Name: 여성 작은 설치류에 신경을 살려주는 중간 요도 폐색 (네모) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: 학습하세요 여성 설치류에서 방광 출구 폐쇄를 유도하는 신경 보존 수술 기법을. 이 방법은 낮은 사망률과 일관된 폐쇄 수준을 제공하여 방광 재형성 연구에 활용됩니다.

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다음 실험 프로토콜은 기관의 동물 관리위원회에 의해 승인되었다. 여성 쥐 1. 니모 <ol><li> 예비 <ol><li> 약 200g 하에서 3 % 이소 플루 란 마취를 계량 암컷 스프 라그 - 돌리 쥐를 배치 동물 체중 및 면도 요오드 수술 스크럽을 사용해 prepubic 영역을 3 회 소독한다. </li><li> 다운 가열 패드, 테이프 뒷다리와 꼬리 또한 부드럽게 미끄럼 방지하기 위해서 녹화 된 20 게이지 angiocatheter과 방광 카테 테르를 꽂다. </li></ol></li><li> 해부 <ol><li> 요도쪽으로 만져 치골에서 8mm 길이 방향 피부 절개를 수행하기 위해 메스를 사용합니다. 나중에 상처 봉합을 촉진하기 위해 양쪽에있는 피부를 들어 올립니다. </li><li> 세로 미세 가위로 확산하여 스텐트 요도를 식별하는 데 퉁명스럽게 해부하다. 노출을 향상시키기 위해 미세 자기 유지 피부 후크를 배치요도. </li><li> 수행 약간 부드러운 길이 요도 및 질의 평면을 개발하는 곡선 위의 요도 지느러미하여 확산. 그런 다음, 퉁명스럽게 요도 뒤에 4-0 실크 봉합사를 통과하고 외과 의사의 매듭의 이중 던져 준비합니다. </li></ol></li><li> 부분 요도 폐색 <ol><li> 상기 angiocatheter 제거 요도에 0.9 mm 금속봉 병렬 배치하고, 후자는 여전히 그 후 쉽게 미끄러지도록 한 다음, 요도 및 금속 막대 주위에 매듭을 조인다. </li><li> 3 이상의로드를 제거하기 전에 완만 장력을 사용하여 드로우 매듭을 고정. 봉합사는 길이 약 3mm 또는 폐쇄 이후 릴리스 실험의 일부인 경우 4mm 단부 잘랐다. </li></ol></li><li> 상처 폐쇄 <ol><li> 흡수 꼰 봉합 4-0의 매장 단일 스티치를 사용하여 paraurethral 분비 대략적인. </li><li> 같은 흡수 SUT를 사용하여 매장 수평 매트리스 스티치로 피부를 닫습니다URE. 참고 : 피부 관통 스티치에 대한 흡수성 봉합사를 사용하는 틀에 얽매이지 않는 것처럼 보일 수 있지만, 우리는 상처 감염 등의 합병증이 발생하지 않았고, 봉합사 제거는 피할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 치료 후 <ol><li> 주입 부 프레 노르 핀 0.1 ㎎ / ㎏ 피하 회복 케이지 래트를 배치하기 전에. </li><li> 단일 보관되어 쥐에 처음 24 시간 동안 일부 소프트 복구 다이어트를 제공합니다. 이 기간 후, 절차 이전과 동일 쌍에 다시 집 동물은 잘 같은 치료 그룹에 속한다 제공. </li><li> 방광의 크기 및 일반 복지를위한 매일 쥐를 확인; 적어도 매주 자신의 체중을 기록합니다. </li></ol></li></ol> 여성 마우스 2. 니모 <ol><li> 예비 <ol><li> 약 18g 무게 암컷 C57BL / 6 마우스를 놓고 1.1.1에서 상세한 진행. </li><li> 24 게이지의 중앙을 사용한 것 이외는, 단계 1.1.2의 상세한 진행iocatheter. </li></ol></li><li> 해부 <ol><li> 요도쪽으로 만져 치골에서 6mm 길이 방향 피부 절개를 수행하기 위해 메스를 사용합니다. </li><li> 세로 미세 가위로 확산하여 스텐트 요도를 식별하는 데 퉁명스럽게 해부하다. 유사 무딘 박리하여 요도에 복부 실행하는 신경 혈관 다발을 들어 올립니다. </li><li> 수행 약간 부드러운 길이 요도 및 질의 평면을 개발하는 곡선 위의 요도 지느러미하여 확산. 그런 다음, 퉁명스럽게 요도 뒤에 5-0으로 비 흡수성 꼰 봉합을 통과하고 외과 의사의 매듭의 이중 던져 준비합니다. </li></ol></li><li> 부분 요도 폐색 <ol><li> 1 ml 주사기로 angiocatheter 연결 방광에 생리 식염수를 0.1 mL의 주입. </li><li> 요도에 26 게이지 캐뉼라 병렬 배치. angioca를 뒤로 당기면서 부드럽게 요도 및 정맥 주위의 매듭을 조여일. </li><li> 3 이상이 정맥을 제거하기 전에 부드러운 긴장을 사용하여 던졌습니다으로 매듭을 고정합니다. </li><li> 동물의 방광에 부드러운 압력시 (外耳道)에 나타나는 소변 테스트; 소변을 표현 할 수없는 경우에는 넥타이를 푸십시오. 그렇지 않으면, 봉합사는 약 3 맹 롱 끝나는 잘라. </li></ol></li><li> 상처 폐쇄 <ol><li> 5-0 꼰 흡수성 봉합사를 사용하여 매장 수평 매트리스 스티치로 피부를 닫습니다. </li></ol></li><li> 치료 후 <ol><li> 회복 케이지 마우스를 배치하기 전에, 0.1 ㎎ / ㎏을 피하 주사 부 프레 노르 핀. </li><li> 단일 보관되어 마우스로 처음 48 시간 동안 일부 소프트 복구 다이어트를 제공합니다. 이 기간 후, 절차 이전과 동일 그룹에 다시 집 동물은 잘 같은 치료 그룹에 속한다 제공. 참고 : 오버 막혀 처리 할 때 무효화하지 않습니다과 n에서 죽을 것이다 시술 후 만져서 팽창 방광 24 시간와 마우스은 방해 합자의 제거를위한 마취 다시 촬영 이일하지 않는 한 - 1 내선. </li><li> 방광의 크기 및 일반 복지를위한 매일 쥐를 확인; 적어도 매주 자신의 체중을 기록합니다. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Storage+and+voiding+symptoms%3A+pathophysiologic+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects.</a> Urology. 62 (5), 3-10 (2003).</li>
<li>Boyle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+lower+urinary+tract+symptoms+in+men+and+women+in+four+centres.+The+UrEpik+study%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study.</a> BJU Int. 92 (4), 409-414 (2003).</li>
<li>Coyne, K. S., Wein, A., Nicholson, S., Kvasz, M., Chen, C. I., Milsom, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Economic+burden+of+urgency+urinary+incontinence+in+the+United+States%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Manag+Care+Pharm%22%5BJournal%5D)">Economic burden of urgency urinary incontinence in the United States: a systematic review.</a> J Manag Care Pharm. 20 (2), 130-140 (2014).</li>
<li>Buttyan, R., Chen, M. W., Levin, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+bladder+outlet+obstruction+and+molecular+insights+into+the+basis+for+the+development+of+bladder+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Urol%22%5BJournal%5D)">Animal models of bladder outlet obstruction and molecular insights into the basis for the development of bladder dysfunction.</a> Eur. Urol. 32 (Suppl 1), 32-39 (1997).</li>
<li>Mattiasson, A., Uvelius, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+contractile+properties+in+hypertrophic+rat+urinary+bladder%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Changes in contractile properties in hypertrophic rat urinary bladder.</a> J Urol. 128 (6), 1340-1342 (1982).</li>
<li>Chang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alteration+of+the+PKC-mediated+signaling+pathway+for+smooth+muscle+contraction+in+obstruction-induced+hypertrophy+of+the+urinary+bladder%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Alteration of the PKC-mediated signaling pathway for smooth muscle contraction in obstruction-induced hypertrophy of the urinary bladder.</a> Lab Invest. 89 (7), 823-832 (2009).</li>
<li>Moore, J. A., Brading, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+porcine+model+of+bladder+outlet+obstruction+incorporating+radio-telemetered+cystometry%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">A porcine model of bladder outlet obstruction incorporating radio-telemetered cystometry.</a> BJU Int. 100 (5), 1192-1193 (2007).</li>
<li>Beamon, C. R., Mazar, C., Salkini, M. W., Phull, H. S., Comiter, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+sildenafil+citrate+on+bladder+outlet+obstruction%3A+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Inte%22%5BJournal%5D)">The effect of sildenafil citrate on bladder outlet obstruction: a mouse model.</a> BJU Inte. 104 (2), 252-256 (2009).</li>
<li>Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cystometric+evaluation+of+bladder+function+in+non-anesthetized+mice+with+and+without+bladder+outlet+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction.</a> J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).</li>
<li>Kang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Sequential+Changes+in+Bladder+Function+after+Partial+Bladder+Outlet+Obstruction+in+Awake+Sprague-Dawley+Rats%3A+Focus+on+the+Decompensated+Bladder%5BTitle%5D)+AND+%22Korean+J+Urol%22%5BJournal%5D)">Early Sequential Changes in Bladder Function after Partial Bladder Outlet Obstruction in Awake Sprague-Dawley Rats: Focus on the Decompensated Bladder.</a> Korean J Urol. 52 (12), 835-837 (2011).</li>
<li>Schroeder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+an+oral+endothelin+converting+enzyme+inhibitor+on+rat+detrusor+function+after+outlet+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Protective effect of an oral endothelin converting enzyme inhibitor on rat detrusor function after outlet obstruction.</a> J Urol. 172 (3), 1171-1174 (2004).</li>
<li>Sidler, M., Aitken, K., Jiang, J., Bijos, D., Bägli, D. <a target="_blank" href="http://www.jurology.com/article/S0022-5347(16)01357-4/abstract">"sometimes a sham is just a sham" - why the rodent model of partial bladder outlet obstruction needs adjustment.</a> J Urol. 195 (4), e379(2016).</li>
<li>Jin, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+detrusor+overactivity+in+rats+after+relief+of+partial+urethral+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).</li>
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동물의 사망률은 많은 보고서 10, 11, 13을 15 % 이상에서 근위부 요도에서 pBOO의 전통적인 모델의 주요 관심사 중 하나입니다. 니모는 암컷 쥐에 적용 할 때 최소한의 사망률을 보인다. 생쥐의 근위부 요도 폐쇄는 기술적으로 더 도전 쥐에 비해 때문에 더 많은 경향이 합병증이다. 우리 중반 요도 접근 방식에 대한 자리 표시 자로서 26 게이지 캐뉼라를 사용하여, 우리는 최소한의 동물 사망했다. 우리는 단지 2 아웃 (18)의 마우스 오버 차단 된 26 게이지 캐 뉼러를 사용하여 암컷 마우스에서 NEMO인가 진행중인 연구에서 (데이터는 보이지 않음). 예 차단 마우스의 절반 이상 27 게이지 뉼러로 작은 자리 사용 인해 요폐 방광 파열 과잉 폐쇄에 죽었다. 따라서, 우리는 26 게이지 자리는 약 18g의 암컷 생쥐을위한 합리...

일부 방광 출구 폐색 (pBOO)의 높은 유병률을 갖는다 심한 방광 장애 1 초래할 수있다; 스펙트럼은 양성 전립선 비대증으로 취득한 요도 협착 등 위에 후부 요도 밸브 또는 요도 밑 열림 증과 같은 선천성 기형 내지. 남성 육십년의 30 % 이상 및 2 세에 영향을 미치는 후자. 큰 환자 부담 및 pBOO과 관련된 엄청난 의료 비용이 증가 유출 저항 3에 대한 응답으로 공부 방광 리모델링에 투입 상당한 연구 노력을 보증합니다. 2006에서 2015까지 (220)를 통해 PubMed의 기사가 방광에 pBOO의 효과에 관한 발표되었다 색인. pBOO에 대한 동물 모델은 같은 쥐 (5), 토끼 (6), 돼지 7 및 MOUS 등 여러 종 4에 고안되었지만전자 8, 9, 그러나 근위부 요도의 부분적인 방해를받은 암컷 쥐입니다 틀림없이 가장 일반적으로 사용되는 동물 모델; 방광 목 동물의 복부에 접근, 방광의 exteriorizing 및 해부 전통 근위부 요도 폐색 기술과 피할 수 있습니다. 장애물과 동물의 사망률 정도의 변동성 만 (11)이 프로 시저 (10)과 관련된 문제의 일부; 우리는 가짜 운영 동물, 근위부 요도 주위 절개는 방광 경부 (12)에서 신경 섬유의 손실과 상관 관계 생리적 변화에 이르게 것으로 나타났다. 이 발견은 여성 설치류에서 근위부 요도를 액세스 포함 가장 일반적으로 사용되는 pBOO 동물 모델이 영향을 미치는, 방광의 관련 구조 및 기능 변화와 탈 신경 손상에 이르게 것을 나타냅니다가짜와 방해 동물. 따라서, 다른 접근 방식 피 탈 신경 손상이 필요했다. 우리의 실험실 개발 및 가짜 운영 동물이 작동이되지 제어 동물과 구별했다 반면, 같은 기관의 질량과 잔뇨의 증가로 방광에서 예상되는 장애물 관련된 변화를 유도에 효과적인 신경을 살려주는 중간 요도 폐색을 (네모) 접근 방식을 평가 . 그 박리의 수준에 근접하게 놓여으로 또한 선 형상 요도 괄약근는 그대로 남아 있었다. 또한, 방광 폐색 질량 - 유도 증가 변동 전통적인 근위 요도 협착보다 낮았다 동물 사망률은 제로였다. 지금까지 설명 마우스에 대한 모든 pBOO 모델이 50 % 주변의 사망률을하는 동안 우리는 또한 성공적으로 방해 동물의 10 % 미만 사망률과 여성 쥐에서 니모를 적용했다. 마우스에 pBOO의 맥락에서 방광 리모델링을 공부하는 것은 applicabil 도움이됩니다유전자 변형의 전체 스펙트럼 성만. 여성 설치류 중반 요도 주위를 해부하면 기존의 근위부 폐쇄 모델에서 관찰 된 방광에서 바람직하지 혼란 구조적 또는 기능적 변화를 유도하지 않습니다. 그럼에도 불구하고, 중간 요도 수준에서 부분적인 폐쇄를 유도하는 것은 여전히 ​​방광 비대를 유도하고 pBOO에 대한 동물 모델에서 예상대로, 잔뇨 증가했다. 중요한 것은, 마우스에서 NEMO을 수행하는 단계를 더 설치류 사실상 불가능하다 형질 전환 방법에 pBOO 방광 개조 조사를 연다.

<table><tbody><tr><td>암컷 쥐&nbsp;</td><td>Charles-River Canada</td><td>Sprague Dawley 쥐 (Crl:SD); 스트레인 코드: 400</td><td>약 200g</td></tr><tr><td>Isoflorane 기화기</td><td>Benson medical industries inc.</td><td>TEC III 이소플루란;제품 코드: 53-T3ISO&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Isoflorane</td><td>Fresenius Kabi Animal Health</td><td>Isoflorane; 제품 코드 CP0406V2</td><td>&nbsp; 250mL 병</td></tr><tr><td>일회용 메스</td><td>테드 펠라</td><td>#15 멸균, 스테인리스 스틸 메스; 카탈로그 번호 549-9-15S</td><td></td></tr><tr><td>현미경 겸자</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Aesculap 현미경 겸자, Finepoint, 115mm; 제품 번호 5443</td><td></td></tr><tr><td>Adson 겸자</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Aesculap Adson 해부 겸자, 곡선, 120mm; 제품 번호 5002-9</td><td></td></tr><tr><td>곡선 수술 용 가위</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>수술용 가위, 곡선형, S/S, 105mm; 카탈로그 번호 1376</td><td></td></tr><tr><td>0.9 mm inox 금속 막대</td><td>goodfellow.com</td><td>스테인리스 스틸 - AISI 316L 와이어 직경:0.9mm; 주문 코드 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>스킨 후크 - inox 스틸</td><td>goodfellow.com</td> 스테인리스 스틸로 자체 제작 <td>- AISI 316L 와이어 직경:0.9mm; 주문 코드 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>4-0 실크 봉합</td>사 <td>esutures.com</td><td>4-0 Sofsilk 블랙 98" 스트랜드; 제품 번호 LS640</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Vicry 봉합</td>사 <td>esutures.com</td><td>5-0 Vicryl 염색되지 않은 27" RB-1 테이퍼; 제품 번호 J213H</td><td></td></tr><tr><td>바늘 홀더</td><td>Medsupplier.com</td><td>Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner 바늘 홀더 - 5 1/2"; 제품 코드 SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Temgesic (Buprenorphine)</td> <td>첫 번째 수의학 공급</td><td>Buprenex 0.3MG/ml inj 암페어; 품목 #075701</td><td></td></tr><tr><td>27 G 바늘이 있는 1 mL 주사기</td><td>Fisher Scientific</td><td>BD&nbsp; 투베르쿨린 주사기, BD 309623</td><td></td></tr><tr><td>20 g Angiocath</td><td>Fisher Scientific</td><td>앤드윈 사이언티픽&nbsp; 혈관 20 GA; 카탈로그 번호 </td><td></td>NC9561906</tr><tr><td>회복 다이어트</td><td>clearh2o</td><td>DietGel 31M; 72-08-5022</td><td></td></tr><tr><td>C57Bl/6 암컷 마우스</td><td>Charles-River Canada</td><td>C57BL/6 마우스 (C57BL/6NCrI); 스트레인 코드: 027</td><td>약 18g</td></tr><tr><td>24G 혈관 추출물</td><td>Fisher Scientific</td><td>Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc.&nbsp;IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; 카탈로그 번호 </td><td></td>NC9814340</tr><tr><td>5-0 Ethibond</td><td>esutures.com</td><td>5-0 Ethibond green 30" RB-1 테이퍼; 제품 번호 X550H</td><td></td></tr><tr><td>26 G 주사기 바늘</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>BD Precisionglide 주사기 바늘, 게이지 26; z192392</td><td></td></tr><tr><td>Normal Saline</td><td>Baxter</td><td>0.9% Sodium Chloride Injection, USP, 100 mL MINI-BAG; 제품 코드 2B0043</td><td></td></tr></tbody></table>

여성 작은 설치류에 신경을 살려주는 중간 요도 폐색 (네모)

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

일부 방광 출구 폐색 (pBOO)은 높은 유병률이 유의 한 환자 부담과 엄청난 의료 비용이 발생합니다. pBOO에서 방광 리모델링을 조사하는 가장 일반적인 동물 모델은 근위부 요도에 부분적인 방해를 받고 여성 설치류이다. 장애물과 동물의 사망률 정도의 변동성은 근위부 폐쇄와 주요 관심사이다. 또한, 근위부 요도 및 방광 목 해부하는 것은 방광 신경 분포를 위태롭게. 우리는 기존 모델의 단점을 피할 수 pBOO에 대한 신경을 살려주는 중간 요도 폐색 (네모) 모델을 개발했다. 우리는 개복 수술뿐만 아니라이 지역의 해부에 대한 필요성을 없어진다 치골 치골, 단지 열등 요도 접근; 또한, 선 형상 요도 괄약근은 그대로 남아 있었다. 우리는 여성 흰쥐에서 (12 개 장애물, 6 가짜 동물)뿐만 아니라 여성 C57 / BL6 마우스를 니모를 수행 (20 장애물의 18 가짜 동물). 이주 후, 우리는 방광 기능, 방광 질량, 신체 질량을 평가 하였다. 우리는 obstructed- 또는 가짜 운영 암컷 쥐들 사이에 사망률이 없었다; 전통적인 근위 pBOO-방법에서 기술 한 바와 같이, 우리는 근위 요도 주위의 봉합을 연결하고, 일시적으로 0.9 mm의 금속봉을 두었다. NEMO 2 주 후 방광 질량의 85 % 증가를 야기 평균 잔뇨량은 0.03 mL의 모의 동안 동물에 부분적으로 가려 래트 0.4 mL를가 하였다. 생쥐에서는 봉합 매 때 요도를 따라 배치 된 캐 뉼러 3 개 크기를 시험했다. 우리는 27 게이지 캐 뉼러를 사용하여 50 %의 사망률을 통해 동물 결과 것으로; 증가 방광 질량 원하는 응답을 생성하지 않았다 25 게이지 뉼러를 배치하는 단계; 26 게이지 캐 뉼러를 이용하여 최소한의 동물 사망률 (1/8) 아직 방광 질량 크게 2 배의 증가로 양호한 결과를 얻었다.

여성 쥐에서 신경을 살려주는 중간 요도 폐색 (네모) 인류 우리는 지금까지 40여 암컷 쥐에 중간 요도 폐색을 수행하고 더 치사 없었다. 방광 질량 차단 된 래트가 85 % 증가 (p = 0.004으로 변환 0.60 %의 평균 상대 방광 질량 있었을 때 보통 상대적 방광 질량 (방광 투 체질량 비율) 허위 조작 동물, 0.33 % 이주 수술 후이었다 도 1).</s...

설치류 부분 방광 출구 폐색 전통적인 모델은 동물의 사망을 내포한다. 근위부 요도 및 방광 목 해부에서 탈 신경 손상의 주요 관심사이기도하다. 우리는 기존 모델의 단점을 피하고, 개발하고 안전하고 신뢰할 수있는 중간 요도 폐색 모델을 평가 하였다.

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

본 기술의 전반적인 목표는 방광 출구의 신경 분포를 보존하면서 소형 암컷 설치류에게 부분적 방광 출구 폐색을 외과적으로 유도하는 것이며, 동물의 이환율을 낮추고 폐사율을 사실상 없애며 폐색 정도의 가변성을 최소화하는 것입니다. 이 방법은 폐색으로 유도된 방광 리모델링에 관한 핵심 질문, 예를 들어 출구 폐색과 관련된 유전자 발현 패턴과 후성유전학적 변화는 무엇인가 하는 점에 대한 답을 찾는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 신뢰도가 높으며 방광 경부 주변의 절제 과정이 필요하지 않아 방광 출구의 신경 분포를 보존할 수 있다는 점입니다.이 기술의 함의는 방광 폐쇄 치료로까지 확장되는데, 이는 폐쇄 해소 및 회복 단계 이후의 과정을 재현 가능한 방식으로 평가할 수 있기 때문입니다. 인간의 방광 폐쇄 회복은 예측이 어렵습니다. 본 기술을 사용하면 폐쇄를 제거할 수 있으며, 이를 통해 폐쇄 회복과 관련된 세포 및 조직 반응을 평가할 수 있습니다.실제 외과적 폐쇄가 없는 가짜 수술(sham dissection) 후에도 기존의 더 근위부 폐쇄 방식이 심각하고 바람직하지 않은 방광 기능 장애 및 형태 이상과 관련이 있음을 확인하여 본 방법을 정교화하였습니다. 먼저 200 g의 암컷 랫드를 가열 패드 위에 놓고, 테이프로 사지와 꼬리를 고정합니다. 그다음 소독을 실시하고 하복부를 덮지 않은 상태에서 멸균 타월을 배치합니다.그 다음, 20 gauge angiocatheter를 사용하여 방광에 카테터를 삽입하고, 테이프로 카테터를 고정합니다. 이어서 해부 현미경 하에서 메스를 사용하여 촉지 가능한 치골 결합부부터 요도구 방향으로 8 mm 길이의 종방향 피부 절개를 실시합니다. 이후 봉합을 용이하게 하기 위해 절개부 양측의 피부를 들어 올리고, 미세 가위를 사용하여 종방향으로 둔성 박리를 진행하여 짧아진 요도를 확인합니다.요도의 노출을 높이기 위해 미세 자가 유지 피부 후크(fine self-retaining skin hooks)를 배치하고, 유사한 둔성 박리를 사용하여 복측으로 주행하는 신경혈관다발을 들어 올립니다. 곡선 가위와 부드러운 종방향 확장을 사용하여 요도 배측의 요도와 질 사이의 층을 형성합니다. 이제 요도 뒤로 4-0 실크 봉합사를 둔성으로 통과시키고, 외과용 매듭을 두 번 감아 준비합니다.그런 다음 혈관 카테터를 제거하고, 요도와 평행하게 0.9 millimeter 금속봉을 배치합니다. 금속봉이 쉽게 미끄러져 나올 수 있도록 요도와 금속봉 주위의 매듭을 조이고, 세 번 더 가볍게 매듭을 지어 고정합니다. 마지막 매듭 후 금속봉을 제거하고, 흡수성 땋은 4-0 봉합사로 변형 단일 봉합법을 사용하여 요도 주변선을 근접시킨 후 봉합사 끝을 약 3~4 millimeter 길이로 자릅니다.그 다음 동일한 흡수성 봉합사를 사용하여 변형 수평 매트리스 봉합법으로 피부를 폐쇄하고 적절한 진통제를 투여합니다. 생쥐의 신경 보존성 요도 중부 폐쇄(nerve-sparing mid-urethral obstruction, NeMO) 모델의 경우, 18g의 암컷 C-57 black-6 생쥐를 가열 패드 위에 배와 닿게 눕히고 테이프로 사지를 고정합니다. 그 다음 소독을 실시하고 하복부를 제외한 부위에 멸균 타월을 덮어줍니다.다음으로, 실체 현미경 하에서 24게이지 혈관 카테터로 방광에 카테터를 삽입하고, 테이프로 카테터를 고정합니다. 실체 현미경 하에서 메스를 사용하여 촉지되는 치골 결합부에서 요도구 방향으로 6mm 길이의 피부 종절개를 실시합니다. 그 후 미세 가위로 둔성 박리를 하여 짧아진 요도를 확인합니다.요도 배측으로 완만한 종방향 박리를 실시하여 요도와 질 사이의 층을 형성합니다. 그 후 5-0 비흡수성 꼬임 봉합사를 요도 뒤로 둔탁하게 통과시킨 다음, 외과용 매듭의 이중 루프를 준비합니다. 이제 1 mL 주사기를 혈관 카테터에 연결하고, 방광 내로 0.1 mL의 생리식염수를 주입합니다.생리식염수를 모두 주입한 후, angiocath를 뒤로 당기면서 요도와 평행하게 26 gauge 캐뉼라를 매듭을 이용해 조심스럽게 고정합니다. 매듭을 세 번 더 조심스럽게 묶어 고정한 다음 캐뉼라를 제거하고, 방광에 가벼운 압력을 가해 요도구에서 소변이 나오는지 확인합니다. 봉합사의 끝을 약 3mm 길이로 자릅니다.그런 다음 5-0 땋은 흡수성 봉합사를 사용하여 변형 수평 매트리스 봉합법으로 피부를 폐쇄하고, 마우스를 회복 케이지에 넣기 전에 적절한 진통제를 투여합니다. NeMO 가짜 수술 쥐의 평균 상대적 방광 대 체질량 비율은 수술 2주 후 0.33%인 반면, 폐색된 쥐의 경우 0.6%로, 이 동물들에서 상대적 방광 질량이 85% 증가했습니다. NeMO 가짜 수술 쥐는 장기 적출 시 방광 천자로 흡인할 수 있는 잔뇨가 거의 나타나지 않습니다.폐쇄 유도 동물은 대조적으로 0.42 milliliters라는 유의하게 더 높은 평균 잔뇨량을 보입니다. 전반적으로, 가짜 수술(sham) 및 NeMO 수술을 받은 마우스의 사망률은 삽입용 캐뉼라의 크기가 작아질수록 증가합니다. 또한, 25 gauge 캐뉼라의 사용은 마우스의 체중 대비 방광 질량 비율을 효과적으로 증가시키지 못하는 반면, 26 gauge 캐뉼라의 사용은 상대적 방광 질량을 2배 이상 증가시키는 결과를 초래합니다.27 gauge 플레이스홀더를 적용했을 때, 시술 2주 후 상대적 방광 질량이 60% 이상 증가하는 것이 관찰되었습니다. 또한, 요도를 따라 25 또는 26 gauge 캐뉼라를 사용하여 부분적인 방광 출구 폐쇄를 유도했을 때는 2주간의 실험 기간 동안 잔뇨량에 영향을 미치지 않았습니다. 반면, 27 gauge 플레이스홀더를 적용한 동물은 각각의 가짜 수술(sham-operated) 대조군에 비해 평균 잔뇨량이 3배 증가하는 것으로 나타났습니다.몇 번의 연습 후에 NeMO 및 NeMO sham 절차를 모두 10분에서 15분 이내에 완료할 수 있습니다. 마우스에서 NeMO를 수행할 때는 동물을 폐쇄하기 전에 소변을 부드럽게 배출시켜 완전 폐쇄의 가능성을 배제하는 것이 중요합니다. 이 절차 이후에, 근위부 sham 동물을 포함하는 것과 같은 다른 방법들을 수행하여 방광 기능 장애, 형태 이상 및 유전자 조절 장애를 유발하는 국소 신경성 배출구 자극의 상대적 기여도나 연관성에 관한 추가적인 질문에 답할 수 있습니다.이 기술은 폐쇄성 방광 근육병증 분야의 연구자들이 해부학적 및 신경성 방광 유출로 폐쇄가 유출 폐쇄의 발생과 회복력에 어떻게 기여하는지를 탐구할 수 있는 길을 열어줄 것으로 기대됩니다.

nerve-sparing-mid-urethral-obstruction-nemo-in-female-small-rodents

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

용서해주 신경 부상 동물 모델은 나머지 sural 신경은 그대로두고, tibial 및 일반 peroneal 신경 가지를 lesioning하여 좌골 신경의 부분 denervation 다음과 주변 neuropathic 고통의 마우스 모델로 여기에 설명되어 있습니다. 기계 allodynia 인한 행동 수정은 폰 프라이 필라멘트에 의해 계량입니다.

마우스에서 유도된 기계 Allodynia의 겪었던 신경 상해 (스니) 모델

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작은 쥐의 Cystometry의 사용 : 방광 Chemosensation의 연구

미국에서 약 3~8,000,000명은 간질 성 방광염 / 방광 통증 증후군 (IC / BPS), 골반 통증에 의해 부분적으로 특징 쇠약 상태에서 고통. 조건 신경계 기여를 연구하기 위해, 방광 통증의 생리 학적 모델은 생쥐와 쥐에 사용됩니다.

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쥐의 transurethral 도관 법의 설립된 모델 등 요로 감염, 방광 병 리의 연구를 허용 하지만 여성에서 수행할 수 있습니다. 여기, 남성 transurethral 주입의 새로운 모델에는 남녀 간의 강한 임상 및 역학 다름에 의해 표시 된 지역에 연구 수 있게 된다.

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부분 좌골 신경 결찰: 새로운 치료법의 항통각수용 효과를 연구하기 위한 만성 신경병성 통증의 마우스 모델

이 프로토콜은 털과 피부에 의한 소변 흡수를 방지하기 위해 시아노아크릴레이트로 피부를 방수하는 가이드를 제공합니다. 여기에는 접착제를 피부에 바르고, 방광 카테터를 이식하고, 깨어 있는 쥐에서 방광 측정 및 외부 요도 괄약근 전기 조영 기록을 위한 전극에 대한 지침이 포함되어 있습니다.

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본 프로토콜은 편측 요관 폐색의 단계적이고 재현 가능한 모델을 설명합니다.

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복재 신경을 통한 표적 근육 재신경 분포를 사용하여 신경종 통증 치료 옵션을 연구하기 위한 새로운 외과적 설치류 모델

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여성 작은 설치류에 신경을 살려주는 중간 요도 폐색 (네모)

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