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DOI: 10.3791/55265-v
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여기에서는 시험 관내 NKX6-1 + 췌장 전구 세포에 인간 배아 줄기 세포가 분화하는 4 단째의 프로토콜을 설명한다. 이 프로토콜은, 인간 다 능성 줄기 세포의 종류에 적용될 수있다.
이 절차의 전반적인 목표는 췌장 발달의 4가지 주요 단계를 통해 세포를 분화하여 체외에서 인간 만능 줄기 세포에서 췌장 전구 세포를 발현하는 NKX6.1을 효율적으로 생성하는 것입니다. 이 프로토콜은 췌장 발달의 4가지 주요 단계를 통해 인간 만능 줄기세포를 분화시킴으로써, 인간의 췌장 발달을 in vitro에서 연구할 수 있는 모델을 제공합니다. 기존 프로토콜에 비해 이 기술의 주요 장점은 다양한 인간 만능 줄기 세포주를 사용하여 높은 비율의 NKX6.1 양성 췌장 전구 세포를 생성할 수 있다는 것입니다.
췌장 전구 세포가 세포와 같은 베타를 생산하는 인슐린을 생성할 수 있는 잠재력을 가지고 있다는 점을 감안할 때, 이 기술은 당뇨병 치료, 약물 발견 및 질병 모델링을 위한 세포를 개발할 수 있는 기회를 제공할 것입니다. 0일차에는 KnockOut 혈청 교체 배지를 0일차 분화 배지로 교체하여 차별화를 시작합니다. 그런 다음 1 일과 2 일, 미디어를 흡인하기 전에 플레이트를 부드럽게 흔들어 단층에서 죽은 세포를 제거합니다.
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