Laser-assisted Cytoplasmic Microinjection in Livestock Zygotes

Yanina S. Bogliotti; Marcela Vilarino; Pablo J. Ross

doi:10.3791/54465

JoVE Journal
Genetics

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Laser-assisted Cytoplasmic Microinjection in Livestock Zygotes

레이저를 이용한 가축 접합체의 세포질 미세 주입을

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08:59 min

October 5, 2016

DOI: 10.3791/54465-v

Yanina S. Bogliotti¹, Marcela Vilarino¹, Pablo J. Ross¹

¹Department of Animal Science,University of California, Davis

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 프로토콜은 농장 동물 접합자에서 세포질 미세주입을 수행하는 방법을 보여줍니다. 이 기술은 녹아웃 동물을 생성하기 위한 게놈 편집 도구와 같은 단일 세포 배아에 모든 솔루션을 전달하는 데 사용할 수 있습니다.

이 절차의 전반적인 목표는 레이저의 도움으로 뭉툭한 끝 바늘을 사용하여 가축 접합자의 세포질에 용액을 효과적으로 전달하는 것입니다. 이 방법은 CRISPR Cas9 시스템과 같은 게놈 편집 도구와 연결되어 있기 때문에 매우 간단하고 신뢰할 수 있는 방식으로 유전자 기능 및 형질전환 동물을 연구할 수 있는 새로운 암소를 만들 수 있기 때문에 연구 및 동물 형질전환 분야에서 사용됩니다. 이 기술의 주요 장점은 대형 동물의 접합자의 세포질에 모든 용액을 전달하는 데 사용할 수 있다는 것입니다.

편리한 사람의 주입 효율로 동물의 간 로모틸 속도를 최소화합니다. 먼저, 붕규산 유리 모세관을 마이크로피펫 풀러에 넣고 제자리에 고정하여 주입 마이크로피펫을 준비합니다. 적절한 프로그램을 사용하여 모세관을 당겨 긴 테이퍼가 있는 얇은 팁이 되도록 합니다.

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