Name: طريقة بديلة لإزالة Otoliths من سمك الحفش (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 7 s
Description: تعلم طريقة فعّالة لاستخراج حجيرات الأذن من جثث الحفش دون إتلافها، مما يساعد الباحثين على دراسة العمر والنمو في الأنواع المهددة بالانقراض.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

شكر خاص لشعبة سانت ريجيس الموهوك البيئة، Welaka الوطنية التفريخ السمك، السمك الولايات المتحدة وحدة أبحاث إدارة الحياة البرية، جامعة جنوب إلينوي، الولايات المتحدة للأسماك ومركز خدمة مصائد الأسماك في شمال الحياة البرية، والجنيه الاسترليني الكافيار، جامعة كاليفورنيا في ديفيز، حامية السد أسمال التفريخ، الدببة النصب الوطني تفريخ السمك، والسمك الولايات المتحدة ومكتب الموارد مدينة مصايد الأسماك الحياة البرية بنما لمساعدتهم توريد سمك الحفش لهذا المشروع، وهذا المقال هو المساهمة عام 2013 في مركز العلوم البحيرات العظمى هيئة المسح الجيولوجي الامريكية.

ملاحظة هامة: نظرا للوضع المحمية بجميع أنواع سمك الحفش في الولايات المتحدة، يسمح للحصول على والتعامل معها تم الحصول عليها الأسماك قبل إجراء المختبر. تم الحصول على جميع العينات من مصادر التفريخ بعد الوفاة لأسباب طبيعية والتخلص من اتباع إجراءات موحدة. 1. إعداد العينات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل أي شقوق تكمن الذبيحة سمك الحفش على جانبها وباستخدام شريط القياس لقياس الطول الكلي من الخطم إلى طرف الذيل إلى أقرب 1 مم. (الشكل 1A) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وزن سمك الحفش الذبيحة على نطاق tared إلى أقرب 1 غرام. تقييم الذبيحة لأية علامات خارجية أو علامات وسجل. </li></ol> 2. Otolith استخراج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل شق عمودي بسكين شرائح كبيرة بين قاعدة الجمجمة وأول ترس الظهرية من خلال الجسم لفصل الرأس عن الجسم (الشكل 1B). بعد إزالة الرأس، توآر الرأس بحيث يكون الفم هو مواجهة (الشكل 1C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الأنسجة الناعمة في الفم والخياشيم باستخدام سكين شرائح لقطع على طول الجانب البطني من الجمجمة (1D الشكل). إجراء شق مع منشار العظام الكهربائي من طرف خطم إلى قاعدة الجمجمة إلى شطر تماما الرأس (الشكل 1E). فصل شطري باليد للكشف عن تجويف الدماغ (الشكل 2A). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة والمواد الدماغ (المربع الأحمر يسار) مع ملقط لمشاهدة القنوات الهلالية (المربع الأحمر يمين) داخل تجويف الدماغ (الشكل 2B) تجاهل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الغضروف الهلالي القناة من تجويف الدماغ مع ملقط (الشكل 2C). بعناية ثقب دائري الغضروف القناة مع غيض من ملقط وإزالة otolith (الشكل 2D). إزالة otolith (هيكل عظمي صلب داخل الغضروف) مع ملقط من الغضروف القناة الهلالية (الشكل 2E) </stroنانوغرام&gt;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوات من 2،3-2،4 لإزالة otolith من النصف الآخر من الجمجمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تراجع otoliths في 92٪ من الإيثانول لمدة 5 ثانية لإزالة أي الغضروف. مكان otoliths في مفتوح التلألؤ قارورة 25 مل لتجف لمدة 24 ساعة. </li></ol>

<ol><li>Auer, N. A. Conservation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAuer%2C+NA+%22Sturgeons+and+Paddlefish+of+North+America%22">Sturgeons and Paddlefish of North America</a>. LeBreton, G. T. O., Beamish, F. W. H., McKinley, R. S. 27, Kluwer Academic Publishers. 252-276 (2004).</li>
<li>Sturgeon Specialists Group, sturgeon conservation. IUCN (International Union for the Conservation of Nature). , Source: 
 <a target="_blank" href="www.iucn.org">www.iucn.org</a> (2008).</li>
<li>Campana, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy%2C+precision+and+quality+control+in+age+determination%2C+including+a+review+of+the+use+and+abuse+of+age+validation+methods%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fish+Biology%22%5BJournal%5D)">Accuracy, precision and quality control in age determination, including a review of the use and abuse of age validation methods).</a> Journal of Fish Biology. 59, 197-242 (2001).</li>
<li>Bruch, R. M., Campana, S. E., Davis-Foust, S. L., Hansen, M. J., Janssen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lake+Sturgeon+age+validation+using+bomb+radiocarbon+and+known-age+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Lake Sturgeon age validation using bomb radiocarbon and known-age fish.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 138, 361-372 (2009).</li>
<li>Baremore, I. E., Rosati, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated%2C+minimally+deleterious+method+for+ageing+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">A validated, minimally deleterious method for ageing sturgeon.</a> Fishery Bulletin. 112, 274-282 (2014).</li>
<li>Stevensen, J. T., Secor, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age+determination+and+growth+of+Hudson+River+Atlantic+sturgeon%2C+Acipenser+oxyrhynchus%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Age determination and growth of Hudson River Atlantic sturgeon, Acipenser oxyrhynchus.</a> Fishery Bulletin. 97, 153-166 (1999).</li>
<li>Brennan, J. S., Cailliet, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+age-determination+techniques+for+white+sturgeon+in+California%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fishery+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative age-determination techniques for white sturgeon in California.</a> Transactions of the American Fishery Society. 118, 296-310 (1989).</li>
<li>Rossiter, A., Noakes, D. L. G., Beamish, F. W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+age+estimation+for+the+lake+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Validation of age estimation for the lake sturgeon.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 124, 777-781 (1995).</li>
<li>Chalupnicki, M. A., Dittman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((North+American+Sturgeon+Otolith+Morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Copeia%22%5BJournal%5D)">North American Sturgeon Otolith Morphology.</a> Copeia. , 260-266 (2016).</li>
<li>Secor, D. H., Dean, J. M., Laban, E. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSecor%2C+DH+%22Manual+for+otolith+removal+and+preparation+for+microstructural+examination%22">Manual for otolith removal and preparation for microstructural examination</a>. , Barach Press. Columbia, South Carolina. (1991).</li>
</ol>

أي استخدام لأسماء التجارة أو المنتجات أو الشركات هو لأغراض وصفية فقط ولا يعني تأييد حكومة الولايات المتحدة.

وقد فصلت محة عامة عن طريقة بديلة لاستخراج otoliths من جثث سمك الحفش. من المهم أن نلاحظ أن هناك حاجة إلى عناية خاصة لوضع شق الوحشي على خط الوسط من الجمجمة من أجل شطر الجمجمة بالتساوي لضمان عدم وجود ضرر على otoliths أثناء تشريح. إذا شق ليست عميقة بما يكفي لشطر تماما الجمجمة سيكون من الصعب جدا لفضح تجويف الدماغ حيث موقع otoliths واضحة للعيان. من ذوي الخبرة، والتقنية بشكل عام هي بسيطة نسبيا ويؤدي إلى نسبة عالية من otoliths التي وجدت سليمة. هذا الأسلوب الجديد يعطي الأبحاث وسيلة بديلة ل...

وقد سمك الحفش (Acipenseridae) السكان في جميع أنحاء العالم تتراجع لأكثر من قرن بسبب الآثار بما في ذلك فقدان الموائل، والتجزؤ السكان، والصيد الجائر مثل أن العديد من السكان ومحمية بموجب قوانين الدولة والحكومة الاتحادية 1،2. وقد حددت إدارة وكالات في جميع أنحاء الولايات المتحدة الأمريكية والعالم سمك الحفش كنوع الهدف لاستعادة واسترداد 1. وقد تم دراسة الخصائص السكانية (النمو والتوظيف والنظام الغذائي) لمعظم السكان سمك الحفش إلى فهم أفضل الأساسية البيولوجيا والتاريخ الحياة الخصائص 1. ويرجع ذلك إلى الوضع المحمي معظم السكان سمك الحفش، وتقييم سن صعب في السكان المهددين صغير حيث هناك ما يبرر أي تضحية أو ضرر للأفراد. وقد تم استخراج الهياكل العظمية لغرض تقدير العمر وتحليل النمو تقنية 3 المشتركة. استخدام لأقسام الأشعة الزعنفية لتحديد سن ستورجأصبح على طريقة غير قاتل العملي، ولكن تم التحقق من هذه التقنية محدودة والعمر يمكن أن يكون من الصعب جدا فك في الأفراد الأكبر سنا (&gt; 15 سنة) 4. الباحثون بتقييم استخدام هياكل عظمية متعددة في سمك الحفش لاستخدامها في التحقق من سن الخليج سمك الحفش (أسيبنسر oxyrinchus desoti) 5، والمحيط الأطلسي سمك الحفش (أ. س. oxyrinchus) 6، الأبيض سمك الحفش (A. ترانسمونتانوس) 7، وبحيرة سمك الحفش (أ fluvescens) 8 خلصت إلى أن أول الصدرية هامشية أشعة الزعانف قدم العمرية الأكثر دقة ولكن انتهى هذا الإجراء الغازية لتكون ضارة للأفراد أكبر. حاليا، هناك تطور استخدام مقاييس الشكل otolith للتمييز بين أنواع سمك الحفش في أمريكا الشمالية مع نسبة عالية جدا من النجاح 9. تفاصيل عن عملية إزالة otolith مع شق عرضي الظهري في قاعدة الجمجمة هي otolith المشترك خارجوجدت طريقة ction في جميع أنحاء الأدب ومفصلة بشكل واضح سيكور وآخرون. (1991) 10. ومع ذلك، وهذه الطريقة من الصعب تنفيذ على سمك الحفش التي لديها الجماجم سميكة جدا مع otoliths التي هي صغيرة وحساسة ومن شأنه أن يكسر. ويبين استعراض آخر للأدب لا منهجية تفصيلية أخرى لعملية إزالة otolith لسمك الحفش. وكان الهدف من هذه الورقة بالتفاصيل طريقة بديلة لاستخراج otoliths من سمك الحفش قبل دخول تجويف الدماغ من الجانب البطني.

<table><tbody><tr><td>يفضل قياس لوح</td><td></td><td></td><td>العداد المتري</td></tr><tr><td>عصا مقياس الوزن</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>سكين</td><td></td><td></td><td></td>فيليه</tr><tr><td>ملقط</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>مشرط</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>قوارير عينة قوارير</td><td></td><td></td><td>25 مل قوارير التلألؤ تعمل بشكل جيد</td></tr></tbody></table>

طريقة بديلة لإزالة otoliths من سمك الحفش

Alternative Method of Removing Otoliths from Sturgeon

استخراج otoliths (عظام الأذن) من الأسماك التي لها الجماجم سميكة جدا يمكن أن يكون الوقت الصعب وطويلا جدا. الممارسة الشائعة المتمثلة في جعل شق عمودي عرضية على الجزء العلوي من الجمجمة مع جهة أو منشار كهربائي قد يؤدي إلى تلف otolith إذا لم يتم تنفيذ بشكل صحيح. سمك الحفش (Acipenseridae) هي عائلة واحدة على وجه الخصوص أن يكون جمجمة كبيرة جدا وسميكة. كان هناك طريقة مختبر جديد دخول تجويف الدماغ من الجانب البطني من الأسماك لفضح otoliths أسهل من أساليب الاستخراج otolith أخرى وجدت في الأدب. تم تصميم الطرق المستعرضة في الكتابات عن هذا المجال وأكثر كفاءة في معالجة كميات كبيرة من الأسماك بسرعة. ومع ذلك، تم تصميم هذه التقنية الجديدة لتكون أكثر ملاءمة لإعداد مختبر عند الوقت ليس إلحاحا واستخراج ناجحة من كل عينة أمر بالغ الأهمية. نجاح إيجاد وإزالة otoliths باستخدام هذه التقنية عالية جدا ولا تفسد الصورةtructure في أي شكل من الأشكال. هذه التقنية البديلة هي التي تنطبق على أنواع الأسماك الأخرى المماثلة لاستخراج otoliths.

حجم الكبار من سمك الحفش في جميع أنحاء العالم يختلف كثيرا لكن موقع otoliths هو ثابت. تم العثور على استخدام سكين حاد شرائح لإزالة الأنسجة الرخوة في الفم هو مبين بسهولة في 1D الشكل. منشارا العظام الكهربائي هو الأداة المفضلة للشق الجانبي لفضح تجويف الدماغ في الشكل 1E. ومع ذلك، هناك حاجة وإلا قد يكون سحقت الانتباه إلى تتوسط خط الوسط من الجمجمة otoliths خلال هذه العملية. وإذا تم تنفيذ هذه العملية بشكل صحيح ثم يتعرض تجويف...

الهدف من البروتوكول هو إظهار طريقة فعالة لاستخراج otoliths من جثث سمك الحفش.

طريقة بديلة لإزالة Otoliths من سمك الحفش

Extracting the otoliths (ear bones) from fish that have very thick skulls can be difficult and very time consuming. The common practice of making a ...

الهدف العام من هذه الطريقة هو توفير تقنية بديلة وفعالة لاستخراج الحصى السمعية غير التالفة من الأسماك المهددة بالانقراض، مثل سمك الحفش البحيري. يمكن أن تساعد طريقة استخراج الحصى السمعية هذه في الإجابة على أسئلة رئيسية حول عمر الأسماك ونموها، وموقع عظام الأذن بالنسبة لشكل الدماغ، والكيمياء الدقيقة المرتبطة بالبيئة. وتكمن ميزة هذه التقنية في أنه بالنسبة للأسماك ذات الجماجم السميكة والحصى السمعية الهشة، فإن فتح تجويف الدماغ لا يؤدي إلى إتلاف الحصى السمعية أو تعطيل البنى الحيوية الأخرى.طُورت فكرة هذه الطريقة أثناء البحث في إيكولوجيا استعادة أنواع Sturgeon المهددة بالانقراض. ففي المجموعات المتبقية، نادراً ما يتم الحصول على عينات لإجراء التشريح والتحليل المختبري، لذا فإن النجاح في جمع معلومات العمر والمعلومات الأخرى من الحيوانات الفردية يعد أمراً حاسماً لسد الفجوات في بيانات هذه الأنواع.سيقوم مارك بإجراء عملية إزالة السمعيات (otoliths) من سمك الستيرجن البحيري. لاستخراج السمعيات، ضع سمكة الستيرجن أولاً على بطنها واستخدم شريط قياس لتحديد الطول الإجمالي من الخطم إلى طرف الذيل بدقة تصل إلى 1 mm. بعد ذلك، قم بوزن الحيوان على ميزان تمت معايرته بدقة تصل إلى 1 g، وافحص الجسم بحثاً عن أي علامات أو وسوم خارجية.بعد تسجيل هذه البيانات، استخدم سكين فيليه كبيرة لإجراء شق رأسي عبر الجسم بين قاعدة الجمجم

alternative-method-of-removing-otoliths-from-sturgeon

Research

JoVE Journal

Environment

البيئة

والغرض من هذا الفيديو هو إظهار إجراءات الحصول على صحي، وخلايا الشعر سليمة من الأجهزة الأذن الداخلية من الزرد الكبار ومن ثم استخدامها للدراسات المشبك التصحيح تهدف إلى تحديد خواص الفيزيائية الحيوية من القنوات الجهد بوابات بهم.

تسجيلات المشبك التصحيح في الأذن الداخلية خلايا الشعر المعزولة من اسماك الزرد

تصف هذه المخطوطة بروتوكولا لتتبع إعادة توزيع الخلايا الأيونوسية المتفرعة وتعصيبها باستخدام تقنية تلطيخ تفاضلي زمني إلى جانب إزالة التعصيب الثنائي الكامل.

تقنية وقت التفاضلية تلطيخ جانب كامل الثنائي جيل إزالة التعصيب لدراسة Ionocytes في السمك

قياس تأثيرات الملوثات البيئية على سلوك الأسماك في كثير من الأحيان شخصي وتحديا من نوع خاص عند التعامل مع النهاية دون المميتة. وصفنا الأساليب بما في ذلك تكنولوجيا الفيديو لتحديد السلوك السباحة من الحياة المبكرة مرحلة الأبيض سمك الحفش (أسيبنسر ترانسمونتانوس) أثناء وبعد 96 ساعة التعرض الحاد لتركيزات مختلفة من النحاس.

قياس سلوك الأسماك سباحة ردا على التعرض الحاد للمائي النحاس عن طريق الكمبيوتر بمساعدة الفيديو الرقمية وتحليل الصور

يعمل الهيكل العظمي الفرعي ، بما في ذلك الجرعات الخيشومية والأسنان البلعومية والعظام المتفرعة ، كموقع أساسي لمعالجة الأغذية في معظم الأسماك. نصف هنا بروتوكولا لتشريح هذا الهيكل العظمي الداخلي وتركيبه بشكل مسطح في ثلاثي العمود الفقري. تنطبق هذه الطريقة أيضا على مجموعة متنوعة من أنواع الأسماك الأخرى.

تشريح وشقة-تصاعد للThreespine أبو شوكة الخيشومي الهيكل العظمي

يسمح (رنا catesbeiana) كييس الضفدع الأمريكي الفحص المباشر من علم وظائف الأعضاء خلايا الشعر. هنا يتم وصف تشريح وإعداد كييس الضفدع للدراسات الفيزيائية الحيوية. وتبين لنا تجارب تمثيلية من هذه الخلايا الشعر، بما في ذلك حساب علاقة قوة النزوح حزمة وقياس حركته السهلة.

إعداد الفسيولوجية للخلايا الشعر من كييس من ضفدع الثور (<em&gt; رنا catesbeiana</em&gt;)

صحة الأسماك البرية يمكن استخدامها كمؤشر لصحة النظم الإيكولوجية المائية. تقييمات الصحة الأسماك المستندة إلى نيكروبسي تقديم الوثائق من آفات مرئية أو شذوذ، والبيانات المستخدمة في حساب الأرقام القياسية للشرط، فضلا عن فرصة لجمع الأنسجة للتقييم المجهري والتعبير الجيني وأخرى أكثر عمقاً التحليلات.

تقييم صحة الأسماك البرية المستندة إلى نيكروبسي

وهذا بروتوكول لنمذجة طيف الحجم (توسيع العلاقة بين الكتلة الفردية والكثافة السكانية) للبيانات المجمعة عن الأسماك واللافقاريات من الجداول والأنهار القابلة للخوض. وتشمل الأساليب ما يلي: التقنيات الميدانية لجمع الأسماك الكمية والعينات اللافقارية؛ والتقنيات الميدانية لجمع الأسماك الكمية والعينات اللافقارية؛ والتقنيات الميدانية لجمع الأسماك الكمية و أساليب المختبر لتوحيد البيانات الميدانية؛ وتحليل البيانات الإحصائية.

نمذجة طيف الحجم للفقاريات والأسماك في النظم الإيكولوجية للتيار

في هذه الدراسة، نقدم بروتوكول لاستخراج الكورتيزول من الزفية وعظم الفك من أنواع سمك الحفش. تم فحص مستويات الكورتيزول الزعانف وعظم الفك مرة أخرى عن طريق مقارنة اثنين من المذيبات الغسيل تليها الاختبارات ELISA. وقد قامت هذه الدراسة بتجريب جدوى الكورتيزول في عظم الفك كمؤشر جديد للإجهاد.

استخراج الكورتيزول من زعانف سمك الحفش ومصفوفات عظم الفك

والهدف من البروتوكول هو توفير تقنية تخمير الأسماك الصناعية على أساس تلقيح Saccharomyces cerevisiae.

إعداد منتجات الأسماك المخمرة عالية الجودة

تسجيل وحدة متعددة خارج الخلية من العصب الشمي هو طريقة حساسة وقوية وقابلة للتكرار لتقييم حساسية الشم في الأسماك البحرية. ويسجل المدخلات الحسية الأولية ومستقل عن الملوحة الخارجية.

تسجيل متعدد الوحدات خارج الخلية من العصب الشمي من Teleosts

ويصف المقال بروتوكول سريع لgonadectomize وعينة الدم من الأسماك تيليوست الصغيرة، وذلك باستخدام ميداكااليابانية (Oryzias latipes)كنموذج، للتحقيق في دور المنشطات الجنس في فسيولوجيا الحيوان.

إجراءات استئصال الغدد و أخذ عينات الدم في نموذج تيليوست صغير الحجم الياباني ميداكا (Oryzias latipes)

تعلم طريقة فعّالة لاستخراج حجيرات الأذن من جثث الحفش دون إتلافها، مما يساعد الباحثين على دراسة العمر والنمو في الأنواع المهددة بالانقراض.

طريقة بديلة لإزالة Otoliths من سمك الحفش

استكشف المزيد من الفيديوهات