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DOI: 10.3791/55268-v
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This protocol describes the differentiation of human pluripotent stem cells into human trophoblastic cells using bone morphogenic protein 4 and inhibitors of the Activin/Nodal pathways. This method allows for the efficient generation of trophoblastic cells suitable for various applications, including genetic manipulation.
여기에서는 뼈 형태 생성 단백질 4 및 Activin/Nodal 경로의 억제제를 사용하여 인간 만능 줄기 세포에서 인간 융막 세포를 효율적으로 생성하는 프로토콜을 제시합니다. 이 방법은 인간 만능 줄기 세포의 효율적인 분화에 적합하며 유전자 조작을 위해 많은 양의 세포를 생성할 수 있습니다.
이 프로토콜의 전반적인 목표는 인간 태반 형성 및 기능의 초기 사건을 연구하기 위해 뼈 형태 생성 4 및 활성 및 결절 신호 경로의 억제제를 사용하여 인간 만능 줄기 세포를 인간 영양막 세포로 분화시키는 것입니다. 이 방법은 영양막 세포 기능과 이러한 세포가 어떻게 형성되는지에 대한 연구에서 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 유전학을 포함한 다양한 응용 분야를 위해 풍부한 영양막 세포를 생산할 수 있고 세포 기능 분석을 가능하게 한다는 것입니다.
실험을 시작하려면 얼음 위에서 세포외 기질의 분취액을 3-4시간 동안 해동합니다. 얼음처럼 차가운 팁을 사용하여 50ml 원뿔형 튜브 1개와 Dulbecco의 변형 등가 배지 또는 DMEM F12 배지를 사용하여 2mg의 세포외 기질을 24ml의 얼음처럼 차가운 DMEM F12로 전달합니다. 즉시 50ml 원뿔형 튜브를 얼음에 옮겨 넣고 섭씨 4도에서 보관하십시오.
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