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DOI: 10.3791/55465-v
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우리는 정밀 컷 폐 조각 (PCLS)를 생성하고, 폐에 다양한 면역 세포 유형의 현지화를 시각화하도록 면역 염색하는 방법을 설명합니다. 우리의 프로토콜은 다양한 조건 하에서 위치와 다양한 세포 유형의 기능을 시각화 할 수 있도록 확장 할 수 있습니다.
이 방법의 전반적인 목표는 정밀하게 절단된 폐 절편(PCLS)을 사용하여 폐에서 다양한 면역 세포 유형의 국소화 및 이동을 시각화하는 것입니다. 이 방법은 폐 내 면역 세포의 국소화 및 이동 패턴과 같은 면역학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 폐의 3차원 구조를 유지하는 살아있는 생체 외 조직에서 여러 상호 작용을 시각화할 수 있다는 것입니다.
이 방법은 염증 중 면역 세포의 국소화 및 이동에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만 기도 및 평활근 조직 수축을 시각화하는 데에도 사용할 수 있습니다. 폐 조직을 채취하려면 먼저 가위를 사용하여 복부 중앙에서 6주에서 12주 된 쥐의 턱까지 피부와 복막을 열고 장을 복강 옆으로 옮깁니다. 하대정맥을 잘라 폐에서 혈액을 빼내고, 가위의 날카로운 끝으로 횡격막을 뚫어 흉곽을 확장할 수 있도록 합니다.
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