2017년 1월 30일
우리는 분자 기반 인플루엔자 A, 신속하고 B 분석에 대해 설명합니다. 인플루엔자 분석은 분자 표지 프로브와 표적 탐지 뒤에 인플루엔자 특이 프라이머를 등온 증폭을 이용하여 15 분 이내에 각 대상을 감지합니다. 인플루엔자 A와 B의 분석은 사용자 친화적이고 수행 할 최소한의 실습 시간이 필요합니다.
이 분석의 전반적인 목표는 호흡기 계통을 가진 환자에서 인플루엔자 바이러스 감염을 진단하거나 배제하는 것입니다. 이 방법은 호흡기 감염의 주요 원인 진단과 같은 임상 진단 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 지정 치료 환경에서 사용할 수 있는 신속한 방법이라는 것입니다.
이 절차를 시연하는 사람은 우리 실험실의 기술자인 Sam Kaplan이 맡을 것입니다. 비강 면봉 샘플을 채취하려면 배액이 가장 눈에 띄거나 가장 막힌 콧구멍에 면봉을 삽입합니다. 부드럽게 회전하면서 저항이 충족될 때까지 면봉을 콧구멍으로 밀어 넣고 콧구멍에서 천천히 떼어내기 전에 비강에 대해 여러 번 회전합니다.
그런 다음 면봉을 보관하고 3ml의 바이러스 수송 배지가 들어 있는 바이알에 운반합니다. 그런 다음 테스트 전에 샘플과 파란색 샘플 리시버를 실온으로 가져옵니다. 주황색 테스트 베이스는 실온으로 데울 필요 없이 테스트할 수 있습니다.
사용 직전까지 모든 시험편을 호일에 그대로 두십시오. 그런 다음 기기를 켜고 사용자 ID를 입력한 다음 OK.To 눌러 테스트 프로세스를 시작하고 기기 화면에서 테스트 실행을 터치합니다. 그런 다음 화면 키보드 또는 바코드 스캐너를 사용하여 환자 ID를 입력하고 확인을 누릅니다. 그런 다음 뚜껑을 열고 주황색 테스트 베이스 튜브를 주황색 테스트 베이스 홀더에 삽입합니다.
화면에 올바른 테스트가 표시되는지 확인하고 OK를 누릅니다. 그런 다음 파란색 샘플 수신기를 파란색 샘플 수신기 홀더에 삽입하고 샘플 수신기가 예열될 때까지 기다립니다. 그런 다음 샘플 리시버의 가장자리에 두 손가락을 올려 놓고 포일된 씰을 제거하여 제자리에 고정되도록 합니다. 그런 다음 테스트할 환자의 면봉을 샘플 수신기에 넣습니다.
면봉과 액체를 10초 동안 세게 섞고 면봉 머리를 샘플 리시버 측면에 대고 눌러 면봉에서 검체를 제거하는 데 도움이 됩니다. 테스트 면봉이 바이러스 수송 매체에 보관된 경우 바이러스 수송 매체를 10초 동안 소용돌이치고 200마이크로리터를 샘플 리시버에 추가합니다. 그런 다음 확인을 눌러 계속 진행합니다.
그런 다음 흰색 전사 카트리지를 파란색 샘플 수신기에 밀어 넣습니다. s를 계속 누르십시오.amp주황색 표시등이 올라갈 때까지 수신기 수신기. 그런 다음 전사 카트리지를 들어 올려 테스트 베이스에 연결합니다.
주황색 표시기는 카트리지 이송이 올바르게 연결되면 내려가야 합니다. 뚜껑을 닫고 결과 화면이 나타날 때까지 열지 마십시오. 이제 홈 화면에서 QC 테스트 실행을 터치합니다.
실행할 QC 테스트를 선택합니다. 그런 다음 확인을 클릭하고 화면의 지시에 따라 테스트를 완료하여 테스트하려는 QC 샘플과 일치하는 테스트 유형을 확인합니다. 테스트 실행이 완료된 후 인플루엔자 A, B 또는 알 수 없는 아형의 존재에 대한 해석과 함께 화면에 표시된 테스트 결과를 관찰하고 유효하지 않은 결과에 대해 테스트를 반복합니다.
그런 다음 70% 에탄올 또는 10% 표백제 용액으로 기기와 주변 벤치 영역을 청소합니다. 이 그림은 각 인플루엔자 아형에 대한 양성 및 음성 샘플에 대해 RP 분석에 의해 결정된 평균 CT 값을 보여줍니다. 결과는 인플루엔자 A 및 B 분석에 의해 결정된 위음성 샘플이 낮은 바이러스 부하 샘플에 기인함을 보여줍니다.
이 기술을 마스터하면 제대로 수행하면 15분 안에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 분석을 처음 설정할 때 딸깍 소리가 나면서 제자리에 고정될 때까지 전송 카트리지를 테스트 베이스에 연결해야 한다는 점을 기억하는 것이 중요합니다. 이 두 조각이 제대로 고정되지 않으면 실행이 실패하고 처음부터 반복해야 합니다.
이 비디오를 시청한 후에는 인플루엔자에 대한 이 진단 분석을 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 인플루엔자에 감염되었을 가능성이 있는 환자 샘플로 작업하는 것은 매우 위험할 수 있으므로 이 절차를 수행하는 동안 항상 적절한 개인 보호 장비 착용과 같은 예방 조치를 취해야 한다는 것을 잊지 마십시오.
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이 논문은 Influenza A 및 B 바이러스를 검출하기 위한 신속한 분자 기반 분석법을 설명합니다. 이 분석법은 등온 증폭과 molecular beacon 프로브를 활용하여 단 15분 만에 결과를 확인할 수 있습니다.
인플루엔자 바이러스의 신속한 분자 진단은 호흡기 질환 관리에서 조기 진단 의사 결정을 지원합니다. 이 분석법의 15분 소요 시간은 현장 진단(point-of-care) 환경에서 적시 분류를 가능하게 하여 진단 지연을 줄여줍니다. 이러한 역량은 신뢰할 수 있는 감염 상태 데이터를 제공함으로써 초기 단계의 항바이러스제 개발 위험을 낮추는 데 도움이 됩니다.
본 분석법은 선도 물질 최적화 단계로 넘어가기 전, 빠른 감염 상태 확인이 필요한 초기 발견 워크플로우에 적합합니다.