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상대적인 힘의 안티-TNF 단 클론 항 체 (mAb) 중화 방 청 TNF는 시험관에서 생물 메서드를 사...
상대적인 힘의 안티-TNF 단 클론 항 체 (mAb) 중화 방 청 TNF는 시험관에서 생물 메서드를 사...
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JoVE Journal Medicine
Determination of the Relative Potency of an Anti-TNF Monoclonal Antibody (mAb) by Neutralizing TNF Using an In Vitro Bioanalytical Method

상대적인 힘의 안티-TNF 단 클론 항 체 (mAb) 중화 방 청 TNF는 시험관에서 생물 메서드를 사용 하 여의 결정

Full Text
9,695 Views
16:07 min
September 16, 2017

DOI: 10.3791/55376-v

Lilia Tierrablanca-Sánchez1, Víctor Pérez Medina Martínez1, Nancy D. Ramírez Ibañez1, Néstor O. Pérez Ramírez1, Francisco Luis Flores Ortiz1, Emilio Medina-Rivero2

1Research and Development,Probiomed, 2Bioprocess Research and Development Unit,Instituto Politecnico Nacional

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol outlines a method for assessing the relative potency of anti-TNF-alpha monoclonal antibodies using WEHI 164 cells. It provides a comparative analysis of the neutralization efficiency of a reference mAb against a sample mAb.

Key Study Components

Area of Science

  • Immunology
  • Cell Biology
  • Biotechnology

Background

  • Anti-TNF-alpha monoclonal antibodies are used to neutralize the effects of TNF-alpha.
  • WEHI 164 cells serve as a model for studying cytokine interactions.
  • Understanding neutralization efficiency is crucial for therapeutic applications.
  • Cells can be subjected to stress to evaluate their response to TNF-alpha.

Purpose of Study

  • To measure the relative potency of different anti-TNF-alpha mAbs.
  • To compare the neutralization efficiency of a reference mAb with a sample mAb.
  • To provide a detailed protocol for researchers in the field.

Methods Used

  • Cell culture of WEHI 164 cells.
  • Application of anti-TNF-alpha mAbs to the cultured cells.
  • Assessment of cell viability and apoptosis.
  • Comparison of neutralization potency between mAbs.

Main Results

  • Demonstrated differences in neutralization efficiency between mAbs.
  • Provided quantitative data on the anti-apoptotic activity of tested mAbs.
  • Established a reliable protocol for future studies.
  • Highlighted the importance of receptor interactions in TNF-alpha signaling.

Conclusions

  • The protocol is effective for comparing anti-TNF-alpha mAbs.
  • Understanding neutralization mechanisms can inform therapeutic strategies.
  • Further research is needed to explore additional mAb candidates.

Frequently Asked Questions

What is the significance of TNF-alpha in cell biology?
TNF-alpha is a cytokine involved in systemic inflammation and is a key player in immune responses.
How do anti-TNF-alpha mAbs work?
They bind to TNF-alpha, preventing it from interacting with its receptors, thereby inhibiting inflammatory responses.
What are WEHI 164 cells?
WEHI 164 cells are a murine cell line used for studying immune responses and cytokine interactions.
What factors can stress cells in this protocol?
Environmental factors such as starvation can be used to stress cells and evaluate their response to TNF-alpha.
Why is it important to compare mAbs?
Comparing mAbs helps identify the most effective therapeutic candidates for treating diseases associated with TNF-alpha.

프로토콜 WEHI 164 셀 중립화 메커니즘을 사용 하는 안티-TNFα mAb의 상대 안티-apoptotic 활동의 결정에 대 한 여기에 제공 됩니다. 이 프로토콜은 같은 생물 학적 기능을 가진 다른 분자의 중립화 강도 비교 하는 데 유용.

이 절차의 전반적인 목표는 anti-TNF-alpha 분자의 상대적 효능을 측정하는 것입니다. 이 예에서는 두 개의 anti-TNF-alpha 단클론 항체를 비교하여 하나의 reference mAb와 조사 중인 샘플 mAb의 중화 효율을 확인합니다. 이 튜토리얼은 문헌에 포함되지 않은 TNF-알파 중화 효능을 결정하기 위한 자세한 단계를 보여줍니다.

세포는 기아와 같은 다양한 환경적 요인에 의해 스트레스를 받을 수 있습니다. 각 세포의 표면에는 수용체(receptor)라고 하는 서로 다른 단백질이 있습니다. 그 중 일부는 사이토카인 TNF-알파에 특이적입니다.

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