Methods for the Isolation, Culture, and Functional Characterization of Sinoatrial Node Myocytes from Adult Mice

Emily J. Sharpe; Joshua R. St. Clair; Catherine Proenza

doi:10.3791/54555

성인 마우스에서 동방 노드 근육 세포의 분리, 문화 및 기능 특성화하는 방법

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Methods for the Isolation, Culture, and Functional Characterization of Sinoatrial Node Myocytes from Adult Mice

성인 마우스에서 동방 노드 근육 세포의 분리, 문화 및 기능 특성화하는 방법

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October 23, 2016

DOI: 10.3791/54555-v

Emily J. Sharpe*¹, Joshua R. St. Clair*^1,2, Catherine Proenza^1,3

¹Department of Physiology and Biophysics,University of Colorado Anschutz Medical Campus, ²Department of Bioengineering,University of Colorado Anschutz Medical Campus, ³Department of Medicine, Division of Cardiology,University of Colorado Anschutz Medical Campus

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방법은 패치 클램프 전기 생리학 또는 이미징 연구를위한 성인 마우스의 동방 노드 근육 세포 (SAM을)의 분리를 위해 증명된다. 분리 된 세포를 직접 사용할 수 또는 부호화 유전자 리포터로서 관심 단백질의 발현을 허용하는 배양에서 유지 될 수있다.

이 절차의 전반적인 목표는 단기 또는 중기 전기생리학 또는 이미징 실험을 위해 마우스에서 자발적으로 활성화된 동방결절 근세포를 분리하는 것입니다. 고립된 동방결절 근세포는 심장 박동 메커니즘 연구, 특히 특정 이온 전류 또는 세포 내 칼슘 방출 타이밍에 대한 연구에 중요합니다. 그러나 상대적으로 소수의 실험실에서 쥐의 분리된 동방근세포를 사용하는 이유는 문서화된 방법만으로는 절차를 배우기가 매우 어렵기 때문입니다.

격리에 필요한 모든 용액을 준비한 후 가위로 동물의 가슴에서 털을 제거하십시오. 그런 다음 외부 조직 집게와 해부 가위를 사용하여 흉강을 노출시키기 위해 흉곽을 절제합니다. 헤파린이 함유된 데운 티로드 2밀리리터로 흉강을 헹굽니다.

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