Generation of Human Monocyte-derived Dendritic Cells from Whole Blood

Wilfried Posch; Cornelia Lass-Fl&#246;rl; Doris Wilflingseder

doi:10.3791/54968

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Generation of Human Monocyte-derived Dendritic Cells from Whole Blood

전혈로부터 인간 단핵구 유래 수지상 세포의 생성

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07:35 min

December 24, 2016

DOI: 10.3791/54968-v

Wilfried Posch¹, Cornelia Lass-Flörl¹, Doris Wilflingseder¹

¹Division of Hygiene and Medical Microbiology,Medical University of Innsbruck

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기에서는 인간 항응고 혈액의 밀도 구배 원심분리 후 말초 혈액 단핵 세포에서 자기 비드 분리에 의해 단핵구를 분리하는 방법을 보여줍니다. 5일 동안 배양한 후 인간 단핵구는 미성숙 수지상 세포로 분화되고 비임상 환경에서 실험 절차를 수행할 준비가 됩니다.

이 CD14 마그네틱 비드 분리 기술의 전반적인 목표는 혈액에서 단핵구를 분리하여 체외에서 수지상 세포 또는 대식세포로 추가로 분화하는 것입니다. 이 방법은 수지상 세포에 의한 병원체 또는 항원의 인식, 처리 및 발현에 대한 면역학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 분리 절차의 주요 장점은 98-99%의 순수 단핵구 집단을 얻을 수 있다는 것입니다.

이 절차를 시연하는 것은 우리 작업 그룹의 기술자인 Karolin Thurnes가 맡을 것입니다. 먼저 받은 혈액의 양에 따라 멸균 50ml 원심분리기 튜브에 혈액 팩 부피를 나눕니다. 필요에 따라 멸균 Dulbecco의 PBS를 사용하여 각 튜브의 최종 부피를 50ml로 조정하고 샘플을 원심분리합니다.

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