개정 공동 교체에 새로운 진단: 쥡니다 및 다중 연쇄 반응 임 플 란 트

관절 흡인, 다중 중합효소 연쇄 반응 및 초음파 처리로 설명된 절차의 전반적인 목표는 인공 관절 주위 감염이 의심되는 경우 정형외과 의사에게 빠르고 신뢰할 수 있는 미생물 결과를 제공하는 것입니다. 이 방법은 병원체의 조기 발견과 같은 인공 관절 주위 감염의 진단 및 치료 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있으므로 조기 표적 치료가 가능합니다. 이러한 기술의 주요 장점은 신속한 결과를 제공한다는 것입니다.

인공 관절 주위 감염이 의심되는 경우 감별 진단을 가속화할 수 있습니다. 환자를 검사 침대에 누운 자세로 놓습니다. 무릎에 구멍을 뚫어야 하는 경우 환자의 무릎 아래에 무릎 롤을 놓아 무릎이 약간 구부러진 자세로 놓이

전기 가위를 사용하여 빽빽하거나 긴 체모를 줄이십시오. 그런 다음 텍스트 프로토콜에 따라 수술을 위해 기구 테이블과 드레스를 준비합니다. 그런 다음 피부 소독제를 사용하여 환자의 천자 부위 피부를 철저히 씻습니다.

창공 멸균 드레이프로 펑크 부위를 덮습니다. 그런 다음 드레이프를 통해 펑크 부위를 식별합니다. 뾰족한 메스 날을 사용하여 절개 부위의 피부를 살짝 찌르며 절개합니다.

캐뉼러를 주사기의 루어 슬립에 부착합니다. 그런 다음 찌르는 절개 부위를 통해 캐뉼라를 삽입합니다. 무릎 관절의 위쪽 오목한 부분에서 슬개골의 위쪽 극 아래 오목한 곳을 향해 등쪽과 내측으로 45도 각도를 조준하고 약 5cm 깊이까지 바늘을 삽입합니다.

주사기의 피스톤을 당겨 관절액을 흡입합니다. 혈종이 형성되는 것을 예방하려면 드레싱을 바르고 찌르는 절개 부위에 붕대를 감습니다. 알코올 소독제를 사용하여 소아 혈액 배양 플라스크의 막을 소독합니다.

그런 다음 주사기에 새 캐뉼라를 넣고 1-3mL의 흡인 관절액을 플라스크에 주입합니다. 부드럽게 젓거나 회전시켜 섞습니다. 네이티브 관절 흡인 표본을 준비하려면 주사기에서 캐뉼라를 제거합니다.

그런 다음 첨가제가 없는 채혈 튜브를 열고 채취 튜브에 흡입물 1mL를 주입합니다. PCR 분석을 위해 뚜껑을 교체하고 고정합니다. 세포 수 및 분화를 위해 관절 흡인 1-4mL를 EDTA가 포함된 채혈 튜브로 옮깁니다.

마스터 믹스 튜브를 실온으로 설정하여 해동합니다. 수집된 검체 180mcL를 샘플 튜브로 옮깁니다. 전체 워크플로우의 품질 관리를 위해 단백질 kinase K와 내부 대조 유전자가 포함된 샘플 튜브 캡으로 샘플 튜브를 닫습니다.

조종석에서 왼쪽 하단 모서리에 있는 New Test 버튼을 터치하여 운영 소프트웨어를 엽니다. 터치 스크린을 사용하여 환자의 데이터 또는 샘플을 입력하고 ID.To, 드롭다운에서 검체를 선택하고, 먼저 ITI 카트리지를 선택한 다음, 적용 모드로 정형외과를 선택하고, 마지막으로 샘플 유형으로 활액 또는 초음파 유체를 선택합니다. 그런 다음 시작 버튼을 누릅니다.

샘플 튜브 바닥에 있는 바코드를 스캔합니다. 그런 다음 샘플 튜브를 Lysator에 삽입합니다. 그런 다음 조종석 화면에서 샘플을 선택하여 Lysator에서 샘플 튜브의 잠금을 해제합니다.

그런 다음 s를 제거하십시오.amplysator에서 튜브를 제거하고 Lysator의 상단 덮개를 닫습니다. 샘플 튜브를 PCR 카트리지의 샘플 튜브 슬롯으로 옮깁니다. 그런 다음 해동된 마스터 믹스 튜브를 PCR 카트리지의 마스터 믹스 슬롯에 삽입합니다.

콕핏 모니터의 지침에 따라 마스터 믹스 및 샘플 튜브로 PCR 카트리지를 스캔합니다. PCR 카트리지를 분석기의 표시된 카트리지 슬롯에 삽입합니다. 왼쪽 하단 모서리에 있는 조종석 터치 스크린에서 Active Tests(활성 테스트)를 선택한 다음 올바른 샘플 ID를 선택하여 테스트 결과를 표시합니다.

결과를 기기의 메모리에 저장하고 나중에 참조할 수 있도록 인쇄하거나 내보냅니다. 미생물학자와 상담하고 사례 세부 사항에 대해 간략히 설명하면 샘플을 신속하게 분석할 수 있도록 준비할 수 있습니다. 층류 기류 작업대 아래에서 플라스틱 용기를 열고 수술실에서 심은 보철물을 잡고 심은 이물질이 최소 0.9% 덮일 때까지 멸균 염화나트륨 용액을 80% 플라스틱 용기를 닫습니다.

그런 다음 플라스틱 용기를 30초 동안 완전히 흔들거나 교반합니다. 플라스틱 용기를 초음파 처리 수조로 옮깁니다. 그런 다음 수조의 유체 레벨을 확인하십시오.

40 ± 2 킬로헤르츠의 주파수와 0.22 ± 0.04 와트 / 평방 센티미터의 출력 밀도로 5 분 동안 표본을 초음파 처리합니다. 그런 다음 30초 동안 표본을 흔들거나 완전히 와류로 만듭니다. laminar flow bench 내부에서 50mL의 초음파 처리 유체를 수집하여 튜브를 단단히 밀봉하기 전에 멸균 튜브로 옮깁니다.

농축 초음파 처리 유체를 만들려면 4200 회 G에서 튜브를 10 분 동안 원심 분리하고 10mL의 잔류 부피를 남기고 피펫을 사용하여 나머지 상등액을 버리십시오. 피펫팅과 볼텍싱으로 펠릿을 다시 현탁시킵니다. 적절한 배양 배지의 각 플라스크에 0.5mL의 농축 초음파 처리 유체를 접종합니다.

이 비디오의 앞부분에서 설명한 것처럼 소아 혈액 배양 플라스크에 2mL의 농축 초음파 처리 유체를 접종합니다. 그런 다음 PCR 분석을 위해 첨가제가 없는 멸균 튜브에 1mL의 농축 초음파 처리 유체를 옮깁니다. 접종된 배양 배지를 인큐베이터로 옮깁니다.

14일 동안 배양물을 배양하고 매일 성장을 확인하십시오. 보철물 주위 관절 감염의 존재는 하나의 주요 기준 또는 5개의 사소한 기준 중 최소 3개가 존재할 때 입증된 것으로 간주되었습니다. 주요 기준에는 누공의 존재 또는 두 개의 개별 미생물 샘플에서 병원체의 검출이 포함됩니다.

보조 기준에는 관절 흡인에서 양성 세포 수 또는 양성 세포 분화, 혈액 샘플에서 양성 CRP 및 침강 속도, 조직 샘플에서 양성 조직학 또는 단 하나의 미생물 샘플에서 병원체 검출이 포함됩니다. 여기의 결과는 초음파 처리 유체 및 관절 흡인의 PCR 진단에 대한 중간 정도의 민감도를 보여 주었지만, PCR이 관절 흡인 유체 또는 초음파 처리 유체에서 긍정적 인 소견을 보일 때마다 100 %의 매우 강한 특이성을 보였을 때마다, 동일한 병원체가 나중에 기존의 미생물 배양 중 하나에서 검출되었다. 비감염 사례의 다른 샘플에 대한 PCR은 위양성 결과를 보여주지 않았습니다.

초음파 처리 유체 샘플에서 16 개의 실제 병원체 중 6 개와 관절 유체 배양에서 13 개의 병원체 중 5 개가 PCR 검출에 의해 누락되었습니다. 두 물질, 관절 흡인 및 초음파 처리 유체의 결합된 PCR 진단은 18건의 감염 사례 중 12건을 정확하게 식별했습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 인공 관절 주위 감염의 진단 경로를 개선하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.

미생물학자와 정형외과 의사가 어떻게 긴밀히 협력하여 감별 진단을 최대한 개선해야 하는지 알 수 있습니다. 올바르게 수행되면 관절 흡인 후 5시간 이내에 카트리지 기반 멀티플렉스 PCR에서 임상적으로 가치 있는 결과를 얻을 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 전체 프로세스를 통해 무균 작업을 기억하는 것이 중요합니다.

인체 조직 표본 또는 미생물 표본으로 작업하는 것은 매우 위험할 수 있다는 것을 잊지 마십시오. 이 절차를 수행하는 동안 항상 개인 보호 장비와 같은 모든 예방 조치를 취해야 합니다.