Phagosome Migration and Velocity Measured in Live Primary Human Macrophages Infected with HIV-1

Gabrielle L&#234;-Bury; Chantal Deschamps; Audrey Dumas; Florence Niedergang

doi:10.3791/54568

HIV-1 감염 라이브 차 인간 대 식세포에서 측정 Phagosome 마이그레이션 및 속도

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Immunology and Infection

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Phagosome Migration and Velocity Measured in Live Primary Human Macrophages Infected with HIV-1

HIV-1 감염 라이브 차 인간 대 식세포에서 측정 Phagosome 마이그레이션 및 속도

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07:32 min

September 5, 2016

DOI: 10.3791/54568-v

Gabrielle Lê-Bury¹, Chantal Deschamps¹, Audrey Dumas¹, Florence Niedergang¹

¹Inserm U1016, Institut Cochin, CNRS UMR 8104, Université Paris Descartes, Sorbonne Paris Cité

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

우리는 인간 면역결핍 바이러스(HIV) 1형에 감염되거나 감염되지 않은 살아있는 세포에서 세포 중심을 향해 이동하는 식체체의 속도를 측정하는 방법을 설명하며, 회전 디스크 컨포칼 형광 현미경을 사용하여 형광 감염 세포를 식별하고 명시야 현미경을 사용하여 식체를 검출합니다.

이 분석의 전반적인 목표는 간단한 수동 추적 방법을 사용하여 HIV-1에 감염된 대식세포의 식체 속도를 정량화하는 것입니다. 이 프로토콜의 장점은 움직이거나 변형될 수 있는 세포 내 개체 그룹의 상대적 움직임을 계산하는 쉬운 방법을 제공한다는 것입니다. 이 방법은 GFP 양성 감염된 대식세포에서 식체의 이동에 대한 통찰력을 제공하지만 형광 표지된 세포의 다른 세포 간 구획에 사용할 수 있습니다.

인간 단핵구 유래 대식세포를 감염시키고 양에서 자란 혈액 세포를 옵소니제이션한 후, 텍스트 프로토콜에 따라 섭씨 37도의 가열 챔버가 장착된 회전 디스크 현미경과 같은 컨포칼 이미징 시스템을 사용하여 이산화탄소로 식세포작용 분석을 설정합니다. 실험하기 전에 가열실을 켜서 현미경 스테이지를 섭씨 37도까지 가열합니다. 그런 다음 현미경과 컴퓨터를 켜고 이미징 소프트웨어를 로드합니다.

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