Name: ניצול טכנולוגיית הדפסה 3D כדי מיזוג MRI עם היסטולוגיה: פרוטוקול המוח חתך (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 53 s
Description: למדו ליישר בדיוק תמונות MRI עם חתכי היסטולוגיה באמצעות מחזיקי מוח מודפסים בתלת-ממד. פרוטוקול זה משפר מתאם רדיולוגי-היסטופתולוגי במחקר עצבי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

תוכנית המחקר הפנימי של NINDS תמכה במחקר זה. אנו מודים למתקן הדמיית תהודה מגנטית פונקציונלית של ה-NIH. אנו מודים לג'ניפר לפבר ולססיל צ'רן-צ'י ין על הסיוע ברכישת MRI לאחר המוות. אנו מודים לג'ון אוסטוני ולמחלקה למתקן ליבת מכשור על הסיוע בהדפסת תלת מימד. איור 1 של עבודה זו השתמש בתמונות מ-MeshLab, כלי שפותח בתמיכת פרויקט 3D-CoForm.

<ol><li>Evans, A. C., Frank, J. A., Antel, J., Miller, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+MRI+in+clinical+trials+of+multiple+sclerosis%3A+comparison+of+image+processing+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">The role of MRI in clinical trials of multiple sclerosis: comparison of image processing techniques.</a> Ann Neurol. 41 (1), 125-132 (1997).</li>
<li>'t Hart, B. A., van Kooyk, Y., Geurts, J. J. G., Gran, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+primate+autoimmune+encephalomyelitis+model%3B+a+bridge+between+mouse+and+man%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Clin+Transl+Neurol%22%5BJournal%5D)">The primate autoimmune encephalomyelitis model; a bridge between mouse and man.</a> Ann Clin Transl Neurol. 2 (5), 581-593 (2015).</li>
<li>Ontaneda, D., Hyland, M., Cohen, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+sclerosis%3A+new+insights+in+pathogenesis+and+novel+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Med%22%5BJournal%5D)">Multiple sclerosis: new insights in pathogenesis and novel therapeutics.</a> Annu Rev Med. 63, 389-404 (2012).</li>
<li>Guy, J. R., Sati, P., Leibovitch, E., Jacobson, S., Silva, A. C., Reich, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Custom+fit+3D-printed+brain+holders+for+comparison+of+histology+with+MRI+in+marmosets%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Custom fit 3D-printed brain holders for comparison of histology with MRI in marmosets.</a> J Neurosci Methods. 257, 55-63 (2016).</li>
<li>Breen, M. S., Lazebnik, R. S., Wilson, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+registration+of+magnetic+resonance+image+data+to+histological+sections+with+model-based+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional registration of magnetic resonance image data to histological sections with model-based evaluation.</a> Ann Biomed Eng. 33 (8), 1100-1112 (2005).</li>
<li>Dauguet, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+reconstruction+of+stained+histological+slices+and+3D+non-linear+registration+with+in-vivo+MRI+for+whole+baboon+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional reconstruction of stained histological slices and 3D non-linear registration with in-vivo MRI for whole baboon brain.</a> J Neurosci Methods. 164 (1), 191-204 (2007).</li>
<li>McGrath, D. M., Vlad, R. M., Foltz, W. D., Brock, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technical+note%3A+fiducial+markers+for+correlation+of+whole-specimen+histopathology+with+MR+imaging+at+7+tesla%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Phys%22%5BJournal%5D)">Technical note: fiducial markers for correlation of whole-specimen histopathology with MR imaging at 7 tesla.</a> Med Phys. 37, 2321-2328 (2010).</li>
<li>Schormann, T., Zilles, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-Dimensional+linear+and+nonlinear+transformations%3A+An+integration+of+light+microscopical+and+MRI+data%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Brain+Mapp%22%5BJournal%5D)">Three-Dimensional linear and nonlinear transformations: An integration of light microscopical and MRI data.</a> Hum Brain Mapp. 6, 339-347 (1998).</li>
<li>Jiang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+MR%2C+fluorescence+and+histology+imaging+strategy+in+a+human+breast+tumor+xenograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22NMR+Biomed%22%5BJournal%5D)">Combined MR, fluorescence and histology imaging strategy in a human breast tumor xenograft model.</a> NMR Biomed. 26 (3), 285-298 (2013).</li>
<li>Absinta, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postmortem+magnetic+resonance+imaging+to+guide+the+pathologic+cut%3A+individualized%2C+3-dimensionally+printed+cutting+boxes+for+fixed+brains%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuropathol+Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Postmortem magnetic resonance imaging to guide the pathologic cut: individualized, 3-dimensionally printed cutting boxes for fixed brains.</a> J Neuropathol Exp Neurol. 73 (8), 780-788 (2014).</li>
<li>Gaitán, M. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perivenular+brain+lesions+in+a+primate+multiple+sclerosis+model+at+7-tesla+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Mult+Scler%22%5BJournal%5D)">Perivenular brain lesions in a primate multiple sclerosis model at 7-tesla magnetic resonance imaging.</a> Mult Scler. 20 (1), 64-71 (2014).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

הפרוטוקול המתואר כאן מאפשר השוואה מדויקת בין MRI וחתכים היסטולוגיה. הפרוטוקול מוצג במתכונת אחידה כי ניתן להחיל על מוחם של בני אדם או בעלי חיים קטנים, כגון מרמוסטים או מכרסמים. הבדלים ספציפיים גדול (אדם) וקטנים (פרימטים לא אנושיים ו מכרסם) מוח מודגש, ובסרטון ודמויות המצורפים אנחנו מדגימים את היישום המרמוסט. למרות הגישה היא פשוטה, השיטה דורשת צעדים רבים, כמו גם את השימוש כמה סוגים של תוכנה. יתר על כן, מספר בעיות שעלולים להשפיע על הדיוק של שיטה זו הן חשובות להזכיר. איכות התמונה של MRI in vivo היא גורם חשוב. כדי למזער את הפער רזולוציית תמונה בין MRI ותמונות היסטולוגיה דיגיטליות, גודל voxel MRI הקטן ביותר האפשרי אמור לשמש. מושג זה חל גם על איכות התמונה של ה- MRI לאחר המוות. בעוד גדלרכישת הזמן ב- MRI לאחר המוות מאפשר רזולוציית תמונה גבוהה בהרבה, ההכנה יכולה להציג ממצאי תמונה כגון נשירת אות מוקדים הקשורים בועות אוויר. ממצאים אלה יכולים לטשטש אזורים של רקמות וכן להשפיע קונטור שלה. יתר על כן, את הממדים של הרקמה על MRI לאחר המוות צפויים להיות מושפעים על ידי תהליך קיבוע ומשך. בעוד in vivo כדי משחק vivo לשעבר MRI יכול להיות מקורב מקרוב על ידי ניצול ציוני דרך אנטומיים בהגדרת גיאומטריה פרוסה במהלך הרכישה נעשה רישום שאינו ליניארי עדיין יהיה צורך להגיע רמה גבוהה יותר של דיוק בהתאמת שתי התמונות האלה MRI. העיצוב של בעל מוח מבצעה הוא גם צעד מכריע. ביצירת המודל הדיגיטלי של המוח, אלגוריתם החלקה מוחל שמביאה להגדלה ביחס המודל מעט למוח הקבוע. זה מאפשר החדרה קלה של המוח לתוך המחזק שלו ואת מבצעה ומפחית קצוות חדים במחזיק &amp;# 39; קונטור s. עם זאת, אם המודל הוא גדול מדי (למשל, על ידי יותר מ -5%), המוח יכול לזוז במהלך MRI לאחר המוות ו / או החתך. נקודה חשובה נוספת היא להתאים את העיצוב של דגם המוח כך המוח הקטן ממוקם כראוי בתוך האובייקט מודפס 3D. זה יכול להיות מאתגר במיוחד כאשר המוח הקטן נפגע במהלך חילוץ מוח הנתיחה. בעת הדפסת מבצעה במוח בעל, את סוג מדפסת 3D חייב גם להיות שנבחר בקפידה. חלק מדפסות רב-סילון דורשים שלאחר עיבוד באמצעות תנור להסיר חומר תמיכה. בעוד מדפסות אלה יכולים לייצר אובייקטים למים יחסית עמיד יותר ממדפסות דוגמנות בתצהיר התמזגו שולחן העבודה (FDM), תהליך החימום להסיר תומך לשבש את הקופסה מילימטרים ספורים, יצירת פערים להב שאינם ניצבים באופן מושלם את חיטובי המוח. תהליך חתך המוח הוא עוד צעד חיוני. לפני חיתוך המוח הדואר כולו לתוך לוחות, חשוב לוודא כי המוח יושב בחוזקה בתוך מבצעה במוח: לא אמור להיות תנועה כאשר לחצו קל מוחל על המוח. זה יעשה את זה אפשרי עבור הלהבים לחתוך דרך המוח נכחה בזירה שקבע החוקרים. לחץ רצוף, מאוזן צריך להיות מוחל על שני בעלי הלהב בעת חיתוך. בהתאם החד של הלהבים הנוקש של הרקמות, בתנועות חיתוך רוחביות קלות יכולות להיות יתרון עבור שמירת משטחי חתך שטוחים. תהליך ההטבעה-פרפין יכול להיות גם מקור של חוסר תיאום בין MRI ו היסטולוגיה. אם לוח הרקמות אינו יושב שטוחים על הקלטת בתהליך ההטבעה, תהיה הטיה בין מטוס החיתוך של microtome ומקום השטח של הלוח. זה ידרוש קיצוץ בסעיפים שמישים למצוא מישור שטוח שבו כל הרקמה חשופה. דרך אחת לתקן את ההטיההיא על ידי שינוי הזווית של המטוס לצפייה MRI לאחר המוות גבוהה איזוטרופיים ברזולוציה. עם זאת, זה כמעט בלתי אפשרי לבצע על MRI vivo ב כי היא רכשה בדרך כלל עם רזולוצית איזוטרופי (בדרך כלל פרוסות העטרה עבות). לבסוף, הרקמה יכולה לחוות כמה עיוות במהלך תקופת הקיבוע בפורמלין והטבעת פרפין (הצטמקות), כמו גם במהלך תקופת ההכנה של שקופיות (מתקפלים, פיצוח, קמטים). חלק דפורמציות אלה ניתן לתקן על ידי צבת 4-5 מיקרומטר החלקים באמבט מים לפני ההעברה על גבי שקופיות. ניתן דפורמציות אחרים נפתרה חלקית על ידי ביצוע coregistration תמונה ובר-עיוות של תמונות דיגיטציה היסטולוגית לתמונות MRI לאחר המוות. אף על פי כן, מזעור דפורמציות עם תרגול זהיר ומיומן היא הגישה היעילה ביותר כדי התאמת כמויות MRI כדי היסטולוגיה סעיפים. לסיכום, המתודולוגיה הציג כאן מאפשר investigators להעריך את הפתולוגיה הבסיסית במדויק ממצאי ה- MRI. באופן כללי יותר, היא גישה מבטיחה לזיהוי ו / או על מנת לאשר ביומרקרים MRI רומן ללימודי מחקר למקד תהליכים פתולוגיים ספציפיים, כגון דלקת או מיאלין מחדש.

in vivo MRI מספק מדד לא פולשני ורגיש לשלמות הרקמה ברמה המקרוסקופית. שינויים בעוצמת אות ה-MRI הנראים in vivo הם מדדי תוצאה בניסויים קליניים מתמשכים רבים. 1 בעוד ששינויי העוצמה הנראים באמצעות MRI יכולים לזהות אזורים חריגים בהקשר של המוח כולו, הם לרוב אינם ספציפיים מספיק כדי להבדיל בין תהליכים פתולוגיים. זה נכון במיוחד לגבי תהליכים דינמיים הכוללים פתולוגיות מרובות. לדוגמה, בטרשת נפוצה (MS) או במודל החי שלה, דלקת מוח אוטואימונית ניסיונית (EAE), דלקת, בצקת, פירוק מיאלין, הרס אקסונלי, גליוזיס ומוות עצבי חופפים. 2, 3 כדי להשיג את הספציפיות הדרושה לגבי הפתולוגיה הבסיסית, יש לקחת בחשבון את ההקשר, יחד עם ידע על ההיסטולוגיה של רקמות חריגות שזוהו ב- MRI.
עם זאת, אפילו בניסויים בבעלי חיים מבוקרים היטב, התאמת היסטולוגיה ל-MRI in vivo היא מאתגרת ביסודה מסיבות שונות. ראשית, ההבדל בקנה מידה ממדי בין חתכים היסטולוגיים ל-MRI הוא בכמה סדרי גודל. 4 שנית, לצורך השוואה נכונה, הכיוון של מישור פרוסת ה-MRI חייב להתאים למישור החיתוך של רקמת המוח בעת החיתוך. בשל צורת המוח, קשה מאוד לבצע חתכים ישרים ומדויקים באופן עקבי כאשר המוח יושב על משטח ישר. שלישית, גודלו הגדול של המוח ביחס לאזור עניין קטן פוטנציאלי (נגע, גידול וכו') יוצר תרחיש של "מחט בערימת שחת" עבור הפתולוג המעבד את הרקמה. רביעית, גם כאשר רקמת המטרה נמצאת, היא מעובדת בדרך כלל באופן שהופך את הקשר לנתוני ה-MRI המקוריים לבלתי אפשרי. לבסוף, חתך פתולוגי מסורתי של רקמת המוח הוא לרוב לא מדויק ולא עקבי, מה שמסבך עוד יותר את ההשוואה בין חתכים היסטולוגיים לתמונות MRI. 
 ניסיונות קודמים להתגבר על אתגרים אלה הסתמכו על שימוש באלגוריתמים דפורמטיביים כדי לרשום במשותף את הנתונים ו/או מיקום של סמנים פידוציאליים בתוך הרקמה או סביבה כהפניה. 5, 6, 7, 8 הגישה הראשונה דורשת מודלים חישוביים מורכבים הרגישים במיוחד לסיבוכים עקב עיצוב נתונים, חפצי הדמיה ושינויים הנגרמים על ידי עיבוד רקמות. 4 מצד שני, הגישה האחרונה מציגה את האפשרות לזהם או לפגוע בדרך אחרת ברקמה עצמה. 9
הגישה המתוארת כאן משפרת את המעבר בין שיטות באמצעות שימוש ב-MRI לאחר המוות כדי לגשר על הפער בין MRI in vivo להיסטולוגיה. MRI לאחר המוות מספק תמונות תלת מימדיות (תלת מימד) של המוח ברזולוציה גבוהה יותר ממה שניתן להשיג in vivo ובנוסף, מספק את הנתונים הדרושים להפקת מודל מדויק מבחינה מורפולוגית של פני המוח. לאחר מכן ניתן להשתמש במודל דיגיטלי זה ליצירת מחזיק מותאם אישית בהדפסת תלת מימד עבור המוח. עם מיקום זהיר, מחזיק המוח מאפשר חתך מוח מדויק ומכוון MRI, מפחית את הצורך באלגוריתמים מתמטיים מורכבים, ומאפשר התמקדות באזורים ספציפיים לדגימה ממוקדת. 
המעבדה שלנו הציגה לאחרונה שיטות חדשות ליצירת מחזיקי מוח ופורסים מותאמים אישית באמצעות MRI לאחר המוות וטכנולוגיית הדפסת תלת מימד עבור מוחות אנושייםשל 10 ומרמוסטים. 4 שתי השיטות מאפשרות מתאם מדויק יותר בין MRI והיסטולוגיה במסגרת מחקרית, ובסופו של דבר מאפשרות הבנה מעמיקה יותר של הפתולוגיה הספציפית העומדת בבסיס חריגות MRI. ניסויים שתוכננו בקפידה, שבהם המוח נדגם שוב ושוב לאורך זמן in vivo, יכולים לספק הקשר לפירוש הפתולוגיה, מה שבתורו יכול להוסיף ספציפיות לפירוש ה-MRI. כאן, אנו מציגים פרוטוקול מותאם במסגרת מאוחדת שניתן ליישם על כל רקמת מוח, בין אם היא נובעת מפרימטים לא אנושיים, מכרסמים או בני אדם. אנו מספקים הוראות מפורטות, וסרטון מתאים, לחיתוך המרמוסטים. אף על פי שהפרוטוקול הכללי חל על כל סוג של מוח, בשל הבדלים ברכישת MRI ובגודל הרקמה, כמו גם האתגרים שנתקלים בהם כאשר מתמודדים עם סוגי מוח מסוימים, ישנם כמה הבדלים בגישה כתלות בסוג המוח המעובד. במצגת זו, קטעים עם "אנושי" יצביעו על הבדלים בפרוטוקול הספציפי למוח האנושי.

<table><tbody><tr><td>7T/30 ס"מ USR AVIII Bruker MRI</td><td>Bruker Biospin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>38 מ"מ סליל נפח Bruker Biospin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fomblin</td><td>Solvay Solexis</td><td></td><td></td></tr><tr><td>50 מ"ל צינורות צנטריפוגה פלקון, פוליפרופילן,</td><td>קורנינג</td> סטרילי <td>21008-951</td><td></td></tr><tr><td>ספוגי גזה של פישרברנד</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>13-761-52</td><td></td></tr><tr><td>סרט מעבדה לכל מטרה Parafilm M</td><td>Bemis</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Leica RM2235 מיקרוטום סיבובי&nbsp;</td><td>להבים</td> חד פעמיים Leica <td></td><td></td></tr><tr><td>Leica, פרופיל נמוך (819)</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cresyl Violet Acetate, 0.1%</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td> מימית <td>26089-01</td><td></td></tr><tr><td>Luxol Fast Blue, 0.1% ב-95% אלכוהול</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>26056-15</td><td></td></tr><tr><td>ETOH</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ultimaker 2 מורחב&nbsp;</td><td>Ultimaker.75</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>ק"ג ממותג רשמי של Ultimaker PLA&nbsp; נימה, 2.85 מ"מ, כסף מתכתי</td><td>Ultimaker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Axio Observer.Z1</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zen 2 (מהדורה כחולה)</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Netfabb Professional 5.0.1</td><td>Netfabb</td><td>http://www.netfabb.com/professional.php</td><td></td></tr><tr><td>Meshmixer 10.9.332</td><td>Autodesk</td><td>http://www.meshmixer.com/download.html</td><td></td></tr><tr><td>Mipav 7.2</td><td>NIH CIT</td><td>http://mipav.cit.nih.edu</td><td></td></tr><tr><td>Cura</td><td>Ultimaker</td><td>https://ultimaker.com/en/products/cura-software</td><td></td></tr></tbody></table>

ניצול טכנולוגיית הדפסה 3d כדי מיזוג mri עם היסטולוגיה: פרוטוקול המוח חתך

Utilizing 3D Printing Technology to Merge MRI with Histology: A Protocol for Brain Sectioning

הדמיית תהודה מגנטית (MRI) מאפשרת תיחום בין רקמה תקינה לחריגה בקנה מידה מקרוסקופי, תוך דגימת נפח רקמה שלם באופן תלת מימדי. בעוד ש-MRI הוא כלי רגיש ביותר לאיתור חריגות ברקמות, הקשר של שינויי אות עם תהליך פתולוגי בסיסי הוא בדרך כלל לא פשוט. במערכת העצבים המרכזית, למשל, דלקת, דה-מיאלינציה, נזק אקסונלי, גליוזיס ומוות עצבי עשויים כולם לגרום לממצאים דומים ב-MRI. ככזה, הפרשנות של סריקות MRI תלויה בהקשר, ולכן יש חשיבות עליונה למתאם רדיולוגי-היסטופתולוגי. למרבה הצער, חתך פתולוגי מסורתי של רקמת המוח הוא לרוב לא מדויק ולא עקבי, ובכך מסבך את ההשוואה בין חתכים היסטולוגיים ל-MRI. מאמר זה מציג מתודולוגיה חדשה לחיתוך מדויק של רקמות מוח של פרימטים ובכך לאפשר התאמה מדויקת בין היסטולוגיה ל-MRI. הפרוטוקול המפורט המתואר במאמר הזה יסייע לחוקרים ליישם את השיטה הזו, שמסתמכת על יצירת פורסות מוח מודפסות בתלת-ממד. עם שינוי קל, ניתן ליישם אותו בקלות עבור מוחות של מינים אחרים, כולל בני אדם.

זרימת העבודה של שיטה זו מסוכמת באיור 1. ברגע שהמוח הוא פרוס, השוואה ויזואלית בין תמונות MR ותמונות של המשטחים השטחיים של לוחות מראה משחק אורינטציה טוב חוצה רצועות מרובות (איור 2). אחרי לוחות מוטבעי פרפין, הם הם מחולקים על microtome ומוכתמת. השוואה יסודית יותר בין ברזולוציה הגבוהה MRI לאחר מוות ואת הסעיפים היסטולוגיה המוכתמים מדגימה התאמה מדויקת ועקבית בכל המבנים של המוח המרמוסט (איור 3). במודל חיה זו של MS, החיות לפתח נגעים בחומר הלבן הפזורים ברחבי החומר הלבן במוח. נגעים אלה יכולים להיות מזוהים פולשנית על ידי ביצוע MRI. איור 4 מדגים את היכולת של טכניקה זו על מנת להבהיר את המצע פתולוגית של ממצאי ה- MRI. נגעים קטנים שזוהו ב- MRI in vivo יכוללהיות במעקב משני MRI ו היסטולוגיה לאחר המוות. כפי שניתן לראות את ריבועי, פגיעה במיאלין בתוך נגעים הוא אחד המרכיבים העיקריים נהיגה שיתחלף הרמזור MR (והיפראינטנסיות לעומת הרקמה הסובבת). בדיקת ה- MRI היסטולוגיה לאחר המוות גם יכול להראות נגעים החמיצו על in vivo MRI (איור 4). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54780/54780fig1.jpg" /> איור 1. Workflow ליצירת תיבת מבצעה המרמוסט המוח. המוח הוא קבוע עם פורמלין (A1) וכן MRI משוקלל T2 נרכש עם ווקסלים איזוטרופיים של 150 מיקרומטר לכל קצה (A2). תמונות מעובדים thresholded ליצור מסכה בינארי (A3). המשטח הוא שניתנו אז תוכנת מודלים 3D (A4). חיסור בוליאני בין תבנית מבצעה ומודל המוח יוצר מודל דיגיטלי של מבצעה במוח (B1). תיבת מבצעה המוח מודפסת במדפסת 3D (B2). המוח הוא הניח אז בתקיפות בתיבת מבצעה עבורחיתוך (B3). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54780/54780fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/54780/54780fig2.jpg" /> איור 2. משמאל לימין: בשנת vivo MRI, לאחר מות MRI, ולצלם לוח רקמות. מטוסי חיתוך נקבעו בהתבסס על MRI (B) לאחר המוות חזותי לעומת פרוסת MRI vivo המקבילה (א). המוח נחתך ואז, ואת הלוחות וכתוצאה מכך נמצאו להיות עקבי (C). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54780/54780fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/54780/54780fig3.jpg" /> MRI לאחר המוות ברזולוציה גבוהה איור 3. היסטולוגיההתאמת סעיף. לוחות היו מוטבע פרפין, לחתוך עם microtome ל -4 מיקרומטר חלקים, ומוכתמת עם סגול כחול cresyl מהיר (B). הסעיפים מכן הותאמו ויזואלית עם T2 100 מיקרומטר * משוקלל MRI מבוסס על מבנים מוחיים (א). פרטים לרכישת התמונה מופיעים בקטע המשלימה מטעם הפרוטוקול ומבני מוח בטבלת 1.: (1) חץ אדום = כמוסה פנימית, חץ כחול = השליך קדמי; (2) חץ אדום = putamen, חץ כחול = בדרכים אופטיות; (3) חץ אדום = caudate, חץ כחול = ההיפוקמפוס; (4) חץ אדום = כפיס מוח, חץ כחול = אמת מוחות; (5) חץ אדום = colliculus נחה, חץ כחול = בדרכי פירמידה. התיבה המקווקות B1 מצביעה על פרוסה שבו, או במהלך חיתוך במוח או הטבעת פרפין, שגיאה גרמה סיבוב קל על ציר Y, ​​מה שמוביל התאמה של השליך הקדמי בצד השמאל. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54780/54780fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג</a>גרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/54780/54780fig4.jpg" /> איור 4. מעקב נגעים מ MRI in vivo סעיף היסטולוגיה. תפקידיו של מוסד vivo MRI לא הראה שום ראיות משכנעות של אות והיפראינטנסיות נורמלית להציע נגעים או בדרכים אופטיות (A1). עם זאת, MRI לאחר המוות ברזולוציה הגבוה מראה ברורי יתר קווים אינטנסיביים בשני שטחים האופטיים (A2). הכתם הסגול הכחול / cresyl המהיר של קטע היסטולוגיה 4 מיקרומטר מראה כי באזורי hyperintense לראות על vivo לשעבר MRI הם demyelinated (A3). ב החומר הלבן במוח, את in vivo MRI מראה והיפראינטנסיות עדין בילטרלי (B1 שהורחבה את ריבועי). אזורי hyperintense יותר ברורים על ברזולוציה הגבוהה לאחר מות MRI (B2). כתם LFB של קטע היסטולוגיה 4 מיקרומטר מראה כי באזורים אלה demyelinated (B3). לאחר השוואה עם ה- i הבסיסn vivo MRI וכתם hemotoxylin-ו-eosin, בצד ימין היה נחוש בדעתו להיות חריגות אנטומי, לא נגע demyelinated. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54780/54780fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="קבצי קוד משלימה" src="/files/ftp_upload/54780/54780supplementalfiles.jpg" /> קבצי קוד משלימה. Brain_Slicer_Parts_Marmoset.stl: <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54780/Brain_Slicer_Parts_Marmoset.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד את הקובץ.</a> Brain_Slicer_Parts_Human.stl: <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54780/Brain_Slicer_Parts_Human.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד את הקובץ.</a> Cap_Insert.stl: <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54780/Cap_Insert.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד את הקובץ.</a>

המטרה הכללית של פרוטוקול זה היא ליישר הדמיה בתהודה מגנטית במדויק כרכי תמונה (MRI) עם קטעים היסטולוגיה באמצעות יצירת בעלי המוח 3D מודפס אישית ותיבות מבצעה.

ניצול טכנולוגיית הדפסה 3D כדי מיזוג MRI עם היסטולוגיה: פרוטוקול המוח חתך

Magnetic resonance imaging (MRI) allows for the delineation between normal and abnormal tissue on a macroscopic scale, sampling an entire tissue volume ...

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא לבצע התאמה מדויקת בין נפחי דמויי MRI לבין חתכי היסטולוגיה, באמצעות יצירה של מחזיקי מוח ותיבות חיתוך מותאמות אישית בהדפסת תלת-ממד. למרות שסרטון זה מתמקד ברקמת מוח שהוצאה מקוף מרמוזט, ניתן להחיל פרוטוקול זה על כל מוח, בין אם הוא מקורו במכרסם, בפרימט שאינו אדם או בבן אדם. הכינו עמדת עבודה כפי שמתואר בפרוטוקול.מלאו את המבחנה ב-Fomblin ובגזה עד לסימון של 20 milliliter. דחסו את הגזה כדי להסיר בועות אוויר במהלך המילוי. ייבשו בעדינות את המוח מפורמלין.לאחר מכן, הכניסו את המוח כאשר החלק הקדמי פונה לתחתית המבחנה. קבעו בזהירות את המוח בתוך המבחנה באמצעות גזה מסביב לדפנות המוח כדי לקבע את מיקומו. מלאו את שאר המבחנה בגזה וב-Fomblin.הסר בזהירות בועות אוויר לאורך התהליך. לאחר מכן, הדק את הפקק ואטום את המבחנה בפרפין. סמן את הפקק ואת הקו בסימון של החריץ הבין-המισפרה (inter hemisphere fissure).לאחר מכן, עטפו את המבחנה בנייר סופג והכניסו אותה לסליל כאשר הסימון נמצא במיקום המרכזי העליון. הכניסו את הסליל לסורק ה-MRI. לאחר הרכישה ועיבוד הנתונים, נקבל תמונת T2-weighted שבה נוכל להשתמש כדי ליצור מודל דיגיטלי של המוח.פתחו את ה-MRI במישור הקורונלי. לאחר מכן, השתמשו בכלי הטרנספורמציה כדי לבצע דגימה מחדש (resample) של התמונה לווקסלים איזוטרופיים של 1 millimeter. לבסוף, החילו מסנן להפחתת רעשים לא ליניארי.בחר ב-displays look up table. לאחר מכן לחץ על כפתור ה-dual Threshold. גרור את הסמן על הגרף כך שיכסה את המוח כולו.צרו מסכת מוח בינארית באמצעות אלגוריתם הסגמנטציה Threshold using min/max. הזינו בתיבת ה-Lower limit את הערך המופיע בפינה השמאלית התחתונה של גרף העוצמה, ממש מתחת לסקאלה. לאחר מכן, בחרו ב-Binary ובטלו את הסימון של Inverse threshold.בחר באלגוריתם המורפולוגי, Fill holes. סמן את Process in 2.5D. כדי למלא את הרווח שבין המוח האחורי לקורטקס, בחר ב-line VOI.סמנו קו חיבור בין המוח האחורי לקורטקס בשני צדי המוח בנקודה הלטרלית ביותר. המשיכו לסמן חיבורי VOI לאורך המוח. המירו את ה-VOIs למסכת בינארית.השתמש במחשבון התמונות (Image calculator) כדי לשלב את המסכות הבינאריות של ה-VOI והמוח על ידי בחירה בפעולת OR. בחר באפשרות Promote destination image type. כעת בחר באלגוריתם המורפולוגי Fill holes.סמנו את Process ב-2.5D. בחרו באלגוריתם Extract surface, בחרו ב-Mask image, הזינו שם ולאחר מכן בחרו בסוג הקובץ ply. ניתן למקם את המרווחים בתיבת החיתוך התואמים למיקום מישור הפרוסה החל מקדמת המוח, מאחורי המוח או ביחס לאזור עניין, כגון הנגעים בחומר הלבן הנראים כאן.באמצעות VOI של תיבה, שרטטו תיבה סביב המוח. העתיקו והדביקו את התיבה על מספר פרוסות ה-MRI התואם לעובי מרווחי הפלטה המתוכננים. לאחר מכן, דלגו קדימה לפי מספר פרוסות ה-MRI לכל מקטע והניחו את התיבה כפי שנעשה קודם לכן כדי ליצור מרווח להב נוסף.חזור על תהליך זה לאורך המוח. הפוך את ה-VOIs של התיבה למסכה בינארית (Binary mask). לאחר מכן, הוצא את המשטח באמצעות Extract surface כפי שבוצע קודם לכן עבור המוח.בחר את המסכה הבינארית (Binary mask) של מרווח הלהב. השתמש ב-Image math כדי להכפיל אותה ב-10,000. לאחר מכן, השתמש ב-Image calculator כדי להוסיף את המסכה הבינארית המוכפלת ל-MRI האיזוטרופי שעבר דגימה מחדש (resampled isotropic MRI).כעת, על ידי בחירה בתצוגה הטרי-פלנרית (triplanar view), ניתן לראות מפת להבים של ה-MRI המראה את המיקום שבו המוח ייחתך בשלוש תצוגות אורתוגונליות. ב-Netfabb Professional, בחרו ב-Add part. לאחר מכן בחרו בדגמי ה-Blade Gap וה-Brain Model plys.בחר את מודל המוח ולחץ על מצב תיקון (repair mode). השתמש בכפתור בחירת המעטפת (shell selection) כדי לבחור את המוח. לאחר מכן, העבר את הבחירה למעטפות האחרות ומחק אותן.לאחר מכן החילו את התיקון והסירו את החלק הישן. כאשר המוח נבחר, בחרו ב-Move. לחצו על to origin ורשמו את הפרמטרים בתיבות X, Y ו-Z.אלו נחוצים כדי לשמור על מיקום מרווח הלהבים. לחץ על תרגום. וסגור את החלון.בחרו את מודל Blade Gap ובצעו לו טרנסלציה באמצעות הפרמטרים שנרשמו בשלב הקודם. בחרו את מודל המוח ולחצו על מצב תיקון (repair mode). השתמשו בכפתור בחירת המעטפת (shell selection) כדי לבחור את המוח.לאחר מכן בחרו ב-Smooth triangles. הזינו ארבעה במספר ה-Iterations. וסמנו את Prevent volume shrinking.בחר ב-Reduce Triangles והזן 200000 בתיבת ה-Target Triangle Count. לאחר מכן בחר ב-Automatic repair ובצע תיקון ברירת מחדל. החל את התיקון.לאחר מכן, ייצאו את מודל המוח המוחלק כקובץ STL. ייבאו את מודל המוח המוחלק ל-Meshmixer. השתמשו בכלי הפיסול (sculpting tools) כדי להחליק את האזורים שסומנו באמצעות ה-VOIs של הקווים.תקנו פגמים מינוריים אחרים במודל. ייבאו את מודל המוח הערוך והמחליק ל-Netfabb Professional. לאחר מכן הוסיפו את החלק, brain slicer parts marmoset.בחר ב-Shells להפיכה לחלקים (parts). לאחר מכן, שנה את השם של כל חלק כפי שמתואר בפרוטוקול. באמצעות הגדרות הבחירה המתוארות בפרוטוקול, לחץ וגרור את החלקים כדי למקם את המוח במרכז התיבה.לחצו וגררו את החלקים כדי להתאים את עומק המוח בתיבה. בחרו את מודל המוח המוחלק והערוך, את מודל החיתוך בתיבה ובחרו בפעולת boolean. לחצו על מודל המוח כדי להפוך אותו לאדום.בחרו בהפחתה בוליאנית (boolean subtraction). בצעו את החישובים. סמנו את הבליטות שעלולות למנוע את מיקומו התקין של המוח.עיינו בסעיף הנלווה של הפרוטוקול לקבלת שיטה להסרתם. בחרו את דגם מרווח הלהב ולחצו על move. רשמו את התוצאה במיקום Z.זה יהיה המיקום של מרווח הלהב האחורי ביותר. לאחר מכן סגור את החלון. בחר את חלק הלהב מרשימת חלקי פורס המוח ולחץ על Move.הזינו את ערך ה-Z מהשלב הקודם. והזינו את ערכי המיקום הנוכחיים X ו-Y. בחרו ב-Translation מוחלט (absolute) ובצעו את ההזזה.לחצו על Duplicate. אם עובי הנתח עקבי, כפי שמוצג כאן, הזינו את מספר הלהב הכולל, את הספירה הכוללת ואת ה-Z count, והזינו את עובי הנתח בתיבת ה-Z gap. לאחר מכן בחרו ב-duplicate.בחרו את חלק להב המיקרוטום מתוך חלקי פורס המוח. חזרו על אותם שלבי הזזה ושכפול שבוצעו עם חלק הלהב. בחרו את כל להבי המיקרוטום ואת מחזיק הלהב הראשי ולחצו על פעולת בוליאנית (boolean operation).בחר את כל להבי המיקרוטום (Microtome Blades) כדי לצבוע אותם באדום ולחץ על חיסור בוליאני (boolean subtraction). לאחר מכן, החל את החישובים. היכנס למצב תיקון ובחר בתיקון אוטומטי.בצע תיקון מורחב (Extended Repair) והחל את התיקון. ייצא את מחזיק הלהבים כקובץ STL. בחר את כל הלהבים, את התיבות הראשית והמשנית, ואת מודל המוח הערוך והמחליק, ולחץ על פעולת בוליאנית (boolean operation).השתמשו בחלון בחירת החלקים (Parts selection) כדי לצבוע את כל החלקים, למעט התיבה הראשית, באדום. לאחר מכן בחרו בהפחתה בוליאנית (boolean subtraction). החילו את החישובים.היכנסו למצב תיקון (repair mode) וסמנו את התיבה עבור קצוות חדים שעלולים לפגוע במוח. ניתן לתקן אותם במצב התיקון של Netfabb, או באמצעות כלי הפיסול ב-Meshmixer.לאחר מכן בחרו בתיקון אוטומטי (Automatic repair). בצעו תיקון מורחב (Extended Repair). לאחר מכן החילו את התיקון.ייצאו את תיבת המוח כקובץ STL. בתוכנת Cura, בחרו ב-Load וייבאו את תיבת המוח. לחצו על כפתור ה-Rotate.לאחר מכן, לחצו וגררו כדי להניח את התיבה בצורה שטוחה. עריכו את הגדרות ההדפסה כפי שמופיע בפרוטוקול, ולאחר מכן שמרו את נתיב הכלי (toolpath).בצע את אותו התהליך עבור מחזיק הלהב ושכפל גם את האובייקט הזה. לאחר מכן, שמור את נתיב הכלי (toolpath). לאחר מריחת שכבה דקה של דבק על משטח ההדפסה, הדפס את קופסת המוח ואת מחזיקי הלהבים במדפסת התלת-ממד בהתאם להגדרות המתוארות בפרוטוקול.לאחר השלמת ההדפסות, ניתן להכין את המוח לחיתוך. הגדירו תחנת עבודה כפי שמתואר בפרוטוקול. מקמו את המוח בזהירות בתוך הקופסה וודאו שהוא מקובע היטב במקומו.מקמו את להבי המיקרוטום בתוסי הלהבים בחריצים המתאימים בקופסה. בעזרת כפפות מגן, לחצו בחוזקה על תוסי הלהבים. הפעילו לחץ איטי ומאוזן כדי לחתוך את המוח.הסר את הפרוסות אחת אחת, החל מחלקו הקדמי של המוח. למרות שגישה זו היא פשוטה, השיטה דורשת שלבים רבים וכן שימוש במספר סוגי תוכנות, ולכן על החוקרים להכיר את ממשקי המשתמש לפני תחילת הפרוצדורה. תזרים עבודה זה מסכם את הפרוטוקול להכנת קופסת חיתוך עבור מוח של Marmoset.המוח מקובע בפורמלין ונרכשת תמונת MRI בשקלול T2 ברזולוציה של 150 micron. התמונות מעובדות ועוברות סף (thresholding) כדי ליצור מסכה בינארית. לאחר מכן, פני השטח מרונדרים בתוכנה למידול בתלת-ממד.חיסור בוליאני בין תבנית פריסה למודל המוח יוצר את המודל הדיגיטלי של פורס המוח. לאחר מכן, קופסת פורס המוח מודפסת במדפסת תלת-ממד. לבסוף, המוח מונח בחוזקה בתוך קופסת הפורס לצורך החיתוך.לאחר חיתוך המוח, השוואה ויזואלית בין תמונות ה-MRI שבוצעו In Vivo לבין אלה שבוצעו לאחר המוות (post-mortem), יחד עם תמונות של המשטחים השטחיים של הפרוסות, חושפת התאמה טובה במיקום ובאוריינטציה לאורך מספר פרוסות. השוואה מעמיקה יותר בין ה-MRI ברזולוציה גבוהה לאחר המוות לבין נתחים היסטולוגיים שנצבעו ב-LFB CV ממספר פרוסות מוח, מדגימה התאמה מדויקת ועקבית בכל מבני המוח של המרמוזט. במודל חיה זה של טרשת נפוצה, החיות מפתחות נגעי חומר לבן הפרוסים ברחבי המוח.באמצעות טכניקה זו, ניתן לעקוב אחר נגעים קטנים שהתגלו ב-MRI In Vivo הן ב-MRI לאחר המוות (post-mortem) והן בחתכים היסטולוגיים. ההיסטולוגיה וה-MRI לאחר המוות עשויים לחשוף נגעים שפיספסו ב-MRI In Vivo. במקרה זה, ה-MRI In Vivo לא הראה ראיות משכנעות לאות היפר-אינטנסיבי נורמלי שיצביע על נגעים באחד ממסלולי הראייה (optic tracts).עם זאת, ב-MRI לאחר המוות, נצפו היפר-אינטנסיביות של אות במסלול הראייה. אזורים אלו תאמו באופן ישיר את הנגעים המיליניים שנראו בחתך ההיסטולוגי של LFB CV. לסיכום, המתודולוגיה המוצגת כאן מאפשרת לחוקרים להעריך במדויק את הפתולוגיה העומדת בבסיס ממצאי ה-MRI.אנו סבורים כי זוהי גישה מבטיחה לזיהוי סמנים ביולוגיים חדשים למחלות המערבות את המוח ולתהליכים פתולוגיים ספציפיים כגון דלקת ודמילינציה.

utilizing-3d-printing-technology-to-merge-mri-with-histology-protocol

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

פרוטוקול זה מתאר כיצד מוטבע שרף רקמת המוח יכול להיות מוכן צילמו בשלושת המימדים אלומת יונים ממוקדת, סריקת מיקרוסקופ אלקטרונים.

אלומת יונים ממוקדת כרסום מיקרוסקופיית אלקטרונים של רקמת המוח

באמצעות סריקות MRI (אנושיות), תוכנת הדמיה תלת-ממדית וניתוח אימונוהיסטולוגי, אנו מתעדים שינויים בחדרים הצדדיים של המוח. מיפוי תלת מימד אורכי של שינויים בנפח החדר הצדדי ואפיון של שינויים תאיים סביב החדר המתרחשים במוח האנושי עקב הזדקנות או מחלה מודלים לאחר מכן בעכברים.

3D דוגמנות של רוחב החדרים והיסטולוגית אפיון רקמות סביב חדרי מוח בבני אדם ועכבר

באמצעות מספר זוויות לחתוך את מוח גור עכבר, אנחנו לשפר פרוסת מוח חריפה שתואר אשר לוכדת את הקשרים בין רוב מבני המוח התיכון והמוח הקדמי השמיעתיים המרכזיים.

שינוי של Colliculo-thalamocortical עכבר המוח פרוסה, שילוב הדפסת 3-D של לשכת רכיבים ודימות אופטי רב בקנה מידה

אנחנו פיתח פרוטוקולים ועוצב מנגנון מותאם אישית כדי לאפשר הטבעה של מילימטר-סולם דגימות. אנו מציגים מדגם הכנת נהלים תוך שימת דגש על הטמעת שרף אקרילי, פוליאימיד אבובים להשיג הנייח נוקשה, אחסון לטווח ארוך של דגימות לחקירה הרקמה תא ואדריכלות מורפולוגיה של...

נוקשה ההטמעה של קבוע, צבעונית, ככלל, דגימות מילימטר-סולם עבור היסטולוגיה ללא סעיף תלת-ממד על-ידי מיקרו-שחושב טומוגרפיה

מאמר זה מתאר שיטה פשוטה כדי להתכונן מוח בעל חיים קטן מיקרו-CT הדמיה, פצעים אשר ניתן לכמת, אלקטרודות הממוקם עם דיוק גבוהה בהקשר של המוח כולו.

שיטה המבוססות על מיקרו-CT אפיון נגעים ואיתור אלקטרודות במוח בעלי חיים קטנים

מאמר זה מציג פרוטוקול ניסיוני באמצעות טכנולוגיית סריקה תלת-ממדית המגשר על שני סולמות מרחביים: הסולם המרחבי המקסקופי של אנטומיה מוחית שלמה המועלת על-ידי MRI ב-&gt; 100 יקרומטר ובקנה המידה המרחבי המיקרוסקופי של הפצות עצבי באמצעות כתמים אימונוהיסטוכימיה ומערכת מערך רב אלקטרודה ושיטות אחרות (~ 10 μm).

3D סריקה תלת-ממדית מיקרומעגלים ותמונות המוח המקברקנה בתלת-ממד הטבעה בפרוטוקול החופף

טרשת נפוצה היא מחלה. בלתי מיאלואידית דלקתית ללא מרפא ניתוח רקמת המוח מספק רמזים חשובים כדי להבין את הפתוגנזה של המחלה. כאן אנו דנים מתודולוגיה וניתוח במורד הזרם של רקמת המוח של MS שנאספו באמצעות תוכנית מהירה ניתוח מהיר ייחודי במבצע במרפאת קליבלנד.

שלאחר המוות תוכנית מקיפה עבור אנשים עם טרשת נפוצה

הפרוטוקול מתאר את הייצור של הדפסים תלת מימדיים בצבע מלא של המטופל ספציפי, הגולגולת מודלים אנטומיים לשמש לסימולציה כירורגית. השלבים הקריטיים של שילוב שיטות דימות שונות, פילוח תמונה, הפקת מודל תלת מימדי, וייצור הדפסים מוסברים.

Multicolor 3D הדפסה של גידולים בתוך-גולגולתי מורכב בנוירוכירורגיה

השיטה המתוארת להלן נועדה לספק פרוטוקול מקיף להכנת נוירוכירורגיה יונקים לא אנושיים (NHP) באמצעות שילוב חדשני של שיטות הדפסה תלת מימדיות (תלת מימד) וחילוץ נתוני MRI.

ארגז כלים מבוסס MRI לתכנון נוירוכירורגי בפרימטים לא אנושיים

הפרוטוקול מספק שיטה מפורטת של הדמיה עצבית בפרוסת המוח באמצעות שיטת ניקוי רקמות, ScaleSF. הפרוטוקול כולל הכנת רקמות מוח, הבהרת רקמות, טיפול בפרוסות מנוקות והדמיית מיקרוסקופיה של סריקת לייזר קונפוקלית של מבנים עצביים מרמות מזוסקופיות למיקרוסקופיות.

שיטת ניקוי רקמות להדמיה עצבית מסולמות מזוסקופיים למיקרוסקופיים

למרות התפקיד המכריע של מקלעת הכורואיד במוח, מחקרי דימות מוחי של מבנה זה נדירים בשל היעדר כלי סגמנטציה אוטומטיים אמינים. הפרוטוקול הנוכחי נועד להבטיח פילוח ידני סטנדרטי של מקלעת הכורואיד שיכול לשמש בסיס למחקרי דימות מוחי עתידיים.

פילוח ידני של מקלעת הכורואיד האנושית באמצעות MRI מוח

למדו ליישר בדיוק תמונות MRI עם חתכי היסטולוגיה באמצעות מחזיקי מוח מודפסים בתלת-ממד. פרוטוקול זה משפר מתאם רדיולוגי-היסטופתולוגי במחקר עצבי.

ניצול טכנולוגיית הדפסה 3D כדי מיזוג MRI עם היסטולוגיה: פרוטוקול המוח חתך

גלה סרטונים נוספים