여기에는 타목시프렌 처리된 R-26 Cre-RET2 색종이 댐의 형광 단백질 양성 배아가 사용됩니다. 각 파라포름알데히드 고정 배아를 48웰 플레이트의 웰에 0.1%PBST 1밀리리터에 담가 염색을 시작합니다.

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